مساعدة الخبرة في علم الأحياء ، يرجى السؤال عن الكشف عن البروتين والكشف عن الكربوهيدرات والكشف عن الدهون. موضوع “تحليل جودة الغذاء. كشف البروتين في عينة الاختبار

استهداف:دراسة خصائص البروتينات.

المعدات والكواشف:- محلول البروتين

محلول كبريتات النحاس.

محلول خلات الرصاص

أنابيب الإختبار

تقدم:

إذابة البروتين

تذوب العديد من البروتينات في الماء ، ويرجع ذلك إلى وجود مجموعات محبة للماء على سطح جزيء البروتين. تعتمد قابلية ذوبان البروتين في الماء على بنية البروتين وتفاعل الوسط ووجود الإلكتروليتات. تذوب البروتينات ذات الخصائص الحمضية بشكل أفضل في البيئة الحمضية ، بينما تذوب البروتينات ذات الخصائص الأساسية بشكل أفضل في البيئة القلوية.

الألبومينات قابلة للذوبان بدرجة عالية في الماء المقطر ، في حين أن الجلوبيولين قابل للذوبان في الماء فقط في وجود الإلكتروليتات.

لا تذوب بروتينات الأنسجة الداعمة (الكولاجين ، والكيراتين ، والإيلاستين ، إلخ) في الماء.

المعدات والكواشف:- بياض البيضة;

ماء مقطرة؛

محلول كلوريد البوتاسيوم

كيراتين (صوف أو شعر).

تقدم:

إلى قطرتين من بياض البيض غير المخفف يضاف 1 مل من الماء المقطر ويخلط. في هذه الحالة ، يذوب زلال البيض ، ويترسب غلوبولين البيض على شكل راسب صغير.

تحقق من قابلية الذوبان في الماء و 5٪ محلول كلوريد البوتاسيوم من بروتين الكيراتين الموجود في الصوف والشعر.

رتب نتائج العمل على شكل جدول:

تمسخ البروتين بالكحول.

المعدات والكواشف: محلول بروتيني ؛ الإيثانول وأنابيب الاختبار

ترسيب البروتينات عند التسخين.

البروتينات هي مركبات قابلة للتحلل بالحرارة وعندما تسخن فوق 50-60 درجة مئوية ، يحدث تمسخ. يتمثل جوهر التمسخ الحراري في نشر بنية محددة لسلسلة البولي ببتيد وتدمير غلاف الماء لجزيئات البروتين ، والذي يتجلى من خلال انخفاض ملحوظ في قابليتها للذوبان. يحدث الترسب الأكثر اكتمالا وأسرع عند النقطة الكهربية ، أي عند قيمة الرقم الهيدروجيني للوسط ، عندما تكون الشحنة الإجمالية لجزيء البروتين صفراً ، لأن جزيئات البروتين في هذه الحالة هي الأقل استقرارًا. تترسب البروتينات ذات الخصائص الحمضية في بيئة حمضية قليلاً ، ويتم ترسيب البروتينات ذات الخصائص الأساسية في بيئة قلوية قليلاً. في المحاليل شديدة الحموضة أو القلوية بشدة ، لا يترسب البروتين الذي يتم تغيير طبيعته عند تسخينه ، حيث يتم إعادة شحن جزيئاته وتحمل شحنة موجبة في الحالة الأولى ، وشحنة سالبة في الحالة الثانية ، مما يزيد من ثباتها في المحلول.

المعدات والكواشف: - 1٪ محلول بياض البيض

محلول 1٪ حمض الاسيتيك;

10٪ محلول حمض الخليك.

10٪ محلول هيدروكسيد الصوديوم ؛

4 أنابيب اختبار ، حامل ، مصباح روح.

خبرة

النتائج

يتم سكب 10 قطرات من محلول بياض البيض 1٪ في أربعة أنابيب اختبار مرقمة. أ) يتم تسخين الأنبوب الأول حتى الغليان. ب) أضف قطرة واحدة من محلول حمض الأسيتيك بنسبة 1٪ إلى الأنبوب الثاني وحرارة الغليان. ج) أضف قطرة واحدة من محلول حمض الأسيتيك بنسبة 10٪ إلى الأنبوب الثالث وقم بالتسخين حتى الغليان. د) أضف قطرة واحدة من محلول هيدروكسيد الصوديوم 10٪ إلى الأنبوب الرابع وتسخينه حتى الغليان.

أ) يصبح محلول البروتين عكرًا ، ولكن نظرًا لأن جزيئات البروتين المشوهة تحمل شحنة ، فإنها لا تترسب. هذا يرجع إلى حقيقة أن بياض البيض يحتوي على الخصائص الحمضية(نقطة تساوي الطاقة الكهربية هي الأس الهيدروجيني 4.8) وهي سالبة الشحنة في وسط محايد ؛ ب) يترسب البروتين عندما يقترب محلول البروتين من النقطة الكهربية ويفقد البروتين شحنته ؛ ج) لا يتشكل الترسيب ، لأنه في وسط شديد الحموضة ، تكتسب جزيئات البروتين شحنة موجبة (يتم الحفاظ على أحد عوامل استقرار البروتين في المحلول) ؛ د) لا يتم تشكيل أي راسب ، حيث تزداد الشحنة السالبة لجزيئات البروتين في بيئة قلوية.

استخلاص النتائج._____________________________

شروط إتمام المهمة

1. مكان (وقت) المهمة : تكتمل المهمة في الفصل خلال وقت الفصل الدراسي

2. أقصى وقتإنجاز المهمة: ____ 90 _______ دقيقة.

3. يمكنك استخدام ملفات كتاب مدرسي ، مذكرات محاضرة

مقياس التحصيل التعليمي:

معايير التقييم:أداء العمل أكثر من 90٪ - الدرجة "5" ،

70-90٪ - الدرجة "4" ،

50-70٪ - الدرجة "3" ،

أقل من 50٪ - الدرجة "2".

العمل العملي # 1

تحضير محلول بتركيز معين.

استهداف:

تحضير محاليل الأملاح بتركيز معين.
تعلم كيفية تحضير محلول بتركيز معين باستخدام المقاييس وأدوات القياس.

معدات:

ملعقة زجاجية
كوب 50 مل ؛
قضيب زجاجي بطرف مطاطي ؛
اسطوانة القياس;
مقاييس؛
البرد ماء مغلي.
ملح؛

الجزء النظري

المحلول-إنه نظام متجانس يتكون من مذيب ومذابات ومنتجات تفاعلها. عادة ما يكون المذيب هو المادة التي شكل نقيله نفس حالة التجميع مثل الحل ، أو أنه موجود بشكل زائد.

وفقًا لحالة التجميع ، يتم تمييز الحلول: سائل ، صلب ، غازي.حسب نسبة المذيب والمذاب: مخفف ، مركز ، مشبع ، غير مشبع ، مفرط التشبع. عادةً ما يتم نقل تركيبة المحلول بواسطة محتوى المذاب فيه بالشكل جزء الشاملوالتركيزات المئوية والمولارية.

جزء الشامل ( كمية بلا أبعاد) هي نسبة الكتلة المذابة
المواد إلى كتلة المحلول بأكمله:

W جزء في المليون = م راست. المواد / م الحل.

تركيز النسبة المئوية (٪) هي قيمة توضح عدد جرامات المذاب في 100 جرام. المحلول :

W٪ = m rast. المواد 100٪/م الحل

(الكتاب المدرسي O.S. Gabrielyan، I.G. Ostroumov Chemistry، M. "Academy" 2013، p. 57)

التركيز المولي، أو المولارية (مول / لتر) هي قيمة توضح عدد مولات المذاب الموجودة في لتر واحد من المحلول:

سم = م راست. أشياء/السيد (المواد النباتية) الخامس الحل .

(الكتاب المدرسي O.S. Gabrielyan، I.G. Ostroumov Chemistry، M. "Academy" 2013، p. 57)

عنوان البريد الإلكتروني هذا محمي من spambots ، تحتاج إلى تفعيل JavaScript لمشاهدته.

تكلفة المشاركة 290 روبل.

هناك الكثير من القواسم المشتركة بين المطبخ العادي والمختبر العلمي. في القدور والمقالي ، معقدة العمليات البيوكيميائية. يمكن إعادة إنتاج بعضها في المنزل وتشعر وكأنها كيميائي حقيقي
اليوم سوف ندرس تكوين الحليب. يعرف جميع الأطفال أن الحليب جيد جدًا منتج مفيد. صحيح ، لا يحب الجميع الحليب. لكن هذا لا يقلل من فائدتها. تذكر أن الثدييات تغذي صغارها بالحليب. وبالتالي فهي مغذية للغاية وسهلة الهضم. يحتوي الحليب في نفس الوقت على جميع المواد الغذائية الرئيسية - وهي البروتينات والدهون والكربوهيدرات. أكبر عددتوفر الدهون الطاقة. تسمى الكربوهيدرات في الحليب اللاكتوز. ولكن على عكس الجلوكوز أو السكروز ( سكر الطعام) ، اللاكتوز ليس له طعم حلو تقريبًا.

معظم الناس يأكلون حليب البقر. لكن في الحيوانات ، يختلف تكوين الحليب. حلل الجدول وأجب عن الأسئلة.

لنقم الآن ببعض التجارب على الحليب.

يمكنك أخذ عينة واحدة من الحليب ، ولكن من المثير للاهتمام مقارنة عدة عينات. مختلف الشركات المصنعة. إذا أتيحت الفرصة لشخص ما لمقارنة الحليب من المتجر والحليب من بقرة أو أبقار من مزرعة ، فهذا مثير جدًا للاهتمام.

لسوء الحظ ، غالبًا ما يصنع الحليب في العديد من المصانع من مسحوق الحليب أو يضاف إلى الحليب العادي. حليب طازج. من هذا ، قد تتغير بعض خصائص الحليب.

ستحتاج إلى: عدة عينات من الحليب (تأكد من كتابة اسم الشركة المصنعة) ، وعدة أنابيب اختبار (يمكنك أن تسأل مدرس الكيمياء ، إذا لم يكن ذلك ممكنًا ، فخذ أكوابًا صغيرة أو حتى أكوابًا) ، وحمض الأسيتيك ، الزاج الأزرق ، محلول قلوي قليل أو صودا غسيل ، ماصة (متوفر في الصيدليات).

تجربة 1. تحديد الدهون في الحليب.

في حليب بقرعادة تحتوي على 3-4٪ دهون. ربما تعلم بالفعل أن الدهون لا تختلط بالماء. لكن في الحليب ، لا تنفصل هذه الدهون على الفور عن الماء ، ولا يمكن رؤيتها إلا إذا كان الحليب قائمًا لفترة طويلة. ثم تطفو الدهون على السطح. سيكون هذا هو الكريم. حليب دسمتوجد في الحليب على شكل كريات تشكل مستحلب الزيت في الماء مع الماء. الكريات الدهنية محمية بقشور بروتينية قوية ومرنة ، لذلك لا تلتصق ببعضها البعض أثناء الاصطدام.

ضع قطرة من كل عينة حليب على ورق الترشيح. (حاول الاحتفاظ بالقطرات كما هي.) عندما تجف ، قم بقياس قطر كل بقعة بمسطرة. أكبر هو المزيد من المحتوىالدهون في الحليب. نظرًا لأن محتوى الدهون في الحليب المباع هو نفسه تقريبًا ، يمكنك تناول الكريمة مقابل الفائدة. يجب أن يكون لديهم الكثير من الدهون.

تجربة 2. الكشف عن البروتين في الحليب

صب بضع مل (ملليلتر) من الحليب في أنبوب اختبار وأضف بعناية حجمًا متساويًا من محلول ضعيف من كبريتات النحاس (أزرق شاحب) ومحلول قليل من القلويات أو صودا الغسيل على طول الجدران واخلط. يظهر لون أرجواني. يشير هذا إلى وجود البروتين في المنتج قيد الدراسة.

يحتوي الحليب على عدة أنواع من البروتينات. البروتين الرئيسي هو الكازين. يتم تشكيل الجبن من الكازين. عندما يكون الحليب طازجًا ، تذوب جميع البروتينات. لكن إذا كان اللبن حامضًا ، ستلاحظ أنه أصبح أكثر سمكًا - فقد تحول إلى لبن رائب. إذا تم تسخينه ، فإن رواسب البروتين تترسب. هذه هي الطريقة التي يصنع بها اللبن الرائب. ولكن إذا كنت لا ترغب في الانتظار حتى يصبح الحليب حامضًا ، فيمكنك إضافته إليه حمض الطعام- حامض الخليك أو الستريك والحصول على ترسبات من الكازين.

تجربة 3. تحديد وجود الكازين في الحليب.

صب 5 ملاعق كبيرة من الحليب في كوب ، أضف 1 ملعقة كبيرة من حمض الأسيتيك (9٪) ، أو بضع قطرات. جوهر الخل، مزج. يمكنك أن ترى تشكيل رقائق بيضاء. إنه الكازين.

تجربة 4. الحصول على مصل اللبن.

عندما يترسب الكازين ، تبقى البروتينات الأخرى واللاكتوز في الجزء السائل - مصل اللبن. للحصول على المصل ، يجب ترشيح الراسب. للقيام بذلك ، خذ كوبًا صغيرًا. ضع قمعًا فيه. ضع مرشحًا من عدة طبقات من الشاش أو الضمادة فيه واسكب الحليب مع الخثارة الناتجة على القمع. سيبقى الجبن القريش (الكازين) على المرشح ، وسنقوم بإجراء تجارب أخرى على مصل اللبن.

تجربة 5. الكشف عن البروتين في مصل الدم.

من الضروري ، كما في التجربة 2 ، إضافة محلول من كبريتات النحاس والقلويات إلى عدة مل من المصل ويخلط. يشير اللون الأرجواني إلى بقاء العديد من البروتينات الأخرى في مصل اللبن بعد عزل الكازين. لذلك ، يعتبر مصل اللبن أيضًا منتجًا مفيدًا ومغذيًا.

تجربة 6. الكشف عن الكربوهيدرات في الحليب.

يجب سكب القليل من مصل اللبن في كوب أو صحن ، حيث يمكن تسخينه على النار ، وتبخر السائل. عندما يتبخر السائل ، يتفحم مصل اللبن ويطور رائحة حلوة مماثلة لرائحة السكر المحترق. لقد أثبتنا أن الحليب يحتوي على الكربوهيدرات.

تجربة 7. حبر متعاطف.

هذا هو اسم السوائل التي ، عند كتابتها ، لا تترك أي أثر ملون على الورق. لا يمكن قراءة النص إلا بعد معالجة خاصة - التسخين أو التبليل بمادة معينة. الحليب رائع للكتابة السريةو. لذلك ، ستكون المهمة الأخيرة هي - كتابة مراجعة حول منافستنا مع الحليب ، وقم بكي هذه الورقة بعناية بمكواة غير ساخنة جدًا حتى يظهر النص. التقط صورة له وضع الصورة أسفل جدول الإجابات.

عمل بحثي.

نقترح مقارنة عدة أنواع من الحليب وفقًا لعدد من المؤشرات - من جهات تصنيع مختلفة ، سواء محلية الصنع أو تم شراؤها من المتجر.

إجراء التجارب اللازمة وإتمامها الطاولة.

جدول الأسئلة والأجوبة

1.	حليب من هو أكثر تغذية - كلاب أم أبقار ولماذا؟
2.	لماذا هو الأكثر حليب دسم(تصل إلى 40٪ دهون) في الحيتان والدلافين
3.	كثيرًا ما يسأل الأطفال: "لماذا يصبح الحليب أبيضًا إذا أكلت البقرة عشب اخضر؟ حاول الإجابة على هذا السؤال.
4.	هل تمكنت من الحصول على رواسب الكازين من جميع عينات الحليب ، أي الجبن؟
5.	ما هي البروتينات الأخرى الموجودة في الحليب إلى جانب الكازين؟
6.	لماذا لا يتمكن الكثير من الناس كبالغين من تناول الحليب لأنه يسبب لهم عسر الهضم؟ ابحث عن إجابة هذا السؤال في الكتب أو الإنترنت.
7.	ما هي المنتجات المصنوعة من الحليب؟

تكمن أهمية تفاعلات الألوان في أنها تجعل من الممكن اكتشاف وجود بروتين في السوائل البيولوجية والمحاليل وتأسيس تكوين الأحماض الأمينية للبروتينات الطبيعية المختلفة. تستخدم هذه التفاعلات في التحديد النوعي والكمي للبروتين وأحماضه الأمينية. بعض التفاعلات متأصلة ليس فقط في البروتينات ، ولكن أيضًا في مواد أخرى ، على سبيل المثال ، الفينول ، مثل التيروزين ، يعطي لونًا ورديًا أحمر مع كاشف ميلون ، لذلك لا يكفي إجراء أي تفاعل واحد لإثبات وجود بروتين.

هناك نوعان من التفاعلات اللونية: 1) عالمي - بيوريت (لجميع البروتينات) ونينهيدرين (للجميع أالأحماض الأمينية والبروتينات) ؛ 2) محددة - فقط لبعض الأحماض الأمينية في كل من جزيء البروتين وفي محاليل الأحماض الأمينية الفردية ، على سبيل المثال ، تفاعل Fohl (للأحماض الأمينية التي تحتوي على الكبريت ضعيف الارتباط) ، تفاعل ميلون (للتيروزين) ، تفاعل ساكاغوتشي ( أرجينين) ، إلخ.

عند إجراء تفاعلات الألوان للبروتينات والأحماض الأمينية ، يجب عليك أولاً وضع الجدول التالي:

تفاعلات اللون للبروتينات (التفاعلات النوعية)

تفاعلات اللون للبروتينات التجربة 1. تفاعل بيوريت.

تفاعل بيوريت- جودة عالية لكل شيء بدون استثناء السناجب، فضلا عن منتجاتها غير المكتملة التحلل المائيالتي تحتوي على اثنين على الأقل السندات الببتيد.

مبدأ الطريقة. يرجع تفاعل البيوريت إلى وجود روابط الببتيد في البروتينات (- CO - NH -) ، والتي تتشكل في بيئة قلوية مع أملاح النحاس ذات اللون البنفسجي الأحمر كبريتات النحاس (II). المجمعات. يتم إعطاء تفاعل Biuret أيضًا بواسطة بعض المواد غير البروتينية ، على سبيل المثال بيوريت(NH 2 -CO-NH-CO-NH 2) ، أوكساميد(NH 2 CO-CO-NH 2) ، سلسلة أحماض أمينية (الهيستيدين, سيرين, ثريونين, الهليون).

تفاعل Biuret مع الجلايسين

ترتيب العمل.

يضاف حجم متساوٍ من محلول 10٪ إلى 1 مل من محلول البروتين 1٪ الذي تم فحصه. هيدروكسيد الصوديوم(هيدروكسيد الصوديوم) قلوي ثم 2-3 قطرات من محلول 1٪ كبريتات النحاس(CuSO4). مخفف ، محلول عديم اللون تقريبًا من كبريتات النحاس.

مع رد فعل إيجابي ، يظهر اللون الأرجواني مع صبغة حمراء أو زرقاء.

تجربة 2.رد فعلإلى "الكبريت ضعيف الترابط".

مبدأ الطريقة. هذا هو رد فعل للسيستين والسيستين. أثناء التحلل المائي القلوي ، ينفصل "الكبريت ضعيف الارتباط" في السيستين والسيستين بسهولة ، مما يؤدي إلى تكوين كبريتيد الهيدروجين ، والذي يتفاعل مع القلويات ، ويعطي كبريتيد الصوديوم أو البوتاسيوم. عند إضافة أسيتات الرصاص (II) ، يتشكل راسب أسود رمادي من كبريتيد الرصاص (II).

ترتيب العمل.

صب 1 مل من بروتين الدجاج غير المخفف في أنبوب اختبار ، أضف 2 مل من 20٪ محلول هيدروكسيد الصوديوم. يغلي الخليط بلطف (حتى لا يتم التخلص من الخليط).

في هذه الحالة ، يتم إطلاق الأمونيا ، والتي يتم اكتشافها من خلال اللون الأزرق لورقة عباد الشمس الرطبة التي تم إحضارها إلى فتحة أنبوب الاختبار (لا تلمس الجدار). يذوب الراسب الطفيف الناتج عند الغليان ، ثم يضاف 0.5 مل من محلول أسيتات الرصاص (II). لوحظ وجود راسب رمادي-أسود من كبريتيد الرصاص (II):

كيمياء التفاعل:

الرواسب السوداء

صب 1 مل في أنبوب الاختبار. يضاف بروتين الدجاج غير المخفف 2 مل. محلول قلوي مركز ، وضع عدة غلايات. يضاف محلول بلومبيت الصوديوم إلى المحلول الساخن - أصفر بني أو تلطيخ أسود. (يتم تحضير بلومبيت الصوديوم على النحو التالي: يضاف محلول قلوي بالتنقيط إلى 1 مل من أسيتات الرصاص حتى يذوب راسب هيدروكسيد الرصاص الذي يتشكل في البداية).

إذا كان هناك أحماض أمينية تحتوي على الكبريت (سيستين ، سيستين) في جزيء البروتين ، يتم فصل الكبريت تدريجياً عن هذه الأحماض الأمينية في شكل أيون في حالة الأكسدة - 2 ، يتم الكشف عن وجودها بواسطة أيون الرصاص ، الذي يشكل كبريتيد الرصاص الأسود غير القابل للذوبان مع أيون الكبريت:

Pb (CH 3 COO) 2 + 2NaOH Pb (OH) 2 + 2 CH 3 COONa ،

Pb (OH) 2 + 2 NaOH Na 2 PbO 2 + H 2 O ،

Na 2 S + Na 2 PbO 2 + 2H 2 O PbS + 4NaOH.

تجربة 3. تفاعل البروتين Xantoprotein من البروتينات.

مبدأ الطريقة. يستخدم هذا التفاعل للكشف عن الأحماض الأمينية التي تحتوي على جذور عطرية. التيروزين ، التربتوفان ، فينيل ألانين ، عند التفاعل مع حمض النيتريك المركز ، تشكل مشتقات النيترو ذات اللون الأصفر. في البيئة القلوية ، تعطي مشتقات النيترو لهذه الأحماض الأمينية أملاحًا برتقالية اللون. الجيلاتين ، على سبيل المثال ، الذي لا يحتوي على أحماض أمينية عطرية ، لا يعطي اختبار xantoprotein.

ترتيب العمل.

أضف 0.5 مل من حمض النيتريك المركز إلى 1 مل من محلول بروتين بيض الدجاج 10٪. نتيجة لتخثر البروتين ، تتشكل ترسبات بيضاء أو تعكر في محتويات الأنبوب. عند تسخينه ، يتحول المحلول والراسب إلى اللون الأصفر الفاتح. في هذه الحالة ، يتم إذابة الراسب بالكامل تقريبًا نتيجة للتحلل المائي. بعد التبريد ، يضاف 1-2 مل من محلول هيدروكسيد الصوديوم 20٪ (حتى يظهر لون برتقالي من المحلول).

ضع في اعتبارك آلية تفاعل البروتين xantoprotein عند جذر التيروزين:

كيمياء التفاعل:

إجراء التجربة: استنتاج واكتب معادلة التفاعل.

تجربة 4. رد فعل Adamkevich (لوجود التربتوفان في البروتينات).

مبدأ الطريقة. تعطي البروتينات التي تحتوي على التربتوفان في وجود أحماض الجليوكسيليك والكبريتيك لونًا أحمر بنفسجي. يعتمد التفاعل على قدرة التربتوفان على التفاعل في بيئة حمضية مع ألدهيدات حمض الجليوكسيليك (وهو شوائب لحمض الخليك المركز) لتكوين منتجات تكثيف ملونة. يستمر التفاعل وفقًا للمعادلة:

الجيلاتين لا يعطي هذا رد الفعل ، لأن. لا يحتوي على التربتوفان. يأتي اللون من تفاعل التربتوفان مع حمض الجليوكسيليك ، والذي يوجد دائمًا كشوائب في حمض الأسيتيك.

يمكن إجراء نفس التفاعل مع التربتوفان باستخدام الفورمالديهايد بدلاً من حمض الأسيتيك ، محلول 2.5٪ من H 2 SO 4. امزج المحلول وبعد 2-3 دقائق. يضاف ويرج 10 قطرات من 5٪ نتريت الصوديوم. يتطور لون بنفسجي كثيف ، والذي يعتمد على مبدأ الطريقةتفاعلات.

ترتيب العمل.

صب بضع قطرات من البروتين غير المخفف في أنبوب اختبار وأضف 2 مل. حمض الخليك الجليدي وبضع قطرات من حمض الجليوكسيليك. يسخن الخليط قليلاً حتى يذوب الراسب الناتج ويبرد ، وعند إمالة أنبوب الاختبار بقوة ، يُسكب H 2 SO 4 المركز بعناية على طول الجدار بحيث لا يختلط كلا السائلين.

بعد 5-10 دقائق ، لوحظ تشكيل حلقة حمراء بنفسجية في الواجهة بين الطبقتين.

التجربة 5. تفاعل نينهيدرين.

مبدأ الطريقة. تتفاعل الأحماض الأمينية مع النينهيدرين لتكوين مركب أزرق بنفسجي (أرجواني Ruemann) ، كثافة لونه تتناسب مع كمية الأحماض الأمينية. يسير التفاعل وفقًا للمخطط:

كيمياء التفاعل :

يستخدم التفاعل مع النينهيدرين للكشف البصري عن الأحماض الأمينية أ على كروماتوجرامس (على الورق ، في طبقة رقيقة) ، وكذلك لتحديد اللوني لتركيز الأحماض الأمينية من خلال كثافة اللون لمنتج التفاعل.

يحتوي ناتج هذا التفاعل على الجذر (R) للحمض الأميني الأصلي ، والذي يسبب ألوانًا مختلفة: أزرق ، أحمر ، إلخ. المركبات الناتجة عن تفاعل الأحماض الأمينية مع النينهيدرين.

حاليًا ، يستخدم تفاعل النينهيدرين على نطاق واسع لاكتشاف الأحماض الأمينية الفردية ولتحديد مقدارها.

ترتيب العمل.

يُسكب 1 مل من محلول مخفف بنسبة 1-10٪ من بروتين بيض الدجاج و1-2 مل من محلول 1٪ من نينهيدرين في الأسيتون في أنبوب اختبار. يتم خلط محتويات الأنبوب وتسخينه بلطف في حمام مائي لمدة 2-3 دقائق حتى يظهر لون أزرق بنفسجي ، مما يدل على وجود البروتين α -أحماض أمينية.

إجراء التجربة: استنتاج واكتب معادلة التفاعل.

التجربة 6. رد فعل ساكاجوتشي.

مبدأ الطريقة. يعتمد رد الفعل هذا على حمض الأرجينين الأميني على تفاعل الأرجينين مع النافثول في وجود عامل مؤكسد. لم يتم توضيح آليتها بشكل كامل. على ما يبدو ، يتم إجراء التفاعل وفقًا للمعادلة التالية:

نظرًا لأن مشتقات الكينونيمينات (في هذه الحالة ، naphthoquinone) ، والتي يتم فيها استبدال الهيدروجين من مجموعة إيمينو –NH- بجذر ألكيل أو أريل ، يتم تلوينها دائمًا بدرجات اللون الأصفر والأحمر ، ثم ، على ما يبدو ، اللون البرتقالي والأحمر من المحلول أثناء تفاعل ساكاجوتشي يرجع إلى ظهور مشتق النافثوكينونيميني بدقة. ومع ذلك ، فإن إمكانية تكوين مركب أكثر تعقيدًا بسبب المزيد من أكسدة مجموعات NH المتبقية من بقايا أرجينين وحلقة البنزين من a-naphthol غير مستبعدة:

ترتيب العمل.

2 مل. أضف 2 مل من محلول بروتين بيض الدجاج المخفف بنسبة 1٪. 10٪ هيدروكسيد الصوديوم (NaOH) وبضع قطرات من محلول كحول 0.2٪ α -نافثول. امزج محتويات الأنبوب جيدًا. ثم صب 0.5 مل. هيبوبروميت الصوديوم (NaBrO) أو هيبوكلوريت الصوديوم (حمض هيبوكلوروس الصوديوم - NaOCl) ، مزيج. يظهر لون أحمر يتزايد تدريجيًا على الفور.

يضاف 1 مل من محلول اليوريا 40٪ على الفور لتثبيت اللون البرتقالي والأحمر سريع التطور.

هذا التفاعل هو سمة من سمات المركبات التي تحتوي على بقايا الغوانيدين

NH \ u003d C -NH 2 ،

ويشير إلى وجود حمض الأرجينين الأميني في جزيء البروتين:

NH \ u003d C -NH - (CH 2) 3 -CH -COOH

إجراء التجربة: استنتاج واكتب معادلة التفاعل.

ألبومات ألبومات تأثير أملاح المعادن الثقيلة على البروتين

هناك العديد طرق بسيطة, كيفية التعرف على البروتين. للقيام بذلك ، نستخدم بعض خصائصه المميزة.

إحدى المجموعات التي تنقسم إليها جميع البروتينات الموجودة هي البروتينات. . هذه المجموعة هي الأكثر شيوعًا والأكثر شهرة. الألبومين هو بروتين من بيض الدجاج، موجود في دم الإنسان والحيوان ، وكذلك في النباتات والعضلات والحليب.

لتحديد مجموعة البروتين هذه ، نستخدم خصائصها للذوبان في الماء. إذا تم تسخين الألبومين ، فإنها تغير هيكلها ، أي أنها "تطوى".

اذا لنجرب التعرف على البروتين. نستخدم ، على سبيل المثال ، مصل دم البقر أو البيض بروتين خام. نضعها في قدر ، يمكنك تخفيفها بالماء وتسخينها على نار خفيفة حتى الغليان. يذوب بعض الملح في محلول البروتين ويضاف القليل من الأوكيت (حمض الخليك).

نتيجة لرد الفعل ، سنرى أن الرقائق البيضاء ستسقط من المحلول.

تعرف على البروتينيمكن للآخرين بطريقة بسيطة: يغير البروتين هيكله تحت تأثير الكحول ، لذلك يكفي إضافة نفس الحجم من الكحول إلى محلول البروتين. تمامًا كما في الحالة السابقة ، سنرى ترسيب البروتين على شكل رقائق بيضاء.

وهنا التالي تجربة مثيرة للاهتماميمكن أن يسمى أيضًا مفيدًا. يمكن تحديد البروتين باستخدام أملاح المعادن الثقيلة. على سبيل المثال ، ملح من النحاس ، الحديد ، الرصاص (كبريتات النحاس CuSO 4 ، كلوريد الحديد FeCl 2 ، FeCl 3 ، نترات الرصاص Pb (NO 3) 4 ، إلخ). لو ل محلول مائيالبروتين لإضافة واحد (أو أكثر) من هذه الأملاح ، ثم راسب من المركب الكيميائي للبروتين مع رواسب معادن ثقيلة. بالنسبة لجسمنا وجسم الحيوانات ، أملاح المعادن الثقيلة مواد سامة تساهم في تدمير البروتين!

تعرف على البروتينمن الممكن أيضًا بمساعدة عمل الأحماض غير المعدنية (باستثناء orthophosphoric H 3 PO 4). إذا تم سكب حمض النيتريك في أنبوب اختبار ، وبعد ذلك ، بعناية ، يتم إسقاط محلول بروتيني على طول جدار أنبوب الاختبار ، ثم يتم تشكيل حلقة بيضاء من البروتين المترسب حول محيط جدار أنبوب الاختبار.

تسمى مجموعة أخرى من البروتينات الجلوبيولين - على عكس الزلاللا - قابل للذوبان في الماء. الجلوبيولين قابل للذوبان بدرجة عالية في حالة وجود الأملاح في المحلول. تم العثور على الجلوبيولين في بعض أجزاء من النباتات والحليب وعضلات الكائنات الحية. بالإضافة إلى ذلك ، فقد ثبت أن الجلوبيولين الموجود في النباتات يذوب في 70٪ كحول!

ومجموعة أخرى من البروتينات - البروتينات الصلبة ، والتي تشمل أنسجة الكائنات الحية ، على سبيل المثال ، الأظافر والشعر وقرنية العين ، وكذلك أنسجة العظاموقرون الحيوانات والصوف. لا تذوب البروتينات الصلبة في الماء ولا تذوب في الكحول ، ولكن عندما يتم معالجتها بمحلول حمضي قوي ، فإنها تكتسب القدرة على الذوبان ، بينما تتحلل جزئيًا.

الجلوبيولينو البروتينات الصلبةيمكن تحديدها باستخدام تفاعل البروتين xantoprotein. هذا تفاعل لوني لتحديد البروتين ، حيث إذا تم تسخين عينة تحتوي على بروتين ، فإن العينة ستتغير لونها إلى اللون الأصفر. بعد ذلك ، عندما يتم تحييد الحمض بالقلويات ، سيتغير اللون إلى اللون البرتقالي.
رد الفعل هذا ، ربما ، قد شاهده البعض بالفعل تجربتي الخاصةعندما يتلامس حمض النيتريك مع الجلد.

التالي تفاعل البروتين - بيوريت، والذي يتكون من إضافة محلول مخفف من قلوي الصوديوم أو البوتاسيوم إلى محلول بروتيني. في نفس المحلول ، أضف بضع قطرات من محلول كبريتات النحاس. نلاحظ تغيرًا في لون المحلول إلى الأحمر ، ثم الأرجواني والأزرق البنفسجي.

إذا تم تسخين البروتين لفترة طويلة في محلول حمضي ، فسيتم تقسيمه إلى مكونات - الببتيدات ، ثم إلى الأحماض الأمينية المكونة له ، والتي تستخدم في الصناعة لتحضير توابل الطعام.