जीव विज्ञान में मदद के अनुभव कृपया प्रोटीन का पता लगाने कार्बोहाइड्रेट का पता लगाने वसा का पता लगाने के बारे में पूछें। थीम “भोजन की गुणवत्ता का विश्लेषण। परीक्षण नमूने में प्रोटीन का पता लगाना

लक्ष्य:प्रोटीन के गुणों का अध्ययन करें।

उपकरण और अभिकर्मक:- प्रोटीन समाधान;

कॉपर सल्फेट का घोल;

लीड एसीटेट समाधान;

परखनली

प्रगति:

प्रोटीन विघटन

कई प्रोटीन पानी में घुल जाते हैं, जो प्रोटीन अणु की सतह पर मुक्त हाइड्रोफिलिक समूहों की उपस्थिति के कारण होता है। पानी में प्रोटीन की घुलनशीलता प्रोटीन की संरचना, माध्यम की प्रतिक्रिया और इलेक्ट्रोलाइट्स की उपस्थिति पर निर्भर करती है। अम्लीय गुणों वाले प्रोटीन अम्लीय वातावरण में बेहतर घुलते हैं, जबकि मूल गुणों वाले प्रोटीन क्षारीय वातावरण में बेहतर तरीके से घुलते हैं।

एल्ब्यूमिन आसुत जल में अत्यधिक घुलनशील होते हैं, जबकि ग्लोब्युलिन केवल इलेक्ट्रोलाइट्स की उपस्थिति में पानी में घुलनशील होते हैं।

सहायक ऊतकों (कोलेजन, केराटिन, इलास्टिन, आदि) के प्रोटीन पानी में नहीं घुलते हैं।

उपकरण और अभिकर्मक:- अंडे सा सफेद हिस्सा;

आसुत जल;

पोटेशियम क्लोराइड समाधान;

केरातिन (ऊन या बाल)।

प्रगति:

बिना पतला अंडे की सफेदी की 2 बूंदों में 1 मिली डिस्टिल्ड वॉटर मिलाएं और मिलाएं। इस मामले में, एग एल्ब्यूमिन घुल जाता है, और एग ग्लोब्युलिन एक छोटे अवक्षेप के रूप में अवक्षेपित हो जाता है।

पानी में घुलनशीलता की जाँच करें और ऊन और बालों में निहित केराटिन प्रोटीन के 5% पोटेशियम क्लोराइड घोल की जाँच करें।

कार्य के परिणामों को तालिका के रूप में व्यवस्थित करें:

अल्कोहल के साथ प्रोटीन विकृतीकरण.

उपकरण और अभिकर्मक: प्रोटीन समाधान; इथेनॉल, टेस्ट ट्यूब

गर्म करने पर प्रोटीन का अवक्षेपण।

प्रोटीन थर्मोलैबाइल यौगिक होते हैं और जब 50-60 डिग्री सेल्सियस से ऊपर गरम किया जाता है, तो विकृतीकरण होता है। थर्मल विकृतीकरण का सार पॉलीपेप्टाइड श्रृंखला की एक विशिष्ट संरचना की तैनाती और प्रोटीन अणुओं के जलयोजन खोल का विनाश है, जो उनकी घुलनशीलता में उल्लेखनीय कमी से प्रकट होता है। सबसे पूर्ण और सबसे तेज़ निक्षेपण आइसोइलेक्ट्रिक बिंदु पर होता है, अर्थात। माध्यम के ऐसे पीएच मान पर, जब प्रोटीन अणु का कुल चार्ज शून्य होता है, क्योंकि इस मामले में प्रोटीन कण सबसे कम स्थिर होते हैं। अम्लीय गुणों वाले प्रोटीन थोड़े अम्लीय वातावरण में अवक्षेपित होते हैं, और मूल गुणों वाले प्रोटीन थोड़े क्षारीय वातावरण में अवक्षेपित होते हैं। अत्यधिक अम्लीय या प्रबल क्षारीय विलयनों में, गर्म होने पर विकृतीकृत प्रोटीन अवक्षेपित नहीं होता है, क्योंकि इसके कणों को रिचार्ज किया जाता है और पहले मामले में एक सकारात्मक चार्ज होता है, और दूसरे में एक नकारात्मक चार्ज होता है, जो समाधान में उनकी स्थिरता को बढ़ाता है।

उपकरण और अभिकर्मक:- 1% अंडे का सफेद घोल;

1% समाधान सिरका अम्ल;

10% एसिटिक एसिड समाधान;

10% सोडियम हाइड्रॉक्साइड समाधान;

4 टेस्ट ट्यूब, होल्डर, स्पिरिट लैंप।

एक अनुभव

परिणाम

1% अंडे की सफेदी के घोल की 10 बूंदों को चार नंबर वाली परखनलियों में डाला जाता है। a) पहली ट्यूब को उबलने के लिए गर्म किया जाता है। बी) दूसरी ट्यूब में 1% एसिटिक एसिड के घोल की 1 बूंद डालें और उबलने के लिए गर्म करें। ग) तीसरी ट्यूब में 10% एसिटिक एसिड के घोल की 1 बूंद डालें और उबलने के लिए गर्म करें। d) चौथी ट्यूब में 10% सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल की 1 बूंद डालें और उबलने के लिए गर्म करें।

a) प्रोटीन का घोल बादल बन जाता है, लेकिन चूंकि विकृत प्रोटीन कणों में आवेश होता है, इसलिए वे अवक्षेपित नहीं होते हैं। यह इस तथ्य के कारण है कि अंडे का सफेद भाग होता है अम्लीय गुण(इसका आइसोइलेक्ट्रिक बिंदु पीएच 4.8 है) और तटस्थ माध्यम में नकारात्मक रूप से चार्ज किया जाता है; बी) प्रोटीन अवक्षेपित हो जाता है क्योंकि प्रोटीन समाधान आइसोइलेक्ट्रिक बिंदु पर पहुंचता है और प्रोटीन अपना चार्ज खो देता है; ग) वर्षा नहीं होती है, क्योंकि एक जोरदार अम्लीय माध्यम में प्रोटीन कण एक सकारात्मक चार्ज प्राप्त करते हैं (समाधान में प्रोटीन स्थिरता के कारकों में से एक संरक्षित है); d) कोई अवक्षेप नहीं बनता है, क्योंकि क्षारीय वातावरण में प्रोटीन कणों का ऋणात्मक आवेश बढ़ जाता है।

परिणाम निकालना।_____________________________

कार्य पूरा करने की शर्तें

1. कार्य का स्थान (समय) : कक्षा के समय के दौरान कक्षा में असाइनमेंट पूरा किया जाता है

2. अधिकतम समयकाम पूरा होना: ____ 90 _______ मि.

3. आप उपयोग कर सकते हैं पाठ्यपुस्तक, व्याख्यान नोट्स

शैक्षिक उपलब्धि पैमाना:

मूल्यांकन के लिए मानदंड: 90% से अधिक काम का प्रदर्शन - ग्रेड "5",

70-90% - ग्रेड "4",

50 -70% - ग्रेड "3",

50% से कम - स्कोर "2"।

व्यावहारिक कार्य#1

किसी दिए गए सांद्रण का विलयन तैयार करना।

लक्ष्य:

एक निश्चित सान्द्रता के लवणों का विलयन तैयार करना।
तराजू और मापने के बर्तनों का उपयोग करके दी गई सांद्रता का विलयन बनाना सीखें।

उपकरण:

कांच का रंग;
50 मिलीलीटर का एक गिलास;
रबर टिप के साथ कांच की छड़;
मापने का सिलिंडर;
तराजू;
ठंडा उबला हुआ पानी.
नमक;

सैद्धांतिक भाग

समाधान-यह एक सजातीय प्रणाली है जिसमें विलायक, विलेय और उनकी बातचीत के उत्पाद शामिल हैं। विलायक आमतौर पर वह पदार्थ होता है जो शुद्ध फ़ॉर्मसमाधान के रूप में एकत्रीकरण की एक ही स्थिति है, या अधिक मात्रा में मौजूद है।

एकत्रीकरण की स्थिति के अनुसार, समाधान प्रतिष्ठित हैं: तरल, ठोस, गैसीय।विलायक और विलेय के अनुपात के अनुसार: तनु, सांद्र, संतृप्त, असंतृप्त, अतिसंतृप्त। एक समाधान की संरचना आमतौर पर इसमें विलेय की सामग्री के रूप में व्यक्त की जाती है द्रव्यमान अनुपात, प्रतिशत सांद्रता और दाढ़।

द्रव्यमान अनुपात ( विमाहीन मात्रा) भंग के द्रव्यमान का अनुपात है
पूरे समाधान के द्रव्यमान के लिए पदार्थ:

डब्ल्यू पीपीएम = एम रस्ट। पदार्थ / एम समाधान.

प्रतिशत एकाग्रता (%) यह दर्शाता है कि 100 ग्राम में कितने ग्राम विलेय c होता है। समाधान :

डब्ल्यू% = एम रस्ट। पदार्थ 100%/एम समाधान

(पाठ्यपुस्तक ओएस गैब्रिएलियन, आईजी ओस्ट्रोमोव रसायन विज्ञान, एम। "अकादमी" 2013, पृष्ठ 57)

दाढ़ एकाग्रता, या मोलरिटी (mol / लीटर) एक मान है जो दर्शाता है कि 1 लीटर घोल में विलेय के कितने मोल होते हैं:

सेमी = मी रस्ट। चीज़ें/श्रीमान (पौधे पदार्थ) वी समाधान .

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भागीदारी की लागत 290 रूबल है।

एक साधारण रसोई और एक वैज्ञानिक प्रयोगशाला में बहुत कुछ समान है। बर्तन और धूपदान में, जटिल जैव रासायनिक प्रक्रियाएं. उनमें से कुछ को घर पर पुन: प्रस्तुत किया जा सकता है और एक वास्तविक रसायनज्ञ की तरह महसूस किया जा सकता है
आज हम दूध के संघटन का अध्ययन करेंगे। सभी बच्चे जानते हैं कि दूध बहुत होता है उपयोगी उत्पाद. सच है, हर किसी को दूध पसंद नहीं होता है। लेकिन इससे इसकी उपयोगिता कम नहीं होती है। याद रखें कि स्तनधारी अपने बच्चों को दूध पिलाते हैं। इसलिए, यह अत्यधिक पौष्टिक और पचाने में आसान है। दूध में एक साथ भोजन के सभी मुख्य पदार्थ होते हैं - ये प्रोटीन, वसा और कार्बोहाइड्रेट हैं। सबसे बड़ी संख्यावसा ऊर्जा प्रदान करते हैं। दूध में मौजूद कार्बोहाइड्रेट को लैक्टोज कहते हैं। लेकिन ग्लूकोज या सुक्रोज के विपरीत ( खाद्य चीनी), लैक्टोज में लगभग कोई मीठा स्वाद नहीं होता है।

ज्यादातर लोग गाय का दूध खाते हैं। लेकिन जानवरों में दूध की संरचना अलग होती है। तालिका का विश्लेषण करें और प्रश्नों के उत्तर दें।

आइए अब दूध के साथ कुछ प्रयोग करते हैं।

आप दूध का एक नमूना ले सकते हैं, लेकिन कई नमूनों की तुलना करना कहीं अधिक दिलचस्प है। विभिन्न निर्माता. अगर किसी के पास दुकान के दूध और अपनी ही गाय के दूध या खेत की गायों के दूध की तुलना करने का अवसर है, तो यह बहुत दिलचस्प है।

दुर्भाग्य से, कई कारखानों में, दूध अक्सर मिल्क पाउडर से बनाया जाता है या सामान्य दूध में मिलाया जाता है। ताजा दूध. इससे दूध के कुछ गुण बदल सकते हैं।

आपको आवश्यकता होगी: दूध के कई नमूने (निर्माता का नाम लिखना सुनिश्चित करें), कई टेस्ट ट्यूब (आप रसायन विज्ञान के शिक्षक से पूछ सकते हैं, यदि यह संभव नहीं है, तो छोटे गिलास या गिलास भी लें), एसिटिक एसिड, नीला विट्रियल, थोड़ा क्षार घोल या वाशिंग सोडा, पिपेट (फार्मेसियों में उपलब्ध)।

अनुभव 1. दूध में वसा का निर्धारण।

पर गाय का दूधआमतौर पर 3-4% वसा होता है। आप शायद पहले से ही जानते हैं कि वसा पानी के साथ नहीं मिलती है। लेकिन दूध में यह फैट तुरंत पानी से अलग नहीं होता है, यह तभी देखा जा सकता है जब दूध ज्यादा देर तक खड़ा रहे। फिर वसा सतह पर तैरने लगेगी। यह क्रीम होगी। दूध में वसादूध में ग्लोब्यूल्स के रूप में पाया जाता है जो पानी के साथ तेल में पानी का इमल्शन बनाते हैं। वसा ग्लोब्यूल्स प्रोटीन के मजबूत और लोचदार गोले द्वारा संरक्षित होते हैं, इसलिए वे टक्कर के दौरान एक दूसरे से चिपकते नहीं हैं।

प्रत्येक दूध के नमूने की एक बूंद फिल्टर पेपर पर लगाएं। (बूंदों को वही रखने की कोशिश करें।) जब वे सूख जाएं, तो प्रत्येक स्थान के व्यास को एक शासक के साथ मापें। यह जितना बड़ा है, अधिक सामग्रीदूध में वसा। चूंकि बेचे गए दूध में वसा की मात्रा लगभग समान होती है, इसलिए आप रुचि के लिए क्रीम ले सकते हैं। उनमें बहुत अधिक वसा होनी चाहिए।

अनुभव 2. दूध में प्रोटीन का पता लगाना

एक परखनली में कुछ मिलीलीटर (मिलीलीटर) दूध डालें और सावधानी से कॉपर सल्फेट (हल्का नीला) के कमजोर घोल की समान मात्रा और क्षार या वाशिंग सोडा का थोड़ा सा घोल दीवारों पर डालें और मिलाएँ। एक बैंगनी रंग दिखाई देता है। यह अध्ययन के तहत उत्पाद में प्रोटीन की उपस्थिति को इंगित करता है।

दूध में कई तरह के प्रोटीन होते हैं। मुख्य प्रोटीन कैसिइन है। यह कैसिइन से है कि पनीर बनता है। जब दूध ताजा होता है, तो सभी प्रोटीन घुल जाते हैं। लेकिन अगर दूध खट्टा है, तो आप ध्यान दें कि यह गाढ़ा हो गया है - यह दही वाले दूध में बदल गया है। यदि इसे गर्म किया जाता है, तो प्रोटीन का अवक्षेप अवक्षेपित हो जाता है। इस तरह से दही बनता है। लेकिन अगर आप दूध के खट्टा होने तक इंतजार नहीं करना चाहते हैं, तो आप इसमें मिला सकते हैं खाद्य अम्ल- एसिटिक या साइट्रिक एसिड और कैसिइन का अवक्षेप प्राप्त करें।

अनुभव 3. दूध में कैसिइन की उपस्थिति का निर्धारण।

एक गिलास में 5 बड़े चम्मच दूध डालें, 1 बड़ा चम्मच एसिटिक एसिड (9%), या कुछ बूंदें डालें सिरका सार, मिश्रण। आप सफेद गुच्छे के गठन को देख सकते हैं। यह कैसिइन है।

अनुभव 4. मट्ठा प्राप्त करना।

जब कैसिइन अवक्षेपित होता है, तो अन्य प्रोटीन और लैक्टोज तरल भाग - मट्ठा में रहते हैं। सीरम प्राप्त करने के लिए, अवक्षेप को फ़िल्टर किया जाना चाहिए। ऐसा करने के लिए एक छोटा गिलास लें। इसमें एक कीप लगाएं। इसमें धुंध या पट्टी की कई परतों से एक फिल्टर डालें और परिणामी दही के साथ कीप पर दूध डालें। पनीर (कैसिइन) फिल्टर पर रहेगा, और हम मट्ठा के साथ अन्य प्रयोग करेंगे।

अनुभव 5. सीरम में प्रोटीन का पता लगाना।

यह आवश्यक है, जैसा कि प्रयोग 2 में है, कॉपर सल्फेट और क्षार के घोल को कई मिलीलीटर सीरम में मिलाएं और मिलाएं। बैंगनी रंग इंगित करता है कि कैसिइन के अलग होने के बाद कई अन्य प्रोटीन मट्ठे में रहते हैं। इसलिए, मट्ठा भी एक उपयोगी और पौष्टिक उत्पाद है।

अनुभव 6. दूध में कार्बोहाइड्रेट का पता लगाना।

थोड़ा सा मट्ठा एक कप या तश्तरी में डालना चाहिए, जिसे आग पर गर्म किया जा सकता है, और तरल वाष्पित हो जाता है। जैसे ही तरल वाष्पित होता है, मट्ठा जलता है और जली हुई चीनी के समान एक मीठी गंध विकसित करता है। हमने साबित किया है कि दूध में कार्बोहाइड्रेट होता है।

अनुभव 7. सहानुभूति स्याही।

यह उन द्रवों का नाम है जो लिखे जाने पर कागज पर कोई रंगीन निशान नहीं छोड़ते हैं। पाठ को विशेष प्रसंस्करण के बाद ही पढ़ा जा सकता है - एक निश्चित पदार्थ के साथ गर्म करना या गीला करना। गुप्त लेखन के लिए दूध उत्तम हैतथा। इसलिए, अंतिम कार्य यह होगा - दूध के साथ हमारी प्रतिस्पर्धा के बारे में एक समीक्षा लिखें, ध्यान से इस कागज की शीट को बहुत गर्म लोहे से तब तक इस्त्री करें जब तक कि पाठ दिखाई न दे। उसका एक फोटो लें और फोटो को उत्तर तालिका के नीचे रखें।

अनुसंधान कार्य।

हम कई प्रकार के दूध की तुलना कई संकेतकों के अनुसार करने का प्रस्ताव करते हैं - विभिन्न निर्माताओं से, घर का बना और स्टोर-खरीदा दोनों।

आवश्यक प्रयोग करें और पूरा करें मेज़।

प्रश्नोत्तर तालिका

1.	किसका दूध अधिक पौष्टिक होता है - कुत्ते या गाय और क्यों?
2.	सबसे ज्यादा क्यों है मोटा दूध(40% तक वसा) व्हेल और डॉल्फ़िन में
3.	बच्चे अक्सर पूछते हैं: "गाय खाने से दूध सफेद क्यों होता है" हरी घास? इस प्रश्न का उत्तर देने का प्रयास करें।
4.	क्या आपने सभी दूध के नमूनों, यानी पनीर से कैसिइन तलछट प्राप्त करने का प्रबंधन किया?
5.	दूध में कैसिइन के अलावा और कौन से प्रोटीन होते हैं?
6.	वयस्कों के रूप में कई लोग दूध का सेवन क्यों नहीं कर पाते हैं, क्योंकि इससे उन्हें अपच होता है? इस प्रश्न का उत्तर किताबों या इंटरनेट में खोजें।
7.	दूध से कौन से उत्पाद बनते हैं?

रंग प्रतिक्रियाओं का महत्व यह है कि वे जैविक तरल पदार्थों, समाधानों में प्रोटीन की उपस्थिति का पता लगाना और विभिन्न प्राकृतिक प्रोटीनों की अमीनो एसिड संरचना को स्थापित करना संभव बनाते हैं। इन प्रतिक्रियाओं का उपयोग प्रोटीन और उसके अमीनो एसिड के गुणात्मक और मात्रात्मक निर्धारण दोनों के लिए किया जाता है। कुछ प्रतिक्रियाएं न केवल प्रोटीन में, बल्कि अन्य पदार्थों में भी निहित होती हैं, उदाहरण के लिए, फिनोल, जैसे टाइरोसिन, मिलन के अभिकर्मक के साथ एक गुलाबी-लाल रंग देता है, इसलिए प्रोटीन की उपस्थिति स्थापित करने के लिए किसी एक प्रतिक्रिया को पूरा करना पर्याप्त नहीं है।

रंग प्रतिक्रियाएं दो प्रकार की होती हैं: 1) सार्वभौमिक - बायोरेट (सभी प्रोटीनों के लिए) और निनहाइड्रिन (सभी के लिए .) एक-एमिनो एसिड और प्रोटीन); 2) विशिष्ट - केवल प्रोटीन अणु में और व्यक्तिगत अमीनो एसिड के समाधान में कुछ अमीनो एसिड के लिए, उदाहरण के लिए, फोहल प्रतिक्रिया (कमजोर रूप से बाध्य सल्फर युक्त अमीनो एसिड के लिए), मिलन प्रतिक्रिया (टायरोसिन के लिए), सकागुची प्रतिक्रिया ( आर्जिनिन के लिए), आदि।

प्रोटीन और अमीनो एसिड के लिए रंग प्रतिक्रिया करते समय, आपको पहले निम्नलिखित तालिका तैयार करनी चाहिए:

प्रोटीन के लिए रंग प्रतिक्रियाएं (गुणात्मक प्रतिक्रियाएं)

प्रोटीन के लिए रंग प्रतिक्रियाएं प्रयोग 1. बायोरेट प्रतिक्रिया।

बाय्यूरेट प्रतिक्रिया- बिना किसी अपवाद के हर चीज के लिए उच्च गुणवत्ता गिलहरी, साथ ही उनके अधूरे उत्पाद हाइड्रोलिसिसजिसमें कम से कम दो पेप्टाइड बॉन्ड्स.

विधि का सिद्धांत। बायोरेट प्रतिक्रिया प्रोटीन (- CO - NH -) में पेप्टाइड बॉन्ड की उपस्थिति के कारण होती है, जो एक क्षारीय वातावरण में कॉपर सल्फेट (II) लाल-बैंगनी रंग के तांबे के लवण के साथ बनती है। परिसर. कुछ गैर-प्रोटीन पदार्थों द्वारा भी बायोरेट प्रतिक्रिया दी जाती है, उदाहरण के लिए ब्यूरेट(एनएच 2-सीओ-एनएच-सीओ-एनएच 2), ऑक्सामाइड(एनएच 2 सीओ-सीओ-एनएच 2), श्रृंखला अमीनो अम्ल (हिस्टडीन, सेरीन, थ्रेओनाइन, asparagine).

ग्लाइसीन के साथ बायोरेट प्रतिक्रिया

काम का क्रम।

जांच किए गए 1% प्रोटीन समाधान के 1 मिलीलीटर में 10% घोल की समान मात्रा डाली जाती है। सोडियम हाइड्रॉक्साइड(NaOH) क्षार और फिर 1% घोल की 2-3 बूंदें कॉपर सल्फेट(क्यूएसओ 4)। कॉपर सल्फेट का पतला, लगभग रंगहीन घोल।

सकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, लाल या नीले रंग के रंग के साथ एक बैंगनी रंग दिखाई देता है।

अनुभव 2.प्रतिक्रिया"कमजोर रूप से बाध्य सल्फर" के लिए।

विधि का सिद्धांत। यह सिस्टीन और सिस्टीन की प्रतिक्रिया है। क्षारीय हाइड्रोलिसिस के दौरान, सिस्टीन और सिस्टीन में "कमजोर रूप से बाध्य सल्फर" आसानी से अलग हो जाता है, जिसके परिणामस्वरूप हाइड्रोजन सल्फाइड का निर्माण होता है, जो क्षार के साथ प्रतिक्रिया करके सोडियम या पोटेशियम सल्फाइड देता है। जब लेड (II) एसीटेट मिलाया जाता है, तो लेड (II) सल्फाइड का एक ग्रे-ब्लैक अवक्षेप बनता है।

काम का क्रम।

एक परखनली में 1 मिलीलीटर बिना पतला चिकन प्रोटीन डालें, 2 मिलीलीटर 20% सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल डालें। मिश्रण को धीरे से उबाला जाता है (ताकि मिश्रण फेंका न जाए)।

इस मामले में, अमोनिया जारी किया जाता है, जिसे टेस्ट ट्यूब के उद्घाटन के लिए लाए गए गीले लिटमस पेपर के नीले रंग से पता लगाया जाता है (दीवार को न छूएं)। परिणामी मामूली अवक्षेप उबलने पर घुल जाता है, और फिर 0.5 मिली लेड (II) एसीटेट घोल मिलाया जाता है। लेड (II) सल्फाइड का एक धूसर-काला अवक्षेप देखा गया है:

प्रतिक्रिया रसायन:

काला तलछट

एक परखनली में 1 मिली डालें। undiluted चिकन प्रोटीन 2 मिलीलीटर जोड़ें। क्षार का केंद्रित घोल, कई बॉयलर डालें। सोडियम प्लंबाइट का घोल गर्म घोल में मिलाया जाता है - एक पीला-भूरा या काला धुंधलापन. (सोडियम प्लंबाइट निम्नानुसार तैयार किया जाता है: एक क्षार घोल को 1 मिली लेड एसीटेट में ड्रॉपवाइज जोड़ा जाता है जब तक कि लेड हाइड्रॉक्साइड जो पहले घुल जाता है)।

यदि प्रोटीन अणु में सल्फर युक्त अमीनो एसिड (सिस्टीन, सिस्टीन) होते हैं, तो सल्फर धीरे-धीरे इन अमीनो एसिड से ऑक्सीकरण अवस्था - 2 में आयन के रूप में अलग हो जाता है, जिसकी उपस्थिति का पता लेड आयन द्वारा लगाया जाता है। , जो सल्फर आयन के साथ काला अघुलनशील लेड सल्फाइड बनाता है:

पीबी (सीएच 3 सीओओ) 2 + 2नाओएच पीबी (ओएच) 2 + 2 सीएच 3 कूना,

पीबी (ओएच) 2 + 2नाओएच ना 2 पीबीओ 2 + एच 2 ओ,

ना 2 एस + ना 2 पीबीओ 2 + 2 एच 2 ओ पीबीएस + 4NaOH।

अनुभव 3. प्रोटीन की ज़ैंटोप्रोटीन प्रतिक्रिया।

विधि का सिद्धांत। इस अभिक्रिया का उपयोग ऐरोमैटिक रेडिकल्स वाले अमीनो एसिड का पता लगाने के लिए किया जाता है। टायरोसिन, ट्रिप्टोफैन, फेनिलएलनिन, जब केंद्रित नाइट्रिक एसिड के साथ बातचीत करते हैं, तो नाइट्रो डेरिवेटिव बनाते हैं जिनका रंग पीला होता है। एक क्षारीय वातावरण में, इन a-एमिनो एसिड के नाइट्रो डेरिवेटिव नारंगी रंग के लवण देते हैं। जिलेटिन, उदाहरण के लिए, जिसमें कोई सुगंधित अमीनो एसिड नहीं होता है, एक ज़ैंटोप्रोटीन परीक्षण नहीं देता है।

काम का क्रम।

10% चिकन अंडे प्रोटीन समाधान के 1 मिलीलीटर में, 0.5 मिलीलीटर केंद्रित नाइट्रिक एसिड जोड़ें। प्रोटीन जमावट के परिणामस्वरूप, ट्यूब की सामग्री में एक सफेद अवक्षेप या मैलापन बनता है। गर्म होने पर घोल और अवक्षेप चमकीले पीले हो जाते हैं। इस मामले में, हाइड्रोलिसिस के परिणामस्वरूप अवक्षेप लगभग पूरी तरह से भंग हो जाता है। ठंडा होने के बाद, 20% सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल का 1-2 मिलीलीटर मिलाया जाता है (जब तक कि घोल का नारंगी रंग न दिखाई दे)।

टाइरोसिन रेडिकल पर ज़ैंटोप्रोटीन प्रतिक्रिया के तंत्र पर विचार करें:

प्रतिक्रिया की रसायन शास्त्र:

प्रयोग करना: एक निष्कर्ष निकालें और प्रतिक्रिया समीकरण लिखें।

अनुभव 4. एडमकेविच की प्रतिक्रिया (प्रोटीन में ट्रिप्टोफैन की उपस्थिति के लिए)।

विधि का सिद्धांत। ग्लाइऑक्सिलिक और सल्फ्यूरिक एसिड की उपस्थिति में ट्रिप्टोफैन युक्त प्रोटीन लाल-बैंगनी रंग देते हैं। प्रतिक्रिया रंगीन संघनन उत्पादों को बनाने के लिए ग्लाइऑक्साइलिक एसिड (जो केंद्रित एसिटिक एसिड के लिए एक अशुद्धता है) के एल्डिहाइड के साथ एक अम्लीय वातावरण में बातचीत करने के लिए ट्रिप्टोफैन की क्षमता पर आधारित है। प्रतिक्रिया समीकरण के अनुसार आगे बढ़ती है:

जिलेटिन यह प्रतिक्रिया नहीं देता है, क्योंकि। इसमें ट्रिप्टोफैन नहीं होता है। रंग ग्लाइऑक्साइलिक एसिड के साथ ट्रिप्टोफैन की प्रतिक्रिया से आता है, जो हमेशा एसिटिक एसिड में अशुद्धता के रूप में मौजूद होता है।

ट्रिप्टोफैन के लिए एक ही प्रतिक्रिया एसिटिक एसिड के बजाय फॉर्मलाडेहाइड का उपयोग करके की जा सकती है, केंद्रित एच 2 एसओ 4 का 2.5% समाधान। घोल को 2-3 मिनट के बाद मिलाएं। 5% सोडियम नाइट्राइट की 10 बूंदों को मिलाते हुए मिलाएं। एक तीव्र बैंगनी रंग विकसित होता है, जो पर आधारित होता है विधि सिद्धांतप्रतिक्रियाएं।

काम का क्रम।

एक परखनली में बिना पतला प्रोटीन की कुछ बूँदें डालें और 2 मिली डालें। ग्लेशियल एसिटिक एसिड और ग्लाइऑक्साइलिक एसिड की कुछ बूंदें। मिश्रण को तब तक थोड़ा गर्म किया जाता है जब तक कि परिणामी अवक्षेप घुल न जाए, ठंडा हो जाए और, परखनली को मजबूती से झुकाकर, ध्यान से दीवार के साथ केंद्रित एच 2 एसओ 4 डालें ताकि दोनों तरल मिश्रण न हों।

5-10 मिनट के बाद, दो परतों के बीच इंटरफेस में एक लाल-बैंगनी अंगूठी का गठन देखा जाता है।

अनुभव 5. निनहाइड्रिन प्रतिक्रिया।

विधि का सिद्धांत। a-अमीनो अम्ल निनहाइड्रिन के साथ अभिक्रिया करके एक नीला-बैंगनी संकुल (रुमेन पर्पल) बनाता है, जिसके रंग की तीव्रता अमीनो अम्ल की मात्रा के समानुपाती होती है। योजना के अनुसार प्रतिक्रिया होती है:

प्रतिक्रिया की रसायन शास्त्र :

निनहाइड्रिन के साथ प्रतिक्रिया का उपयोग क्रोमैटोग्राम (कागज पर, एक पतली परत में) पर अमीनो एसिड के दृश्य पता लगाने के लिए किया जाता है, साथ ही प्रतिक्रिया उत्पाद की रंग तीव्रता द्वारा अमीनो एसिड एकाग्रता के वर्णमिति निर्धारण के लिए भी किया जाता है।

इस प्रतिक्रिया के उत्पाद में मूल अमीनो एसिड का रेडिकल (R) होता है, जो विभिन्न रंगों का कारण बनता है: नीला, लाल, आदि। निनहाइड्रिन के साथ अमीनो एसिड की प्रतिक्रिया से उत्पन्न होने वाले यौगिक।

वर्तमान में, निनहाइड्रिन प्रतिक्रिया का व्यापक रूप से व्यक्तिगत अमीनो एसिड की खोज और उनकी मात्रा निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है।

काम का क्रम।

चिकन अंडे के प्रोटीन के 1-10% पतला घोल का 1 मिली और एसीटोन में निनहाइड्रिन के 1% घोल के 1-2 मिली को एक परखनली में डाला जाता है। ट्यूब की सामग्री को मिश्रित किया जाता है और धीरे-धीरे पानी के स्नान में 2-3 मिनट तक गर्म किया जाता है जब तक कि नीला-बैंगनी रंग दिखाई न दे, जो किसकी उपस्थिति का संकेत देता है α -अमीनो अम्ल।

प्रयोग करना: एक निष्कर्ष निकालें और प्रतिक्रिया समीकरण लिखें।

प्रयोग 6. सकागुची की प्रतिक्रिया।

विधि का सिद्धांत। एमिनो एसिड आर्जिनिन की यह प्रतिक्रिया ऑक्सीकरण एजेंट की उपस्थिति में ए-नैफ्थोल के साथ आर्गिनिन की बातचीत पर आधारित है। इसका तंत्र अभी तक पूरी तरह से स्पष्ट नहीं हुआ है। जाहिर है, प्रतिक्रिया निम्नलिखित समीकरण के अनुसार की जाती है:

चूंकि क्विनोनिमाइन्स (इस मामले में, नेफ्थोक्विनोन) के डेरिवेटिव, जिसमें इमिनो समूह -एनएच- के हाइड्रोजन को एल्काइल या एरिल रेडिकल द्वारा प्रतिस्थापित किया जाता है, हमेशा पीले-लाल टन में रंगीन होते हैं, फिर, जाहिरा तौर पर, नारंगी-लाल साकागुची प्रतिक्रिया के दौरान समाधान का रंग ठीक नेफ्थोक्विनोनिमाइन व्युत्पन्न की उपस्थिति के कारण होता है। हालांकि, आर्गिनिन अवशेषों के शेष NH समूहों और a-नैफ्थॉल के बेंजीन रिंग के आगे ऑक्सीकरण के कारण और भी अधिक जटिल यौगिक के गठन की संभावना को बाहर नहीं किया गया है:

काम का क्रम।

2 मिली तक। 1% पतला चिकन अंडे प्रोटीन समाधान के 2 मिलीलीटर जोड़ें। 10% सोडियम हाइड्रॉक्साइड (NaOH) और 0.2% अल्कोहल के घोल की कुछ बूँदें α -नेफ्थोल। ट्यूब की सामग्री को अच्छी तरह मिलाएं। फिर 0.5 मिली डालें। सोडियम हाइपोब्रोमाइट (NaBrO) या सोडियम हाइपोक्लोराइट (सोडियम हाइपोक्लोरस एसिड - NaOCl), मिलाएं। एक लाल, धीरे-धीरे बढ़ता रंग तुरंत दिखाई देता है।

तेजी से विकसित हो रहे नारंगी-लाल रंग को स्थिर करने के लिए 40% यूरिया के घोल का 1 मिली तुरंत मिलाया जाता है।

यह प्रतिक्रिया एक गुआनिडीन अवशेष युक्त यौगिकों की विशेषता है

एनएच \u003d सी -एनएच 2,

और प्रोटीन अणु में एमिनो एसिड आर्जिनिन की उपस्थिति को इंगित करता है:

NH \u003d C -NH - (CH 2) 3 -CH -COOH

प्रयोग करना: एक निष्कर्ष निकालें और प्रतिक्रिया समीकरण लिखें।

एल्बुमिन एल्बुमिन प्रोटीन पर भारी धातु लवण का प्रभाव

वहाँ कई हैं सरल तरीके, प्रोटीन की पहचान कैसे करें. ऐसा करने के लिए, हम इसके कुछ विशिष्ट गुणों का उपयोग करते हैं।

सभी मौजूदा प्रोटीनों को विभाजित करने वाले समूहों में से एक प्रोटीन है। . यह समूह सबसे आम और सबसे प्रसिद्ध है। एल्बुमिन एक प्रोटीन है मुर्गी के अंडे, मनुष्यों और जानवरों के रक्त के साथ-साथ पौधों, मांसपेशियों और दूध में भी पाया जाता है।

इस प्रोटीन समूह को परिभाषित करने के लिए, हम पानी में घुलनशीलता के इसके गुणों का उपयोग करते हैं। यदि एल्ब्यूमिन को गर्म किया जाता है, तो वे अपनी संरचना बदलते हैं, अर्थात वे "गुना" करते हैं।

तो चलो कोशिश करें प्रोटीन की पहचान करें. हम उपयोग करते हैं, उदाहरण के लिए, गाय का रक्त सीरम या अंडा क्रूड प्रोटीन. हम इसे एक सॉस पैन में डालते हैं, आप इसे पानी से पतला कर सकते हैं और उबाल आने तक धीमी आंच पर गर्म कर सकते हैं। प्रोटीन के घोल में थोड़ा नमक घोलें और थोड़ा सा ओसेट (एसिटिक एसिड) मिलाएं।

प्रतिक्रिया के परिणामस्वरूप, हम देखेंगे कि सफेद गुच्छे घोल से बाहर गिरेंगे।

प्रोटीन की पहचान करेंअन्य कर सकते हैं सरल तरीके से: शराब के प्रभाव में प्रोटीन अपनी संरचना बदल देता है, इसलिए यह प्रोटीन के घोल में उतनी ही मात्रा में अल्कोहल मिलाने के लिए पर्याप्त है। पिछले मामले की तरह ही, हम सफेद गुच्छे के रूप में प्रोटीन की वर्षा देखेंगे।

और यहाँ अगला है दिलचस्प अनुभवउपयोगी भी कहा जा सकता है। भारी धातुओं के लवणों का उपयोग करके प्रोटीन का निर्धारण किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, कॉपर, आयरन, लेड (कॉपर सल्फेट CuSO 4, आयरन क्लोराइड्स FeCl 2, FeCl 3, लेड नाइट्रेट Pb (NO 3) 4, आदि) का नमक। अगर करने के लिए जलीय घोलइन लवणों में से एक (या कई) जोड़ने के लिए प्रोटीन, फिर एक भारी धातु के साथ प्रोटीन के रासायनिक यौगिक का एक अवक्षेप। हमारे शरीर के लिए, और जानवरों के शरीर के लिए, भारी धातुओं के लवण जहरीले पदार्थ होते हैं जो प्रोटीन के विनाश में योगदान करते हैं!

प्रोटीन की पहचान करेंयह गैर-खनिज एसिड (ऑर्थोफॉस्फोरिक एच 3 पीओ 4 को छोड़कर) की कार्रवाई की मदद से भी संभव है। यदि टेस्ट ट्यूब में नाइट्रिक एसिड डाला जाता है, और फिर, टेस्ट ट्यूब की दीवार के साथ एक प्रोटीन घोल को सावधानी से गिराया जाता है, तो टेस्ट ट्यूब की दीवार की परिधि के चारों ओर अवक्षेपित प्रोटीन का एक सफेद वलय बनता है।

प्रोटीन का एक अन्य समूह कहा जाता है ग्लोब्युलिन्स - विपरीत एल्बुमिननहीं - पानी में घुलनशील। घोल में लवण मौजूद होने पर ग्लोब्युलिन अत्यधिक घुलनशील होते हैं। ग्लोब्युलिन पौधों के कुछ भागों, दूध और जीवित जीवों की मांसपेशियों में पाए जाते हैं। इसके अलावा, यह स्थापित किया गया है कि पौधों में पाए जाने वाले ग्लोब्युलिन 70% अल्कोहल में घुल जाते हैं!

और प्रोटीन का दूसरा समूह - स्क्लेरोप्रोटीन , जिसमें जीवित जीवों के ऊतक शामिल हैं, उदाहरण के लिए, नाखून, बाल, आंख का कॉर्निया, साथ ही साथ अस्थि ऊतक, जानवरों के सींग और ऊन। स्क्लेरोप्रोटीन पानी में नहीं घुलते हैं और शराब में नहीं घुलते हैं, लेकिन जब उन्हें मजबूत एसिड घोल से उपचारित किया जाता है, तो वे आंशिक रूप से विघटित होने पर घुलने की क्षमता प्राप्त कर लेते हैं।

ग्लोब्युलिनतथा स्क्लेरोप्रोटीनका उपयोग करके निर्धारित किया जा सकता है ज़ैंटोप्रोटीन प्रतिक्रिया. यह प्रोटीन के निर्धारण के लिए एक रंग प्रतिक्रिया है, जिसमें, यदि प्रोटीन युक्त नमूने को गर्म किया जाता है, तो नमूना का रंग बदलकर पीला हो जाएगा। फिर, जब अम्ल क्षार के साथ उदासीन हो जाता है, तो रंग नारंगी में बदल जाएगा।
ऐसी प्रतिक्रिया, शायद, कुछ पहले ही देख चुके हैं अपना अनुभवजब नाइट्रिक एसिड त्वचा के संपर्क में आता है।

अगला प्रोटीन प्रतिक्रिया - ब्यूरेट, जिसमें प्रोटीन के घोल में सोडियम या पोटेशियम क्षार का पतला घोल मिलाया जाता है। उसी घोल में कॉपर सल्फेट के घोल की कुछ बूंदें मिलाएं। हम विलयन के रंग में लाल, फिर बैंगनी और नीले-बैंगनी रंग में परिवर्तन देखते हैं।

यदि प्रोटीन को लंबे समय तक एसिड के घोल में गर्म किया जाता है, तो इसे घटकों में विभाजित किया जाएगा - पेप्टाइड्स, फिर इसके घटक अमीनो एसिड में, जिसका उपयोग भोजन के लिए मसाला तैयार करने के लिए उद्योग में किया जाता है।