จุลินทรีย์แอโรบิกแบบมีโซฟิลิกและแบบไม่ใช้ออกซิเจนแบบคณะ kmafanm ตัวบ่งชี้ Kmafanm - เป็นเกณฑ์สำหรับคุณภาพของผลิตภัณฑ์

นมและผลิตภัณฑ์จากนมคือ สินค้าทรงคุณค่าโภชนาการที่มาจากสัตว์ อย่างไรก็ตาม ควรจำไว้ว่านมที่ได้จากสัตว์ป่วยอาจเป็นสาเหตุของการติดเชื้อในมนุษย์ด้วยโรคจากสัตว์สู่คน (ที่พบบ่อยในคนและสัตว์) นอกจากนี้ หากละเมิดกฎอนามัยและเทคโนโลยีในการได้มา แปรรูป และจัดเก็บ นมอาจทำให้เกิด อาหารเป็นพิษและการติดเชื้อที่เป็นพิษ .

แหล่งที่มาของการปนเปื้อนเบื้องต้นของผลิตภัณฑ์นมที่มีจุลินทรีย์คือนม - วัตถุดิบ จุลินทรีย์เข้าสู่น้ำนมจากสภาพแวดล้อมภายนอกผ่านทางท่อขับถ่าย ถังเก็บน้ำนม และช่องจุกนม จุลินทรีย์ที่ไม่เฉพาะเจาะจงนมประกอบด้วยแบคทีเรีย ยีสต์ เชื้อรา. การปนเปื้อนของนมที่มีจุลินทรีย์เกิดขึ้นแล้วในกระบวนการรีดนมและความเข้มข้นขึ้นอยู่กับระดับสุขอนามัยในฟาร์ม คุณภาพของการล้างและการฆ่าเชื้อของอุปกรณ์รีดนม จุลินทรีย์มีอยู่มากมายบนพื้นผิว ผิวสัตว์. จุลินทรีย์บนผิวหนังมาจากอาหาร เครื่องนอน มูลสัตว์ อากาศ

สภาพการเก็บน้ำนมไม่ดียังส่งผลต่อการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ในนั้น นมสดที่รีดนมสดมีคุณสมบัติในการฆ่าเชื้อแบคทีเรีย กล่าวคือ ความสามารถในการชะลอการสืบพันธุ์ของแบคทีเรียที่เข้าสู่น้ำนมและแม้กระทั่งฆ่าพวกมัน เพื่อรักษาคุณสมบัติในการฆ่าเชื้อแบคทีเรีย นมสด, มันเย็นลง. ที่อุณหภูมิ +30°C ฤทธิ์ฆ่าเชื้อแบคทีเรียจะคงอยู่เป็นเวลา 3 ชั่วโมง ที่ +15 °C - ประมาณ 8 ชั่วโมง ที่ +10°C - ประมาณ 24 ชั่วโมง นมจะเย็นลงทันทีหลังจากการรีดนม และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ +2 ถึง +6°C จนกว่าจะจัดส่ง ในระหว่างการเก็บรักษาคุณสมบัติต้านจุลชีพของนมจะหายไปและหากไม่ปฏิบัติตามกฎการเก็บรักษาจะมีการสร้างเงื่อนไขสำหรับการพัฒนาจุลินทรีย์ที่ไม่พึงประสงค์ซึ่งเป็นผลมาจากการเสื่อมสภาพของผลิตภัณฑ์

จุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคสามารถเข้าไปในน้ำนมได้ในระหว่างการผลิตและการขนส่งจาก สิ่งแวดล้อมหรืออาจพบได้ในน้ำนมของสัตว์ป่วย โดยเฉพาะอย่างยิ่งจุลินทรีย์หลายชนิดที่พบในนมของสัตว์ที่เป็นโรคเต้านมอักเสบ (staphylococci, streptococci เป็นต้น) จุลินทรีย์สามารถป้อนนมผ่านอากาศและสัมผัสกับสัตว์ป่วยที่เป็นวัณโรค เชื้อ Salmonellosis ฯลฯ ดังนั้น ควบคู่กับโปรตีน ไขมัน และความเป็นกรด ปริมาณแบคทีเรีย (หรือ QMAFAnM) จึงเป็นหนึ่งในตัวชี้วัดที่สำคัญที่สุดของคุณภาพและความปลอดภัยของนม

นมที่ดีมีปริมาณแบคทีเรียต่ำตามลำดับ อย่างไรก็ตาม ต้องจำไว้ว่าน้ำนมดิบไม่สามารถมีปริมาณแบคทีเรียเป็นศูนย์ได้ นมเป็นผลิตภัณฑ์ที่มีชีวิตซึ่งได้มาจากสัตว์ และแบคทีเรียเป็นส่วนประกอบสำคัญของสิ่งมีชีวิตใดๆ และเป็นผลให้ผลิตภัณฑ์เมตาบอลิซึมของมัน นมที่มี จำนวนมากของแบคทีเรียแม้ไม่ก่อให้เกิดโรคและไม่เปลี่ยนแปลง ตัวชี้วัดทางประสาทสัมผัสถือว่าสมบูรณ์ไม่ได้ การปนเปื้อนของแบคทีเรียที่เพิ่มขึ้นของผลิตภัณฑ์บ่งชี้ถึงการเพิ่มจำนวนของจุลินทรีย์ ซึ่งอาจมีเชื้อโรคที่ทำให้เกิดการเน่าเสียของผลิตภัณฑ์ เนื้อหาสูงจุลินทรีย์ยังสามารถทำให้เกิด อาหารเป็นพิษมีอาการท้องเสียและกระเพาะลำไส้อักเสบ

ข้อกำหนดสำหรับน้ำนมดิบในแง่ของการปนเปื้อนของแบคทีเรียนั้นกำหนดโดยเอกสารกำกับดูแลของสหพันธรัฐรัสเซียและกฎระเบียบทางเทคนิคของสหภาพศุลกากร การปนเปื้อนของบาซิลลัสในนม - ปริมาณแบคทีเรียในเชิงปริมาณใน 1 cm³ น้ำนมดิบ. ตัวชี้วัดทางจุลชีววิทยาของนมตาม TMC (จำนวนจุลินทรีย์ทั้งหมด) หรือ QMAFAnM (จำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic) ต้องเป็นไปตามข้อกำหนด กฎระเบียบทางเทคนิคของสหภาพศุลกากร "ในความปลอดภัยของนมและผลิตภัณฑ์นม" (TR TS 033/2013) ลงวันที่ 09.10.2013 และไม่เกิน 5.0 × 10 5 (500,000) CFU / cm³

การปนเปื้อนของแบคทีเรียในนมที่เก็บเกี่ยวถูกกำหนดโดยใช้การทดสอบรีดักเตส วิธีการนี้ขึ้นอยู่กับข้อเท็จจริงที่ว่าเอนไซม์รีดักเตสที่หลั่งจากจุลินทรีย์ในน้ำนมจะทำให้เมทิลีนเปลี่ยนสี ย้อมสีฟ้า. มีการสร้างความสัมพันธ์ระหว่างปริมาณจุลินทรีย์และอัตราการเปลี่ยนสีของนมซึ่งเติมเมทิลีนบลู ยิ่งอัตราการฟอกขาวสูง ปริมาณมากจุลินทรีย์พบได้ในนม ส่งผลให้คุณภาพแย่ลง

ในห้องปฏิบัติการทดสอบตาม GOST 32901-2014“ นมและผลิตภัณฑ์จากนม วิธีการ การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา” เพื่อตรวจสอบการปนเปื้อนของแบคทีเรียของน้ำนมดิบเป็นวิธีการอนุญาโตตุลาการใช้วิธีถ้วยมาตรฐานของการเจือจางนมดั้งเดิมบนสารอาหารที่เป็นของแข็งตามด้วยการเพาะปลูกเป็นเวลา 72 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 ± 1 ° C และนับ หน่วยก่อรูปโคโลนี (CFU) ของจุลินทรีย์มีโซฟิลิกแอโรบิกและทางเลือก - จุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจน (QMAFAnM)

ดังนั้นการกำหนด QMAFAnM ในนมจึงบ่งบอกถึงสถานะสุขอนามัยและสุขอนามัยของผลิตภัณฑ์ ระดับของการปนเปื้อนด้วยจุลินทรีย์ ทำให้สามารถตัดสินสถานะสุขภาพของสัตว์ สถานะของเต้านม ประสิทธิผลของการซักและ การฆ่าเชื้ออุปกรณ์การปฏิบัติตามเงื่อนไขสุขอนามัยและสุขอนามัยของการผลิตและกฎสุขอนามัยส่วนบุคคลของคนงานเกี่ยวกับเงื่อนไขการจัดเก็บการขนส่ง ผลิตภัณฑ์สำเร็จรูป. ดังนั้น ตัวบ่งชี้นี้จึงถูกทำให้เป็นมาตรฐานสำหรับผลิตภัณฑ์นมทั้งหมด ยกเว้นผลิตภัณฑ์ที่ผลิตโดยใช้จุลชีพที่มีประโยชน์ทางเทคนิค (จุลินทรีย์ของเชื้อเริ่มต้น)

โซมาติกเซลล์ถาวร องค์ประกอบที่เป็นส่วนประกอบนมและแสดงโดย: เซลล์เยื่อบุผิวของเยื่อเมือกของต่อมน้ำนม, ถุงลมและทางเดินน้ำนมขนาดเล็กซึ่งเป็นเซลล์กลมขนาดใหญ่ (ตั้งแต่ 12 ถึง 100 ไมครอนขึ้นไปในขนาด) มักจะอยู่ในรูปของกลุ่มหรือชั้นน้อยกว่า มักจะอยู่ในรูปแบบของเซลล์เดียว เซลล์เยื่อบุผิวเสื่อมรูปแบบไม่แน่นอนของโครงสร้างที่ถูกทำลาย เซลล์เม็ดเลือด: เม็ดเลือดขาว (ส่วนใหญ่เป็นลิมโฟไซต์ นิวโทรฟิล อีโอซิโนฟิล ฯลฯ) และเม็ดเลือดแดง เป็นที่ทราบกันดีอยู่แล้วว่าโซมาติกเซลล์ไม่เพิ่มจำนวนในนมที่รีดนม (ต่างจากแบคทีเรีย)

องค์ประกอบทางสัณฐานวิทยาและเซลล์วิทยาและเนื้อหาเชิงปริมาณของเซลล์โซมาติกในนมของสัตว์แต่ละตัวนั้นแตกต่างกันอย่างมากขึ้นอยู่กับปัจจัยหลายประการ: อายุของสัตว์ (ในนมของวัวสาวลูกวัวแรกมีเซลล์ร่างกายน้อยกว่าโคที่มีขนาดใหญ่ จำนวนการให้นม) ระยะเวลาการให้นม (ในน้ำนมของโคที่แข็งแรง จำนวนเงินขั้นต่ำเซลล์ร่างกายสังเกตได้ 2 - 6 เดือน การให้นมและเพิ่มขึ้น - ในช่วงน้ำนมเหลืองเมื่อสิ้นสุดการให้นมบุตรและในช่วงเริ่มต้น) สายพันธุ์และลักษณะเฉพาะของสัตว์ตลอดจนสภาวะสุขภาพสัตว์ (โดยเฉพาะจากสถานะของเต้านม) ระดับและโหมดการให้อาหาร ฯลฯ

เนื้อหาของเซลล์โซมาติกเป็นตัวบ่งชี้ที่สำคัญเกี่ยวกับความปลอดภัยของนมและแสดงความเหมาะสมสำหรับการประมวลผล การปรากฏตัวของเซลล์โซมาติกจำนวนมากในนมทำให้ลดลงอย่างมาก ตัวชี้วัดคุณภาพ: สูญเสียประโยชน์ทางชีวภาพ คุณสมบัติทางเทคโนโลยีเสื่อมโทรมระหว่างการประมวลผล นอกจากนี้ความเป็นกรดของนมลดลงมีการสูญเสียไขมันเคซีนแลคโตส นมจะทนความร้อนได้น้อยลง จับตัวเป็นก้อนแย่ลง เรนเนทชะลอการพัฒนาของที่มีประโยชน์ แบคทีเรียกรดแลคติก. เป็นไปไม่ได้ที่จะทำจากนมดังกล่าว สินค้าคุณภาพ(ชีส คอทเทจชีส โยเกิร์ต kefir ฯลฯ) เซลล์โซมาติกไม่เพียงส่งผลต่อคุณภาพของนมเท่านั้น แต่ยังส่งผลต่อผลผลิตของวัวด้วย

ตั้งแต่วันที่ 1 กรกฎาคม 2017 ปริมาณโซมาติกเซลล์ในน้ำนมดิบไม่ควรเกิน 7.5 × 10 5 ใน 1 ซม. 3 ส่วนสำหรับน้ำนมดิบสำหรับการผลิต อาหารเด็ก, ชีสและนมสเตอริไลซ์ - ไม่เกิน 5 × 10 5 เซลล์ ใน 1 cm3.

มันสำคัญมากที่จะต้องกำหนดเนื้อหาของเซลล์โซมาติกในนมได้อย่างง่ายดายและรวดเร็ว ในการระบุสิ่งเจือปนของนมเต้านมอักเสบในวัตถุดิบ จะใช้วิธีการทางตรงและทางอ้อม โดยพิจารณาจากจำนวนเซลล์โซมาติก วิธีการทางอ้อมสำหรับกำหนดจำนวนเซลล์โซมาติกในนมรวมถึงวิธีการตรวจหาเมื่อทำปฏิกิริยากับรีเอเจนต์จำนวนหนึ่ง ปัจจุบันการกำหนดจำนวนเซลล์โซมาติกในนมนั้นควบคุมโดย GOST 23453-2014“ น้ำนมดิบ วิธีการกำหนดเซลล์โซมาติก” และดำเนินการโดยใช้การเตรียมการวินิจฉัย เช่น “มาสโตปริม” ด้วยสายตาและการใช้เครื่องวัดความหนืด มาตรฐานได้รับการพัฒนาโดยสถาบันวิทยาศาสตร์แห่งรัฐ "VNIIMS ของสถาบันการเกษตรแห่งรัสเซีย"

วิธีการนี้ขึ้นอยู่กับผลของซัลฟานอล (สารลดแรงตึงผิวที่เป็นส่วนหนึ่งของการเตรียม Mastoprim) ต่อเยื่อหุ้มเซลล์ของเซลล์โซมาติกซึ่งนำไปสู่การละเมิดความสมบูรณ์และการปล่อยเนื้อหาเซลล์ออก สภาพแวดล้อมภายนอก. ในกรณีนี้ความหนืด (ความสม่ำเสมอ) จะเปลี่ยนไปซึ่งได้รับการแก้ไขด้วยสายตาหรือด้วยเครื่องวัดความหนืด สำหรับการวิเคราะห์นั้น เพลต PMK-1 จะใช้กับการประเมินด้วยสายตาหรือเครื่องวัดความหนืดแบบเส้นเลือดฝอยที่ปรับเทียบโดยผู้ผลิตอุปกรณ์เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์โซมาติกในน้ำนมดิบ

การประเมินด้วยสายตาทำได้ง่ายมาก แต่ไม่สามารถหาตัวบ่งชี้ตัวเลขเฉพาะของจำนวนเซลล์โซมาติกในนมได้ ด้วยการประเมินด้วยสายตา เราสามารถกำหนดระยะขอบของความปลอดภัยตามคำแนะนำของรีเอเจนต์เท่านั้น

ในห้องปฏิบัติการของเรา กำหนดเนื้อหาของเซลล์โซมาติกในนมโดยใช้เครื่องวัดความหนืด Somatos-V.2K ขั้นตอนการพิจารณามีดังนี้: สารละลาย Mastoprim 5 มล. และน้ำนมดิบที่วิเคราะห์ 10 มล. จะถูกถ่ายด้วยปิเปตและเติมลงในขวดความหนืด ก่อนทำการสุ่มตัวอย่าง น้ำนมดิบที่วิเคราะห์แล้วจะต้องผสมให้ละเอียด และหากจำเป็น ให้ทำความสะอาดสิ่งเจือปนทางกล ผสมส่วนผสมของน้ำนมดิบที่วิเคราะห์แล้วกับสารละลายของยา Mastoprim ในขวดวัดความหนืดจะกวนเป็นเวลา (30 ± 10) วินาทีในโหมดแมนนวลหรืออัตโนมัติ ในตอนท้ายของการผสม จำนวนเซลล์โซมาติกในน้ำนมดิบที่วิเคราะห์จะกำหนดโดยเวลาที่ส่วนผสมไหลออกจากเส้นเลือดฝอย ระยะเวลาของการไหลออกจะถูกกำหนดโดยความหนืดของส่วนผสมของน้ำนมดิบกับสารละลาย Mastoprim ซึ่งสัมพันธ์กับเนื้อหาเริ่มต้นของเซลล์ร่างกายในนั้น ช่วงสำหรับกำหนดจำนวนเซลล์โซมาติกโดยใช้เครื่องวัดความหนืดของเส้นเลือดฝอยอยู่ที่ 90 ถึง 150,000 ต่อน้ำนมดิบ 1 ซม. 3 และระยะเวลาของส่วนผสมที่ไหลออกจากเส้นเลือดฝอยมีตั้งแต่ 12 ถึง 58 วินาที

ค่า Viscometer ที่อ่านได้น้อยกว่า 90,000 ใน 1 cm3 บ่งบอกถึงการปลอมแปลงน้ำนมดิบเป็น เคมีภัณฑ์และโดยการสัมผัสกับอุณหภูมิ:

การเพิ่มไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ยูเรียโซดาและสารอื่น ๆ ลงในนมที่ใช้ในการปลอมแปลงตัวบ่งชี้บางอย่างของน้ำนมดิบทำให้ค่าความหนืดลดลงตามสัดส่วนโดยตรงขึ้นอยู่กับความเข้มข้น

การให้ความร้อนของนมเพื่อให้ความร้อนหรืออุณหภูมิพาสเจอร์ไรส์นำไปสู่ความล้มเหลวของการอ่านเครื่องมือและเครื่องวัดความหนืดจะแสดงค่าน้อยกว่า 90,000 เซลล์ต่อ 1 ซม. 3 ของนม โดยไม่คำนึงถึงเนื้อหาที่แท้จริงของพวกมัน

ต้องคำนึงถึงคุณสมบัติเหล่านี้เมื่อวิเคราะห์ผลลัพธ์ที่ได้รับ

เนื้อหาของเซลล์ร่างกายเป็นตัวบ่งชี้ทางอ้อมที่สำคัญที่สุดของสุขภาพเต้านมเนื่องจากในระหว่างกระบวนการอักเสบในนมจำนวนเซลล์เม็ดเลือดโดยเฉพาะเม็ดเลือดขาวและนิวโทรฟิลิกแกรนูโลไซต์เพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว กระบวนการอักเสบทำให้เกิดการพัฒนาของโรคเต้านมอักเสบแบบไม่แสดงอาการ ด้วยโรคเต้านมอักเสบแบบไม่แสดงอาการไม่มีอาการอักเสบในเต้านม แต่เนื้อหาของเซลล์ร่างกายในนมเพิ่มขึ้น ดังนั้นการเปลี่ยนแปลงใน องค์ประกอบทางเคมีนมมักเป็นเครื่องพิสูจน์ว่าเป็นโรคเต้านมอักเสบชนิดเดียวกัน สาเหตุที่พบบ่อยที่สุดของโรคเต้านมอักเสบแบบไม่แสดงอาการคือ Streptococci และ Staphylococci โรคเต้านมอักเสบแบบไม่แสดงอาการสามารถอยู่ได้นาน ทำให้เกิดอันตรายถาวรต่อสุขภาพของเต้านมและฟาร์ม (ผลผลิตลดลง ราคานมที่ลดลง) และยังสามารถกลายเป็นโรคเต้านมอักเสบทางคลินิกได้อีกด้วย

มีปัจจัยอื่นๆ ที่ส่งผลต่อเนื้อหาของเซลล์โซมาติกในนม เช่น ข้อผิดพลาดในการรีดนม ข้อบกพร่องในอุปกรณ์รีดนม สุขอนามัยไม่เพียงพอ ข้อผิดพลาดในการบำรุงรักษา ข้อผิดพลาดในการป้อนนม เป็นต้น

โดยสรุป ผมขอนำเสนอตัวเลขบางส่วนตั้งแต่ต้นปีนี้ ตัวอย่างดิบมากกว่า 1,500 ตัวอย่าง นมวัวจากฟาร์มซึ่งต้องปฏิเสธตัวอย่างเพียง 7 ตัวอย่างตามตัวบ่งชี้ "QMAFAnM" และ "เนื้อหาของเซลล์ร่างกาย" นี้พูดถึง อย่างดีนมที่จำหน่ายโดยผู้ผลิตทางการเกษตรในภูมิภาคของเรา

ในการกำหนดปริมาณของแบคทีเรีย mesophilic ควรเลือกการเจือจางเมื่อฉีดวัคซีนบนถ้วยอย่างน้อย 30 และไม่เกิน 300 โคโลนีเติบโต

จากตัวอย่างแต่ละตัวอย่าง การฉีดวัคซีนจะทำด้วยวิธีลึกบนจานเพาะเชื้อแบบคู่ขนาน 2 จาน จากการเจือจางติดต่อกัน 2 ถึง 3 ครั้งในปริมาณ 1.0 มล. โดยใช้วุ้น 2% ที่เตรียมจากวุ้นสารอาหารแห้ง จะเชื่อถือได้มากกว่าและควบคุมอุณหภูมิได้ง่ายขึ้นหากเทวุ้นในส่วนเล็กๆ ลงในหลอดทดลอง (12 - 15 มล.) วุ้นในหลอดจะละลายเร็วขึ้นและเย็นลงอย่างทั่วถึงถึง อุณหภูมิที่ต้องการ. ถ้วยเติมด้วยของเหลวที่หลอมละลายและทำให้เย็นลงถึง 45 องศา ด้วยวุ้นทันทีหลังจากนำวัสดุ มิฉะนั้นอาจสังเกตเห็นการกระจายตัวของอาณานิคมที่ไม่สม่ำเสมอในรูปแบบของกระจุกที่แยกจากกันในความหนาของวุ้น เพื่อการกระจายที่สม่ำเสมอยิ่งขึ้น เมล็ดพันธุ์นอกจากนี้เนื้อหาของถ้วยยังผสมกับการเคลื่อนไหวแบบหมุน

หลังจากที่วุ้นแข็งตัวแล้ว จานที่มีการเพาะเชื้อจะถูกวางคว่ำลงในเทอร์โมสตัท ฟักไข่ตามคำแนะนำของ FAO/WHO ที่อุณหภูมิ 30°C C ภายใน 72 ชั่วโมง; หากจำเป็น บัญชีเบื้องต้นจะดำเนินการหลังจาก 48 ชั่วโมง จำนวนโคโลนีจะถูกนับในถ้วยเมล็ดแต่ละใบ การนับจำนวนโคโลนีบนจานจะดำเนินการโดยใช้ตัวนับอาณานิคมของแบคทีเรียหรือแว่นขยาย เพื่อการมองเห็นที่ดีขึ้น อาณานิคมจะถูกนับบนพื้นหลังสีเข้ม (กระดาษสีเข้มวางอยู่ใต้ถ้วย) ถ้วยจะถูกวางคว่ำ แต่ละอาณานิคมจะถูกทำเครื่องหมายที่ด้านล่างของจานด้วยหมึกหรือหมึก

เมื่อนับจะมีการปฏิบัติตามกฎต่อไปนี้:

ก) ถ้าถ้วยโต . จำนวนเล็กน้อยอาณานิคมประมาณ 100 อาณานิคมนับอาณานิคมทั้งหมด

B) ถ้าโคโลนีกระจายอย่างเท่าเทียมกันและจำนวนของโคโลนีวัดได้หลายร้อย (โคโลนี 200 - 300) จะได้รับอนุญาตให้นับโคโลนีอย่างน้อย 1/3 ของพื้นที่ถ้วย ในกรณีเหล่านี้ ส่วนล่างของจานจะแบ่งออกเป็น 6 ส่วนด้วยดินสอ และโคโลนีจะนับเป็น 3 ส่วน จากนั้นพวกเขาจะคำนวณใหม่สำหรับพื้นที่ทั้งหมดของถ้วย: คำนวณจำนวนอาณานิคมเฉลี่ยต่อพื้นที่ของหนึ่งเซกเตอร์และคูณจำนวนผลลัพธ์ของอาณานิคมต่อเซกเตอร์ด้วย 6;

C) หากมากกว่า 300 โคโลนีเติบโตบนจานพวกเขาจะกระจายอย่างสม่ำเสมอและไม่สามารถวิเคราะห์ซ้ำได้จากนั้นใช้อุปกรณ์สำหรับการนับอาณานิคมของแบคทีเรีย 10 มุมมองพื้นที่ 1 ตร.ม. ดูใน ที่ต่างๆถ้วย. ตัวเลขผลลัพธ์จะถูกเพิ่มและนำค่าเฉลี่ยเลขคณิตมา ในการคำนวณจำนวนโคโลนีในจานทั้งหมด จำนวนเฉลี่ยที่ได้คือ 2 คูณด้วยพื้นที่ของจาน (pi R) โดยปกติเส้นผ่านศูนย์กลางของถ้วยจะอยู่ที่ 8.5 - 10 ซม. pi = 3.14 แทนที่ข้อมูลลงในสูตร เราได้ถ้วยขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 10 ซม. พื้นที่ถ้วยคือ 78.5 ตารางเมตร ซม. ในกรณีที่ไม่มีอุปกรณ์นับแบคทีเรียคุณสามารถใช้กระดาษกราฟธรรมดาซึ่ง "หน้าต่าง" ที่มีพื้นที่ 1 ตารางวาถูกตัดออก ดูการนับอาณานิคมที่ผลิตด้วยแว่นขยายดังข้างต้น

ตัวอย่าง. ถ้าจำนวนโคโลนีเฉลี่ยต่อ 1 ตร.ม. ซม. คือ 18 เส้นผ่านศูนย์กลางของถ้วยคือ 10 ซม. จากนั้นจำนวนโคโลนีในพื้นที่ทั้งหมดของถ้วยคือ 18 x 78.5 = 1413 ปัดเศษในคำตอบระบุ 1400

จำนวนโคโลนีที่ปลูกบนจานควรสะท้อนถึงจำนวนของจุลินทรีย์ที่มีชีวิตที่มีอยู่ในปริมาตรที่เพาะเชื้อของวัสดุทดสอบ เนื่องจากมักจะฉีดวัคซีนในรูปแบบเจือจาง จำนวนโคโลนีที่ปลูกบนจานจึงคูณด้วยระดับการเจือจางที่ถ่าย ค่าเฉลี่ยเลขคณิตจะถูกคำนวณและจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนเชิงคณะต่อ 1 กรัม (มล.) ของ ผลิตภัณฑ์ได้รับการจัดตั้งขึ้น

เมื่อกำหนดจำนวนแบคทีเรีย mesophilic ไม่สามารถใช้อาหารทุกจานในการคำนวณค่าเฉลี่ยเลขคณิตได้:

ก) เป็นไปไม่ได้ที่จะใช้พืชผลเพื่อคำนวณค่าเฉลี่ยเลขคณิตหากจำนวนโคโลนีที่ปลูกบนจานมีค่าน้อยกว่า 30 ในกรณีนี้ ตัวบ่งชี้การปนเปื้อนที่ได้จากการนับโคโลนีบนจานหนึ่งหรือสองจานเท่านั้น จำนวนโคโลนีบน ที่มีมากกว่า 30 ตัว รวมอยู่ในระเบียบวิธีวิจัยแล้ว ในกรณีที่มีการเจริญเติบโตน้อยกว่า 30 โคโลนีบนจานเพาะเชื้อในผลการวิเคราะห์แนะนำให้ใช้ถ้อยคำต่อไปนี้: "การเติบโตของอาณานิคมเดี่ยวระหว่างการฉีดวัคซีน (ระบุปริมาณของการฉีดวัคซีน) ผลิตภัณฑ์)";

ข) พืชผลไม่ได้ใช้คำนวณค่าเฉลี่ยเลขคณิตของถ้วยบนพื้นผิวที่สังเกตการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ที่สร้างสปอร์บนพื้นผิวมากกว่า 1/2 ของพื้นที่ ส่วนหลังสามารถปกปิดการเจริญเติบโตของแบคทีเรียอื่นๆ . มีหลายกรณีที่การเจริญเติบโตของจุลินทรีย์สปอร์ได้มาจากการเจือจางทั้งหมดบนจานและการนับโคโลนีที่แยกได้นั้นแทบจะเป็นไปไม่ได้เลย ในกรณีเหล่านี้ โปรโตคอลการศึกษาควรระบุ: "การเติบโตของจุลินทรีย์ที่สร้างสปอร์"

ตัวอย่างการคำนวณ หากในจานเพาะเชื้อเมื่อฉีดวัคซีน 0.1 กรัมของผลิตภัณฑ์ เฉลี่ย 135 โคโลนีเติบโตและเมื่อหว่านการเจือจางครั้งที่ 2 (0.01 กรัมของผลิตภัณฑ์) - 9 โคโลนีผลของการศึกษาจะพิจารณาข้อมูลดิจิทัลที่ได้รับ เมื่อฉีดวัคซีนการเจือจางครั้งที่ 1 เช่น จำนวนจุลินทรีย์ 135 x 10 = 1350 ใน 1 กรัมของผลิตภัณฑ์

เพื่อให้ได้ข้อมูลที่แม่นยำยิ่งขึ้นเกี่ยวกับจำนวนแบคทีเรีย mesophilic ขอแนะนำให้เปรียบเทียบผลการนับโคโลนีที่ได้รับบนจานกับการฉีดวัคซีนของวัสดุจากการเจือจางแบบอนุกรม จำนวนของโคโลนีที่นับควรสัมพันธ์กับความหลายหลากของการเจือจางโดยประมาณโดยประมาณ หากจำนวนโคโลนีบนจานที่มีการฉีดวัคซีนจากการเจือจางต่อมา (1:10, 1:100) เกือบจะเกิดขึ้นพร้อมกันหรือแตกต่างกันเพียงเล็กน้อย แสดงว่ามีการผสมหัวเชื้อไม่เพียงพอระหว่างการเตรียมการเจือจางและก่อนการเพาะเชื้อ

เมื่อซื้อเนื้อสัตว์ นม ปลา อาหารกระป๋องในซูเปอร์มาร์เก็ต ตลาด และจุดขายแบบรวมศูนย์ เราต้องการให้แน่ใจว่าเป็นไปตามมาตรฐานด้านสุขอนามัยและระบาดวิทยา คุณภาพของผลิตภัณฑ์ถูกควบคุมตาม GOST อย่างไร?

ตัวแทนกลุ่ม BGKP

การระบุ BGKP (แบคทีเรียของกลุ่ม Escherichia coli) เกิดขึ้นจากการวิจัยในห้องปฏิบัติการโดยใช้วิธีการทางอ้อม แบคทีเรียกลุ่มนี้คืออะไรและมีลักษณะทางสัณฐานวิทยาอย่างไร

แบคทีเรียในสกุลนี้ประกอบด้วยตัวแทนมากกว่า 100 คน ซึ่งมีที่อยู่อาศัยคืออากาศ ดิน ลำไส้ของสิ่งมีชีวิต เป็นอันตรายต่อมนุษย์เพราะ เป็นเวลานานสามารถอยู่ในดิน น้ำ และตายได้ที่อุณหภูมิ 60 0 C เมื่อถูกความร้อนเป็นเวลา 15 นาทีเท่านั้น GOST กำหนดบรรทัดฐานซึ่งถือว่าตัวบ่งชี้ของกลุ่มนี้เป็นที่ยอมรับ หากการปนเปื้อนของแบคทีเรียสูงกว่าตัวบ่งชี้ที่กำหนดไว้หรือต่อหน้าตัวแทนที่ทำให้เกิดโรคในกลุ่มนี้อาหารเป็นพิษได้

ตัวแทนของ BGKP รวมถึงประเภทต่อไปนี้:

• เอสเคอริจิโอสิส สายพันธุ์นี้มีความทนทานต่อสภาวะที่ไม่เอื้ออำนวยและสามารถคงอยู่ในน้ำนมได้นานถึง 35 วันสำหรับของใช้ในครัวเรือนตั้งแต่ 3 ถึง 5 เดือน เข้าสู่ร่างกายทางน้ำ อาหาร มือสกปรก เด็กเล็กและผู้ที่มีระบบภูมิคุ้มกันอ่อนแอจะอ่อนแอเป็นพิเศษ
• เลบซิเอลล่า. กระจายในดิน น้ำ เมล็ดพืช ผัก. ขับออกมาในน้ำนมและน้ำดื่ม เป็นสาเหตุของโรคในส่วนบน ทางเดินหายใจ,ข้อต่อและอวัยวะสืบพันธุ์.

มาตรฐาน GOST

มาตรฐาน GOST ใช้กับผลิตภัณฑ์อาหารทั้งหมด ที่ การตรวจสุขาภิบาลสำหรับการปรากฏตัวของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคจะใช้วิธีการทางอ้อมซึ่งทำให้สามารถระบุระดับของเนื้อหาของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคได้ ยิ่งระดับนี้สูงเท่าใดก็ยิ่งมีโอกาสมากขึ้นที่บุคคลจะติดเชื้อโรคติดเชื้อ

มีตัวบ่งชี้ทางจุลชีววิทยาสองแบบตามการตรวจสอบผลิตภัณฑ์อาหาร

1. QMAFAnM เป็นตัวบ่งชี้การปนเปื้อนทั้งหมดของผลิตภัณฑ์ เปอร์เซ็นต์สูงตัวชี้วัด QMAFAnM ( กลุ่มต่างๆจุลินทรีย์บนพื้นผิวของผลิตภัณฑ์อาหาร) บ่งชี้การละเมิดดังกล่าว:

• แย่ การรักษาความร้อนสินค้า;
• การจัดเก็บและการขนส่งที่ไม่เหมาะสม
• ขาดการฆ่าเชื้ออุปกรณ์

QMAFAnM ถูกกำหนดในนมและผลิตภัณฑ์จากนมที่ไม่ใช้การเพาะเชื้อแบบพิเศษ ในการตรวจจับ QMAFAnM ในนม จะใช้สารอาหารพิเศษจากวุ้นเนื้อเปปโตน

2. ตัวบ่งชี้ BGKP เป็นตัวบ่งชี้มลพิษทางน้ำและดินผ่านการขับถ่ายของมนุษย์ GOSTs ระบุมวลของผลิตภัณฑ์และ บรรทัดฐานที่อนุญาตการตรวจจับ BGKP เพื่อตรวจสอบจำนวนแบคทีเรียในสกุล Escherichia coli ใช้สื่อ Kessler และระบุตัวตนโดยใช้สื่อ Endo

ดัชนีความบริสุทธิ์ น้ำดื่มโดดเด่นด้วย coli-titer และ coli-index titer เป็นตัวหลักในการกำหนดตัวบ่งชี้ความบริสุทธิ์ของน้ำ เมื่อ E. coli อยู่ในน้ำ 1 มล. ถือว่าดื่มได้ค่อนข้างดี ดัชนีโคไล ─ การหาอีโคไลในน้ำ 1 ลิตร ดัชนีการมีอยู่ของ Escherichia coli ตาม GOST 2874-82 ไม่ควรเกิน 3 หากดัชนีอยู่เหนือบรรทัดฐานแสดงว่าน้ำดื่มปนเปื้อนของเสียจากสิ่งมีชีวิต

วิธีการตรวจหาจุลินทรีย์ในเนื้อสัตว์

วิธีการล้าง

เพื่อศึกษาการมีอยู่ของ QMAFAnM ในเนื้อสัตว์ ใช้วิธีล้าง นำชิ้นเนื้อหรือซากนกมาใส่ในถุงปลอดเชื้อ เทน้ำปราศจากเชื้อที่นั่นและเขย่าถุงที่มีสารอยู่หลายครั้ง ผลของการล้างจะได้วัสดุต้นทางซึ่งต่อมาใช้เพื่อระบุการปรากฏตัวของจุลินทรีย์ ผลการศึกษาคือจำนวนจุลินทรีย์ต่อฟลัช 1 มล. ตามมาตรฐานโดยใช้วิธีการชะล้างในเนื้อสัตว์ ดัชนีของจำนวนจุลินทรีย์ทั้งหมดไม่ควรเกิน 10,000 CFU / g

วิธีการเพาะ

การจัดตั้ง BGKP ขึ้นอยู่กับวิธีการเพาะวัสดุในตัวกลางเคสเลอร์ (อาหารที่มีแลคโตส) พืชผลจะปลูกเป็นเวลา 2 วัน จากนั้นชนิดของแบคทีเรียจะถูกกำหนดโดยลักษณะทางสัณฐานวิทยา

สถานประกอบการขนาดใหญ่สำหรับการแปรรูปเนื้อสัตว์ นม ปลามีห้องปฏิบัติการของตนเองซึ่งควบคุมคุณภาพของผลิตภัณฑ์ กำหนดระดับของ BGKP และการปนเปื้อนทั่วไปของแบคทีเรีย หากไม่สามารถตรวจสอบผลิตภัณฑ์โดยตรง ณ สถานที่ปล่อยตัวอย่างได้ ตัวอย่างจะถูกนำไปที่ห้องปฏิบัติการเฉพาะทางอื่นๆ

การพัฒนาแบบไดนามิกของเศรษฐกิจ อุตสาหกรรมอาหารเป็นไปไม่ได้โดยไม่เพิ่มความสามารถในการแข่งขันของสินค้าและบริการ ปัจจัยกำหนดผู้บริโภคคือคุณภาพของผลิตภัณฑ์ ผู้ผลิตต้องทราบและศึกษาข้อกำหนดสำหรับคุณภาพของผลิตภัณฑ์ของตน สามารถวิเคราะห์และประเมินประสิทธิภาพในเชิงปริมาณและเชิงคุณภาพได้

ในเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิค ตัวชี้วัดคุณภาพที่ควบคุมได้แบ่งออกเป็น 3 กลุ่ม ได้แก่ ทางประสาทสัมผัส กายภาพ-เคมี และจุลชีววิทยา

วิธีการวิจัยทางจุลชีววิทยากำหนดระดับการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ด้วยจุลินทรีย์และทำให้สามารถระบุการเปลี่ยนแปลงที่จะเกิดขึ้นในคุณภาพของผลิตภัณฑ์การเน่าเสียของผลิตภัณฑ์

QMAFAnM (Mesophilic Aerobic and Facultative Anaerobic Microorganism Count) เป็นการทดสอบความปลอดภัยของจุลินทรีย์ที่ใช้บ่อยที่สุด ตัวบ่งชี้นี้ใช้ทุกที่เพื่อประเมินคุณภาพของผลิตภัณฑ์ ยกเว้นผลิตภัณฑ์ที่ใช้การเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์พิเศษ (เช่น เบียร์ kvass ผลิตภัณฑ์นมเป็นต้น) QMAFAnM ประกอบด้วยกลุ่มจุลินทรีย์ต่างๆ เช่น แบคทีเรีย ยีสต์ รา จำนวนทั้งหมดของพวกเขาบ่งบอกถึงสถานะสุขอนามัยและสุขอนามัยของผลิตภัณฑ์ระดับของการปนเปื้อนของจุลินทรีย์

ผลิตภัณฑ์ที่มีแบคทีเรียจำนวนมาก แม้จะไม่ทำให้เกิดโรคและไม่เปลี่ยนแปลงลักษณะทางประสาทสัมผัสของพวกมัน ก็ถือว่าไม่ครบถ้วนสมบูรณ์ เนื้อหาที่สำคัญของเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตใน ผลิตภัณฑ์อาหาร(ยกเว้นในการผลิตที่ใช้แป้งเปรี้ยว) แสดงว่าวัตถุดิบผ่านการอบชุบด้วยความร้อนอย่างมีประสิทธิภาพไม่เพียงพอ หรือการล้างอุปกรณ์ไม่ดี หรือสภาพการเก็บรักษาที่ไม่น่าพอใจสำหรับผลิตภัณฑ์ การปนเปื้อนของแบคทีเรียที่เพิ่มขึ้นของผลิตภัณฑ์ยังบ่งชี้ถึงการเสื่อมสภาพที่อาจเกิดขึ้นได้

สำหรับผู้บริโภค ตัวบ่งชี้ QMAFAnM แสดงถึงคุณภาพ ความสด และความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์อาหาร ในเวลาเดียวกัน การประเมินคุณภาพของผลิตภัณฑ์โดยตัวบ่งชี้นี้มีข้อเสียหลายประการ ประการแรก นี่เป็นเพียงการประเมินเชิงปริมาณของจุลินทรีย์ทั่วไปเท่านั้น เนื่องจากการศึกษาไม่ได้คำนึงถึงจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค ประการที่สอง วิธีการนี้ไม่เป็นที่ยอมรับสำหรับผลิตภัณฑ์ที่มีจุลินทรีย์เฉพาะทางเทคโนโลยี

ตัวบ่งชี้ QMAFAnM ช่วยให้ประเมินระดับของสภาพสุขอนามัยและสุขอนามัยในสังคมในที่ทำงาน ช่วยให้คุณสามารถระบุการละเมิดการจัดเก็บและการขนส่งผลิตภัณฑ์

การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับจุลชีววิทยา กล่าวคือ การตรวจหาการปนเปื้อนในอาหาร วิธีการนี้รวมถึงการเตรียมเนื้อเปปโตนวุ้นเทลงในจานเพาะเชื้อการสุ่มตัวอย่างจากผลิตภัณฑ์อาหารการเตรียมสารแขวนลอยจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารการเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยการทดสอบและการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยทดสอบในจานเพาะเชื้อ การเพาะปลูกและการนับจำนวนโคโลนีตามสูตร: x=a n ×10, n คือระดับการเจือจาง นอกจากนี้ ในการเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยทดสอบ จะใช้สารละลายเปปโตนเนื้อ 0.6-0.8% ในขณะที่การเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยทดสอบจะวางบนตัวกรองเมมเบรนที่อยู่บนพื้นผิวของวุ้นเนื้อเปปโตนใน Petri จาน. วิธีการนี้เป็นแนวทางดั้งเดิมในการแก้ปัญหา ใช้งานง่าย ให้ข้อมูล ให้ผลลัพธ์ที่มีนัยสำคัญทางสถิติ ช่วยให้คุณลดการบริโภคสารอาหาร อาหารฆ่าเชื้อแบคทีเรีย และเวลาในการวิเคราะห์ได้อย่างมาก ให้การประเมินปริมาณที่แท้จริงของจุลินทรีย์ที่ให้การเจริญเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นอาณานิคมที่เล็กมาก และยังช่วยให้คุณศึกษากระบวนการแทรกซึมของจุลินทรีย์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง 1 ป่วย 1 แท็บ

การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับสาขาการตรวจทางสัตวแพทย์และสุขาภิบาล สุขาภิบาลและจุลชีววิทยา กล่าวคือ การกำหนดสิ่งปนเปื้อนในอาหารและสภาวะสุขาภิบาลและสุขอนามัยของวัตถุสิ่งแวดล้อม

ที่ใกล้ที่สุดคือวิธีการกำหนดจำนวนจุลินทรีย์ใน ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ในน้ำ วิธีที่รู้จักการกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และแบบไม่ใช้ออกซิเจนเชิงปัญญาใน 1 กรัมของผลิตภัณฑ์มีดังนี้: การเตรียมสารละลายเจือจางและวุ้นเนื้อเปปโตนสำหรับฉีดวัคซีน การวิเคราะห์; ผลการบัญชี 1. ข้อเสีย วิธีการที่มีอยู่ก็คือ สารละลายโซเดียมคลอไรด์ (0.85%) ที่ใช้สำหรับการเจือจางตัวอย่างนั้นไม่มีบัฟเฟอร์และไอโซโทนิกเฉพาะในส่วนที่เกี่ยวกับเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม และใช้สารอาหารในปริมาณมาก จานฆ่าเชื้อแบคทีเรีย และค่าแรงสำหรับการวิเคราะห์ นอกจากนี้ วิธีนี้ไม่อนุญาตให้มีการประเมินปริมาณที่แท้จริงของจุลินทรีย์ที่ให้การเจริญเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นอาณานิคม (น้ำค้าง) ขนาดเล็กมาก (วิธีการของแบคทีเรียทั่วไป แก้ไขโดย F. Gerhard et al. M.: Mir, 1983, หน้า 442-512)

วัตถุประสงค์ของการประดิษฐ์คือเพื่อลดปริมาณสารอาหารที่ใช้ อาหารแบคทีเรีย และค่าใช้จ่ายของเวลาในการทำงานโดยใช้สารละลาย MPA ทางสรีรวิทยาทางสรีรวิทยาแทนสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% ตามด้วยการฉีดวัคซีนเจือจางเจือจาง ทดสอบช่วงล่างบนพื้นผิวของแผ่นกรองเมมเบรน

แอปพลิเคชัน วิธีนี้ขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่าสารละลายทางสรีรวิทยาของวุ้นเนื้อเปปโตนกึ่งของเหลว (0.6-0.8%) ใช้เป็นสารละลายทางสรีรวิทยาสำหรับการเจือจางประกอบด้วยน้ำกลั่น 1 dm 3, เปปโทน 10 กรัม, โซเดียม 5 กรัม คลอไรด์ 0.3 กรัมปราศจากน้ำ KH 2 PO 4 0.6 กรัมของปราศจากน้ำ NaH 2 PO 4 และ 0.6-0.8 กรัมของวุ้น-วุ้น; ค่าความเป็นกรด - ด่างของตัวกลางคือ 7.0-7.2 ซึ่งหยดลงบนพื้นผิวของตัวกรองเมมเบรน

ใช้เป็นสารละลายสำหรับการเจือจาง (0.6-0.8% เนื้อสัตว์เปปโทนกึ่งของเหลววุ้น) ตามด้วยการฉีดวัคซีนหยดของสารแขวนลอยทดสอบเจือจางบนตัวกรองเมมเบรนเป็นต้นฉบับในสารละลาย ใช้งานง่าย ให้ข้อมูล ให้ผลลัพธ์ที่มีนัยสำคัญทางสถิติ ช่วยให้คุณลดการบริโภคสารอาหาร อาหารฆ่าเชื้อแบคทีเรีย และเวลาในการวิเคราะห์ได้อย่างมาก ช่วยในการประเมินปริมาณที่แท้จริงของจุลินทรีย์ที่ให้การเจริญเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นอาณานิคม (น้ำค้าง) ขนาดเล็กมาก และยังช่วยให้คุณศึกษากระบวนการแทรกซึมเข้าไปด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง

สำหรับการวิเคราะห์ จะเก็บตัวอย่างอาหารตามความเหมาะสม เอกสารกำกับดูแล(GOST 18963-73. น้ำดื่มวิธีการวิเคราะห์สุขาภิบาลและแบคทีเรีย M. , 1986; GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982; GOST 7702.2.1-95 เนื้อสัตว์ปีกเครื่องในและกึ่ง -ผลิตภัณฑ์สำเร็จรูป นก ม., 1994)

ในการเตรียมสารแขวนลอย ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์อาหารจะถูกวางในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% ในปริมาณสี่เท่า การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันจะดำเนินการในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรกให้วัสดุถูกบดเป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วการหมุนของมีดช้า ๆ จากนั้นที่ 15000-20000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2.5 นาที อนุญาตให้เตรียมสารแขวนลอยทดสอบในครกพอร์ซเลนที่ปราศจากเชื้อได้หากไม่มีโฮโมจีไนเซอร์โดยบดผลิตภัณฑ์ 20 กรัมด้วยทรายปลอดเชื้อ 2-3 กรัม ค่อยๆ เติมน้ำเกลือปลอดเชื้อ 80 มล. สำหรับการฉีดวัคซีนในอาหารเลี้ยงเชื้อ สารแขวนลอยจะถูกถ่ายด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาที่ผ่านการฆ่าเชื้อหลังจากผ่านไป 15 นาทีที่ อุณหภูมิห้อง. สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม

วุ้นเนื้อเปปโตนเทลงในแก้วหรือจานเพาะเชื้อพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) และหลังจากที่วุ้นเย็นตัวลงแล้วตัวกรองเมมเบรน 5-6 ตัวจะถูกวางบนพื้นผิวด้วยแหนบที่ปลอดเชื้อ แผนภาพแสดงขั้นตอนหลักในการกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และแบบไม่ใช้ออกซิเจนแบบคณะตามวิธีการที่เสนอ

0.6-0.8% สารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลวเทลงในหลอดทดลองที่ปลอดเชื้อขนาด 9 ซม. 3 จากนั้นในสารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลว 9 ซม. 3 จะเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ศึกษา ในการทำเช่นนี้ จะมีการเติมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 ลงในหลอดแรกด้วยวุ้นกึ่งเหลว 9 ซม. 3 สารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 ผสมอย่างทั่วถึงจากหลอดแรก ถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง เป็นต้น วัฒนธรรมที่เจือจาง 0.1 มล. (1 หยด) ถูกนำไปใช้กับตัวกรองเมมเบรนที่อยู่ใน MPA ในถ้วย ในถ้วยเดียว คุณสามารถใส่วุ้น 5-6 หยดด้วยการเจือจางวัฒนธรรมต่างๆ หยดวุ้นที่มีวัฒนธรรมเจือจางแข็งตัวใน 10-15 นาที หลังจากนั้น จานเพาะเชื้อจะปลูกกลับหัวในอุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตอยู่ อาณานิคมจะถูกนับในวุ้นหนึ่งหยด

ในการกำหนดจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนจำนวนโคโลนีที่ปลูกจะถูกคูณด้วยระดับการเจือจางของวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

เพื่อหาปริมาณจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดการเจริญเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นโคโลนี (น้ำค้าง) ขนาดเล็กมาก ตลอดจนศึกษากระบวนการแทรกซึมของจุลินทรีย์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง อาณานิคมที่ปลูกบนตัวกรองเมมเบรนจะจับจ้องในไอระเหยของกลูตาราลดีไฮด์ 25% เป็นเวลา 30-40 นาที จากนั้นแผ่นกรองเมมเบรนจะถูกวางลงบนพื้นผิวของสไลด์แก้วและหยดโพรพิลีนออกไซด์สองสามหยดลงไป แผ่นกรองเมมเบรนจะโปร่งใส และสามารถอ่านโคโลนี (น้ำค้าง) ขนาดเล็กมากได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์หรือแว่นขยาย และหากจำเป็น ก็สามารถถ่ายภาพไมโครโฟโต้ได้

วิธีการนี้แสดงให้เห็นในตัวอย่างการใช้งานเฉพาะต่อไปนี้ (ดูตาราง)

สัญลักษณ์: วิธีที่ 1 - อะนาล็อกที่ใกล้เคียงที่สุด

วิธีที่ 2 - แนะนำ

ตัวอย่างที่ 1 การหาจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic ในไส้กรอกต้ม การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative แบบไม่ใช้ออกซิเจนได้ดำเนินการในสองวิธี: วิธีที่ 1 (ต้นแบบ) - สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนเทลงในแก้วหรือจานเพาะเชื้อพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% ในปริมาณสี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดเป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15000-20000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดวัคซีนบนอาหารเลี้ยงเชื้อ ให้ถ่ายสารแขวนลอยด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาหลังจากได้รับเชื้อเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียมการเจือจางของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว 3 ครั้งในสารละลายโซเดียมคลอไรด์ทางสรีรวิทยา: สารละลายโซเดียมคลอไรด์ทางสรีรวิทยาถูกเทลงใน 9 ซม. 3 ในหลอดทดลองที่ปลอดเชื้อ จากนั้นในสารละลายโซเดียมคลอไรด์ทางสรีรวิทยา 9 ซม. 3 จะเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ศึกษา เมื่อต้องการทำเช่นนี้ ให้เติมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 ลงในหลอดทดลองแรกด้วยโซเดียมคลอไรด์ 9 ซม. 3 จากหลอดทดลองแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 อย่างทั่วถึง ถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง ฯลฯ และจากการเจือจางแต่ละครั้ง 0.1 มล. ถูกนำไปใช้กับจานเพาะเชื้อ (ทั้งหมด 3 จาน) หลังจากนั้น นำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่ดำรงชีวิตได้ ให้นับโคโลนีในสารละลายวุ้น เพื่อกำหนดจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative แอนแอโรบิกจำนวนโคโลนีที่ปลูกจะถูกคูณด้วยระดับการเจือจางของวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n - ระดับการเจือจาง

วิธีที่ 2 (เสนอ) รวมถึงการเตรียมสารละลายเจือจาง (0.6-0.8% สารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลว 0.6-0.8% สารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลว) และวุ้นเนื้อเปปโทนสำหรับการเพาะ การวิเคราะห์; ผลการบัญชี

สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนจะถูกเทลงในจานเพาะเชื้อแก้วหรือพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) หลังจากที่วุ้นเย็นตัวลงแล้ว ตัวกรองเมมเบรนถึง 6 ชิ้นจะถูกวางบนพื้นผิวด้วยแหนบที่ปลอดเชื้อ การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% ในปริมาณสี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดเป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15000-20000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดวัคซีนบนอาหารเลี้ยงเชื้อ ให้ถ่ายสารแขวนลอยด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาหลังจากได้รับเชื้อเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียมการเจือจางของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว 3 ครั้งในสารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA: 0.6-0.8% สารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลวถูกเทลงใน 9 ซม. 3 ในหลอดทดลองที่ปลอดเชื้อ จากนั้นในสารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลว 9 ซม. 3 จะมีการเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ศึกษา ในการทำเช่นนี้ จะมีการเติมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 ลงในหลอดแรกด้วยวุ้นกึ่งเหลว 9 ซม. 3 สารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 ผสมอย่างทั่วถึงจากหลอดแรก ถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง เป็นต้น และจากการเจือจางแต่ละครั้ง 0.1 มล. ถูกนำไปใช้กับพื้นผิวของตัวกรองเมมเบรนที่อยู่บน MPA ในจานเพาะเชื้อ ยิ่งไปกว่านั้น มีการเจือจาง 3 ครั้งในจานเพาะเชื้อหนึ่งจาน หลังจากนั้น นำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่ดำรงชีวิตได้ ให้นับโคโลนีในสารละลายวุ้น เพื่อกำหนดจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative แอนแอโรบิกจำนวนโคโลนีที่ปลูกจะถูกคูณด้วยระดับการเจือจางของวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

จำนวนจุลินทรีย์แอโรบิกแบบมีโซฟิลิกและแบบไม่ใช้ออกซิเจนเชิงคณะ กำหนดโดยวิธีที่ 1 - (9×10 2) และวิธีที่ 2 - (10×10 2) ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ

ตัวอย่างที่ 2 การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic ในเนื้อสัตว์ การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative แบบไม่ใช้ออกซิเจนได้ดำเนินการในสองวิธี: วิธีที่ 1 (ต้นแบบ) - สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนเทลงในแก้วหรือจานเพาะเชื้อพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% ในปริมาณสี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดเป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15000-20000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดวัคซีนบนอาหารเลี้ยงเชื้อ ให้ถ่ายสารแขวนลอยด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาหลังจากได้รับเชื้อเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียมการเจือจางของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว 6 ครั้งในสารละลายโซเดียมคลอไรด์ทางสรีรวิทยา: สารละลายโซเดียมคลอไรด์ทางสรีรวิทยาถูกเทลงในหลอดทดลองปลอดเชื้อ 9 ซม. 3 หลอด จากนั้นในสารละลายโซเดียมคลอไรด์ทางสรีรวิทยา 9 ซม. 3 จะเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ศึกษา เมื่อต้องการทำเช่นนี้ ให้เติมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 ลงในหลอดทดลองแรกด้วยโซเดียมคลอไรด์ 9 ซม. 3 จากหลอดทดลองแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 อย่างทั่วถึง ถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง ฯลฯ จากนั้นนำ 0.1 มล. มาใส่ในจานเพาะเชื้อจากการเจือจางแต่ละครั้ง (ทั้งหมด 6 จาน) หลังจากนั้น นำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่ดำรงชีวิตได้ ให้นับโคโลนีในสารละลายวุ้น เพื่อกำหนดจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative แอนแอโรบิกจำนวนโคโลนีที่ปลูกจะถูกคูณด้วยระดับการเจือจางของวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

วิธีที่ 2 (เสนอ) รวมถึงการเตรียมสารละลายเจือจาง (0.6-0.8% สารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลวและ 0.6-0.8% ทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลว) และวุ้นเนื้อเปปโทนสำหรับการเพาะ การวิเคราะห์; ผลการบัญชี

สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนจะถูกเทลงในจานเพาะเชื้อแก้วหรือพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) และหลังจากที่วุ้นเย็นตัวลงแล้ว ตัวกรองเมมเบรน 5-6 ตัวจะถูกวางบนพื้นผิวด้วยแหนบที่ปลอดเชื้อ การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% ในปริมาณสี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดเป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15000-20000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดวัคซีนบนอาหารเลี้ยงเชื้อ ให้ถ่ายสารแขวนลอยด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาหลังจากได้รับเชื้อเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียม 6 เจือจางของสารแขวนลอยตรวจสอบในสารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA: 0.6-0.8% สารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลวเทลงใน 9 ซม. 3 ในหลอดทดลองที่ปราศจากเชื้อ จากนั้นในสารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลว 9 ซม. 3 จะเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ศึกษา ในการทำเช่นนี้ จะมีการเติมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 ลงในหลอดแรกด้วยวุ้นกึ่งเหลว 9 ซม. 3 สารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 ผสมอย่างทั่วถึงจากหลอดแรก ถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง เป็นต้น และจากการเจือจางแต่ละครั้ง 0.1 มล. ถูกนำไปใช้กับพื้นผิวของตัวกรองเมมเบรนที่อยู่บน MPA ในจานเพาะเชื้อ นอกจากนี้ มีการเจือจาง 6 ครั้งในจานเพาะเชื้อสองจาน หลังจากนั้น นำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่ดำรงชีวิตได้ ให้นับโคโลนีในสารละลายวุ้น เพื่อกำหนดจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative แอนแอโรบิกจำนวนโคโลนีที่ปลูกจะถูกคูณด้วยระดับการเจือจางของวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

หลังจากเพาะในจานเพาะเชื้อที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง จำนวนจุลินทรีย์แอโรบิกแบบมีโซฟิลิกและแบบไม่ใช้ออกซิเจนเชิงคณะที่กำหนดโดยวิธีที่ 1 - (8×10 5) และวิธีที่ 2 - (7×10 5) ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ

จากตัวอย่างข้างต้น จะเห็นได้ว่าเมื่อเปรียบเทียบทั้งสองวิธี จำนวน CFU ที่กำหนดโดยวิธีการที่เสนอไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญเมื่อกำหนดโดยวิธีที่ยอมรับโดยทั่วไป ในขณะเดียวกัน วิธีการที่พัฒนาขึ้นก็มีข้อดีหลายประการ ดังนั้นเพื่อกำหนดจำนวนเซลล์ที่มีชีวิตสำหรับตัวอย่างห้าประเภทคือ: ตามที่มีอยู่หนึ่ง - 98 นาที; ตามวิธีการที่เสนอ - 48 นาที ค่าใช้จ่ายของสารอาหารเท่ากับต้นแบบ - 420 มล. ตามวิธีการที่เสนอ - 135 มล. จำนวนจานเพาะเชื้อเป็นไปตามต้นแบบ - 28 ชิ้น; ตามวิธีการที่เสนอ - 9 ชิ้น