البحث في الموقع
الصفحة الرئيسيةالحمية

فحص جبن النقانق للبنزبيرين. طرق المنتجات الغذائية لتحديد جزء كتلة البنزو (أ) البيرين. تسجيل نتائج القياس

ينتمي البنزوبيرين إلى فئة الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات - الهيدروكربونات العطرية. هذه مجموعة من المركبات العضوية في التركيب الكيميائي لها حلقات بنزين - مجموعات من ثلاث حلقات أو أكثر. التعريف الكيميائي للبنزبريرين: مادة عضوية تحتوي على الكربون ، وهي جزء من مجموعة الهيدروكربونات متعددة الحلقات ، بكتلة مولارية 252.31 جم / مول.

ما هو البنزابيرين

البنزوبيرين ، مثل جميع الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات ، هو في الأساس نتيجة للتقدم التكنولوجي ، نتيجة للنشاط البشري. المصادر الرئيسية للتلوث التكنولوجي من الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات هي احتراق المواد العضوية الصلبة والسائلة ، بما في ذلك الزيوت والمنتجات النفطية ، والخشب ، والنفايات البشرية. من بين المصادر الطبيعية للبنزابيرين ، تجدر الإشارة إلى حرائق الغابات والانفجارات البركانية.

ومع ذلك ، يمكن أن يحدث تكوين البنزابيرين أيضًا بدون عمليات احتراق - أثناء الانحلال الحراري ، الاحتراق ، البلمرة.

يتم إطلاق البنزابرين أثناء التدخين: يبلغ متوسط ​​محتوى البنزابيرين في دخان سيجارة واحدة 0.025 ميكروغرام ، وهو أعلى بعدة مرات من MPC (10000-15000 مرة في المتوسط). لقد تم حساب أن تدخين سيجارة واحدة يعادل ستة عشر ساعة من استنشاق غاز العادم من حيث محتواها من البنزابيرين.

صيغة بنزوبيرين

هناك نوعان من ايزومرات البنزابيرين. الأول هو 1،2-benzapyrene (3،4-benzpyrene) - الموجود في جميع منتجات الاحتراق - الزيت والقطران والفحم والدخان من مختلف الأصول ، بما في ذلك. في شكلها النقي ، تكون هذه البلورات على شكل إبرة أو صفائح ذات لون أصفر فاتح ، مع نقطة انصهار تبلغ حوالي 177 درجة مئوية.

4،5-Benzopyrene - بلورات على شكل إبر وألواح ذات لون أصفر فاتح ، مع نقطة انصهار 179 درجة مئوية. يحتوي على قطران الفحم ، الموجود في التربة (خاصة بالقرب من الشركات والطرق السريعة). لا يحتوي على خصائص مطفرة أو مسرطنة.

الصيغة الكيميائية للبنزوبيرين هي C20H12.

البنزوبيرين في التربة والهواء

لا يحدث البنزوبرين عمليًا في الحالة الحرة ، ولكنه يترسب دائمًا على الجزيئات الموجودة في الهواء. جنبا إلى جنب مع الكتل الهوائية المتحركة ، ينتشر البنزابيرين على مساحة كبيرة ، ويسقط من الهواء مع الجسيمات الصلبة (على سبيل المثال ، أثناء هطول الأمطار) يدخل طبقات التربة والخزانات وأسطح المباني.

في هجرة وتراكم البنزابيرين ، يلعب مصدر مثل النقل البري دورًا أيضًا. من ناحية ، تساهم السيارات التي تتحرك لمسافات طويلة في التوزيع المنتظم للبنزابيرين. من ناحية أخرى ، يتراكم البنزابيرين المستقر بكميات كبيرة على طول الطرق السريعة وعلى الأشياء المجاورة لها (ما يسمى ب "المصادر الثانوية").

يتم "تضمين" البنزوبيرين بسهولة في دورة المواد في الطبيعة: مع هطول الأمطار ، الذي يحتوي دائمًا على جزيئات صلبة ، يتم نقله حتى إلى المناطق البعيدة عن المصدر الرئيسي للهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات ، ويدخل المسطحات المائية ، حيث يرتفع أثناء عمليات التبخر مرة أخرى في الهواء. هذه القدرة على الهجرة هي التي تؤدي إلى حقيقة أن محتواه يمكن أن يكون مرتفعًا في الأماكن التي لا يوجد فيها مصدر قوي لهذه المادة.

عند دخوله إلى البيئة وتراكمه ، يخترق البنزيبيرين النباتات ، والتي تعمل لاحقًا كعلف للماشية أو تستخدم في تغذية الإنسان. تركيز البنزابيرين في النباتات أعلى من محتواه في التربة ، وفي الغذاء (أو العلف) أعلى منه في المواد الأولية المستخدمة في تصنيعها. يسمى هذا التأثير لزيادة تركيز المواد الكيميائية ، بما في ذلك البنزابيرين ، التراكم الأحيائي.

وبالتالي ، فإن مادة البنزيبيرين تعتبر خطيرة ليس فقط كخلفية للتلوث البيئي ، ولكن أيضًا كمادة تخترق الجسم من خلال السلسلة الغذائية.

MAC من benzapyrene

الطريقة الرئيسية لتحديد والتحكم في البنزابيرين هي الكروماتوغرافيا السائلة.

وفقًا للمعايير الصحية 2.1.6.695-98 و 2.1.6.1338-03 ، فإن الحد الأقصى المسموح به لمتوسط ​​الكمية اليومية من البنزابيرين في الهواء (MPCds) هو 0.1 ميكروغرام / 100 م 3 أو 10-9 جم / م 3 ، و MPC في التربة وفقًا للمعايير الصحية 2.1.7.2041-06 - 0.02 مجم / كجم إجمالاً ، مع مراعاة مستوى الخلفية. في الهواء في أماكن العمل ، لا يزيد متوسط ​​التغيير MPC عن 0.00015 مجم / م 3. (من الفقرة 1. والفقرة 2. GN 2.2.5. 1313-03).

لا يزيد MPC للبنزابيرين في الماء عن 0.000001 مجم / لتر ، في مياه الشرب مع نظام إمداد مركزي بالمياه - لا يزيد عن 0.000005 مجم / لتر. في مياه الشرب المعبأة - من ما لا يزيد عن 0.001 ميكروغرام / لتر (مياه ذات جودة عالية) إلى ما لا يزيد عن 0.005 ميكروغرام / لتر في المياه المعبأة من فئة الجودة الأولى.

في المنتجات الغذائية التي يُسمح فيها بوجود البنزابيرين بسبب الميزات التكنولوجية ، لا يزيد المستوى المسموح به من البنزابيرين عن 0.001 مجم / كجم. وتشمل هذه: النقانق والمنتجات التي تستخدم المنتجات الثانوية ، بما في ذلك المدخن ؛ شحم الخنزير المدخن النقانق والمنتجات المدخنة من لحوم الدواجن ومخلفاتها ؛ الأطعمة المعلبة المدخنة والأسماك المعلبة والأسماك المدخنة ؛ الحبوب الغذائية.

عند استخدام منكهات الدخان ، لا يزيد محتوى البنزابيرين عن 2 ميكروجرام / كجم (لتر) ، وبعد استخدامها ، يجب ألا يتجاوز محتوى البنزابيرين في المنتجات النهائية 0.03 ميكروجرام / كجم (لتر).

في المنتجات الغذائية الأخرى ، لا يُسمح بوجود البنزابيرين.

ومع ذلك ، وفقًا لنتائج المراقبة ، تم تجاوز معايير محتوى البنزابيرين عدة مرات. في المتوسط ​​، يبلغ مستوى تلوث الهواء في المدن 5-12 مرة أعلى من MPC ، في التربة - 3-7 مرات ، في الغذاء - من 1.5 إلى 11 مرة.

تأثير البنزابيرين على جسم الإنسان

يصنف البنزوبرين كمادة من فئة الخطر الأولى. فئة الخطر الأولى هي المواد ذات التأثير الخطير للغاية على البيئة ، في حين أن التغييرات التي تسببها لا رجعة فيها ولا يمكن استعادتها.

يعتبر البنزوبيرين أحد أقوى المواد المسببة للسرطان على نطاق واسع. كونه مستقرًا كيميائيًا وحراريًا ، ويمتلك خصائص التراكم الحيوي ، بمجرد دخوله وتراكمه في الجسم ، فإنه يعمل باستمرار وبقوة. بالإضافة إلى كونه مادة مسرطنة ، فإن للبنزابرين تأثير مطفر ، سام للجنين ، وتسمم الدم.

تتنوع طرق تغلغل البنزابيرين في الجسم: مع الطعام والماء ، وعبر الجلد والاستنشاق. درجة الخطر بغض النظر عن كيفية دخول البنزابيرين الجسم. في التجارب ، وكذلك وفقًا لرصد المناطق غير المواتية للبيئة ، يتم إدخال البنزابيرين في مجمع الحمض النووي ، مما يتسبب في حدوث طفرات لا رجعة فيها تنتقل إلى الأجيال اللاحقة. ومما يثير القلق بشكل خاص حقيقة التراكم الأحيائي للبنزابيرين: تزداد احتمالية حدوث طفرات في الأجيال القادمة من النسل عدة مرات بسبب التراكم الأحيائي.

هل تريد الإقلاع عن التدخين؟


ثم انضم إلينا في سباق ماراثون للتخلي عن السجائر.
سيجعل الإقلاع عن التدخين أسهل بكثير.

4.1.2. طريقة قياس الكسر الكتلي للبنزو (أ) البيرين في المواد الخام الغذائية والمنتجات الغذائية والتربة بواسطة كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء

الغرض والنطاق

تهدف هذه الطريقة إلى التحديد الكمي لمادة benzo (a) pyrene (BP) في المواد الخام الغذائية والمنتجات الغذائية والتربة في الجزء الكتلي المحدد في الجدول. 1. يتوافق الحد الأدنى لنطاق القياس مع نصف المستوى (المحتوى) المسموح به للسموم في المنتجات والمواد الخام ، والحد الأعلى - إلى خمسة أضعاف المستوى المسموح به.

بنز (أ) البيرين مركب مسرطن عالي السمية ، ومحتواه المسموح به في المنتجات الغذائية والمواد الخام الغذائية تحدده القواعد الصحية و SanPiN 2.3.2.560-96.

يمكن تطبيق هذه التقنية من قبل مؤسسات الإشراف الصحي والوبائي الحكومي في الاتحاد الروسي ، ومختبرات المنظمات والشركات الأخرى ذات الصلة بالبحث والتحليل الكيميائي وإصدار الشهادات للمنتجات الغذائية. المنهجية ليست المراجحة.

أرز. 11.14.

  • 1. النفثالين 9. كريزن (0.17 *)
  • 2. أسينافثين (1.40 *) 10. بنز (أ) بيرين
  • 3. الفلورين (2.60 *) 11. بنز (ب) فلورانثين (0.26 *)
  • 4. فينترين * 2.40 *) 12. بنز (ج) فلورانثين (0.10 *)
  • 5. أنثراسين (0.13 *) 13. بنز (أ) بيرين (0.2 *)
  • 6. فلورانثين (0.74 *) 14. ديبنز (أ ، ب) أنثراسين
  • 7. بيرين (0.67 *) 15. BeH3 (g، h، i) nepHaen (0.21 *)
  • 8. بنز (أ) أنثراسين (0.07 *) 16. إندينو (1،2،3-سي سي 1) بيرين (0.26 *)

شروط التحليل:

العمود: Supelcosil® LC RAS ​​(250 مم × 2.1 مم ؛ 5 ميكرومتر) ؛

التدرج: أسيتونتريل (أ) 50-100٪ ، ماء (ب) 50-0٪ ؛ 200 ميكرولتر / دقيقة درجة الحرارة: 25 درجة مئوية حجم العينة: 10 ميكرولتر الكشف: Sflu ، حسب البرنامج


خصائص خطأ القياس

حدود الخطأ النسبي (± 5) لنتيجة القياس لكسر كتلة BP (بمستوى ثقة 0.95) موضحة في الجدول. واحد.

الجدول 1.الأشياء التي تم تحليلها ونطاقاتها وخصائص القياسات

مجموعة المنتج (كائن تم تحليله)

المحتوى المسموح به ( الرابع X) ،ملغم / كغم

نطاق القياس لكسر كتلة BP ، مجم / كجم

معامل في الرياضيات او درجة

اِستِخلاص،

حدود الخطأ النسبي (± 8) ، %

اللحوم والأسماك والمنتجات الدهنية المدخنة

أدوات القياس والأجهزة المساعدة والمواد والكواشف

أدوات القياس

الكروماتوغرافيا السائلة:

  • - العمود المصغر "Milichrome-5" ، TU 25-7405.0009-89 ، الإصدار 3 مع كاشف قياس الفلور (FlD) (الخيار 1).
  • - كروماتوجراف سائل متساوي أو متدرج ، على سبيل المثال ، "Kpayeg" (ألمانيا) ، سجل الدولة لأدوات القياس في الاتحاد الروسي 16848-97 أو مرفق كروماتوغرافي "VEZHKh-3" ، LLP "Lumex" (سانت بطرسبرغ) ، FLD "Fluorat-02-2M" ، LLP "Lumex" ، سجل الدولة لأدوات القياس في الاتحاد الروسي 14093-99 (الخيار 2).
  • - كروماتوجراف سائل متساوي أو متدرج مع PLD من أي نوع ، على سبيل المثال "Kpaerg" (ألمانيا) ، سجل الدولة لأدوات القياس في الاتحاد الروسي 16848-97 (الخيار 3).

الأعمدة الكروماتوغرافية "Diasfer-110-S 16" ، TU 4215-001-05451931-94 ، CJSC "BioKhimMak ST" (موسكو) ، بأحجام قياسية تتوافق مع متغير النظام الكروماتوغرافي:

  • - 2 × 80 مم ، dp = 5-7 ميكرومتر (الخيار 1)
  • - 2 × 150 مم ، dp = 5-7 ميكرومتر (الخيار 2)
  • - 4 × 150 مم ، dp = 5-7 ميكرومتر (الخيار 3)

مجمع الأجهزة والبرامج "MultiChrom-Spectrum" ، TU AZHRC

3.036.001 ، CJSC Ampersend (موسكو) ، أو أي برنامج آخر يسمح بالمعايرة والتحديد الكمي بالطريقة القياسية الخارجية.

GSO 7515-98 لتركيب محلول بنزو (أ) بيرين في أسيتونيتريل بتركيز كتلي من بنزو (أ) بيرين 100 ميكروغرام / سم 3 ، AOZT "إيكروس" (سانت بطرسبورغ).

GSO 7064-93 تكوين محلول بنزو (أ) بيرين في الهكسان بتركيز كتلي من بنزو (أ) بيرين 100 ميكروغرام / سم 3 ، AOZT "إيكروس" (سانت بطرسبورغ).

معمل موازين الكترونية 4 خلايا. نموذج الدقة VLE 134 أو GOST 24104-88 أو غيرها.

100 ميكرولتر إبرة دقيقة من هاميلتون ، موديل Microliter # 1710 أو ما يعادله.

الماصات الدقيقة 0.5 ؛ 0.2 ؛ 0.1 ميكرولتر ؛ GOST 20292-74.

الاسطوانات ذات الأبعاد 2-25.2-50 ، 2-100 و 2-500 ، GOST 1770-74.

قوارير حجمية 2-10-2 ، 2-100-2 ، GOST 1770-74.

ماصات متدرجة 1 ، 2 ، 5 ، 10 سم 3 ، GOST 29227-91.

الكواشف والمواد

الأسيتونيتريل للكروماتوجرافيا السائلة ، OP-3 عالية النقاء ، TU 6-09-14-2167-84 ، مصححة.

ماء مقطر ثنائي ، TU 6-09-2502-77.

الهكسان النقي كيميائيا ، TU 6-09-3375-78 ، يجفف فوق Na 2 س 04 ، مصحح.

بنزين ، نقي كيميائياً ، GOST 5955-75 ، يجفف فوق Na 2 س 04 ، مصحح.

كبريتات الصوديوم اللامائية ، نقية كيميائيا ، GOST 4166-76.

خراطيش التركيز "Diapak": A-3 ، P-3 ، C ؛ TU 4215-002-05451931-94 ، ZAO BioKhimMak ST (موسكو).

الأجهزة المساعدة

نظام الترشيح وتفريغ الغاز من شطف CJSC "BioKhimMak ST" (موسكو) أو غيرها.

قوارير زجاجية مقاس 1.8 و 5.0 سم لمحاليل المعايرة والتحليل مع أغطية لولبية وحشيات تفلون من Supelco ، أرقام الكتالوج 2-6951 ، 2-7037 و

2-7039 او ما يعادلها.

Micromixer PPE-3 ، "Ekros" (سانت بطرسبرغ).

المبخر الدوراني IR-1M2 ، TU 25-1173.102-84 أو غيرها.

قوارير حادة مع سدادات بسعة 25 و 10 و 5 سم 3 ، GOST 25336.

جهاز لتفجير المحاليل في تيار من النيتروجين ، مزود بكتلة ألومنيوم يتم التحكم فيها حراريًا (حمام هواء جاف) من مشروع BioMark المشترك (Lvov) أو غيره.

المرشحات الغشائية مع dp = 0.4-0.5 ميكرومتر.

جهاز لعمل فراغ بحوالي 7 ملم زئبق. فن. (مضخة نفاثة مائية ، GOST 25336 ؛ مضخة فراغ حلقة المياه Begemot ، UVK-RK2 / 1 ، CJSC BioKhimMak ST ، موسكو).

جهاز تحضير العينة بالفراغ (مشعب الفراغ) أو غيره مع مستقبلات العينات بسعة لا تقل عن 10 سم 3.

دورق بخنر ، قمع بنسن بسعة لا تقل عن 500 و 200 سم 3 ، على التوالي ، GOST 1770.

قمع فصل بسعة 100 و 500 سم 3 ، GOST 25336.

قوارير مخروطية مسطحة القاع مع سدادات بسعة 50 ، 100 و 250 سم 3 ، GOST 25336.

قوارير على شكل كمثرى مع سدادات بسعة 50 و 100 سم 3 ، GOST 25336.

قمع مخروطي بقطر لا يقل عن 10 سم ، GOST 1770.

ورق ترشيح من نوع "الشريط الأزرق".

قطن صوف طبي غير معقم ، قطن.

طريقة القياس

تتضمن التقنية الإجراءات الرئيسية التالية:

  • - الاستخلاص الأولي بالهكسان وإعادة الاستخلاص إلى أسيتونيتريل BP من عينة من منتج مدخن ؛
  • - الاستخلاص الأولي لـ BP مع خليط من ماء الأسيتونيتريل من عينة من الحبوب أو التربة ؛
  • - تركيز وتنقية المستخلص الأولي عن طريق استخلاص الطور الصلب ؛
  • - تخفيف مستخلص العينة المحضر بمزيج من ماء الأسيتونيتريل ؛
  • - معايرة الكروماتوجراف وفقًا للمحاليل ذات القيمة المعروفة لتركيز كتلة BP ؛
  • - تحليل محلول مستخلص العينة المحضر بواسطة كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء (HPLC) مع تسجيل إشارة التألق ؛
  • - تحديد BP المحدد بواسطة معلمات الاحتفاظ ؛
  • - حساب تركيز كتلة BP على أساس الإشارة التحليلية المسجلة وخصائص المعايرة ؛
  • - حساب الكسر الكتلي لـ BP ، بناءً على تركيز كتلة BP ، وكتلة عينة الطعام وحجم محلول المستخلص المحضر.

متطلبات السلامة

عند العمل بالمركبات الكيميائية المستخدمة ، من الضروري الامتثال لمتطلبات السلامة المحددة للعمل مع المواد السامة والكاوية والقابلة للاشتعال ، GOST 12.1.018-86 و GOST 12.1.004-76 ، متطلبات السلامة من الحرائق ، GOST 12.1.004 -76.

إذا لامست محاليل BP الجلد "أو أسطح الأشياء ، فيجب معالجتها بالماء والمنظفات ، ثم بالكحول الإيثيلي. ويجب تخزين المحاليل في الثلاجة في عبوات محكمة الغلق.

عند تشغيل نظام HPLC وتنفيذ القياسات المقابلة ، من الضروري مراعاة قواعد السلامة الكهربائية ، GOST

12.1.019-79 وتعليمات تشغيل الجهاز.

متطلبات تأهيل المشغل

الأشخاص المسموح لهم بالعمل:

  • - مؤهل كمهندس كيميائي أو فني كيميائي ؛
  • - لديه خبرة في مختبر كيميائي ؛
  • - الذين أكملوا الدورات التدريبية والتدريب الداخلي في المعامل المعتمدة لإجراء التحليلات باستخدام HPLC ؛
  • - حصل على نتائج إيجابية أثناء أداء عمليات المكافحة.

شروط القياس

يتم تحضير العينة ، تحضير المحاليل ، التحضير وأداء القياسات في درجة حرارة محيطة من 18-25 درجة مئوية ، ضغط جوي 84.0-100.7 كيلو باسكال (630-800 مم زئبق) ، رطوبة هواء لا تزيد عن 80٪ ( عند درجة حرارة 25 درجة مئوية).

عند القياس في المختبر ، يجب استيفاء الشروط التالية: جهد التيار الكهربائي 220 ± 10 فولت ، تردد التيار الكهربائي 50zh 1 هرتز. يتم إجراء القياسات وفقًا للشروط الموصى بها في الوصف وتعليمات التشغيل الخاصة بالجهاز.

التحضير لأخذ القياسات

الأواني الزجاجية

قبل الاستخدام الإضافي ، يتم شطف الأواني الزجاجية بآخر المذيبات المستخدمة وغسلها جيدًا بالماء الساخن مع أي مسحوق غسيل ، ثم تشطف بالتتابع بالماء المقطر والمُقطَّر وتُجفف. يتم تخزين الأطباق النظيفة عن طريق إغلاقها بقطعة من الفلين أو قطعة قطن.

أخذ العينات والتخزين والمناولة

يتم أخذ العينات والتوسيط وفقًا للوثائق التنظيمية لكل نوع من المنتجات (GOST 13586.3-83 ، GOST 27668-88 ، GOST 9792-73 ، GOST 7631-85). يتم استخراج BP المحدد من عينات المنتجات المدخنة عن طريق الاستخلاص باستخدام الهكسان الجاف ، وبعد التبخر يعاد استخلاصه إلى الأسيتونيتريل. عند استخراج BP من عينات الحبوب أو التربة ، يتم استخدام خليط من أسيتونيتريل الماء (16:84). يتم التركيز والتنقية اللاحقة لمستخلص العينة الأولية المحتوية على BP ، بغض النظر عن طبيعة المنتج الأولي ، وفقًا للمخطط المعقد لاستخراج المرحلة الصلبة باستخدام ثلاث خراطيش مركزة Diapak A-3 ، P-3 ، S .

يتم إذابة العينات المحضرة (مستخلصات العينات) في خليط من ماء الأسيتونيتريل (70:30).

يتضمن كل قياس للكسر الكتلي لـ BP التحضير والتحليل الكروماتوغرافي لعينتين على الأقل.

تحضير مخاليط المذيبات

يتم تحضير مخاليط المذيبات بالطريقة الحجمية في اسطوانات مدرجة. يتم قياس الأحجام المطلوبة من الأسيتونيتريل والماء بأسطوانات مدرجة منفصلة ثم يتم خلطها. المستخلص أ: ماء الأسيتونيتريل (84:16).

تحضير المستخلصات

لتحضير الأسيتونيتريل والهكسان المشبعين بشكل متبادل ، رج حوالي 300 سم 3 من الأسيتونيتريل و 100 سم 3 من الهكسان في قمع فصل بسعة 500 سم 3. بعد فصل المذيبات ، تؤخذ الطبقات بشكل منفصل: الطبقة السفلية (الأسيتونيتريل المشبعة بالهكسان - المستخلص B) والطبقة العليا (الهكسان المشبع بالأسيتونيتريل - المستخلص C) ، يتم التخلص من الطور البيني.

تحضير شطفات

لقياسات HPLC ، يتم تحضير خلائط الأسيتونيتريل والماء بالنسب التالية: (90:10) - eluent 90 ، (84:16) - eluent 84 ، (80:20) - eluent 80 ، (70:30) - eluent 70 يتم ترشيح الشطفات الجاهزة من خلال مرشح غشائي ويتم تفريغ الهواء أو التفريغ الحراري.

تحضير محاليل المعايرة

يتم تخفيف GSO لتركيب محلول BP في الأسيتونيتريل (انظر أعلاه) بمزيج من ماء الأسيتونيتريل (7: 3) قبل الاستخدام. تم أخذ الماصة

يتم وضع 1.0 سم 3 من محلول المخزون في دورق حجمي بسعة 100 سم 3 ويضاف المذيب إلى العلامة. بعد ذلك ، يتم أخذ أحجام معينة من المحلول الناتج بواسطة ماصة ، توضع في دورق حجمي بسعة 10 سم 3 ويضاف المذيب إلى العلامة. الأحجام المقابلة من الحلول المستخدمة للتخفيف وتركيزات محاليل المعايرة 2-5 (الخيار 1) و3-7 (الخيارات 2 ، 3) موضحة في الجدول. 2. عند استخدام GSO لتكوين محلول BP في الهكسان (انظر أدناه) ، بعد تبخير المذيب في الظروف التالية ، تتم إعادة إذابة البقايا الجافة في الأسيتونيتريل وتخفيفها على النحو الموصوف أعلاه ، مع مراعاة قيمة المادة المعتمدة تركيز GSO.

الجدول 2.حلول للمعايرة في تحليل البنزوبيرين (BP)

تركيز كتلة BP (قيمة مصدق عليها GSO) ، ميكروغرام / سم 3

محلول التخفيف الأولي

معايرة

تركيز كتلة BP ، ميكروغرام / سم 3

* لا تستخدم للمعايرة المباشرة للنظام الكروماتوغرافي.

تحضير النظام الكروماتوجرافي

يتم تشغيل الكروماتوغراف وتجهيزه للتشغيل وفقًا لوصفه ودليل التشغيل. قم بتثبيت العمود "Diasfer-110-C 16" بأحجام قياسية وفقًا لخيار الكروماتوغراف (انظر أعلاه). يتم ضخ المادة التي تحتوي على أعلى تركيز من الأسيتونيتريل من خلال النظام الكروماتوغرافي حتى يتم تثبيت خط الأساس للكاشف ، ثم يتم تكييفها وفقًا للظروف الأولية للتدرج وفقًا للأقسام ذات الصلة من "شروط التحليل".

تحضير خراطيش التركيز

تم تجهيز خراطيش التركيز Diapak A-3 و P-3 للعمل على النحو التالي:

  • 1. يتم سكب 3 سم 3 من مادة Diapak A أو P الماصة الجافة في غلاف بولي بروبيلين 10 سم 3 مع مرشح قابل للاستبدال في الجزء السفلي ، ويستخدم الجزء العلوي الفارغ من الغلاف كقمع لتطبيق عينة أو شطف.
  • 2. ثبت الخرطوشة عموديًا في جهاز تفريغ مناسب واضغط لتشكيل طبقة علوية أفقية مسطحة من المادة الماصة. من أجل التحضير النهائي لخرطوشة Diapak A-3 ، يكفي إصلاح الطبقة الماصة بقطعة قطن صغيرة.
  • 3. لتحضير خرطوشة Diapak P-3 ، يتم غسل المادة الماصة على التوالي بـ 10 سم 3 من البنزين والأسيتون و مستخرج أمع فراغ ضعيف (معدل التنقيط لا يزيد عن 1-2 قطرات في الثانية) ، مما يمنع الهواء من دخول المادة الماصة. بعد ملء الخرطوشة بالأسيتون ، يُسمح للمادة الماصة أن تستقر ، ويتم إدخال مرشح البوليمر العلوي ، وضغطه فوق الطبقة العليا من المادة الماصة ، ويستمر الغسيل. عند الوصول مستخرج أمستوى 2-3 سم فوق الفلتر ، يتم إيقاف الغسيل وإغلاق الخرطوشة بسدادة سفلية وغطاء علوي (للتخزين). في حالة التجفيف العرضي ، يتم غسل الخرطوشة مستخلص أ.قبل تطبيق العينة ، تتم إزالة السدادات ، وبشفط ضعيف ، يتم تمرير بقايا خليط الماء والأسيتونيتريل إلى مستوى المرشح العلوي ، ثم يُسكب محلول الاختبار على الفور. يتم تجديد الخرطوشة القابلة لإعادة الاستخدام Diapak P-3 وفقًا لمخطط مماثل ، باستثناء إزالة الفلتر العلوي.

يتم تحضير خرطوشة التركيز Diapak C للعمل على النحو التالي:

  • 1. كبسولة بولي بروبيلين جاهزة بسعة 1 سم 3 من مادة Diapak S الماصة محكمة الغلق بسدادات. بعد إزالة السدادات ، يتم تحضير الخرطوشة للعمل عن طريق تمرير 5 سم 3 من الهكسان من خلالها بواسطة حقنة بمعدل تقطير من 1-2 قطرات في الثانية.
  • 2. يتم تطبيق العينة عن طريق الجاذبية ، باستخدام جسم بولي بروبيلين فارغ بحجم 10 سم 3 كقمع ، مثبت بإحكام في الجزء العلوي من كبسولة دياباك سي.

تحضير العينة للقياسات

استخراج الهكسان من البنزو (أ) البيرين من عينة من منتج مدخنيتم طحن عينة من 10.0 جم من عينة منتج مدخن في ملاط ​​مع 30 جم من كبريتات الصوديوم اللامائية. ينقل الخليط كمياً إلى دورق مسطح القاع مقاس 100 سم 3 ويستخلص مع 40 سم 3 من الهكسان لمدة 30 دقيقة على الأقل مع التقليب. يتم صب مستخلص الهكسان الأولي من إجمالي الدهون للعينة وتمريره عبر 10 جم من كبريتات الصوديوم اللامائية إلى دورق تجريد. كرر عملية الاستخلاص مرتين مع مجلدين 20 سم 3 من الهكسان ومرّر أجزاء من المستخلص عبر مادة تجفيف إلى نفس دورق التقطير. يتبخر الهكسان على مبخر دوار عند درجة حرارة لا تزيد عن 35 درجة مئوية حتى تختفي الرائحة.

يذاب مستخلص الدهون الكلية في 20 سم 3 مستخلص ب ،نقل كميًا إلى أسطوانة مدرجة بسعة 50 سم 3 وجعل حجم المحلول 40.0 سم 3 بنفس المذيب.

20.0 سم 3 من المحلول الناتج ينقل إلى قمع فصل بسعة 100 سم 3 ويعاد ضغط ضغط الدم إلى أسيتونتريل بثلاثة أحجام 20 سم 3 مستخلص ب.في كل مرة ، لتحقيق أقصى فصل كامل للمراحل ، يتم أخذ الطبقة السفلية (مستخلص الأسيتونيتريل من BP) وتبخيرها على مبخر دوار عند درجة حرارة لا تزيد عن 50 درجة مئويةيصل حجمها إلى 10-15 سم 3. كميًا (باستخدام الأسيتونيتريل) ، قم بنقل المحلول إلى أسطوانة قياس بسعة 25 سم 3 ، ورفع الحجم إلى 21.0 سم 3 مع الأسيتونيتريل ، أضف 4.0 سم 3 من الماء المقطر واخلط جيدًا الناتج. مستخلص الأسيتونتريل المائي لبروتين بريتيش بتروليوم.

استخلاص البنزو (أ) البيرين من عينة من الحبوب أو التربة بمزيج من ماء الأسيتونيتريل

يتم نقل جزء من 10-25 جم من العينة إلى دورق مسطح القاع ، يضاف 50-125 سم 3 مستخلص أ ،التقيد الصارم بنسبة 1: 5 عينة من المنتج إلى حجم المستخرج ، ويتم تقليبها لمدة ساعة واحدة. مصفى مستخلص الأسيتونتريل المائي لبروتين بريتيش بتروليوممن خلال مرشح ورقي على قمع بوشنر تحت التفريغ والضغط على الراسب على المرشح.

التنقية المسبقة وتركيز المستخلص الأولي للحبوب أو المنتج المدخن

تمر عبر خرطوشة Diapak A-3 مقاس 25.0 سم 3 ثم 3 سم 3 مستخرج أبمعدل تنقيط من 2-3 قطرات في الثانية في دورق استقبال.

يتم تمرير الشذبة المجمعة عبر خرطوشة Diapak P-3 المحضرة ، ثم 5 سم 3 من الأسيتونيتريل بمعدل تقطير من 1-2 قطرات في الثانية ، مع التخلص من الانجرافات. يُستخرج الجزء المستهدف المحتوي على BP من الخرطوشة بمزيج من البنزين - أسيتونيتريل (1: 1) بحجم 7 سم 3 بمعدل تقطير من 1-2 قطرات في الثانية في دورق تقطير. يبخر الشطف على مبخر دوار عند درجة حرارة لا تزيد عن 50 درجة مئوية ، ويضاف 0.5 سم 3 من الهكسان إلى القارورة ويهتز جيدًا على جهاز خلط دقيق حتى تذوب البقايا الجافة تمامًا.

التنقية الأولية وتركيز مستخلص التربة الأولي

تمر عبر خرطوشة Diapak A-3 5.0 سم 3 مستخلص ماء الأسيتونتريل من BP ،ثم 3 سم 3 مستخرج أبمعدل تنقيط من 2-3 قطرات في الثانية في دورق استقبال. انقل النافخة إلى أسطوانة مدرجة بسعة 25 سم 3 ، واشطف الدورق بمجلدين 5 سم 3 مستخرج أوجعل حجم المحلول في الاسطوانة 20 سم 3.

يتم تمرير 5.0 سم 3 من الشذبة المخففة عبر خرطوشة Diapak P-3 المحضرة ، ثم 5 سم 3 من الأسيتونيتريل بمعدل تقطير من 1-2 قطرات في الثانية ، مع التخلص من عمليات الانجراف. يُستخرج الجزء المستهدف المحتوي على BP من الخرطوشة بمزيج من البنزين - أسيتونيتريل (1: 1) بحجم 7 سم 3 بمعدل تقطير من 1-2 قطرات في الثانية في دورق تقطير. يبخر الشطف على مبخر دوار عند درجة حرارة لا تزيد عن 50 درجة مئوية ، ويضاف 0.5 سم 3 من الهكسان إلى القارورة ويهتز جيدًا على جهاز خلط دقيق حتى تذوب البقايا الجافة تمامًا.

تنقية جيدة للمستخلص

يتم وضع 0.5 سم 3 من محلول العينة في الهكسان على خرطوشة Diapak C المعدة عن طريق الجاذبية ، ثم يتم غسل القارورة بجزئين من 0.5 سم 3 من الهكسان ويتم وضعها بالتتابع على الخرطوشة ، مع التخلص من جميع الغسلات. تتم تصفية BP بالبنزين بحجم 2.0 سم 3 بمعدل 1-2 قطرات في الثانية في دورق فصل وتبخر على مبخر دوار عند درجة حرارة لا تزيد عن 50 درجة مئوية. قم بإذابة البقايا الجافة لمستخلص عينة BP في خليط من ماء الأسيتونيتريل (7: 3) ، والتي يشار إليها في أقسام "شروط القياس" لكل متغير من النظام الكروماتوغرافي (انظر أدناه).

التخرج والقياسات

معايرة الكروماتوجراف

تتم معايرة الكروماتوغراف من خلال إدخال متتالي (تحت ظروف قياس BP) للحجم الاسمي لمحاليل المعايرة (الجدول 2) بترتيب تصاعدي لتركيزات كتلتها. يتم حقن كل محلول في الكروماتوجراف مرتين على الأقل. مع الضبط الصحيح للنظام الكروماتوغرافي ، ينبغي أن يتجاوز ارتفاع الذروة على مخطط كروماتوجرافي لمحلول المعايرة بأقل تركيز مستوى الضوضاء الأساسي بمقدار 10 مرات على الأقل.

بعد المعالجة الرياضية للكروماتوجرامس ، يتم إصلاح معلمات الاحتفاظ ومناطق الذروة ويتم بناء خصائص المعايرة (GC) ، مما يعكس اعتماد متوسط ​​قيمة منطقة الذروة على تركيز كتلة BP في محلول المعايرة.

التحكم في صحة بناء خصائص المعايرة.

يتم إعادة بناء خاصية المعايرة عند تغيير الأعمدة ، بعد إجراء الصيانة والصيانة الوقائية ، مع نتائج سلبية لمراقبة استقرار GC (انظر أدناه).

تحديد بنزو (أ) بيرين

شروط القياس (الخيار 1)

للتحليل ، يتم إذابة المستخلص المحضر لعينة BP في 0.1 سم 3 من خليط ماء أسيتونيتريل.

يتم ضبط أوضاع تشغيل FMD و UVPA من لوحة مفاتيح الكمبيوتر وفقًا لدليل المستخدم (HSS "MultiChrome-Spectrum") ويتم التحكم فيها على الشاشات بالشكل التالي:

كاشف فلورومتري

  • الطول الموجي للإثارة 296 نانومتر ؛
  • الطول الموجي للانبعاث - مرشح الضوء رقم 2 (أكثر من 380 نانومتر) ؛
  • وقت القياس 0.2 ثانية.

موزع أوتوماتيكي

  • حجم التجديد 0.4 سم 3 ؛
  • حجم العينة 0.04 سم 3 ؛
  • معدل التدفق 0.15 سم 3 / دقيقة ؛
  • سرعة التوظيف 0.3 سم 3 / دقيقة ؛
  • وقت الاحتفاظ BP 11 دقيقة.
  • يتم عرض تكوين الشطفات في الأوعية ومخطط تجميع تدرج الأسيتونتريل في الجدول. 3.

الجدول 3الوينتس

شروط القياس (الخيار 2)

للتحليل ، يتم إذابة مستخلص عينة BP المحضر (انظر أعلاه) في 0.5 سم 3 من خليط ماء أسيتونيتريل.

  • مرشح على خط الإثارة - "X4" ؛
  • مرشح على خط الانبعاث - "KhZ" ؛
  • حجم العينة 0.02 سم 3 ؛
  • الحساسية متوسطة
  • تنعيم - 4 ؛
  • يتم اختيار المستوى "الخلفية" بناءً على نتائج تسجيل كروماتوجرام اختبار لمحلول المعايرة رقم 3.
  • معدل التدفق 0.2 سم 3 / دقيقة ؛
  • 84؛
  • وقت استبقاء BP حوالي 12 دقيقة.

وضع الانقسام المتدرج:

  • معدل التدفق 0.25 سم 3 / دقيقة ؛
  • eluent 100 في eluent 70في 20 دقيقة؛

شروط القياس (الخيار 3)

للتحليل ، يتم إذابة المستخلص المحضر لعينة BP في 0.5 سم 3 من خليط ماء أسيتونيتريل.

  • الطول الموجي للإثارة 375 نانومتر ؛
  • الطول الموجي للانبعاث 405 نانومتر ؛
  • معدل التدفق 0.8 سم 3 / دقيقة ؛
  • حجم العينة 0.02 سم 3 ؛
  • الوقت ثابت 1.0 ثانية.

وضع الفصل الإيزوقراطي:

  • 84؛
  • وقت الاحتفاظ BP حوالي 12 دقيقة ؛

وضع الانقسام المتدرج:

  • التدرج الخطي من 30 إلى 70٪ eluent 100 في eluent 70في 20 دقيقة؛
  • وقت استبقاء BP حوالي 14 دقيقة.

اقتناء ومعالجة كروماتوجرامس

يتم إدخال محلول استخراج العينة في جهاز الكروماتوغراف مرتين. يتم تحديد BP على أساس مقارنة معلمات الاحتفاظ بالذروة في المخططات اللونية لمستخلص العينة ومحاليل المعايرة. يشار إلى معلمات الاحتفاظ التقريبية في أقسام "شروط القياس". يتوافق التحديد الموثوق للمركب المحدد مع الفرق بين قيم معلمات الاستبقاء لمحلول المعايرة والعينة ، والتي لا تتجاوز 0.2 دقيقة.

تمييع محلول الاستخراج

يتم تنفيذه في حالة تجاوز تركيز الكتلة لـ BP المحدد أعلى تركيز جماعي له في محاليل المعايرة. يتم تخفيف محلول الاستخراج مرتين (نسبة التخفيف ، المخفف = 2) بأخذ كميات متساوية من هذا المحلول ومزيج من ماء الأسيتونيتريل (70:30) وخلط الأخير. في حالة أن التخفيف الفردي لا يلغي "خارج النطاق" ، يتم تكرار الإجراء (درجة التخفيف ، التخفيف = 4).

معالجة نتائج القياس

احسب متوسط ​​قيمة منطقة الذروة (إشارة خرج الكروماتوغراف) لحقنتين من محلول استخراج العينة في الكروماتوغراف. التحكم في تقارب إشارات الخرج (انظر أدناه).

وفقًا لاعتماد المعايرة ، تم العثور على قيمة تركيز كتلة BP في المحلول ، المقابلة لمتوسط ​​قيمة منطقة الذروة.

يتم حساب الكسر الكتلي لـ BP (I ^) ، mg / kg ، في العينة i (نتيجة التحديد) بواسطة الصيغة

حيث Cbp هو تركيز الكتلة للتحليل في محلول مستخلص العينة i-th من BP ، ميكروغرام / سم 3 (محسوبًا وفقًا لاعتماد المعايرة ، بناءً على متوسط ​​قيمة منطقة الذروة) ؛ نائب الرئيس- حجم محلول مستخلص العينة / -th من BP ، سم 3 ؛ ص- درجة استخراج BP في مرحلة تحضير العينة حسب الجدول. 2 ؛ م مكافئ- كتلة جزء العينة المقابلة لنسبة مستخلص أسيتونتريل الماء من BP المستخدم للتنقية والتحديد الكروماتوجرافي اللاحق - الكتلة المكافئة للعينة ، وهي 5.0 جم (حبوب ، منتجات مدخنة) أو 0.25 جم (تربة).

في حالة تخفيف المستخلص (انظر أعلاه) ، فإن الجزء الكتلي لـ BP ( W ، - ، mg / kg) في البعد / يحسب بالصيغة

أين wj- القيمة التي تم الحصول عليها بالصيغة (II. 1) ، ضعيف - درجة التخفيف (انظر أعلاه).

احسب متوسط ​​قيمة الكسر الكتلي لـ BP لعينتين (نتيجة التحليل):

السيطرة على تقارب نتائج تحديد جزء الكتلة من BP (انظر أدناه).

تسجيل نتائج القياس

يتم عرض نتيجة تحليل (قياس) جزء الكتلة من BP في الكائن الذي يتم تحديده في النموذج

أين ث-الكسر الكتلي لـ BP محسوبًا بالصيغة (II.3).

إذا لم يتم اكتشاف BP ، يتم تقديم نتيجة القياس في النموذج

حيث P "ds هو المحتوى المسموح به لـ BP وفقًا للجدول 1.

التحكم في خطأ MVI

تحكم تقارب لإشارات خرج الكروماتوغراف

يتم إجراء التحكم أثناء معايرة وتحليل كل عينة فيما يتعلق بإشارات الخرج (قيم مناطق قمم BP على كروماتوجرامس) التي تم الحصول عليها بحقنتين من المحلول في الكروماتوغراف. تعتبر نتيجة المراقبة مرضية إذا لم يتجاوز نطاق إشارات الخرج المشار إليها بالمتوسط ​​الحسابي 8٪.

مراقبة صحة بناء خاصية المعايرة

يتم التحكم في كل معايرة. يتم التعرف على نتيجة التحكم على أنها مرضية إذا تم استيفاء شروط كل "حل معايرة"

أين سج- متوسط ​​قيمة منطقة ذروة BP لمحلول المعايرة y ، cu ؛ س)- قيمة منطقة الذروة المقابلة لخاصية المعايرة لتركيز كتلة BP في محلول المعايرة y ، c.u.

التحكم في ثبات خاصية المعايرة

يتم إجراء التحكم يوميًا قبل بدء العمل مع العينات التي تم تحليلها وفقًا لمحلول التحكم ، والذي يستخدم كمحلول معايرة بتركيز كتلة من BP المطابق لمحتواه المسموح به في الكائن الذي تم تحليله.

يتم الاعتراف بنتيجة المراقبة على أنها مرضية إذا تم استيفاء الشرط

حيث C ki - قيمة تركيز كتلة BP في محلول التحكم ، التي تم العثور عليها بواسطة خاصية المعايرة لمتوسط ​​قيمة منطقة الذروة ، µg / cm 3 ؛ مع - قيمة تركيز كتلة BP في محلول التحكم وفقًا للجدول. 2.

السيطرة على تقارب نتائج التحديد

يتم التحكم في كل تحليل (قياس). تعتبر نتيجة الضبط مرضية إذا كان نطاق نتائج التحديدات المشار إليها بالمتوسط ​​الحسابي (نتيجة التحليل) لا يتجاوز 10٪.

التحكم في الخطأ بالطريقة المضافة

يتم التحكم:

  • أ) قبل بدء تطبيق MVI - دون فشل ؛
  • ب) عندما تظهر نتائج مشكوك فيها لتحديد الكسر الكتلي لـ BP ؛
  • ج) وفقًا لخطط التحكم داخل المختبر ؛
  • د) بناء على طلب المنظمات التي تراقب أنشطة المختبر.

يتم تشكيل المادة المضافة على أساس محلول المعايرة. القيمة المضافة (د، mg / kg) بحيث يزداد جزء كتلة BP في العينة بمقدار 1.5-2.5 مرة. يتم الحساب وفقًا للصيغة

أين ج د- تركيز كتلة BP في محلول المعايرة ، ميكروغرام / سم 3 ؛ Vo- حجم محلول معايرة BP الذي تم إدخاله في العينة ، سم 3 ؛ م مهاجم- الوزن المكافئ للعينة المأخوذة للتحليل ز.

يتم إدخال المادة المضافة في المستخلص الأولي لعينة الحبوب أو التربة في شكل محلول معايرة تم إعداده وفقًا للجدول. 2. يتم إدخال المادة المضافة في المستخلص الأولي للمنتج المدخن في شكل محلول بتركيز مماثل في الهكسان. للقيام بذلك ، يتم تخفيف GRM لتكوين BP في الهكسان (انظر أعلاه) (مع مراعاة التصحيح لقيمة التركيز المعتمدة) وفقًا للإجراء الخاص بإعداد محاليل المعايرة (انظر أعلاه) ، باستخدام الهكسان كمذيب و الحصول على محلول التركيز المطلوب. عند استخدام التركيبة GSO لـ BP في الأسيتونيتريل بعد تبخر المذيب ، تتم إعادة تذويب البقايا الجافة في الهكسان وتخفيفها باستخدام الهكسان ، كما هو موصوف أعلاه.

يتم إجراء تحليل عينتين بالمحتوى الطبيعي لـ BP وعينتين مع إضافة BP في نفس الظروف (أداة واحدة ، خاصية معايرة واحدة ، مشغل واحد). يتم الاعتراف بنتيجة المراقبة على أنها مرضية إذا تم استيفاء الشرط

أين دبليو د- جزء الكتلة من BP في العينات مع المادة المضافة ، ملغم / كغم ؛ دبليو- جزء الكتلة من BP في عينات بدون مادة مضافة ، مجم / كجم ( دبليو دو ث-متوسط ​​قيم الكسر الكتلي لعينتين مع نتائج إيجابية للتحكم في التقارب).

يمكن أن يكون رسم توضيحي لتطبيق هذه التقنية في التحليلات البيئية العملية بمثابة مخطط كروماتوجرافي ورسم بياني للمعايرة لتحديد مادة benzo (a) pyrene في المنتجات الغذائية (الشكلان 11.15 و 11.16).

نتائج التحكم في الخطأ في تقدير البنزو (أ) البيرين في الأجسام بطريقة الإضافات مع الكشف الفلوري 375 Ex / 405 Et (البديل 3).

يتوافق مستوى المادة المضافة مع 0.5 من المحتوى المسموح به من البنزابيرين (0.0005 مجم / كجم - الحبوب والمنتجات المدخنة ، 0.01 مجم / كجم - التربة).


أرز. 11.15.

التخرج للمكون: معامل ارتباط BaP: 0.999667 الاستجابة: المنطقة

القناة المرجعية 365 Ex / 405 Em

الصيغة Y = Ki X

القيم 100 ( دبليو د - W-D) / دهي 10 و 16٪ للعينتين 1 و 2 على التوالي. المركب المحدد في العينة الأولية لدقيق القمح موجود بكمية 0.00009 كجم / كجم.

العينة 1 - 0.00064 مجم / كجم العينة 2 - 0.00067 مجم / كجم

  • في الحالة العامة ، يكون لخاصية المعايرة الشكل S = AC + B ، حيث S هي منطقة الذروة ، cu ؛ C هو تركيز كتلة الملوث ، ميكروغرام / سم 3 ؛ A و B معاملات.

الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات: الخصائص الفيزيائية والكيميائية والآثار البيولوجية. مراجعة طرق تحديد البنزابيرين. تحديد البنزابيرين في الماء عن طريق كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء مع كشف الفلورسنت.

إرسال عملك الجيد في قاعدة المعرفة أمر بسيط. استخدم النموذج أدناه

سيكون الطلاب وطلاب الدراسات العليا والعلماء الشباب الذين يستخدمون قاعدة المعرفة في دراساتهم وعملهم ممتنين جدًا لك.

نشر على http://www.allbest.ru/

يحتوي هذا العمل على 30 صفحة ، قسم واحد ، 4 أقسام فرعية ، 14 فقرة ، 6 جداول و 9 أشكال. في نهاية عمل الدورة ، توجد قائمة مراجع تتكون من 14 عنصرًا.

الهدف من بحثي هو البنزو (أ) البيرين وخصائصه وتأثيره المسرطن وطرق تحديده. يقدم عمل المقرر طرقًا مثل كروماتوغرافيا الغاز مع الكشف الطيفي الكتلي والكروماتوجرافيا السائلة عالية الأداء مع الكشف عن التألق. بالإضافة إلى ذلك ، تم اعتبار أجهزة الكشف المناسبة لتسجيل الإشارة التحليلية لـ benzo (a) pyrene وتم إثبات عقلانية استخدام هذا الكاشف أو ذاك.

كما تم تقديم طرق لتحديد مادة بنزو (أ) البيرين في الماء ، والتي تتكون من تحضير العينة ومعايرة الكروماتوجراف والتحليل وتسجيل البيانات. تقدم الورقة المخططات اللونية التي تم الحصول عليها بهذه الطرق.

الكلمات الرئيسية: هيدروكربونات عطرية متعددة الوظائف ، بينزو (أ) بيرين ، كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء ، كروماتوغرافيا الغاز ، كشف الفلور.

عمل دورة Tazi يتضمن 30 صفحة ، قسم واحد ، 4 أقسام فرعية ، 14 نقطة ، 6 ماسي و 9 أرقام. في حافة العمل المتصل ، يتم تقديم قائمة بالأدب ، بدءًا من النقطة 14.

لم يتم تحديد سيلتا في دراستي للبنزو (أ) البيرين ، وخصائص النفي ، والتأثيرات المسببة للسرطان ، وطريقة ما لذلك. عمل الدورة التدريبية بما في ذلك طرق مثل كروماتوغرافيا الغاز مع منحنى الكتلة الطيفية والكروماتوغرافيا عالية الكفاءة مع منحنى التألق. هذا ما تعتبره أجهزة الكشف ، وهي مناسبة للاستقبال التحليلي لإشارة من benzo (a) pyrene والاستخدام المبرر على الكاشف.

لذلك ، في سياق العمل على الحوض ، نقدم طرق تحديد بنزو (أ) البيرين في الماء ، والتي تتكون من التحضير على عينة ، والمعايرة على الكروماتوجراف ، والتحليل والتسجيل على البيانات. ميثاق تقديم البيانات والحصول عليها وفق المنهجية.

الأفكار الرئيسية: مياه عطرية متعددة الوظائف ، بنز (A) بيرينيه ، كروماتوغرافيا TECHNA عالية الكفاءة ، كروماتوغرافيا الغاز ، فتحة تدفق الفلور.

تم عمل الدورة التدريبية لتغطية 30 جانبًا ، وجزءًا واحدًا ، و 4 مجلدات فرعية ، و 14 نقطة ، و 6 جداول ، و 9 رسومات. وفي نهاية الدورة التدريبية قائمة المؤلفات التي تتكون من 14 نقطة.

حول "أبحاثي حول بنز (أ) البيرين ، وقوتها ، ومسبباتها للسرطان ، بالإضافة إلى طرق تحديدها. وفي الدورة التدريبية ، تعتبر طرق مثل كروماتوغرافيا الغاز مع الكشف عن التحليل الطيفي الشامل فعالة للغاية ، ولكن الكروماتوغرافيا فعالة للغاية وفلورية الكاشفات المناسبة لتسجيل إشارة تحليلية لبنزو (أ) بيرين وعقلانية الكاشف الآخر مثبتة.

أيضًا ، في عمل الدورة ، يتم تقديم منهجية تعيين benzo (a) pyrene في الماء ، والتي تتكون من تحضير العينة ومعايرة الكروماتوجراف وتحليل البيانات وتسجيلها. يتم تمثيل الروبوتات بواسطة كروماتوجرامس مأخوذة من هذه الطرق.

الكلمات الرئيسية: كربوهيدرات عطرية بوليسيكليك ، بنز (أ) بيرينيه ، كروماتوغرافيا ريدينا عالية الكفاءة ، كروماتوغرافيا الغاز ، كشف الفلور.

حرف او رمز

المقدمة

1. مراجعة الأدبيات

1.1.1 معلومات عامة

1.1.2 أصل الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات

1.1.4 العمل البيولوجي

1.1.5 بنز (أ) بيرين. معلومات عامة

1.2 طرق تقدير البنزابيرين

1.2.1 كروماتوغرافيا الغاز

1.3 تقدير البنزابيرين في الماء بواسطة HPLC

1.3.2 تحضير العينة

1.3.3 التخرج

1.3.4 أداء تحليل HPLC

1.3.5 تسجيل ومعالجة البيانات

1.4.2 القياس الكمي لشركة بريتيش بتروليوم

فهرس

حرف او رمز

الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات الهيدروكربونات العطرية

BP - بنزو (أ) بيرين

MPC - أقصى تركيز مسموح به

MPC SS - متوسط ​​أقصى تركيز يومي مسموح به

HPLC - كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء

GC - كروماتوغرافيا الغاز

LC - اللوني السائل

NPC - كروماتوغرافيا الطور الطبيعي

RPCH - كروماتوغرافيا الطور العكسي

LLE - استخراج السائل السائل

OFS - مادة ماصة ذات طور معكوس

TLC - كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة

المقدمة

تنتمي الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات (PAHs) إلى مجموعة الملوثات العضوية الثابتة. لقد أعلنوا عن خصائص مسرطنة. أحد أخطر ممثلي الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات هو benzo (a) pyrene (BP).

تم اكتشاف بنز (أ) بيرين في عام 1933 ، وفي وقت لاحق ، في عام 1935 ، أجريت دراسات تؤكد قدرته على الإصابة بالسرطان. اليوم ، تم تصنيف benzo (a) pyrene على أنها مادة مسرطنة من فئة الخطر الأولى. لها خصائص مطفرة. حتى التركيز الصغير من BP يؤثر سلبًا على جسم الإنسان. يمكن أن يتسبب تركيز BP في الهواء الذي يتجاوز الحد الأقصى المسموح به (MAC) مع التعرض الطويل في الإصابة بسرطان الرئة. لذلك ، فإن مشكلة الكشف عنها وتعريفها حادة. بناءً على خواصه الفيزيائية والكيميائية ، تم تطوير عدد من الطرق المماثلة لتحديده ، والتي تختلف فقط في مراحل أخذ العينات وتحضير العينة. كان الغرض من عملي التعرف على خصائص الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات و BP ، لدراسة طرق فصل الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات وطرق تحديد BP.

1. مراجعة الأدبيات

1.1 الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات (PAHs)

1.1.1 معلومات عامة

الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات هي مركبات عضوية عالية الجزيئية من سلسلة البنزين ، ويبلغ عددها أكثر من 200 ممثل. تحتوي على 2 إلى 7 حلقات بنزين. الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات موزعة على نطاق واسع في الطبيعة وهي مستقرة بمرور الوقت. لديهم نشاط مسرطنة ومطفرة. نظرًا لسميتها وخصائصها المسببة للسرطان ، فإنها تصنف على أنها ملوثات ذات أولوية. يستخدم تحديد الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات في الدراسات البيئية والجيوكيميائية. أكثرها سمية هي 3 ، 4-بنز (أ) بيرين و 1 ، 12-بنزبيريلين ، والتي يتم تحديدها غالبًا بشكل خاص في الكائنات البيئية.

1.1.2 أصل الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات

الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات منتج ثانوي غير مرغوب فيه لحرق الوقود الأحفوري. تتشكل في الطبيعة بسبب عمليات غير حيوية. تدخل آلاف الأطنان من الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات المنبعثة من المكونات الدبالية للتربة إلى المحيط الحيوي كل عام. لكن معظم هذه المواد المسببة للسرطان تأتي من عمليات من صنع الإنسان.

يعتبر الفحم مزيجًا من كمية ضخمة من نوى البنزين العطرية متعددة التكثيف مع الحد الأدنى من محتوى الهيدروجين. عندما يتم حرق هذه المواد في الأفران ومحطات الطاقة ومحركات الاحتراق الداخلي ، تتحلل هذه المركبات. في درجات حرارة الاحتراق المنخفضة وعدم كفاية الإمداد بالأكسجين الجوي ، يتم تكوين الأسيتيلين التفاعلي والهيدروكربونات الأليفاتية. يتبلمر الأسيتيلين إلى بوتادين ، والذي يشكل بعد ذلك نواة هيدروكربون عطري. عند إضافتها إلى النوى العطرية الموجودة ، يتم إنتاج الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات.

ينتج عن الاحتراق غير الكامل جزيئات الكربون - السخام. يتم امتصاص الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات على سطحها وتدخل البيئة.

1.1.3 الخصائص الفيزيائية والكيميائية للهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات

معظم الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات عبارة عن مركبات بلورية (باستثناء بعض مشتقات النفثالين) ذات نقطة انصهار عالية. الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات ضعيفة الذوبان في الماء. عند الانتقال إلى المذيبات العضوية ، تزداد قابليتها للذوبان وتعتمد على وزنها الجزيئي. كقاعدة عامة ، مع زيادة عدد الحلقات العطرية وجذور الألكيل ، تقل قابلية ذوبان الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات.

تمتص معظم الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات الأشعة فوق البنفسجية بكثافة (300-420 نانومتر) وتتأكسد ضوئيًا سريعًا في الغلاف الجوي لتكوين الكينونات ومركبات الكربونيل.

1.1.4 العمل البيولوجي

تدخل الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات إلى الجسم عن طريق الجهاز التنفسي أو الجلد أو الجهاز الهضمي.

يعتمد نوع تفاعل الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات مع الجسم بشكل أساسي على الهيدروكربون نفسه. بشكل أساسي ، عندما تدخل الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات إلى الجسم ، تشكل الإنزيمات مركب إيبوكسي يتفاعل مع الجوانين ، والذي يتداخل مع تخليق الحمض النووي ، أو يسبب اضطرابات ، أو يؤدي إلى طفرات تساهم في تطور السرطان.

أحد أكثر الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات سمية ، كما ذكرنا سابقًا ، هو BP. بالإضافة إلى ذلك ، فإن النشاط المسرطنة للهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات هو 70-80٪ نتيجة لتأثير BP. لذلك ، يمكن استخدام وجود BP في المنتجات الغذائية للحكم على وجود الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات الأخرى.

1.1.5 بنز (أ) بيرين. الخصائص العامة

بنز (أ) بيرين (C 20 H 12) مركب كيميائي ، ممثل لعائلة الهيدروكربونات متعددة الحلقات (الشكل 1.1) ، وهي مادة من فئة الخطر الأولى. يتشكل أثناء احتراق الوقود الهيدروكربوني السائل والصلب والغازي (بدرجة أقل أثناء احتراق الوقود الغازي).

الشكل 1.1 الصيغة الهيكلية للبنزو (أ) بيرين.

BP عبارة عن صفائح أو إبر صفراء. إنه قابل للذوبان بدرجة عالية في المذيبات غير القطبية ، على سبيل المثال ، في التولوين والبنزين والزيلين. إنه أقل قابلية للذوبان قليلاً في المذيبات القطبية ، ولكنه غير قابل للذوبان عمليًا في الماء.

يتراكم BP بشكل رئيسي في التربة ، وغالبًا ما يتراكم في الماء. يدخل من التربة إلى النباتات ، ويواصل حركته على طول السلسلة الغذائية. في كل مستوى تالٍ ، يزداد محتوى البنزو (أ) البيرين بترتيب من حيث الحجم.

إن مادة BP عبارة عن مادة كيميائية مسرطنة نموذجية وهي خطيرة على البشر حتى في التركيزات الدنيا ، حيث أن لها خاصية التراكم في جسم الإنسان. يتم عرض MPC من benzo (a) pyrene في كائنات مختلفة في الجدول 1.1. بالإضافة إلى ذلك ، فإن BP لها خصائص مطفرة ، أي يمكن أن تسبب طفرات.

الجدول 1.1 MPC لبنزو (أ) بيرين في بيئات مختلفة

اسم الكائن

MAC ، ميكروغرام / كغ

المنتجات المدخنة

الحبوب

يشرب الماء

خزانات المياه

في الهواء ، متوسط ​​الحد الأقصى اليومي المسموح به للتركيز (MPC CC) هو 0.1 ميكروغرام / 100 م 3.

1.2 طرق تقدير بنزو (أ) البيرين

الطرق الرئيسية لتحديد الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات هي تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء (HPLC) مع الكشف الفلوري أو التحليل الطيفي واللوني للغاز (GC) مع الكتلة الانتقائية ، أو التأين باللهب ، أو التقاط الإلكترون ، أو الكشف عن التأين الضوئي.

لتحديد BP ، يتم أيضًا استخدام طريقة التحليل الطيفي للإنارة بناءً على تأثير Shpolsky. يكمن جوهر التأثير في حقيقة أنه في درجات الحرارة المنخفضة ، تعطي بعض الجزيئات متعددة الذرات أطياف تلألؤ شبه خطي عالية الدقة. ميزة هذه الطريقة هي انخفاض الطلب على درجة التنقية والحساسية. لكن تعقيد الأجهزة يمثل قيدًا كبيرًا على تعريف BP.

الكروماتوغرافيا هي طريقة للفصل والتحليل والدراسات الفيزيائية والكيميائية للمواد بناءً على حركة منطقة من مادة على طول طبقة ماصة في تدفق طور متحرك مع تكرار عمليات الامتصاص والامتصاص. يحدث الفصل بسبب الاختلاف في ثوابت توزيع المواد الفردية بين المرحلتين. الميزة الأكثر أهمية للكروماتوغرافيا هي الطبيعة الديناميكية للعملية ، حيث تحدث التدرجات في توزيع تركيز الجزيئات أو الجزيئات.

يظهر المخطط العام لفصل مكونات الخليط في الشكل 1.2.

الشكل 1.2 مخطط تنفيذ العملية الكروماتوغرافية

تشمل مزايا الطرق الكروماتوغرافية إمكانية التنفيذ المتزامن لعدد كبير من المعلمات التي تميز الفصل والتعرف والتقدير الكمي للمكونات في الخليط. وبالتالي ، فإن اللوني هو مصدر معلومات متعدد القنوات.

اعتمادًا على حالة تجميع الطور المتحرك ، تنقسم الطرق اللونية إلى غاز وكروماتوغرافيا سائلة.

يتضمن كروماتوغرافيا الغاز ، بدوره ، اعتمادًا على حالة تجميع الثابت (الثابت) ، كروماتوغرافيا الغاز السائل والكروماتوغرافيا الغازية الصلبة.

ينقسم الكروماتوغرافيا السائلة إلى سائل - سائل ، سائل - صلب - سائل - هلام.

1.2.1 كروماتوغرافيا الغاز

GC هو نوع من اللوني يكون فيه الطور المتحرك في حالة غاز أو بخار - غاز خامل. إنه غاز ناقل. المرحلة الثابتة عبارة عن سائل عالي الوزن الجزيئي ، يتم تثبيته على حامل مسامي أو على جدران أنبوب شعري طويل.

GC هي طريقة عالمية لفصل مخاليط المواد التي تتبخر دون تحلل. تتحرك مكونات الخليط عبر العمود الكروماتوغرافي بغاز حامل. في هذه الحالة ، يتم توزيع الخليط بشكل متكرر بين الغاز الحامل والمرحلة الثابتة. يحدث الفصل بسبب قابلية الذوبان المختلفة لمكونات الخليط في الطور الصلب. عند خروج المواد من العمود ، يتم تسجيلها باستخدام كاشف.

الكاشف هو جهاز مستمر يسجل إشارة تحليلية. تم اقتراح حوالي 60 نوعًا من أنظمة الكشف لـ GC. يسرد الجدول 1.2 أنواع الكاشفات الأكثر استخدامًا في GCs.

الجدول 1.2 كاشفات كروماتوغرافيا الغاز

اسم الكاشف

مبدأ التشغيل

عن طريق التوصيل الحراري

يتم تسجيل الفرق في التوصيل الحراري بين المادة التحليلية والغاز الحامل

اسم الكاشف

مبدأ التشغيل

إمساك إلكتروني

يلتقط بمحلل الإلكترونات الحرارية المتولدة عن طريق التشعيع بجزيئات أو إلكترونات عالية الطاقة للغاز الحامل

الأشعة فوق البنفسجية

امتصاص ضوء الأشعة فوق البنفسجية عن طريق تحليل كروموفور محدد

بلازما الميكروويف

إثارة مادة تحليلية في بلازما الميكروويف وانبعاث الضوء عند الطول الموجي المميز للعنصر الموجود في المادة

اللهب الضوئي

إثارة الحليلة في اللهب وانبعاث الضوء حسب نوع العنصر الموجود في المادة

مطياف الامتصاص الذري

الانحلال الحراري متبوعًا بامتصاص الضوء بطول موجي محدد

الكهروكيميائية

امتصاص المواد التي تم تحليلها عن طريق تدفق السائل وكشفها الكهروكيميائي في التدفق

مطياف الأشعة تحت الحمراء

امتصاص الضوء في منطقة الأشعة تحت الحمراء بالتحليل

التأين باللهب

تكوين وتسجيل الأيونات في اللهب أثناء احتراق المواد التي تم تحليلها

مطياف الكتلة

تكوين الأيونات الجزيئية والشظية عن طريق تأثير الإلكترون أو التأين الكيميائي

التأين الضوئي

التكوين الضوئي الكيميائي وتسجيل الأيونات تحت تأثير الأشعة فوق البنفسجية القاسية على المادة التحليلية

كاشف التأين باللهب حساس ولكنه غير انتقائي لـ BP. لذلك ، يتم استخدامه فقط لتحليل المخاليط البسيطة.

كاشف التقاط الإلكترون حساس وانتقائي لـ BP ، لكن تطبيقه صعب بسبب الاستجابة العالية للمركبات المحبة للكهرباء.

يعد استخدام التأين الضوئي واعدًا لتحديد BP ، لكنه لم يجد توزيعًا واسعًا بسبب عدم استقرار التشغيل والتكلفة العالية للمعدات.

GC مع الكشف عن مقياس الطيف الكتلي هو الحل الأفضل لتقدير البنزابيرين في الخلائط المعقدة

مبدأ تشغيل مطياف الكتلة هو توزيع الشظايا أو الأيونات بالكتلة. تستخدم عملية التأين لتحويل الجزيئات المحايدة إلى أيونات. غالبًا ما يستخدم تأثير الإلكترون في تأين المركبات العضوية. بالإضافة إلى ذلك ، يتم استخدام التأين الكيميائي ، والذي يعتمد على حدوث تفاعلات جزيئية أيونية. لدراسة الجزيئات البيولوجية والبوليمرات والمواد الأخرى التي لا يمكن نقلها إلى الطور الغازي دون التحلل ، يتم استخدام أنواع خاصة من التأين.

GC مع الكشف الطيفي الشامل هي الطريقة الوحيدة التي تسمح باستخدام المعايير الداخلية للتحديدات الكمية. تستخدم الخلائط الأيزومرية الموصوفة 2 H و 13 C من الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات كمواد قياسية. إن تغير الوزن وحقيقة أن المواد المرجعية لها نفس الخصائص تقريبًا مثل الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات غير المسماة يسهل التعرف عليها.

أحد العيوب الثانوية لمقاييس الطيف الكتلي هو النطاق الصغير للخطية لاستجابة الكاشف. لذلك ، يتم استبدال مطياف الكتلة التقليدي بمقياس وقت الرحلة. ميزتها هي أنه في وقت قصير يمكن الحصول على طيف كتلة كامل من المركبات وقياس دقيق للكتل حتى 0.0001 a.m.u.

يوفر الجمع بين مطياف الكتلة وقت الرحلة مع كروماتوغرافيا الغاز فصلًا جيدًا للمكونات للخلائط المعقدة وحدود اكتشاف منخفضة.

1.2.2 الكروماتوغرافيا السائلة

الكروماتوغرافيا السائلة (LC) هي طريقة لفصل وتحليل المواد المعقدة ، حيث يعمل السائل كمرحلة متحركة. من ناحية أخرى ، تؤدي المرحلة المتنقلة وظيفة نقل ، أي ينقل المادة غير القابلة للامتصاص ، ومن ناحية أخرى ينظم ثوابت التوازن ، وبالتالي ، الاحتفاظ نتيجة للتفاعل مع المرحلة الثابتة ومع جزيئات المواد التي يتم فصلها.

في LC ، تتم عمليات الفصل غالبًا في درجة حرارة الغرفة. يتم حقن العينة التي تم تحليلها في العمود وتمرير eluent من خلاله. في LC ، تعتبر طبيعة المرحلة المتنقلة ضرورية. نتيجة لذلك ، فإن التركيبات المختلفة حتى لعدد صغير من الطور الثابت وعدد كبير من الطور المتحرك تجعل من الممكن حل المشكلات التحليلية المختلفة.

يتم إجراء التحليل في الكروماتوغرافيا السائلة الكلاسيكية لفترة طويلة ، نظرًا لأن معدل تغذية العينة منخفض. هذه الطريقة مناسبة للفصل الأولي لمكونات الخليط. في معظم الحالات يتم استخدام HPLC. يسمح النقل السريع للكتلة بكفاءة الفصل العالية لـ HPLC بتحديد الجزيئات والجزيئات الكبيرة والأيونات. يتم عرض الاختلافات بين LC الكلاسيكي و HPLC في الجدول 1.3.

الجدول 1.3 الاختلافات التجريبية بين LC الكلاسيكية وعالية الأداء

صفة مميزة

الكلاسيكية LC

HPLC

الضغط ، أجهزة الصراف الآلي

من كسور أجهزة الصراف الآلي. ما يصل إلى 2 أجهزة الصراف الآلي.

معدل التدفق ، مم / دقيقة

مدة الانفصال

من عدة ساعات إلى عدة أيام

عدة دقائق إلى عدة ساعات

معدات

السماعات والاكسسوارات

كروماتوغراف

نوع الفصل

الانفصال التحضيري

قسم تحليلي

كشف

الكشف عن الفرد

الكسور بالطرق التحليلية

مع كاشف

كمية مادة الاختبار

من بضعة ميكروغرامات إلى عدة كيلوغرامات

عدة نانوغرام إلى عدة ميكروغرام

HPLC هي طريقة كروماتوغرافيا عمود حيث تكون المرحلة المتنقلة عبارة عن سائل يتحرك عبر عمود كروماتوغرافي مملوء بمرحلة ثابتة (مادة ماصة). تتميز أعمدة HPLC بمقاومة هيدروليكية عالية عند المدخل.

اعتمادًا على آلية فصل المواد ، يتم تمييز خيارات HPLC التالية:

أ) التوزيع.

ب) التبادل الأيوني.

ج) حصري ؛

د) مراوان.

ه) الامتزاز.

يعتمد الفصل الكروماتوغرافي على توزيع المادة بين سائلين غير قابلين للامتزاج ، على غرار الاستخراج المتكرر. عند اجتياز مرحلة سائلة متحركة ، يحدث الفصل بسبب قابلية الذوبان المختلفة لمكونات الخليط في المرحلة السائلة الثابتة.

في كروماتوغرافيا التبادل الأيوني ، يتم فصل جزيئات خليط من المواد ، المنفصلة في محلول إلى كاتيونات وأنيونات ، عند التحرك عبر المادة الماصة بسبب قوى التفاعل المختلفة بين الأيونات التي يتم تحديدها والمجموعات الأيونية للمادة الماصة

في كروماتوغرافيا استبعاد الحجم ، يتم فصل جزيئات المواد حسب الحجم بسبب قدرتها المختلفة على اختراق مسام المرحلة الثابتة. في هذه الحالة ، فإن الجزيئات الأكبر التي يمكنها اختراق الحد الأدنى لعدد مسام المرحلة الثابتة هي أول من يغادر العمود ، والمواد ذات الأحجام الجزيئية الصغيرة هي آخر من يغادر.

في الكروماتوغرافيا اللونية ، يتم فصل المركبات النشطة بصريًا إلى متماثلات فردية (أيزومرات مرآة).

في كروماتوغرافيا الامتزاز ، يتم فصل المواد بسبب قدرتها المختلفة على الامتصاص والامتصاص من سطح مادة ماصة ذات سطح متطور.

اعتمادًا على قطبية المرحلتين المتنقلة والثابتة ، يتم تقسيم كروماتوغرافيا الامتزاز إلى طور عادي (NPC) وكروماتوغرافيا طور معكوس (RPC).

يستخدم NPC مادة ماصة قطبية ومرحلة متنقلة غير قطبية ، بينما يستخدم RPC مادة ماصة غير قطبية ومرحلة متحركة قطبية.

على الرغم من أن الكروماتوغرافيا السائلة هي طريقة لفصل العينة إلى مكونات ، فإن الكروماتوجراف السائل الحديث لا يشمل فقط نظام الفصل ، ولكن أيضًا نظام القياس الكمي لمحتوى كل مكون ، أي. نظام الكشف. يظهر مخطط الكروماتوغراف في الشكل 1.3.

اللوني السائل البنزيبيرين الهيدروكربون

الشكل 1.3 رسم تخطيطي للكروماتوجراف السائل

1 - مضخة امداد الطور المتحرك من خلال العمود

2 - موزع لإدخال العينة في العمود

3 - العمود الفاصل

4 - كاشف - جهاز للحصول على إشارة تحليلية

5- نظام المعالجة - محول الإشارة التحليلي إلى شكل مناسب للإدراك البشري

لتسجيل إشارة تحليلية ، كما ذكرنا سابقًا ، يتم استخدام أجهزة الكشف. يتم استخدام طرق كشف مختلفة في LC. تمت مناقشة بعضها في الجدول 1.4.

الجدول 1.4 الكاشفات في اللوني السائل

اسم الكاشف

مبدأ التشغيل

قياس الطيف الضوئي

أثناء عملية الشطف ، يتم قياس الكثافة الضوئية للشذبة عند طول موجي معين

قياس الفلور

إشعاع الفلورسنت الممتص

اسم الكاشف

مبدأ التشغيل

قياس الانكسار

تحديد تركيز مادة ما بالاعتماد على معامل الانكسار المختلف عن معامل الانكسار للمرحلة المتنقلة

كاشف ضوء الليزر التبخيري

يعتمد مبدأ التشغيل على الاختلاف في ضغط البخار للمذيبات الكروماتوغرافية التي تشكل الطور المتحرك والمواد التي تم تحليلها

في HPLC ، يتم استخدام كاشف قياس الفلور لتحديد BP ، وهو انتقائي فيما يتعلق بالبنزابيرين وله حساسية عالية. يعتمد مبدأ تشغيل هذا الكاشف على قياس انبعاث الفلورسنت للضوء الممتص. يتم إجراء القياسات بشكل أساسي في منطقة الأشعة فوق البنفسجية عند الطول الموجي لأقصى امتصاص لمجموعة معينة من المواد. دائمًا ما يكون الطول الموجي للإشعاع الفلوري أكبر من الطول الموجي للضوء الممتص. نظرًا لحقيقة أن الكشف يتم من الصفر ، فإن أجهزة الكشف عن القياس الفلوري أكثر حساسية من كاشفات الامتصاص.

لم يتم استخدام توليفة HPLC مع جهاز الكشف الطيفي الكتلي في تحديد مادة benzapyrene. ويرجع ذلك إلى حقيقة أنه يتم فرض متطلبات عالية على نقاء المستخلصات ، أي تزداد مدة التحليل بسبب الإعداد الشاق للعينة. بالإضافة إلى ذلك ، فإن المعدات باهظة الثمن وليست انتقائية وحساسة بما فيه الكفاية.

1.3 تقدير بنز (أ) بيرين في الماء بواسطة HPLC

1.3.1 أدوات القياس ، المعدات المساعدة ، الكواشف

للقياسات ، يتم استخدام كروماتوجراف Agilent 1200 HPLC (الشكل 1.4) مع كاشف قياس الفلوري ، والذي يوفر نطاقًا لطول موجة الإثارة في نطاق 270-365 نانومتر وتسجيل مضان في نطاق 390-460 نانومتر.

الشكل 1.4 Agilent 1200 HPLC

يتم تعبئة العمود الكروماتوغرافي بمادة ماصة لـ OFC. في ظل ظروف التجربة ، يجب أن تكون كفاءة العمود 5000 لوحة نظرية على الأقل.

لتحضير العينة ، يتم استخدام قمع فصل بسعة 2000 سم 3 ، ومبخر دوار ، وحمام مائي ، ومضخة نفاثة للمياه ، و n-hexane ، وكلوريد الصوديوم والكبريتات ، والأسيتونيتريل.

لتحضير محاليل المعايرة ، قوارير بسعة 25 و 50 سم 3 وماصات متدرجة بسعة 1 ، 2 ، 5 سم 3 ، محلول بنز (أ) بيرين بتركيز c = 1.0 ميكروغرام / سم 3 و تستخدم الأسيتونتريل.

1.3.2 تحضير العينة

يستخدم استخراج السائل السائل (LLE) لاستخراج البنزو (أ) البيرين من الماء. استخراج بنزو (أ) بيرين مع n- هكسان. لهذا الغرض ، يتم إدخال الماء المختار بحجم 1000 سم 3 في قمع الفصل بسعة 2000 سم 3 و 25-30 سم 3 من n-hexane و 20 سم 3 من كلوريد الصوديوم (NaCl) بتركيز يضاف c = 0 ، 25 جم / سم 3 ويتم الاستخراج ، ويهز الخليط لمدة 10-15 دقيقة. بعد ذلك يتم فصل الطبقة المائية ويتم الاستخلاص مرتين أخريين بدون إضافة كلوريد الصوديوم. بعد دمج المستخلصات وتجفيفها ، تمر عبر مادة تجفيف ، وهي عبارة عن قمع بطبقة من كبريتات الصوديوم بارتفاع 2 سم على الأقل ، ويمكن استخدام ثنائي كلورو ميثان من نفس حجم n-hexane كمستخرج.

بعد الاستخلاص ، يبخر المستخلص إلى حجم 3-5 سم 3 على مبخر دوار - جهاز لإزالة السوائل بسرعة عن طريق التقطير تحت ضغط منخفض. يتم نقل البقايا إلى أنبوب اختبار بسعة 10 - 15 سم 3 ويضاف n-hexane ، وبعد ذلك يتبخر المحلول حتى يجف في فراغ بمضخة نفاثة مائية ، ووضع أنبوب الاختبار في حمام مائي عند درجة حرارة 40-50 درجة مئوية. يذاب المتبقي في 0.2 - 0.5 سم 3 أسيتونيتريل. يتم الاحتفاظ بالتركيز الناتج لمدة 15 دقيقة على الأقل.

1.3.3 التخرج

يتم التخرج وفقًا لـ 5 حلول قياسية بتركيز 0.002 ؛ 0.01 ؛ 0.02 ؛ 0.05 و 0.1 ميكروغرام / سم 3. تم وصف تحضير محاليل المعايرة في الجدول 1.5.

الجدول 1.5 تحضير محاليل المعايرة

الصورة ، ميكروغرام / سم 3

c0 ، ميكروغرام / سم 3

تم تصنيع الحلول حتى العلامة باستخدام الأسيتونيتريل.

يتم تسجيل اثنين على الأقل من مخطط كروماتوجرام لكل حل من الحلول. يوضح الشكل 1.5 مخططًا لونيًا لبنزو (أ) بيرين بتركيز 0.002 ميكروغرام / سم 3.

الشكل 1.5 كروماتوجرام بنز (أ) بيرين بتركيز 0.002 ميكروغرام / سم 3

يجب ألا يزيد التباين بين المناطق التي تم الحصول عليها عن 7٪ من الوسط الحسابي.

بناءً على البيانات التي تم الحصول عليها ، تم إنشاء رسم بياني للمعايرة (الشكل 1.6) في شكل اعتماد منطقة الذروة على تركيز الكتلة. يجب أن يكون منحنى المعايرة خطيًا. لكل محلول ، يجب ألا يتجاوز انحراف تركيز الكتلة المقاس وفقًا لخاصية المعايرة عن القيمة المحددة 12٪. إذا تجاوز الانحراف القيمة المحددة ، تتكرر المعايرة. يتم إجراء المعايرة ليس فقط قبل القياسات ، ولكن أيضًا بعد استبدال العمود أو أثناء أعمال صيانة جهاز الكروماتوغراف.

الشكل 1.6 اعتماد المعايرة لمنطقة الذروة على تركيز benzo (a) pyrene (r 2 = 0.998)

1.3.4 أداء تحليل HPLC

يتم إجراء التحديد الكروماتوغرافي للبنزابيرين في عمود Agilent 1200 HPLC ، ويجب أن تكون كفاءة العمود 5000 لوحة نظرية على الأقل بناءً على ذروة البنزابيرين. القطر الداخلي للعمود 2 مم. يتم تعبئة العمود بمادة ماصة ذات طور معكوس (RPS). في هذا التعريف ، تم استخدام العمود الأولي الذي يؤدي وظيفة الحماية. يبلغ القطر الداخلي للعمود الأولي 2 مم ؛ وهو مملوء بنفس OFS.

مثل OFS ، يتم استخدام المواد الماصة ذات الأطوار المستعبدة التي تم الحصول عليها على أساس هلام السيليكا. في هذا التعريف ، تم استخدام هلام السيليكا أوكتاديسيل (C 18) بحجم جسيم يبلغ 5 ميكرومتر وبوليستيرين متشابك متشابك للغاية مع قطر جسيم يبلغ 3.2 ميكرومتر ومتوسط ​​قطر مسام من 20-40 شرقا كمواد ماصة. هذه المادة الماصة مستقرة كيميائيا عند الرقم الهيدروجيني = 2-7. يتم ضمان كفاءة الفصل من خلال مساحة السطح العالية للجسيمات الماصة ، فضلاً عن توحيد تركيبة المادة الماصة والتعبئة المنتظمة الكثيفة. عامل السعة (k) لمثل هذه المادة الماصة هو 9.86.

الطور المتحرك عبارة عن خليط من الأسيتونيتريل - الماء. قم بإعداد eluent بنسبة حجم 8: 2. في الأواني الزجاجية بسعة 1000 سم 3 يضاف 200 سم 3 من الماء ويحضر للعلامة بالأسيتونيتريل. مباشرة قبل الاستخدام ، يتم الاحتفاظ بالسائل لإزالة الغازات لمدة 4 ساعات على الأقل. لإزالة الغازات بشكل أسرع ، يتم تفريغ الحاوية التي تحتوي على مادة شطف عن طريق توصيلها بمضخة نفاثة مائية ووضعها في حمام فوق صوتي. يتم توفير eluent بواسطة صمام جرعات حلقي (حاقن) بحجم حلقة 10 مم 3 ، ومعدل تدفق الطور المتحرك 200 مم 3 / دقيقة.

في ظل هذه الظروف ، يستغرق الفصل اللوني 20-30 دقيقة.

1.3.5 تسجيل النتائج ومعالجتها

تم الكشف عن بنزوبيرين باستخدام كاشف الفلورسنت. يوصى بتسجيل مخطط الكروماتوجرام عند الطول الموجي للإثارة l ex = 365 نانومتر وتسجيل الطول الموجي للتسجيل. = 400-460 نانومتر.

لزيادة الحساسية في هذه التقنية ، تمت برمجة الأطوال الموجية للإثارة والانبعاث عن طريق التألق. يظهر وضع البرمجة في الجدول 1. 6.

الجدول 1.6 وضع البرمجة عند استخدام كاشف الفلورسنت

يظهر الرسم اللوني الذي تم الحصول عليه من تحليل المياه في الشكل 1.7.

الشكل 1.7 كروماتوجرام لمحتوى BP في الماء

يتم تحديد ذروة البنزابيرين من خلال وقت الاحتفاظ ، لأن هذه خاصية نوعية للبنزو (أ) البيرين. لتقدير محتوى benzo (a) pyrene ، يتم حساب منطقة الذروة. ثم ، وفقًا لمخطط المعايرة ، تم العثور على تركيزه.

إذا تجاوز تركيز benzo (a) pyrene الحد الأقصى لتركيز المحلول القياسي ، يتم تخفيف المحلول الذي تم تحليله ويتم تحليل العينة مرة أخرى.

حساسية تقدير البنزابيرين بهذه الطريقة هي 0.01 ميكروغرام / مارك ألماني 3.

1.4 تقدير بنز (أ) بيرين في الماء بواسطة GC

1.4.1 أخذ العينات والتحضير

جزء مهم من التحليل هو اختيار وإعداد العينة. يتم أخذ الماء عدة مرات بفاصل عدة أيام. بعد ذلك ، يتم تصفية الماء وأخذ عينة من 0.5 لتر. يضاف كلوريد الصوديوم إلى العينة ويخزن في الثلاجة لمدة لا تزيد عن يوم واحد.

للحصول على بيانات موثوقة ، يتم استخراج BP من العينة بطريقة LLE. المستخلص هو ثنائي إيثيل إيثر. يتم الاستخراج ثلاث مرات. أول مرتين يتم استخلاص المادة بحجم 50 مل من المستخلص. للمرة الثالثة حجم المستخلص 30 مل. يتم دمج جميع المستخلصات وتبخيرها في مبخر دوار حتى يتم إزالة الأثير تمامًا. يتم إذابة العينة الناتجة في 2 مل من البنزين.

قبل التحديد الكمي لـ BP ، يتم فصل مكونات الخليط بواسطة كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة (TLC).

TLC هي طريقة كروماتوغرافية تعتمد على استخدام طبقة رقيقة من الممتزات كمرحلة ثابتة.

قبل الفصل ، تُغمر اللوحة في محلول 4٪ من الكافيين في الكلوروفورم وتنشط في فرن عند درجة حرارة 100 درجة مئوية. فرن لمدة 30 دقيقة عند درجة حرارة 100 حوالي S.

توضع العينات المذابة في البنزين على صفيحة ويتم تحليلها بالكروماتوجراف. عامل التصفية هو خليط من الهكسان الحلقي - n- هكسان ، بنسبة حجم 16: 1.

1.4.2 القياس الكمي

يتم إجراء التحليل الكمي وفقًا لهذه الطريقة بواسطة كروماتوغرافيا الغاز والسائل باستخدام كاشف التأين باللهب. للتحليل ، تم استخدام كروماتوجراف "Tsvet - 500" (الشكل 1.8) مع كاشف التأين باللهب.

الشكل 1.8 كروماتوغرافيا الغاز "اللون - 500"

كان الغاز الحامل لهذا التحديد هو النيتروجين. تم توفير النيتروجين بمعدل تدفق 3 مل / دقيقة. تم استخدام عمود كوارتز شعري بحجم 25 م × 0.32 مم للتحليل. تم استخدام زيت ميثيل سيليكون OV-101 بسمك غشاء 0.4 ميكرومتر كمرحلة ثابتة. تم إجراء التحليل في وضع برمجة درجة الحرارة من 210 إلى 300 درجة مئوية بمعدل 4 درجات مئوية / دقيقة. تم حقن عينة 1 ميكرولتر باستخدام microsyringe.

يوضح الشكل 1.9 مخطط كروماتوجرام BP الذي تم الحصول عليه بهذه الطريقة.

الشكل 1.9 كروماتوجرام BP الذي تم الحصول عليه بواسطة GC (3-BP)

من الناحية النوعية ، تم تحديد BP من خلال وقت الاستبقاء ، مقارنة بوقت الاحتفاظ بالعينة القياسية ، والذي كان 28 دقيقة.

من الناحية الكمية ، يتم تحديد BP بالطريقة القياسية الخارجية. للقيام بذلك ، قم بإنشاء رسم بياني للمعايرة للعديد من العينات القياسية بنطاق تركيز 1-20 نانوغرام / مل. تم استخدام ارتفاع الذروة كإشارة تحليلية.

بنز (أ) البيرين مادة مسرطنة من فئة الخطر الأولى المتعلقة بالهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات. يمكن العثور عليها في التربة والماء والهواء والغذاء وعندما تدخل الجسم تتراكم. لذلك ، فإن تحديده في كائنات مختلفة هو أولوية.

MPC لـ BP منخفضة جدًا ، لذا يتم استخدام طرق حساسة لتحديدها. تكمن صعوبة تحديدها أيضًا في حقيقة أنه ، بالإضافة إلى BP ، قد تحتوي العينة على أيزومراتها ، مثل benz (e) pyrene و perylene ، التي يكون وقت الاحتفاظ بها هو نفسه تقريبًا لـ BP. أي أن وجود الأيزومرات يجعل من الصعب التعرف على المادة. يتم حل هذه المشكلة عن طريق فصل الخليط أولاً بواسطة TLC ، وكذلك باستخدام عينات BP القياسية.

تم في هذا المقرر الدراسي دراسة عدة طرق كروماتوجرافية مناسبة لتقدير مادة البنزو (أ) البيرين. بعد عمل تمهيدي مع الأدبيات ، كان اختيار طرق التحديد الكمي له ما يبرره. على أساس الطريقة ، تم اختيار الطرق وعرض كروماتوجرامس التي تم الحصول عليها بهذه الطرق.

فهرس

1. Traven VF الكيمياء العضوية. الكتاب المدرسي للجامعات: في 3 مجلدات / VF Traven - M: BINOM. معمل المعرفة 2013. -. - T. 2. - 2013. - 517 ص.

2. Grechishcheva N. Yu. تفاعل الأحماض الدبالية مع الهيدروكربونات العطرية متعددة النوى: الجوانب الكيميائية والسمية: أطروحة لدرجة دكتوراه في الكيمياء. العلوم: 02.00.13 / N. Yu. Grechishcheva. - م ، 2000. - 157 ص.

3. بات. 2466406 الاتحاد الروسي. طرق التحديد الكمي للبنزو (أ) البيرين في البول بالكروماتوجرافيا السائلة / زايتسيفا ن.ف. ، أولانوفا ت.س. ، كورنازهيتسكايا ت.د. ديسمبر 20.10.11 ؛ سنة 10.11.12 ، ثور. رقم 31.

4. التركيزات القصوى المسموح بها (MPC) للمواد الكيميائية: GN 2.1.7.2041-06. - [تم تقديمه في 2006-02-07]. - م: Standartinform، 2006. - 7 ص.

5. Tsimbalyuk K. K. تقدير الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات (PAHs) في الأجسام البيئية (مراجعة) / K. K. - 2013. - ت 8 ، رقم 2. - ص 50 - 62.

6. Yu. A. Zolotov ، أساسيات الكيمياء التحليلية. قضايا عامة. طرق الفصل: في كتابين. / Yu. A. Zolotov، E.N Dorokhova، V. I. Fadeeva and others. Ed. يو. أ. زولوتوفا. - م: العالي. Shk. ، 2002. -. -- أمير. 1. - 2002. - 351 ص.

7. Tsarev N. I. كروماتوغرافيا الغاز العملية. معينات التدريس لطلاب كلية الكيمياء في الدورة الخاصة "طرق التحليل الكروماتوغرافي للغاز" / N. I. Tsarev ، V. I. Tsarev ، I. B. Katrakov. - بارناول: دار النشر بجامعة ولاية التاي 2000. - 156 ص.

8. Drugov Yu. S. التحليل الكروماتوغرافي للغاز للهواء الملوث / Yu. S. Drugov ، A. A. Rodin. - م: بينوم. معمل المعرفة ، 2015. - 531 ص.

9. Styskin E. L. كروماتوغرافيا سائلة عملية عالية الأداء / E.L Styskin ، L.B Itsikson ، E. V. Braude. - م: الكيمياء ، 1986. - 210 ص.

10. Dmitrikov V. P. ، Larionov O.G ، Nabivach V.M. تحليل الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات بواسطة كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء // Uspekhi khimii. - 1986. - ت 2 ، رقم 4. - س 679-700.

11. شرب الماء. طريقة تقدير محتوى بنزو (أ) بيرين: GOST 31860 - 2012. - [مقدمة 2014/01/01]. - م: Standartinform، 2014. - 11 ص. - (معيار الطريق السريع).

12. Borsch N. A. تحديد benzapyrene بواسطة كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء / N. A. Borsch ، S. V. Sidorenko // الاتجاهات الحديثة في تطوير العلوم والتكنولوجيا. - 2016. - V. 1 ، No. 2. - S.37 - 41.

13. Proskurina N. A. تحديد الهيدروكربونات العطرية متعددة النوى في المنتجات الغذائية المحتوية على الدهون باستخدام استخلاص المرحلة الصلبة / N. A. Proskurina ، V. A. Davankov ، M. - 2009. - T. 9، No. 2. - S. 167 - 176.

14. Nazarkina S. G. Nazarkina S. G. ، Purygin P. ، Bulanova A. V. ، Larionov O. - 2000. - ت 2 ،. - س 152-156.

استضافت على Allbest.ru

...

وثائق مماثلة

    الهيدروكربونات العطرية: الخصائص العامة. التسمية والتشابه والخصائص الفيزيائية والكيميائية للهيدروكربونات العطرية. آلية تفاعلات الاستبدال الكهربية والنووية في السلسلة العطرية. استخدام الأرينات وسميتها.

    الملخص ، تمت الإضافة في 12/11/2011

    معلومات عامة عن كلوريد الفينيل - غاز عديم اللون ، سم قوي له تأثير مسبب للطفرات ومسرطن وماسخ. تاريخ اكتشاف كلوريد الفينيل وخصائصه الكيميائية وطرق إنتاجه. الهيدروكلورة الغازية التحفيزية للأسيتيلين.

    عرض تقديمي ، تمت إضافة 08/10/2015

    تصنيف الألدهيدات ، التركيب ، التواجد في الطبيعة ، الفعل البيولوجي ، التطبيق. تسمية الكيتونات وتاريخ الاكتشاف والخصائص الفيزيائية والكيميائية. تفاعلات الإضافة المحبة للنواة. الطرق الكيميائية لتحديد الألدهيدات.

    عرض تقديمي ، تمت إضافة 2014/05/13

    خواص الماء وطرق تليينه. متطلبات صلابة المياه المستهلكة في إنتاج الحرارة والطاقة. الأسس والطرق النظرية لتحديد درجة عسر الماء بالطريقة المعقدة. أخذ العينات ، الكواشف ، التحديد.

    ورقة مصطلح ، تمت الإضافة في 10/07/2009

    مفهوم وتسمية الفينولات وخصائصها الفيزيائية والكيميائية الأساسية والتفاعلات المميزة. طرق الحصول على الفينولات ونطاق تطبيقها العملي. الخصائص السامة للفينول وطبيعة تأثيره السلبي على جسم الإنسان.

    ورقة المصطلح ، تمت إضافة 03/16/2011

    تاريخ اكتشاف الأسبارتام وخصائصه. طريقة لتحديد الأسبارتام والمعدات والأدوات والكواشف. الأسبارتام في جسم الإنسان. الدراسات السمية والسريرية للأسبارتام. استهلاك الأطعمة التي تحتوي على الحمض الأميني فينيل ألانين.

    الملخص ، تمت الإضافة بتاريخ 04.10.2011

    التأثير السام للفينول والفورمالدهيد على الكائنات الحية وطرق تحديدها النوعي. التحديد الكمي للفينول في عينات المياه الطبيعية. طريقة لتحديد الحد الأدنى لتركيزات الكشف عن المواد السامة العضوية في الماء.

    ورقة مصطلح ، تمت الإضافة 05/20/2013

    التركيب الكيميائي والخصائص والأهمية البيولوجية لفيتامين ج. الحاجة اليومية إليه. القياس التجريبي لقياس اليود والطرق الكمية والكيميائية لتحليل محتوى الفيتامينات في المنتجات الغذائية ومستحضرات الفيتامينات.

    ورقة مصطلح تمت إضافتها في 03/18/2013

    الخصائص العامة والخصائص الكيميائية الرئيسية لمشتقات الأسيتامينو العطرية. طرق تحديد أصالة مشتقات الاسيتامينو العطرية. استخدام مشتقات الأسيتامينو في علم الأدوية وتأثيرها على جسم الإنسان.

    ورقة مصطلح تمت إضافتها في 11/11/2009

    السمات المشتركة في بنية جزيئات الكحولات أحادية الماء ومتعددة الهيدروكسيل. خصائص الكحول الإيثيلي. تأثير الكحول على جسم الإنسان. إنشاء مراسلات بين مواد البداية ومنتجات التفاعل. الخواص الكيميائية للكحولات متعددة الهيدروكسيل.


صفحة 1



الصفحة 2



الصفحة 3



صفحة 4



الصفحة 5



الصفحة 6



الصفحة 7



الصفحة 8



الصفحة 9



الصفحة 10



الصفحة 11



الصفحة 12



الصفحة 13



الصفحة 14



الصفحة 15



صفحة 16



الصفحة 17



صفحة 18



صفحة 19

غوست 24104.

المبخر الدوراني IR-1M.

GOST 25336.

ماء الاستحمام.

محرك مغناطيسي نوع MM-ZM مع تسخين كهربائي.

إنارة فوق بنفسجية منظار كروماتوسكوب بمدى طيفي يتراوح من 250 إلى 700 نانومتر ومصباح BUV-15 كمصدر للأشعة فوق البنفسجية.

غرفة زجاجية كروماتوجرافية 40 × 40 × 40 سم.

ألواح زجاجية لكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة 5 × 20 و 20 × 20 سم.

عمود كروماتوجرافي زجاجي طوله 500 مم وقطره 20 مم مع نهايته مسحوبة من الأسفل وخزان بسعة 50-60 سم 3 × 14/23.

ثلاجة ХПТ-2-400-29 / 32 درجة مئوية أو ХШ-1-400-29 / 32 درجة مئوية حسب GOST 25336.

نوع Alonge AIO-14 / 23-50 TS أو AIO-14 / 23-14 / 23-65 TS وفقًا لـ GOST 25336.

قياس المسطرة بتقسيم مقياس 0.1 سم 427.

Dephlegmator 250-19 / 26-29 / 32 TC أو 300-19 / 26-29 / 32 وفقًا لـ GOST 25336.

فوهة П-1-19 / 26-14 / 23-14 / 23 درجة مئوية أو Н-2-19 / 26-14 / 23 درجة مئوية وفقًا لـ GOST 25336.

GOST 25336.

GOST 25336. الاسطوانات المتدرجة 1-100 ، 1-250 أو 3-100 ، 3-250 GOST 25336.

الزجاج الكيميائي B-1-100 أو B-1-150 وفقًا لـ GOST 25336.

قوارير K-1-100-29 / 32 THS أو K-1-25R-29/32 THS أو K-1-500-29 / 32 THS أو P-1-500-29 / 32 THS وفقًا لـ GOST 25336.

قمع بوشنر 1 أو 2 أو 3 غوست 9147.

أكواب للوزن (الصناديق) SV-14/8 أو SV-19/9 أو SV-24/10 أو SV-34/12 وفقًا لـ GOST 25336.

Microsyringes من أنواع MSH-10 ، الشعيرات الدموية الزجاجية.

مؤشر ورق عالمي.

ورق الترشيح للمختبر GOST 12026.

مبضع أو ملعقة رفيعة.

تم تصحيح الكحول الإيثيلي وفقًا لـ GOST R 51652أو الكحول الإيثيلي المعدل ، من الدرجة التقنية GOST 18300.

الأسيتونتريل وفقًا للوثيقة المعيارية.

مسحوق السليلوز الجريزوفولفين وفقًا للوثيقة المعيارية.

GOST R 51650-2000

بنز (5) كريسين ، محتوى المادة الرئيسية لا يقل عن 98٪.

سيفاديكس LH-20.

هلام السيليكا من ماركة ASKG وفقًا للوثيقة المعيارية.

يُسمح باستخدام أدوات القياس الأخرى ذات الخصائص المترولوجية والمعدات ذات الخصائص التقنية ، وكذلك الكواشف والمواد ذات الجودة التي لا تقل عن ما سبق.

5.2 التحضير للاختبار

5.2.1 تحضير المذيبات

المذيبات (هكسان ، كحول إيثيل ، أسيتون ، بنزين) يتم تقطيرها بالطريقة المعتادة باستخدام مكثف راجع.

يقطر ثنائي ميثيل فورماميد بإضافة 120 سم 3 من البنزين و 36 سم 3 من الماء لكل 1 دسم 3 من المذيب إلى دورق التقطير.

5.2.2 تحضير أسيتات السليلوز

(50.0 ± 2.0) جم من السليلوز الجريزوفولفين يوضع في دورق مسطح القاع بسعة 500 سم 3 ، خليط من 150 سم 3 من البنزين أو التولوين ، 70 سم 3 من أنهيدريد الخل و 0.3 سم 3 من حامض الكبريتيك المحضر في دورق منفصل يضاف. يتم تقليب خليط التفاعل باستخدام محرض مغناطيسي لمدة 6-8 ساعات ، وتركه بدون تقليب لمدة 18 ساعة أخرى ، وبعد ذلك يتم صب الطور السائل ، وتصب البقايا في 300 سم 3 من كحول الإيثيل ، وتقليبها ، وتركها في الكحول لمدة 24 ساعة ، ثم يتم ترشيح السليلوز على قمع بوشنر ، وغسله بـ 100 سم 3 من الكحول الإيثيلي والماء المقطر حتى تصبح الغسالات متعادلة (وفقًا لورقة المؤشر).

ثم تحقق من النشاط الكروماتوغرافي للسليلوز الأسيتيل. للقيام بذلك ، 3-4 ساعات قبل التحليل ، قم بإعداد خليط من الكحول الإيثيلي والأسيتون والماء ، يؤخذ بنسبة حجم 60:25:15 ، وصبه في غرفة كروماتوغرافية مبطنة بشرائط ورق الترشيح. يجب أن يكون ارتفاع طبقة المذيب 1.5-2 سم شعري إلى نقطة 5 ميكرولتر من محلول بنز (أ) بيرين بتركيز كتلي 1 ميكروغرام / سم 3. توضع اللوحة في غرفة الكروماتوغرافيا وتترك في الحجرة حتى يرتفع مستوى المذيب بما لا يقل عن 100 مم من خط البداية. في نهاية الكروماتوغرافيا ، تتم إزالة الصفيحة وتجفيفها في الهواء ، وتحت مصباح مشع فوق بنفسجي ، يُلاحظ بقعة زرقاء مشعة من benzo (a) pyrene. قس المسافة من خط البداية إلى مقدمة المذيب وإلى منتصف بقعة بنزو (أ) بيرين ؛ احسب قيمة Rj التي تقدر سرعة حركة benzo (a) pyrene على اللوحة ، وفقًا للصيغة:

حيث XBP هي المسافة من خط البداية إلى منتصف بقعة benzo (a) pyrene ، mm ؛

L هي المسافة من خط البداية إلى مقدمة المذيب ، مم.

يجب أن تكون قيمة Rj لـ benzo (a) pyrene 0.1.

لتحضير لوحة عمل ، يتم تعليق 5 جم من السليلوز الأسيتيل في 20 سم 3 من كحول الإيثيل ويصب في طبقة متساوية على طبق مقاس 20 × 20 سم.

5.2.3 تحضير المحاليل المعيارية للبنزو (أ) البيرين والبنزو (ب) الكريزين

(10.0 + 0.2) ملغ من بنزو (أ) بيرين وبنزو (ب) كريسين يتم وزنها في أكواب وزن (أكياس قنينة). يتم نقل العينات كمياً إلى قوارير حجمية بسعة 100 سم 3: بنز (أ) بيرين بنزين ، بنزو (ج) كريسين أسيتونتريل ، ثم يتم ضبط حجم محلول بنز (أ) بيرين حسب العلامة مع البنزين ، حجم المحلول هو benz (c) chrysene-acetonitrile. الحلول الناتجة لها تركيز كتلة 100 ميكروغرام / سم 3. يتم تخزين المحاليل في مكان بارد ومظلم لمدة لا تزيد عن ثلاثة أشهر.

5.2.4 تحضير محاليل عمل بنزو (أ) بيرين وبنزو (ب) كريسين

يتم تحضير حلول العمل عن طريق تخفيف المحاليل القياسية باستخدام ماصات بسعة 1 و 5 و 10 سم 3 ودوارق حجمية بسعة 100 سم 3 ، ويتم ضبط حجم المحلول على العلامة بالمذيب المناسب ، وخلطه وتخزينه في مكان بارد ومظلم لمدة لا تزيد عن شهر.

تحضير محلول بنزو (أ) بيرين بتركيز كتلة 1.0 ميكروغرام / سم 3 (يتم تحديده بواسطة مقياس التألق الطيفي): يؤخذ 1.0 سم 3 من المحلول القياسي وينقل إلى دورق حجمي بسعة 100 سم 3 ؛ تم تعديل حجم المحلول حسب العلامة بالبنزين.

تحضير محلول بنز (أ) بيرين بتركيز كتلة 0.25: 1.0 و 5.0 ميكروغرام / سم 3 (يتم تحديده بواسطة كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء): 0.25 مأخوذ من المحلول القياسي ؛ 1.0 ؛ 5.0 سم 3 ، على التوالي ، وتنقل إلى قوارير حجمية بسعة 100 سم 3 ؛ تم تعديل حجم المحاليل إلى العلامة باستخدام الأسيتونيتريل.

تحضير محاليل benzo (b) chrysene بتركيز كتلة 0.5 و 10 ميكروغرام / سم 3: 0.5 و 10 سم 3 تؤخذ من المحلول القياسي ، على التوالي ، وتنقل إلى قوارير حجمية بسعة 100 سم 3 ؛ تم تكوين حجم كل محلول حتى العلامة باستخدام الأسيتونيتريل.

5.2.5 تحضير محاليل المعايرة

لتحضير محاليل المعايرة لمزيج من benzo (a) pyrene و benzo (b) chrysene ، تكون أحجام محلول benzo (a) pyrene القياسي بتركيز كتلة 100 ميكروغرام / سم 3 ومحلول عمل benzo (b) ) تركيز كتلة الكريزين 10 ميكروغرام / سم 3 ، اجعل الحجم يصل إلى العلامة باستخدام الأسيتونيتريل. يتم خلط المحاليل الناتجة وتخزينها في مكان بارد ومظلم لمدة لا تزيد عن شهر واحد.

الجدول 2

المحلول

حجم الحل الابتدائي سم 3

تركيز الكتلة في محلول المعايرة ، ميكروغرام / سم 3

بنز (أ) تركيز كتلة البيرين 100 ميكروغرام / سم 3

بنز (ت) تركيز كتلة الكريزين 10 ميكروغرام / سم 3

بنز (أ) بيرين

بنز (ت) كريسين

5.3 إجراء الاختبار

5.3.1 فصل بنزو (أ) البيرين عن المنتج

في دورق مستدير القاع أو قارورة مسطحة القاع بسعة 100 سم 3 ، توضع عينة من المنتج تزن 10 جم ، محلول يتكون من 4 جم من هيدروكسيد البوتاسيوم في 50 سم 3 من 92 ٪ كحول إيثيلي مضاف. يتم خلط محتويات القارورة بالرج. يتم توصيل القارورة بمكثف ارتجاع وتسخينها في حمام مائي أو على محرك مغناطيسي مع غليان خليط التفاعل لمدة 3 ساعات ، ثم يضاف 100 سم 3 من الماء المقطر إلى القارورة من خلال الثلاجة. يتم تبريد كتلة التفاعل إلى درجة حرارة الغرفة. بعد التبريد ، يتم نقل كتلة التفاعل إلى قمع فصل بسعة 500 سم 3. إذا بقيت بقايا صلبة بعد التحلل المائي في كتلة التفاعل ، يتم فصلها على قمع بوشنر ، وغسل البقايا على المرشح بـ 30 سم 3 من كحول الإيثيل الساخن. تُستخدم المرحلة السائلة لكتلة التفاعل في الاستخراج. أضف 30 سم 3 ن من الهكسان في قمع الفصل. يتم اهتزاز محتويات القمع وتركها لفصل السوائل. في حالة تكوين مستحلب ، يضاف 20 سم 3 من الكحول الإيثيلي إلى الخليط في قمع فصل. بعد الفصل ، يُسكب الطور المائي الكحولي السفلي في دورق ، ويُسكب مستخلص الهكسان في قمع فصل آخر. يتم إجراء هذه المعالجة لكتلة التفاعل مرتين أخريين ، باستخدام 30 سم 3 من n-hexane للاستخلاص وكحول الإيثيل لفصل المستحلب في أجزاء 20 سم 3.

عند الانتهاء من الاستخلاص ، يتم غسل مستخلص الهكسان المركب في قمع فصل بالماء المقطر ثلاث مرات في 30 سم 3 ، ويتم نقل المستخلص إلى دورق مستدير القاع بسعة 100 سم 3 ، ويتم ترشيحه من خلال طبقة من اللامائية كبريتات الصوديوم على قمع بفلتر مسامي. يتم تبخير المحلول على مبخر دوار إلى حجم 50 سم 3 عند درجة حرارة حمام مائي لا تزيد عن 60 درجة مئوية.

يتم نقل مستخلص تم تجريده إلى قمع فصل بسعة 500 سم 3 ويضاف إليه 50 سم 3 من خليط من ثنائي ميثيل فورماميد والماء ، بنسبة حجم 9: 1. يُرج الخليط بقوة لمدة دقيقة واحدة ، بعد فصل الطور ، يُسكب الجزء السفلي في دورق ذو قاع مسطح بسعة 200 سم 3 ، ويتم استخلاص 50 سم 3 من خليط ثنائي ميثيل فورماميد والماء مرة أخرى من الهكسان العلوي طبقة. يتم التخلص من طبقة الهكسان ، ويتم نقل مستخلص ثنائي ميثيل فورماميد المدمج في دورق مسطح إلى قمع فصل ، ويضاف 100 سم 3 من الماء المقطر ، ويتم الاستخلاص من الطور المائي باستخدام الهكسان ثلاث مرات في 50 سم 3. يتم التخلص من الطور المائي ، ويتم غسل مستخلص الهكسان بالماء ثلاث مرات 30 سم 3 ، وينقل إلى دورق مسطح القاع ، ويضاف 10 جم من كبريتات الصوديوم اللامائية وتحضينها لمدة ساعة واحدة ، ويتبخر الهكسان على قرص دوار. مبخر بحجم 1.5 - 2.0 سم 3 ، تتم إزالة المذيب المتبقي

GOST R 51650-2000

يتدفق الهواء من خلال إسفنجة مفرغة متصلة بمضخة نفاثة للماء ، ويتم إذابة البقايا الموجودة في القارورة في 0.5 سم 3 من الكحول الإيثيلي.

تزن (2.5 ± 0.2) جم من Sephadex LH-20 في كوب بسعة 100 سم 3 ، يضاف 20 سم 3 من الكحول الإيثيلي ويترك لينتفخ لمدة 3-4 ساعات ثم ينقل الجل ويغسل بقطعة صغيرة تسمح كمية الكحول ، في عمود كروماتوغرافي زجاجي ، للمذيب بالتصريف بطريقة تجعل طبقة الكحول فوق الطبقة الماصة 2 مم على الأقل. يتم تطبيق ما تبقى من المستخلص من القارورة على العمود المحضر باستخدام ماصة ، وغسله من الدورق ثلاث مرات باستخدام الكحول الإيثيلي في أجزاء من 0.5 سم 3. يتم الشطف من عمود من الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات ، بما في ذلك benzo (a) pyrene ، باستخدام 40 سم 3 من الإيثانول ، ويتم التخلص من الجزء الأول بحجم 12 سم 3 ، والجزء الثاني بحجم 25 سم 3 يتم جمعها. يتم توفير معدل شطف مذيب يبلغ 0.5 سم مكعب / دقيقة عن طريق تطبيق ضغط زائد طفيف مع تيار من الهواء أو النيتروجين من خلال فوهة متصلة بمنفاخ أو زجاجة غاز. يجب توفير الغاز من خلال أنبوب زجاجي مملوء بهلام السيليكا.

يمكن استخدام العمود الذي يحتوي على Sephadex LH-20 بشكل متكرر. للقيام بذلك ، ومنع المادة الماصة من الجفاف بعد التجزئة ، يتم غسل العمود بـ 25 سم 3 من كحول الإيثيل ويتم تطبيق العينة التالية.

يتم نقل محلول الجزء الثاني إلى دورق على شكل كمثرى بسعة 50 سم 3 ، ويبخر المذيب إلى حجم 0.5 - 1.0 سم 3 ، وتتم إزالة بقاياها في تيار من الهواء أو النيتروجين.

يتم تحليل الجزء الناتج المحتوي على benzo (a) pyrene بشكل إضافي بواسطة كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء أو طريقة قياس طيف الفلور.

في الوقت نفسه ، يتم إجراء تجربة تحكم ، وتنفيذ جميع مراحل التحليل باستخدام الكواشف وفقًا للإجراء ، ولكن دون وزن المنتج.

/ 5/3 2 تحديد مادة بنز (أ) البيرين باستخدام كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء

5.3.2.1 شروط الكروماتوغرافيا

يتم تحديد شروط الكروماتوغرافيا اعتمادًا على نوع الكروماتوغرافيا السائلة والعمود الكروماتوغرافي المستخدم.

كمثال ، يمكن إعطاء الشروط التالية لتحديد الكروماتوغرافي للبنزو (أ) البيرين.

كروماتوجراف سائل AIex-334 مع كاشف الفلورسنت Kratos FS-970.

عمود Supelcosil LC-PAM ، التحبيب 5 ميكرون ، الطول 150 مم ، القطر - 4.6 مم.

كاشف قياس الفلور: الطول الموجي للإثارة 300 نانومتر ، مرشح الانبعاث - 418 نانومتر.

الطور المتحرك: أسيتونتريل وماء بنسبة حجم 8: 2.

معدل شطف - 2.0 سم 3 / دقيقة.

حجم العينة المحقونة 20 ميكرولتر.

يتم اختيار حساسية مكبر الصوت بحيث لا تتجاوز شدة إشارات بنزو (أ) بيرين والمعيار الداخلي - بنزو (ب) كريسين 95٪ من المقياس.

وقت التحليل - 15 دقيقة ؛ زمن الاحتفاظ بنزو (أ) بيرين - 5 دقائق ، بنزو (ب) كريسين -13 دقيقة.

يتم تحليل المحاليل الكروماتوجرافية مرتين تحت نفس الظروف. يتم قياس مناطق الذروة باستخدام وحدة تكامل أو يدويًا كمنتج لارتفاع الذروة وعرضه بنصف ارتفاع.

يتم تحديد محتوى benzo (a) pyrene من خلال طريقة المعيار الداخلي أو طريقة الإضافات.

5.3.2.2 تقدير محتوى بنزو (أ) بيرين في محلول (مستخلص) تم الحصول عليه وفقًا للمعيار 5.3.1 بالطريقة القياسية الداخلية

عند استخدام طريقة التقييم الكمي هذه ، تتم معايرة الكروماتوجراف مبدئيًا باستخدام محاليل المعايرة المُعدَّة وفقًا للمعيار 5.2.5.

في ظل الظروف المحددة في 5.3.2.1 ، قم بتسجيل ثلاثة كروماتوجرام لكل من الحلول المعدة وقياس مناطق الذروة للبنزو (أ) البيرين والبنزو (ب) الكريزين. أوجد المتوسط ​​الحسابي لمساحة قمم البنزو (أ) البيرين والبنزو (ب) الكريزين ، محسوبًا من ثلاثة كروماتوجرامس.

يتم حساب معامل المعايرة K بواسطة الصيغة

أين و 2 هي كتل benz (a) pyrene (/ l]) و benzo (b) chrysene (t 2) ، ميكروغرام يتم إدخالها في الكروماتوغراف ؛ 5) و ^ 2 - مناطق ذروة benz (a) pyrene (.9]) و benzo (b) chrysene (A ^) ، سم 3.

يتم حساب معامل المعايرة K لكل محلول.

يجب ألا تختلف قيمه عن المتوسط ​​الحسابي لعامل المعايرة عن جميع النتائج بأكثر من 10٪.

مع طول موجة الإثارة 300 نانومتر ومرشح انبعاث 418 نانومتر ، تكون قيمة عامل المعايرة 9.5.

قبل البدء في التحليل في مرحلة تحضير العينات للتحلل المائي القلوي ، يضاف 50 ميكرولتر من محلول بنزو (ب) كريسين بتركيز كتلة 0.5 ميكروغرام / سم 3 إلى عينة المنتج وعينة التحكم. يتم تمرير كلتا العينات من خلال جميع خطوات الاختبار المحددة في 5.3.1. يذوب المتبقي الجاف في 200 ميكرولتر من الأسيتونيتريل.

في ظل الظروف المحددة في 5.3.2.1 ، سجل كروماتوجرامس لمحلول بنز (أ) بيرين بتركيز كتلة 100 ميكروغرام / سم 3 ومحلول بنزو (ب) كريسين بتركيز كتلي 100 ميكروغرام / سم 3 ، لاحظ وقت إطلاق benz (a) pyrene and benz (c) chrysena. بعد ذلك ، يتم تسجيل اللوني لعينة التحكم مع إضافة benzo (b) chrysene وعينة المنتج مع نفس إضافة benzo (b) chrysene. قس مناطق قمم البنزو (أ) البيرين والبنزو (ب) الكريزين على المخططات اللونية لعينة المنتج وعينة التحكم.

يتم تسجيل اثنين من اللوني لكل عينة. يتم حساب المتوسط ​​الحسابي لمساحة قمم benzo (a) pyrene و benzo (b) chrysene من خلال اثنين من كروماتوجرام.

بناءً على البيانات التي تم الحصول عليها ، يتم تحديد كتلة benzo (a) pyrene، mcg في عينة المنتج m وعينة تجربة التحكم m 2.







"72 هي كتلة بنزو (أ) بيرين في عينة تجربة التحكم ، ميكروغرام ؛ t st هي كتلة benzo (v) chrysene التي تم إدخالها في عينة المنتج وعينة التحكم ، mcg ؛

S "] و S 2 - مناطق ذروة benzo (a) pyrene على المخططات اللونية لعينة المنتج (.S"]) وعينة التحكم (.S /) ، cm 2 ؛

L /، L / - مناطق ذروة benz (b) chrysene على المخططات اللونية لعينة المنتج (.SS) وعينة التحكم (L /) ، سم 2 ؛

K هو عامل المعايرة المحدد وفقًا للمواصفة 5.3.2.2.

5.3.2.3 تقدير محتوى بنزو (أ) بيرين في محلول (مستخلص) تم الحصول عليه وفقًا للمعيار 5.3.1 بطريقة الإضافة

للتقدير الكمي عند استخدام طريقة الإضافة ، يتم تحليل عينة من تجربة التحكم في وقت واحد مع عينة من المنتج. يتم إذابة الكسور المعزولة من عينات المنتج وتشغيل التحكم وفقًا لـ 5.3.1 في 400 ميكرولتر من الأسيتونيتريل. تنقسم المحاليل الناتجة إلى جزأين ، مع أخذ جزء أصغر (40 ميكرولتر) في أنبوب اختبار أو دورق على شكل كمثرى.

سجّل المخططات اللونية لعينة المنتج وعينات التحكم والرسم اللوني لمحلول بنز (أ) بيرين بتركيز كتلة 0.25 ميكروغرام / سم 3. لاحظ وقت إطلاق benzo (a) pyrene.

في الأجزاء المتبقية من عينة المنتج وتجربة التحكم (360 ميكرولتر) قم بإضافة 10-20 ميكرولتر من محلول بنزو (أ) بيرين بتركيز كتلة 5 ميكروغرام / سم 3. يتم إعادة تقديم الحلول الناتجة في الكروماتوغراف.

يتم تسجيل جميع مخططات الكروماتوجرام في نسختين. تم قياس مناطق ذروة benzo (a) pyrene. من اثنين من كروماتوجرامس ، يتم حساب المتوسط ​​الحسابي لمنطقة ذروة بنزو (أ) بيرين.

بناءً على البيانات التي تم الحصول عليها ، يتم تحديد كتلة benzo (a) pyrene ، μg ، في عينة المنتج / 77] وعينة تجربة التحكم t 2:

t op ■ S 1. _ t إلى ■ S 3 (9)

ق 2 - 0.95) "2 5 4 - 0.95 3"


حيث / 77 op و / 77 k هي كتلة benzo (a) pyrene المضافة إلى جزء من المستخلص من عينة المنتج (t op) وعينة التحكم (/٪) ، μg ؛

S "] و S 2 - مناطق ذروة benzo (a) pyrene على المخططات اللونية لعينة المنتج (.S"]) وعينة المنتج مع إضافة benzo (a) pyrene (L /)، cm 2 ؛

L / and S) - مناطق ذروة benz (a) pyrene على المخططات اللونية لعينة تجربة التحكم (L /) وعينة تجربة التحكم مع إضافة benzo (a) pyrene (L /) ، سم 2 ؛

0.9 هي نسبة العينة التي يضاف إليها benz (a) pyrene.



5.3.3 تقدير محتوى بنز (أ) البيرين بواسطة مقياس التألق الطيفي في درجة حرارة الغرفة

عند تحديد محتوى benzo (a) pyrene عن طريق قياس الطيف الضوئي ، بالتزامن مع عينة من المنتج ، يتم تحليل عينة من تجربة التحكم ، حيث يتم تحليل 50 ميكرولتر من محلول benzo (a) pyrene بتركيز كتلة 1 ميكروغرام / سم 3.

يتم إذابة الأجزاء المحتوية على benzo (a) pyrene التي تم الحصول عليها وفقًا لـ 5.3.1 من عينة المنتج وعينة التحكم مع المادة المضافة في 0.5 سم 3 من البنزين ثم تعريضها لتنقية إضافية في طبقة رقيقة من السليلوز الأسيتيل.

للقيام بذلك ، يتم تقسيم لوح مقاس 20 × 20 سم ، مُعد كما هو موضح في البند 5.2.2 ، إلى حقلين: حقل جانبي بعرض 1.5-2 سم وحقل رئيسي ، يرسم شريطًا فاصلًا فوق الطبقة الماصة باستخدام مشرط أو ملعقة رفيعة. يتم تطبيق محلول من الكسر المعزول وفقًا للمعيار 5.3.1 على الحقل الرئيسي بشريط متصل ، على بعد 2 سم من الحافة السفلية للوحة و 1 سم من الحواف الجانبية. يتم تطبيق المحلول باستخدام شعري مرسوم رقيقًا أو إبرة دقيقة ، يجب ألا يتجاوز حجم البقع 5 مم. من أجل النقل الكمي للمادة ، يتم غسلها مرتين من جدران القارورة بكمية صغيرة من البنزين (0.4 - 0.6 سم 3). على خط البداية للحقل الجانبي ، يتم تطبيق 5 ميكرولتر من محلول بنزو (أ) بيرين بتركيز كتلة 1 ميكروغرام / سم 3 على النقطة. بعد التبخر الكامل للمذيب ، توضع اللوحة في حجرة كروماتوغرافية مشبعة مسبقًا بزاوية 70 درجة - 85 درجة ويتم الشطف في خليط من الكحول الإيثيلي والأسيتون والماء ، بنسبة 60: 25:15. عندما تصل واجهة المذيب إلى 2 سم من الحافة العلوية للوحة ، يتم إزالتها من الحجرة وتجفيفها في الهواء ، ويتم تطوير منطقة كروماتوغرافيا بنزو (أ) من البيرين تحت مصباح إشعاع فوق بنفسجي. يتم كشط المادة الماصة من منطقة benzo (a) pyrene من الحقل الرئيسي من الصفيحة باستخدام مشرط أو ملعقة رفيعة ويتم نقلها إلى مرشح زجاجي ، حيث يتم التخلص من المادة في عدة خطوات باستخدام 50 سم 3 من البنزين إلى قوارير بسعة 100 سم 3 ، ثم يتبخر المذيب إلى حجم صغير ، ويزال باقي المذيب بتيار من الهواء ويضاف 1 سم 3 من البنزين إلى القارورة.

على مقياس طيفي بطول موجة من الضوء المثير 386 نانومتر في نطاق 400-440 نانومتر بسرعة مسح 60 نانومتر / دقيقة ، أطياف التألق لعينة المنتج وعينة التحكم مع إضافة بنزو (أ) بيرين تسجل.

يتم تسجيل أطياف الحلول في وضع تضخيم واحد ، مع ضبط الفجوة وعامل التضخيم وفقًا لمحلول عينة التحكم بحيث تكون إشارة benzo (a) pyrene عند 406 نانومتر هي 0.4 - 0.6 من مقياس الجهاز. لكل حل ، يتم تسجيل الطيف مرتين ، مما يحقق قابلية استنساخ جيدة. على مخططات الطيف التي تم الحصول عليها بحد أقصى 406 نانومتر ، يتم قياس ارتفاع الخط الطيفي لبنزو (أ) بيرين لعينة المنتج وعينة التحكم بالمليمترات. احسب متوسط ​​قيمة ارتفاعات benzo (a) pyrene وفقًا لمخططين طيفيين. عند المستويات العالية من benzo (a) pyrene في المنتج ، يتم تخفيف العينات بالبنزين ويتم تسجيل الطيف مرة أخرى في نفس وضع التضخيم كما في عينة التحكم.

قم بإجراء تحديدين متوازيين.

5.4 معالجة النتائج

5.4.1 يتم حساب الكسر الكتلي للبنز (أ) البيرين في المنتج X \ ،٪ ، أو X 2 ، مجم / كجم ، عند استخدام طريقة الكروماتوجرافيا السائلة عالية الأداء ، بواسطة الصيغ:


(t 1 - t 2) ■ 100 (t g - t 2) t ■ 1000 1000 "t 10






أين مي هي كتلة بنزو (أ) بيرين في عينة المنتج ، ميكروغرام ؛

m2 كتلة بنزو (أ) بيرين في عينة التحكم ، ميكروغرام ؛ t هي كتلة المنتج المأخوذ للتحليل ، g.

2.4.5 الكسر الكتلي للبنز (أ) البيرين في المنتج أ) ،٪ ، أو X 2 ، مجم / كجم ، عند استخدام طريقة قياس الفلور الطيفي ، يتم حسابها بواسطة الصيغ:



100 ثانية ST // V t ■ 1000 ■ 1000 ■






حيث cst هو تركيز كتلة benzo (a) pyrene في محلول العمل المحضر وفقًا لـ 5.2.4 والمضاف إلى عينة التحكم ، ميكروغرام / سم 3 ؛

ارتفاع الخط الطيفي لـ benzo (a) pyrene على مخطط الطيف لعينة المنتج ، mm ؛ ارتفاع الخط الطيفي لـ benzo (a) pyrene على مخطط الطيف لعينة تجربة التحكم ، mm ؛

V هو حجم محلول عمل benz (a) pyrene المضاف إلى عينة تجربة التحكم ، cm 3 ؛ t هو وزن عينة المنتج المأخوذة للاختبار ، g.

تؤخذ نتيجة الاختبار النهائية على أنها المتوسط ​​الحسابي لقرارين متوازيين لهما نفس العدد من الأرقام المعنوية.

إذا كان التناقض بين نتائج التحديدات المتوازية لا يتجاوز \ X-y - YY 2 |<

< 0,01 dX, где, Х 2 и X- результаты параллельных определений и их среднее арифметическое, а d - норматив контроля сходимости, то среднее арифметическое X принимают за результат анализа. В противном случае анализ повторяют. Значение норматива d приведено в таблице 3.

وفقًا لنتيجة التحليل X وقيمة الخطأ النسبي d الواردة في الجدول 3 ، احسب الخطأ المطلق A = 0 ، (SH

يتم تقديم نتيجة التحليل على شكل (X ± A) ، مجم / كجم أو ٪ عند P = 0.95.

5.5 التحكم في دقة نتائج التحليل

5.5.1 يتم التحقق من قابلية تكرار قرارات النسخ المتماثل لكل عينة تم تحليلها وفقًا للمعيار 5.3.

5.5.2 تستخدم عينات العمل للتحكم في التكاثر. يتم تقسيم العينة إلى جزأين متساويين ويتم تحليلها وفقًا للمنهجية في مختبرات مختلفة أو في نفس المختبر ، مع تغيير ظروف التحليل قدر الإمكان ، أي باستخدام مجموعات مختلفة من الأواني الحجمية ، ويتم إجراء التحليلات في أيام مختلفة أو يومين محللين مختلفين.

تعتبر إمكانية استنساخ تحليلات التحكم مرضية إذا \ X-y - X 2 \<

< 0,01 DX, где Л), Х 2 и X- результаты анализа одной и той же пробы, полученные в разных лабораториях или при варьирующих условиях в одной лаборатории и их среднее арифметическое значение, D - значение норматива внутреннего оперативного контроля воспроизводимости. Значение норматива D приведено в таблице 3.

تواتر التحكم في التكاثر - مرة واحدة على الأقل كل أسبوعين

الجدول 3 - مدى القياس وقيمة خاصية الخطأ النسبي ومعايير التحكم التشغيلي للمكون العشوائي للخطأ النسبي (التقارب وإمكانية تكرار النتائج) عند مستوى الثقة P = 0.95

5.5.3 للتحكم في الدقة ، استخدم عينات عمل مع إضافة معروفة من benzo (a) pyrene. يتم تقسيم العينة إلى جزأين متساويين ، يتم تحليل الأول وفقًا للإجراء ، ويتم إدخال الإضافة المعروفة لـ benzo (a) pyrene في الجزء الثاني ثم يتم تحليلها أيضًا وفقًا للإجراء. يجب أن تكون قيمة المادة المضافة 50 - 150٪ من محتوى البنزابيرين في العينة التي تم تحليلها.

تعتبر دقة تحليلات التحكم مرضية إذا | L) - X- s \< К, где Л), X и с - результаты контрольных анализов пробы с добавкой бенз(а)пирена, реальной пробы и величина добавки бенз(а)пирена соответственно; К - норматив оперативного контроля точности.

مطبوع في FSUE "STANDARTINFORM" على جهاز كمبيوتر.

طبع في فرع FSUE "STANDARTINFORM" - نوع. "طابعة موسكو" ، 105062 موسكو ، ليالين لكل. ، 6

GOST R 51650-2000

1 مجال الاستخدام ............................................ ......... واحد

3 أخذ العينات ... ............... ................ 2

4 طريقة قياس الطيف الضوئي لدرجات الحرارة المنخفضة .............................. 2

4.1 الأجهزة والمواد والكواشف ... ... 2

4.2 التحضير للاختبار ... .................. ... 3

4.3 إجراء الاختبار ... ............. .... 3

4.4 معالجة النتائج ... ................. .... 6

4.5 التحقق من دقة نتائج التحليل .......................................... ..... 6

5 طرق استشراب سائل عالي الأداء وطرق قياس الطيف الضوئي

درجة حرارة الغرفة ................................................ ................ ...... 7

5.1 الأجهزة والمواد والكواشف ... ... 8

5.2 التحضير للاختبار ... .................. ... 9

5.3 إجراء الاختبار ... ............. .... عشرة

5.4 نتائج المعالجة ... ................ .... 13

5.5 التحقق من دقة نتائج التحليل ... .................... 14

6 متطلبات السلامة ... ... خمسة عشر

7 متطلبات تأهيل المشغل .............................................. .15

الملحق أ ببليوغرافيا

معيار الدولة للاتحاد الروسي

المنتجات الغذائية طرق لتحديد الكسر الكتلي للبنزو (أ) البيرين

طرق تحديد نسبة البنز (أ) الكسر الحجري من الكتلة الكلية

تاريخ التقديم 2001-07-01

1 مجال الاستخدام

تنطبق هذه المواصفة القياسية الدولية على المواد الخام الغذائية ، والمواد الغذائية ، والمواد الغذائية ، ومضافات النكهات ، وتحدد طرقًا لتحديد الكسر الكتلي للبنزو (أ) البيرين باستخدام مقياس التألق الطيفي في درجات حرارة منخفضة ودرجة حرارة الغرفة وكروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء.

موازين معملية للأغراض العامة من فئة الدقة الثانية مع أقصى حد لوزن 500 جرام وفقًا لـ غوست 24104.

المبخر الدوراني IR-1M.

ماء الاستحمام.

موقد كهربائي منزلي مع لولب مغلق ومنظم تدفئة حسب GOST 14919.

وعاء ديوار للنيتروجين السائل بأي سعة

حمامات للكروماتوغرافيا (حويصلات ضوئية مطلية بالمينا).

ألواح زجاجية بقياس 15 × 30 و 20 × 40 سم.

قوارير K-1-250-29 / 32 THS أو K-1-100-29 / 32 THS أو K-1-500-29 / 32 THS أو P-1-500-29 / 32 THS وفقًا لـ GOST 25336.

ثلاجات KIT-1-300-14 / 23 KhS أو KhIT-1-400-14 / 23 KhS وفقًا لـ GOST 25336.

ثلاجات KhPT-2-400-29 / 32 KhS و KhPT-1-300-29 / 32 أو KhPT-400-29 / 32 KhS وفقًا لـ GOST 25336.

Dephlegmator 250-19 / 26-29 / 32 TC أو dephlegmator 300-19 / 26-29 / 32 TC وفقًا لـ GOST 25336.

أنابيب اختبار الزجاج P2-10-180 XC وفقًا لـ GOST 25336.

فوهة П-1-19 / 26-14 / 23 درجة مئوية أو Н2-19 / 23 GOST 25336.

مضخة مختبر ووتر جيت GOST 25336.

ماصات بسعة 1 ، 2 ، 5 ، 10 سم 3 GOST 29228و GOST 29229.

قمع VFO-32-POR 100-14 / 23 XC أو VFO-32-POR 160-14 / 23 XC وفقًا لـ GOST 25336.

الأنابيب المقاسة P-2-15-14 / 23 KhS وفقًا لـ GOST 1770.

قمع التقسيم VD-1-500 أو VD-3-500 GOST 25336.

الاسطوانات المتدرجة 1-100 ، 1-250 أو 3-100 ، 3-250 GOST 25336.

أكواب للوزن (الصناديق) SV-14/8 أو SV-19/9 أو SV-24/10 أو SV-34/12 وفقًا لـ GOST 25336.

ميزان حرارة مع حدود قياس درجة الحرارة من 0-250 درجة مئوية بقيمة تقسيم 1 درجة مئوية وفقًا لـ غوست 29224.

شعيرات زجاجية ، قضبان زجاجية.

n.octane ، h. ، وفقًا للوثيقة المعيارية.

ن الهكسان ، ح ، وفقا للوثيقة المعيارية.

الدرجة التقنية الكحول الإيثيلي المصحح GOST 18300أو كحول الإيثيل المصحح وفقًا لـ GOST R 51652.

جزء الأثير البترولي 40-70 درجة مئوية وفقًا للوثيقة المعيارية.

أكسيد الألومنيوم للكروماتوجرافيا من الدرجة الثانية من النشاط وفقًا للوثيقة المعيارية.

بنز (أ) بيرين ، محتوى المادة الرئيسية لا يقل عن 98٪.

1،12-بنزبيريلين ، محتوى المادة الرئيسية لا يقل عن 98٪.

يُسمح باستخدام أدوات قياس أخرى ذات خصائص مترولوجية ومعدات ذات خصائص تقنية ، وكذلك كواشف ومواد ذات جودة لا تقل عن تلك المحددة.

4.2 التحضير للاختبار

4.2.1 تنقية المذيبات

المذيبات (n. أوكتان ، كحول إيثيلي ، إيثر البترول ، كلوروفورم ون. هكسان) يتم تقطيرها بالطريقة المعتادة باستخدام مكثف راجع.

4.2.2 تحضير الألومينا

تجفف الألومينا في فرن عند درجة حرارة (250 + 4) درجة مئوية لمدة 4 ساعات وتخزن في وعاء بسدادة أرضية.

4.2.3 تحضير محلول بنز (أ) بيرين لكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة (محلول شاهد).

يتم وزن حوالي 10 ملغ من بنزو (أ) بيرين في زجاجة الوزن ، وتضاف بضعة مليلتر من الإيثر البترولي حتى تذوب العينة تمامًا.

يتم نقل المحلول الناتج كمياً إلى دورق حجمي بسعة 100 سم 3 ويتم تعديل حجم المحلول إلى العلامة باستخدام الأثير البترولي. لا تزيد مدة صلاحية المحلول عن ثلاثة أشهر في الثلاجة.

4.2.4 تحضير محلول بنز (أ) البيرين القياسي

قم بوزن (10.0 ± 0.2) ملجم من مادة benzo (a) pyrene في زجاجة وزن ، أضف بضعة مليلتر من n.octane حتى تذوب العينة تمامًا. تم نقل المحلول الناتج كميًا إلى دورق حجمي بسدادة أرضية بسعة 100 سم 3 وتم نقله إلى العلامة باستخدام n.octane. تركيز كتلة benzo (a) pyrene في المحلول الناتج هو 100 ميكروغرام / سم 3. يتم تخزين المحلول في الثلاجة. لا تزيد مدة صلاحية المحلول عن ثلاثة أشهر.

4.2.5 تحضير محاليل العمل لمادة benzo (a) pyrene

محاليل عمل بنزو (أ) تركيز كتلة بيرين 0.1 ؛ يتم تحضير 0.04 و 0.02 ميكروغرام / سم 3 في n.octane بواسطة التخفيف التسلسلي للمحلول القياسي الأولي من benzo (a) pyrene ، المحضر وفقًا لـ 4.2.4 ، في قوارير حجمية بسدادة أرضية بسعة 100 سم 3. يتم تخزين الحلول في الثلاجة. العمر الافتراضي للحلول لا يزيد عن شهر واحد.

4.2.6 تحضير المحلول القياسي 1،12-benzperylene (المعيار الداخلي)

لتحضير المحلول الأولي ، قم بوزن (10.0 + 0.2) مجم من 1،12-benzperylene في زجاجة ، أضف بضعة مليلتر من n.octane حتى تذوب العينة تمامًا. تم نقل المحلول الناتج كميًا إلى دورق حجمي بسدادة أرضية بسعة 100 سم 3 وتم نقله إلى العلامة باستخدام n.octane. تركيز كتلة 1،12-benzperylene في المحلول الناتج هو 100 ميكروغرام / سم 3. يتم تخزين المحلول في الثلاجة. لا تزيد مدة صلاحية المحلول عن ثلاثة أشهر.

4.2.7 إعداد حلول عمل 1،12-benzperylene (حلول معيارية داخلية)

حلول العمل بتركيز كتلة 1،12-benzperylene 0.01 ؛ 0.005 ؛ 0.002 و 0.001 ميكروغرام / سم 3

محضر في n.octane بواسطة التخفيفات المتتالية للمحلول القياسي الأولي ، المحضر وفقًا لـ 4.2.6 ، في قوارير حجمية بسدادة أرضية بسعة 100 سم 3. يتم تخزين الحلول في الثلاجة. العمر الافتراضي للحلول لا يزيد عن شهر واحد.

4.3 إجراء الاختبار

4.3.1 فصل بنزو (أ) البيرين عن المنتج

في دورق مستدير القاع بسعة 500 سم 3 ضع عينة من المنتج بوزن 25 جم ، أضف إلى القارورة 20 سم 3 من الماء المقطر ، 200 سم 3 من الكحول الإيثيلي و 20 جم من هيدروكسيد البوتاسيوم.

يتم خلط محتويات القارورة بالرج. يتم توصيل القارورة بمكثف ارتجاع وتسخينها في حمام مائي مع غليان خليط التفاعل لمدة 3 ساعات ، ثم يضاف 150 سم 3 من الماء إلى القارورة من خلال مكثف ؛ يتم إخراج القارورة من الحمام وتبريدها لدرجة حرارة الغرفة.

بعد التبريد ، يتم نقل الطور السائل لخليط التفاعل عن طريق الصب إلى قمع الفصل ، تاركًا باقي المنتج في الدورق. يضاف 150 سم 3 من n-hexane إلى الدورق مع البقايا ، ويتم تقليب محتويات الدورق بقوة ويصب n-hexane في قمع الفصل.

يُغلق القمع ويهز بقوة ، ثم يتم تأمينه في رف ويترك لفصل السوائل. لفصل المستحلب الناتج ، يضاف 20 سم 3 من كحول الإيثيل إلى الخليط في قمع فصل. بعد الفصل ، يُسكب الطور الكحولي المائي السفلي مرة أخرى في القارورة مع الراسب ، ويُسكب مستخلص الهكسان في دورق بحجم 500 سم 3.

يتم إجراء هذه المعالجة لخليط التفاعل مرتين أخريين ، باستخدام 100 سم 3 من n-hexane للاستخلاص وكحول الإيثيل لفصل المستحلب ، في أجزاء 20 سم 3.

في نهاية الاستخراج ، يتم التخلص من البقايا الموجودة في الدورق والمحلول المائي ، ويتم غسل المستخلص في قمع فصل بالماء المقطر ثلاث مرات في 50 سم 3 وتبخره في أجزاء في دورق مستدير القاع بسعة 250 سم 3 تم وزنها مسبقًا إلى المرتبة العشرية الثانية على مبخر دوار عند درجة حرارة حمام مائي لا تزيد عن 60 درجة مئوية. اترك القارورة مع المستخلص في غطاء دخان لإزالة آثار المذيب ، وبعد ذلك يتم وزنها مرة أخرى. يتم تحديد وزن المستخلص المستخلص من خلال الفرق بين الأوزان.

من المستخلص الموجود في القارورة ، يتم أخذ 1/5 جزء في زجاجة بدون وزن. يتم وزن القارورة مع باقي المستخلص. أضف 0.1-0.2 سم 3 من محلول بنز (أ) بيرين "شاهد" المحضر طبقاً للمواصفة 4.2.3 إلى الزجاجة مع جزء من المستخلص. يتم إذابة محتويات الزجاجة والمخلفات الموجودة في القارورة في حجم صغير من الأثير البترولي.

للفصل الكروماتوغرافي للمستخلص ، يُسكب أكسيد الألومنيوم بالتساوي على لوح زجاجي بقياس 20 × 40 سم. بعد ذلك ، باستخدام قضيب زجاجي مقسم إلى ثلاثة أجزاء (14 و 1 و 3 سم) مع حلقات مطاطية بسمك 1 مم وعرض 3 مم ، يتم تسوية أكسيد الألومنيوم بعناية.

يتم تطبيق الحلول الناتجة بشكل كمي على الصفيحة المحضرة ذات الشعيرات الدموية الزجاجية: على الجزء الضيق - محلول من الزجاجة ("شاهد") ، على الجزء العريض - مستخلص المنتج من القارورة. يتم تطبيق المحاليل بالتساوي في شريط متصل ، متراجعًا عن الحافة السفلية للوحة 7-8 سم.

يتم وضع اللوحة في حمام الكروماتوغرافيا بزاوية طفيفة تتراوح بين 20 و 25 درجة ، ويتم سكب الأثير البترولي بحيث لا يصل إلى خط تطبيق العينة. الحمام مغطى بالزجاج ويتم تنفيذ الكروماتوغرافيا ، مما يجعل مقدمة المذيب إلى الحافة العلوية للوحة.

بدون تجفيف الصفيحة ، يتم تشعيعها بالأشعة فوق البنفسجية ويتم تحديد موقع benzo (a) pyrene في عينة الاختبار بواسطة شريط "الشاهد" المضيء. حدد حدود شريط benzo (a) pyrene على الرسم اللوني لعينة الاختبار. يتم تجفيف اللوحة في الهواء في غطاء دخان.

تتم إزالة شريط من أكسيد الألومنيوم المحدد على مخطط كروماتوجرافي لعينة الاختبار من اللوحة باستخدام شريحة زجاجية ويتم نقله كميًا إلى اللوحة المسامية الخاصة بقمع المرشح. يتم توصيل القمع بقارورة مستديرة ذات قاع مستدير بسعة 100 سم 3 ويتم إزالة بنزو (أ) بيرين من الألومينا مع 50 سم 3 من البنزين ، ويضاف البنزين في أجزاء صغيرة ويقلب الألومينا على القمع بعصا. يتبخر البنزين حتى يجف على مبخر دوار عند درجة حرارة حمام مائي لا تزيد عن 60 درجة مئوية. تم نقل الرواسب الموجودة في الدورق بشكل كمي مع الأوكتان إلى أنبوب اختبار. يجب ألا يتجاوز حجم المحلول في أنبوب الاختبار 5 سم 3.

في تحليل بعض المنتجات ، لا يوجد فصل كامل وواضح لمكونات الفلورسنت للعينة أثناء الفصل الكروماتوجرافي الأولي للمستخلص المعزول من المنتج. في هذه الحالة ، يتم عزل شريط أوسع من أكسيد الألومنيوم على الصفيحة عند مستوى "شاهد" ؛ يُستخرج بنز (أ) بيرين من الألومينا مع البنزين كما هو موصوف أعلاه ، ويتم إذابة بقايا التبخر في الإيثانول ويتم إعادة رسم المستخلص الكحولي الناتج عن ذلك.

بالنسبة للفصل الكروماتوغرافي لمستخلص الكحول ، يتم استخدام لوحة بقياس 15 × 30 سم مع طبقة من أكسيد الألومنيوم بسمك 0.3 مم. يتم فصل شريحتين بعرض 10 و 3 سم على اللوحة. يتم وضع مستخلص كحولي من المنتج الذي تم تحليله على الجزء العريض من اللوحة باستخدام شعري زجاجي ، ومحلول بنز (أ) بيرين في الأثير البترولي ("شاهد" يتم تطبيق المحلول) على الجزء الضيق من اللوحة ، ويتم وضع اللوح في الحمام بزاوية 20-25 درجة ويتم إجراء تحليل كروماتوجرافي في الكلوروفورم ، مما يجعل مقدمة المذيب إلى الحافة العلوية للوحة. في الضوء فوق البنفسجي ، لوحظ شريط من أكسيد الألومنيوم مع بنزو (أ) بيرين من المنتج قيد الدراسة بواسطة "الشاهد". ثم يُستخرج بنزو (أ) بيرين من الألومينا بالبنزين ويتم إجراء جميع العمليات الإضافية على النحو الموصوف أعلاه.

GOST R 51650-2000

يتم نقل محلول بنزو (أ) بيرين في الأوكتان n إلى أنبوب اختبار. يجب ألا يزيد حجم المحلول عن 5 سم 3 بعينة أولية من الناتج 25 جم.

في المحلول الناتج (المستخلص) ، يتم تحديد محتوى benzo (a) pyrene من خلال طريقة قياس الطيف الضوئي لدرجات الحرارة المنخفضة ، باستخدام طريقة الإضافة أو الطريقة المعيارية الداخلية للتقييم الكمي.

4.3.2 تقدير محتوى البنزو (أ) البيرين في المحلول (المستخلص) الذي تم الحصول عليه وفقًا للمعيار 4.3.1 بطريقة الإضافة.

في ثلاثة أنابيب اختبار ، صب 1 سم 3 من المحلول الناتج من بنزو (أ) بيرين في n.octane مع ماصة. ثم يتم سكب 2 سم 3 ن أوكتان في أنبوب الاختبار الأول. يصب 1.5 سم 3 من n.octane و 0.5 cm 3 من محلول عامل من benz (a) pyrene ، تركيز كتلة 0.1 ميكروغرام / سم 3 ، محضر وفقًا لـ 4.2.5 ، في أنبوب الاختبار الثاني. في أنبوب الاختبار الثالث أضف 1 سم 3 ن أوكتان و 1 سم 3 من نفس محلول العمل من بنزو (أ) بيرين كما في أنبوب الاختبار الثاني.

يبدأ التحليل الطيفي بالفلور بأنبوب الاختبار الثالث. للقيام بذلك ، يتم وضع أنبوب الاختبار الثالث في وعاء ديوار به نيتروجين سائل أمام فتحة مدخل مقياس الطيف الضوئي ؛ ضبط خط التألق التحليلي للبنزو (أ) بيرين 403 نانومتر عند الطول الموجي للضوء المثير 367 نانومتر. من خلال ضبط الكسب وفتح الشق ، وكذلك في نفس الوقت ضبط أنبوب الاختبار في وعاء ديوار ، يتم تحقيق أقصى إشارة بواسطة جهاز تسجيل مقياس الطيف الضوئي (حتى 50-80٪) ، وبعد ذلك يتم الحصول على مخطط طيف بنز ( أ) يتم تسجيل البيرين في منطقة 401-404 نانومتر ، مع تحديد قيمة مقياس الطيف الضوئي لجهاز التسجيل بطول موجة 401 نانومتر. يتم تكرار تسجيل الطيف مرتين.

ثم يتم تجميد أنابيب الاختبار الثانية والأولى بالتتابع في النيتروجين السائل ويتم تسجيل أطياف التألق في نطاق الطول الموجي 401-404 نانومتر ، تأكد من ضبط قلم المسجل بطول موجة 401 نانومتر على نفس الموضع كما هو الحال عند مسح العينة في أنبوب الاختبار الثالث.

يتم تحديد التركيز الكتلي لـ benzo (a) pyrene في المستخلص الذي تم تحليله وفقًا للرسم البياني ، حيث يتم رسم قيمة إضافة benzo (a) pyrene (g) على طول محور abscissa ، وارتفاع ذروة يتم رسم الخط المميز الأقصى لـ benzo (a) pyrene عند 403 نانومتر على طول المحور الإحداثي ، ويتم قياسه من مخططات الطيف التي تم الحصول عليها بالمليمترات.

إذا كان تركيز كتلة benzo (a) pyrene في محلول الاختبار يقع داخل المنطقة المناسبة للقياسات ، فإن النقاط التجريبية التي تم الحصول عليها تقع على نفس الخط المستقيم. يعطي استقراء هذا الخط المستقيم إلى التقاطع مع محور الإحداثي قطعة منه تتوافق مع محتوى benzo (a) pyrene في المحلول بدون مادة مضافة ، أي في 1 سم 3 من محلول الاختبار. إذا كان تركيز كتلة benzo (a) pyrene في المحلول الذي تم تحليله أعلى من الحد الأعلى لنطاق التركيزات المقاسة بواسطة الجهاز ، فيتم تخفيف المحلول الذي تم تحليله باستخدام n.octane.

4.3.3 تقدير محتوى benzo (a) pyrene في محلول (مستخلص) تم الحصول عليه وفقًا لـ 4.3.1 بالطريقة القياسية الداخلية

يستخدم 1،12-benzperylene كمعيار داخلي. صب 3 سم 3 من محلول بنز (أ) بيرين في n.octane الذي تم الحصول عليه وفقًا لـ 4.3.1 في أنبوب اختبار وضعه في وعاء ديوار مع النيتروجين السائل أمام فتحة مدخل مقياس الطيف الضوئي ، اضبط التحليل التحليلي خط عند 403 نانومتر بطول موجي للضوء المثير 367 نانومتر وقم بتسجيل طيف المحلول في نطاق الطول الموجي 401-409 نانومتر. من شدة الخط (وفقًا لارتفاع ذروة الحد الأقصى للخط المميز لـ benzo (a) pyrene عند 403 نانومتر) ، يتم تقدير المحتوى التقريبي لـ benzo (a) pyrene في العينة. وفقًا لهذا التقييم ، يتم إضافة محلول من 1،12-بنزبيريلين إلى أنبوب اختبار مع 3 سم 3 من محلول بنز (أ) بيرين في أوكتان n بكمية تبلغ شدة 1،12- benzperylene في طيف العينة عند

كان 406.3 نانومتر أكبر من 3 إلى 5 مرات من شدة خط بنز (أ) بيرين بطول موجة 403 نانومتر.

يتم تسجيل الطيف في نطاق الطول الموجي 401-409 نانومتر مرتين.

شدة الخطوط المميزة لـ benz (a) pyrene عند 403 نانومتر و 1،12-benzperylene عند

يتم تحديد 406.3 نانومتر (H | و H 2 على التوالي) من مخططات الطيف عن طريق قياس ارتفاعات القمم عند الحد الأقصى للخطوط المميزة لهذه المركبات بالمليمترات. في الحسابات تأخذ متوسط ​​القيمة. يتم حساب معامل النسبة (K) لشدة خط benz (a) pyrene (EGD) إلى شدة خط 1،12-benzperylene (EG 2) ، K = //] /// 2.

بعد ذلك ، يتم تحديد هذا المعامل للحلول القياسية لـ benzo (a) pyrene (X st). للقيام بذلك ، يتم سكب 3 سم 3 من المحاليل القياسية للبنز (أ) البيرين بتركيز كتلة 0.02 و 0.04 ميكروغرام / سم 3 في أنبوبين اختبار. يتم سكب نفس الكمية من 1،12-benzperylene في كل أنبوب اختبار كما هو الحال في أنبوب الاختبار مع العينة. يتم تسجيل أطياف كل محلول مرتين في نطاق الطول الموجي 401-409 نانومتر.

في الوقت نفسه ، من الضروري التأكد من أن موضع قلم المسجل بطول موجة 401 نانومتر ثابت على نفس المستوى في جميع الحالات.

بعد ذلك ، يتم تحديد شدة الخطوط المميزة لـ benz (a) pyrene عند 403 نانومتر و 1،12-benzperylene عند 406.3 نانومتر (W و H 2 ، على التوالي) من مخططات الطيف. في الحسابات تأخذ متوسط ​​القيمة. احسب K st \ u003d H ^ H 2 لكل تركيز من benzo (a) pyrene.

يتم حساب تركيز كتلة benzo (a) pyrene في المحلول الذي تم تحليله c، g / cm 3 بالصيغة التالية:

s st * K / K st ، (1)

حيث c st هو تركيز benzo (a) pyrene في المحلول القياسي ، g / cm 3 ؛

K هو المعامل الموجود من مخطط الطيف للمحلول الذي تم تحليله مع إضافة 1،12-benzperylene ؛

K C1 - المعامل الموجود من الرسوم الطيفية لمحلول معياري من benz (a) pyrene مع إضافة 1،12-benzperylene ، تكون قيمته أقرب في القيمة إلى معامل المحلول الذي تم تحليله مع الإضافة المقابلة لـ 1 ، 12-بنزبيريلين.

يتم إجراء تحديدين متوازيين وفي نفس الوقت تجربة تحكم ، والتي يتم إجراؤها خلال جميع مراحل التحليل باستخدام جميع الكواشف وفقًا للإجراء ، ولكن بدون عينة من المنتج.

4.4 معالجة النتائج

يتم حساب جزء الكتلة من benz (a) pyrene L) ،٪ ، X و X 2 ، mg / kg ، بواسطة الصيغ:

= (s - er) ■ m l V ■ 100 = (s - er) ■ t 1 ■ V (2)

3 ر 2 ■ ر ■ 1000 ■ 1000 طن 2 ■ ر "

_ (s - s 0) ■ V ■ t 1 (3)

حيث c هو تركيز benzo (a) pyrene ، الذي تم تحديده وفقًا لـ 4.3.2 أو 4.3.3 في محلول (مستخلص) المنتج الذي تم تحليله وفقًا لـ 4.3.1 ، ميكروغرام / سم 3 ؛ c 0 هو تركيز benzo (a) pyrene في محلول تجربة التحكم التي تم الحصول عليها وفقًا لـ 4.3.1، ميكروغرام / سم 3 ؛ V هو حجم محلول benzo (a) pyrene المعزول من العينة التي تم تحليلها للمنتج ، cm 3 ؛

/ «I - وزن المستخلص المعزول من المنتج الذي تم تحليله ، g؛ م 2 - يتم تطبيق كتلة المستخلص على شريط عريض من اللوحة ، ز ؛ t هي كتلة عينة المنتج ، g.

يتم تقريب النتيجة إلى الرقم الثاني المهم.

للنتيجة النهائية للتحديد ، يتم أخذ المتوسط ​​الحسابي لاثنين من التحديدات المتوازية مع نفس العدد من الأرقام المعنوية.

إذا كان التناقض بين نتائج التحديدات المتوازية لا يتجاوز | A) - X 2 \<

< 0,01яЖ, где Xi, Х 2 и X- результаты первого и второго параллельных определений и их среднеарифметическое, a d- норматив контроля сходимости, то среднеарифметическое X принимают за результат анализа. В противном случае анализ повторяют. Значение норматива контроля сходимости d приведено в таблице 1.

بناءً على نتيجة التحليل X وقيمة الخطأ النسبي d الوارد في الجدول 1 ، يتم حساب الخطأ المطلق A = 0 ، (SD mg / kg أو٪).

يتم تقديم نتيجة التحليل على شكل (X ± A) ، مجم / كجم أو ٪ عند P = 0.95.

4.5 التحكم في دقة نتائج التحليل

يشمل التحكم التشغيلي الداخلي (IQA) لجودة نتائج التحليل التحكم في التقارب ، والتكاثر ، ودقة نتائج التحليل.

4.5.1 يتم التحقق من تكرار قرارات النسخ المتماثل لكل عينة تم تحليلها وفقًا لـ 4.4.

4.5.2 للرقابة الداخلية على التكاثر ، يتم استخدام عينات العمل. يتم تقسيم العينة إلى جزأين متساويين ويتم تحليلها وفقًا للمنهجية في مختبرات مختلفة أو في نفس المختبر ، مع تغيير ظروف التحليل قدر الإمكان ، أي باستخدام مجموعات مختلفة من الأواني الحجمية ، ويتم إجراء التحليلات في أيام مختلفة أو من قبل اثنين من المحللين المختلفين.

تعتبر إمكانية استنساخ تحليلات التحكم مرضية إذا \ X ^ - X 2 \<

< 0,01 DX, где X/, Х 2 и X- результаты анализа одной и той же пробы, полученные в разных лабораториях или при варьирующих условиях в одной лаборатории и их среднеарифметическое значение, D - значение норматива внутреннего оперативного контроля воспроизводимости. Значение норматива D приведено в таблице 1.

GOST R 51650-2000

معدل تكرار التحكم في التكاثر مرة واحدة على الأقل كل أسبوعين.

الجدول 1 - نطاق القياس وقيمة خاصية الخطأ النسبي ومعايير التحكم التشغيلي للمكون العشوائي للخطأ النسبي (التقارب وإمكانية تكرار النتائج) بمستوى ثقة P = 0.95

4.5.3 للتحكم في الدقة ، استخدم عينات عمل مع إضافة معروفة من benzo (a) pyrene. تنقسم العينة إلى جزأين متساويين ، يتم تحليل أحدهما وفقًا للإجراء ؛ في الثانية ، يتم إدخال إضافة معروفة من benzo (a) pyrene ثم يتم تحليلها أيضًا وفقًا للإجراء. يجب أن تكون قيمة المادة المضافة 50 - 150٪ من محتوى البنزابيرين في العينة التي تم تحليلها.

تعتبر دقة تحليلات التحكم مرضية إذا \ Xy-X-c \< 0,01 К, где Ху, Xи с - результаты контрольных анализов пробы с добавкой бенз(а)пирена, реальной пробы и величина добавки бенз(а)пирена, соответственно; К- норматив оперативного контроля точности. Норматив оперативного контроля точности рассчитывают по формулам: при проведении внутрилабораторного контроля (Р = 0,90)

K \ u003d 0.84 V (A X]) 2 + (A x) 2 ؛ (أربعة)

أثناء التحكم الخارجي (P = 0.95)

K \ u003d V (A ^) 2 + (A z) 2 ، (5)

حيث A ^ + A x هي قيم خاصية الخطأ المقابلة لتركيز الكتلة

benzo (a) pyrene في العينة مع المادة المضافة وفي العينة الحقيقية ؛

Ay ، \ u003d 0.01 Xy و A x \ u003d 0.01d x X ، حيث Xy و X هما الكسر الكتلي للبنزو (أ) البيرين في العينة مع إضافة

وفي عينة حقيقية ،٪ أو مجم / كجم.

ترد قيمة الخطأ النسبي d x (8y) في الجدول 1.

يتم إجراء التحكم في دقة التحليل مرة واحدة على الأقل شهريًا ، وكذلك عند تغيير الكواشف أو بعد انقطاع طويل في العمل.

إذا تم تجاوز معايير التحكم التشغيلي للدقة ، يتم إجراء تحليلات متكررة. إذا تم تجاوز المعايير المحددة بشكل متكرر ، يتم تعليق التحليلات ، ويتم توضيح الأسباب التي تؤدي إلى نتائج غير مرضية ، ويتم استبعادها.

يتم تسجيل نتائج WQA في مجلة خاصة.

5 تقنيات كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء وقياس التألق الطيفي في درجة حرارة الغرفة

يكمن جوهر الطريقة في استخراج الهيدروكربونات ، بما في ذلك البنزو (أ) البيرين ، مع الهكسان من منتج سبق معالجته بمحلول كحول من هيدروكسيد البوتاسيوم ، وعزل جزء من الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات المحتوية على بنزو (أ) بيرين ، وتنقية الجزء الناتج من الشوائب المتداخلة على عمود باستخدام Sephadex وفي طبقة رقيقة من السليلوز الأسيتيل ، متبوعًا بتحديد كمي للبنزو (أ) البيرين المعزول بواسطة كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء أو قياس طيفي في درجة حرارة الغرفة.

نطاق القيم المحددة لكسر كتلة benzo (a) pyrene في المنتجات التي تم تحليلها باستخدام طريقة اللوني السائل عالي الأداء وطريقة القياس الطيفي عند درجة حرارة الغرفة هو 0.0001-0.002 mg / kg أو 0.1 x 10 -7 - 2.0 × 10-7٪. النطاق الأمثل لتركيزات الكتلة المحددة من benzo (a) pyrene في المحلول عند استخدام طريقة الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء هو 0.01-0.02 ميكروغرام / سم 3 ، عند استخدام طريقة القياس الطيفي - 0.02-0.2 ميكروغرام / سم 3.

مقالات ذات صلة
كيف تقلى الفلفل في مقلاة في المنزل
كيف تقلى الفلفل في مقلاة في المنزل
فلفل رومي محمص
فلفل رومي محمص
وصفة حلوى بانا كوتا كلاسيك ، شوكولاتة ، فراولة ، حليب ، دايت
وصفة حلوى بانا كوتا كلاسيك ، شوكولاتة ، فراولة ، حليب ، دايت
بانا كوتا بالفراولة (الوصفة الكلاسيكية) طريقة التحضير: خطوة بخطوة
بانا كوتا بالفراولة (الوصفة الكلاسيكية) طريقة التحضير: خطوة بخطوة
شوربة الفطر مع الفطر الأبيض المجمد
شوربة الفطر مع الفطر الأبيض المجمد
لفائف الملفوف النباتية البسيطة
لفائف الملفوف النباتية البسيطة
فطيرة صوم في مقلاة بدون فرن
فطيرة صوم في مقلاة بدون فرن
الوصفة: لحم الخنزير المطهو ​​ببطء - مع الزنجبيل وصفات لحم الخنزير
الوصفة: لحم الخنزير المطهو ​​ببطء - مع الزنجبيل وصفات لحم الخنزير