बेंजापायरीन के लिए सॉसेज पनीर की जांच। बेंजो (ए) पाइरीन के द्रव्यमान अंश को निर्धारित करने के लिए खाद्य उत्पाद विधियां। माप परिणामों का पंजीकरण

बेंज़ोपाइरीन पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन - पीएएच के वर्ग से संबंधित है। यह रासायनिक संरचना में कार्बनिक यौगिकों का एक समूह है जिसमें बेंजीन के छल्ले होते हैं - तीन छल्ले या अधिक के समूह। बेंज़पायरीन की रासायनिक परिभाषा: कार्बन युक्त एक कार्बनिक पदार्थ, जो पॉलीसाइक्लिक हाइड्रोकार्बन के समूह का हिस्सा है, जिसका दाढ़ द्रव्यमान 252.31 g / mol है।

बेंजापायरीन क्या है?

बेंज़ोपाइरीन, सभी पीएएच की तरह, मुख्य रूप से तकनीकी प्रगति का परिणाम है, मानव गतिविधि का परिणाम है। पीएएच के तकनीकी प्रदूषण के मुख्य स्रोत तेल और तेल उत्पादों, लकड़ी और मानवजनित कचरे सहित ठोस और तरल कार्बनिक पदार्थों का दहन हैं। बेंजापायरीन के प्राकृतिक स्रोतों में से, यह जंगल की आग, ज्वालामुखी विस्फोटों पर ध्यान देने योग्य है।

हालांकि, बेंजापायरीन का निर्माण दहन प्रक्रियाओं के बिना भी हो सकता है - पायरोलिसिस, सुलगने, पोलीमराइजेशन के दौरान।

धूम्रपान के दौरान बेंजापायरीन निकलता है: एक सिगरेट के धुएं में बेंजापाइरीन की मात्रा औसतन 0.025 एमसीजी होती है, जो एमपीसी (औसतन 10,000-15,000 बार) से कई गुना अधिक है। यह गणना की गई है कि एक सिगरेट पीने से बेंजापायरीन सामग्री के संदर्भ में सोलह घंटे की निकास गैस साँस लेना के बराबर है।

बेंज़ोपाइरीन सूत्र

बेंजापायरीन के दो समावयवी होते हैं। पहला 1,2-बेंजापाइरीन (3,4-बेंजपाइरीन) है - सभी दहन उत्पादों में निहित है - तेल, टार, कोयला, विभिन्न मूल के धुएं, सहित। अपने शुद्ध रूप में, ये सुई के आकार के क्रिस्टल या हल्के पीले रंग की प्लेटें होती हैं, जिनका गलनांक लगभग 177 ° C होता है।

4.5-बेंजोपायरीन - हल्के पीले रंग की सुइयों और प्लेटों के रूप में क्रिस्टल, 179 डिग्री सेल्सियस के गलनांक के साथ। कोयला टार में निहित, मिट्टी में पाया जाता है (विशेषकर उद्यमों और राजमार्गों के पास)। इसमें उत्परिवर्तजन या कार्सिनोजेनिक गुण नहीं होते हैं।

बेंजोपायरीन का रासायनिक सूत्र C20H12 है।

मिट्टी और हवा में बेंजोपायरीन

बेंज़ोपाइरीन व्यावहारिक रूप से मुक्त अवस्था में नहीं होता है, लेकिन हमेशा हवा में निहित कणों पर अवक्षेपित होता है। चलती वायु द्रव्यमान के साथ, बेंज़पायरीन एक बड़े क्षेत्र में फैलता है, और ठोस कणों (उदाहरण के लिए, वर्षा के दौरान) के साथ हवा से बाहर गिरकर मिट्टी की परतों, जलाशयों और इमारतों की सतहों पर प्रवेश करता है।

बेंज़ापायरीन के प्रवास और संचय में, सड़क परिवहन जैसे स्रोत भी एक भूमिका निभाते हैं। एक ओर, लंबी दूरी पर चलते हुए, कारें बेंज़ापायरीन के समान वितरण में योगदान करती हैं। दूसरी ओर, बसे हुए बेंजापाइरीन राजमार्गों और उनके बगल की वस्तुओं (तथाकथित "द्वितीयक स्रोत") पर बड़ी मात्रा में जमा होते हैं।

बेंज़ोपाइरीन प्रकृति में पदार्थों के चक्र में आसानी से "शामिल" होता है: वर्षा के साथ, जिसमें हमेशा ठोस कण होते हैं, इसे पीएएच के मुख्य स्रोत से दूर के क्षेत्रों में भी ले जाया जाता है, जल निकायों में प्रवेश करता है, जहां से, वाष्पीकरण प्रक्रियाओं के दौरान, यह उगता है फिर से हवा में। यह माइग्रेट करने की क्षमता है कि बेंज़ापायरिन इस तथ्य की ओर जाता है कि इसकी सामग्री उन जगहों पर अधिक हो सकती है जहां इस पदार्थ का कोई शक्तिशाली स्रोत नहीं है।

पर्यावरण में प्रवेश करने और उसमें जमा होने के कारण, बेंजापायरीन पौधों में प्रवेश करता है, जो बाद में पशुओं के चारे के रूप में काम करता है या मानव पोषण में उपयोग किया जाता है। पौधों में बेंजापाइरीन की सांद्रता मिट्टी में इसकी सामग्री से अधिक होती है, और भोजन (या फ़ीड) में उनके निर्माण के लिए फीडस्टॉक की तुलना में अधिक होती है। बेंजापायरीन सहित रसायनों की सांद्रता बढ़ाने के इस प्रभाव को जैव संचय कहा जाता है।

इस प्रकार, बेंजापायरीन न केवल एक पृष्ठभूमि पर्यावरण प्रदूषण के रूप में खतरनाक है, बल्कि खाद्य श्रृंखला के माध्यम से शरीर में प्रवेश करने वाले पदार्थ के रूप में भी खतरनाक है।

बेंजापायरिन का मैक

बेंजापाइरीन के निर्धारण और नियंत्रण की मुख्य विधि तरल क्रोमैटोग्राफी है।

स्वच्छ मानकों 2.1.6.695-98 और 2.1.6.1338-03 के अनुसार, हवा में बेंजापायरीन की अधिकतम स्वीकार्य औसत दैनिक मात्रा (एमपीसीडीएस) 0.1 माइक्रोग्राम/100 एम3 या 10-9 ग्राम/एम3 है, और मिट्टी में इसकी एमपीसी है। स्वच्छता मानकों के अनुसार 2.1. 7.2041-06 - कुल मिलाकर 0.02 मिलीग्राम / किग्रा, पृष्ठभूमि स्तर को ध्यान में रखते हुए। कार्यस्थलों पर हवा में, औसत शिफ्ट एमपीसी 0.00015 mg/m3 से अधिक नहीं है। (खंड 1 और खंड 2 से जीएन 2.2.5. 1313-03)।

पानी में बेंजापाइरीन का एमपीसी 0.000001 मिलीग्राम / लीटर से अधिक नहीं है, एक केंद्रीकृत जल आपूर्ति प्रणाली के साथ पीने के पानी में - 0.000005 मिलीग्राम / लीटर से अधिक नहीं। बोतलबंद पेयजल में - पहली गुणवत्ता श्रेणी के बोतलबंद पानी में 0.001 माइक्रोग्राम/ली (उच्चतम गुणवत्ता का पानी) से 0.005 माइक्रोग्राम/ली से अधिक नहीं।

उन खाद्य उत्पादों में जिनमें तकनीकी विशेषताओं के कारण बेंज़ापायरीन की उपस्थिति की अनुमति है, बेंज़ापायरीन का अनुमेय स्तर 0.001 मिलीग्राम / किग्रा से अधिक नहीं है। इनमें शामिल हैं: सॉसेज और उप-उत्पादों का उपयोग करने वाले उत्पाद, जिनमें स्मोक्ड वाले भी शामिल हैं; स्मोक्ड लार्ड; कुक्कुट मांस और ऑफल से सॉसेज और स्मोक्ड उत्पाद; स्मोक्ड डिब्बाबंद भोजन और मछली संरक्षित, स्मोक्ड मछली; अनाज।

स्मोक फ्लेवरिंग का उपयोग करते समय, बेंजापायरीन की सामग्री 2 माइक्रोग्राम / किग्रा (एल) से अधिक नहीं होती है, और उनके उपयोग के बाद, तैयार उत्पादों में बेंजापायरीन की सामग्री 0.03 माइक्रोग्राम / किग्रा (एल) से अधिक नहीं होनी चाहिए।

अन्य खाद्य उत्पादों में, बेंजापायरीन की उपस्थिति की अनुमति नहीं है।

हालांकि, निगरानी के परिणामों के अनुसार, बेंज़ापायरीन की सामग्री के मानदंड कई गुना अधिक हो गए हैं। औसतन शहरों में वायु प्रदूषण का स्तर एमपीसी से 5-12 गुना अधिक है, मिट्टी में - 3-7 गुना, भोजन में - 1.5 से 11 गुना।

मानव शरीर पर बेंजापायरीन का प्रभाव

बेंज़ोपाइरीन को पहले खतरनाक वर्ग के पदार्थ के रूप में वर्गीकृत किया गया है। पहला खतरा वर्ग पर्यावरण पर अत्यधिक उच्च खतरनाक प्रभाव वाले पदार्थ हैं, जबकि उनके कारण होने वाले परिवर्तन अपरिवर्तनीय हैं और उन्हें बहाल नहीं किया जा सकता है।

बेंज़ोपाइरीन सबसे शक्तिशाली लेकिन व्यापक कार्सिनोजेन्स में से एक है। रासायनिक और ऊष्मीय रूप से स्थिर होने के कारण, जैव संचय के गुणों से युक्त, यह एक बार शरीर में प्रवेश करके जमा हो जाता है, यह लगातार और शक्तिशाली रूप से कार्य करता है। कार्सिनोजेनिक होने के अलावा, बेंजापायरीन में एक उत्परिवर्तजन, भ्रूणोटॉक्सिक और हेमटोटॉक्सिक प्रभाव होता है।

शरीर में बेंज़ापायरीन के प्रवेश के मार्ग विविध हैं: भोजन और पानी के साथ, त्वचा के माध्यम से और साँस द्वारा। खतरे की डिग्री इस बात की परवाह किए बिना है कि बेंज़ापायरीन शरीर में कैसे प्रवेश करता है। प्रयोगों में, साथ ही पर्यावरणीय रूप से प्रतिकूल क्षेत्रों की निगरानी के अनुसार, बेंजापायरीन को डीएनए कॉम्प्लेक्स में पेश किया जाता है, जिससे अपरिवर्तनीय उत्परिवर्तन होते हैं जो बाद की पीढ़ियों में गुजरते हैं। विशेष रूप से चिंता बेंज़ापायरीन के जैव संचय का तथ्य है: अगली पीढ़ी की संतानों में उत्परिवर्तन विकसित होने की संभावना जैव संचय के कारण कई गुना बढ़ जाती है।

धूम्रपान छोड़ना चाहते हैं?

फिर सिगरेट छोड़ने के लिए मैराथन में शामिल हों।
यह छोड़ना बहुत आसान बना देगा।

4.1.2. उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा खाद्य कच्चे माल, खाद्य उत्पादों और मिट्टी में बेंजो (ए) पाइरीन के द्रव्यमान अंश को मापने की विधि

उद्देश्य और गुंजाइश

यह विधि खाद्य कच्चे माल, खाद्य उत्पादों और मिट्टी में बेंजो (ए) पाइरीन (बीपी) के मात्रात्मक निर्धारण के लिए तालिका में दर्शाए गए इसके द्रव्यमान अंश पर है। 1. माप सीमा की निचली सीमा उत्पादों और कच्चे माल में विष के अनुमेय स्तर (सामग्री) के 1/2 से मेल खाती है, ऊपरी सीमा - अनुमेय स्तर से पांच गुना तक।

बेंज (ए) पाइरीन एक अत्यधिक विषैला कार्सिनोजेनिक यौगिक है, और खाद्य उत्पादों और खाद्य कच्चे माल में इसकी अनुमेय सामग्री स्वच्छता नियमों और SanPiN 2.3.2.560-96 द्वारा स्थापित की गई है।

तकनीक को रूसी संघ के राज्य स्वच्छता और महामारी विज्ञान पर्यवेक्षण के संस्थानों, अन्य संगठनों की प्रयोगशालाओं और खाद्य उत्पादों के अनुसंधान, रासायनिक विश्लेषण और प्रमाणन से संबंधित उद्यमों द्वारा लागू किया जा सकता है। कार्यप्रणाली मध्यस्थता नहीं है।

चावल। 11.14.

• 1. नेफ़थलीन 9. क्राइज़ेन (0.17*)
• 2. एसेनाफ्थीन (1.40*) 10. बेंज(ए)पाइरीन
• 3. फ्लोरीन (2.60*) 11. बेंज (बी) फ्लोरैन्थीन (0.26*)
• 4. फेनेंट्रीन *2.40*) 12. बेंज (सी) फ्लोरैन्थीन (0.10*)
• 5. एन्थ्रेसीन (0.13*) 13. बेंज(ए)पाइरीन (0.2*)
• 6. फ्लोरैन्थीन (0.74*) 14. डिबेंज़(ए,बी)एंथ्रेसीन
• 7. पाइरीन (0.67*) 15. BeH3(g, h, i)nepHaen (0.21*)
• 8. बेंज (ए) एन्थ्रेसीन (0.07 *) 16. इंडेनो (1,2,3-सीसी 1) पाइरीन (0.26 *)

विश्लेषण की शर्तें:

कॉलम: सुपेलकोसिल® एलसी आरएएस (250 मिमी x 2.1 मिमी; 5 माइक्रोन);

ढाल: एसीटोनिट्राइल (ए) 50-100%, पानी (बी) 50-0%; 200 μl / मिनट तापमान: 25 डिग्री सेल्सियस नमूना मात्रा: 10 μl डिटेक्शन: Sflu, कार्यक्रम के अनुसार

माप त्रुटि के लक्षण

बीपी के द्रव्यमान अंश (0.95 के आत्मविश्वास स्तर के साथ) के माप परिणाम की सापेक्ष त्रुटि (±5) की सीमाएं तालिका में दर्शाई गई हैं। एक।

तालिका एक।विश्लेषण की गई वस्तुएं, श्रेणियां और माप की विशेषताएं

उत्पाद समूह (विश्लेषित वस्तु)	अनुमत सामग्री ( चतुर्थ एक्स),मिलीग्राम/किग्रा	बीपी द्रव्यमान अंश की मापन सीमा, मिलीग्राम/किग्रा	गुणक निष्कर्षण,	सापेक्ष त्रुटि सीमा (±8), %
स्मोक्ड मांस, मछली और वसा उत्पाद

मापने के उपकरण, सहायक उपकरण, सामग्री और अभिकर्मक

मापन उपकरण

तरल क्रोमैटोग्राफ:

• - माइक्रोकॉलम "मिलीक्रोम-5", टीयू 25-7405.0009-89, फ्लोरीमेट्रिक (एफएलडी) डिटेक्टर के साथ संस्करण 3 (विकल्प 1)।
• - आइसोक्रेटिक या ग्रेडिएंट लिक्विड क्रोमैटोग्राफ, उदाहरण के लिए, "Kpayeg" (जर्मनी), रूसी संघ के माप उपकरणों का राज्य रजिस्टर 16848-97 या क्रोमैटोग्राफिक अटैचमेंट "VEZHKh-3", LLP "Lumex" (सेंट पीटर्सबर्ग), से लैस FLD "Fluorat-02 -2M", LLP "Lumex", रूसी संघ के माप उपकरणों का राज्य रजिस्टर 14093-99 (विकल्प 2)।
• - किसी भी प्रकार के पीएलडी के साथ इसोक्रेटिक या ग्रेडिएंट लिक्विड क्रोमैटोग्राफ, उदाहरण के लिए "Kpaerg" (जर्मनी), रूसी संघ के माप उपकरणों का राज्य रजिस्टर 16848-97 (विकल्प 3)।

क्रोमैटोग्राफिक कॉलम "डायस्फर-110-एस 16", टीयू 4215-001-05451931-94, सीजेएससी "बायोखिममैक एसटी" (मॉस्को), क्रोमैटोग्राफिक सिस्टम के संस्करण के अनुरूप मानक आकार के साथ:

• - 2 x 80 मिमी, डीपी = 5 - 7 माइक्रोन (विकल्प 1)
• - 2 x 150 मिमी, डीपी = 5 - 7 µm (विकल्प 2)
• - 4 x 150 मिमी, डीपी = 5 - 7 µm (विकल्प 3)

हार्डवेयर और सॉफ्टवेयर कॉम्प्लेक्स "मल्टीक्रोम-स्पेक्ट्रम", TU AZHRC

3.036.001, CJSC एम्परसेंड (मॉस्को), या कोई अन्य सॉफ़्टवेयर जो बाहरी मानक विधि द्वारा अंशांकन और मात्रात्मक निर्धारण की अनुमति देता है।

जीएसओ 7515-98 बेंजो (ए) पाइरीन के एक समाधान की संरचना के एसीटोनिट्राइल में बेंज़ो (ए) पाइरेन 100 माइक्रोग्राम / सेमी 3, एओजेडटी "एक्रोस" (सेंट पीटर्सबर्ग) के द्रव्यमान एकाग्रता के साथ।

जीएसओ 7064-93 हेक्सेन में बेंजो (ए) पाइरीन के घोल की संरचना जिसमें बेंजो (ए) पाइरीन 100 माइक्रोग्राम / सेमी 3, एओजेडटी "एक्रोस" (सेंट पीटर्सबर्ग) की एक द्रव्यमान एकाग्रता है।

तराजू प्रयोगशाला इलेक्ट्रॉनिक 4 कोशिकाएं। सटीकता मॉडल वीएलई 134, गोस्ट 24104-88 या अन्य।

हैमिल्टन से 100 μl माइक्रोसिरिंज, मॉडल माइक्रोलिटर #1710 या समकक्ष।

माइक्रोपिपेट्स 0.5; 0.2; 0.1 μl; गोस्ट 20292-74।

आयामी सिलेंडर 2-25.2-50, 2-100 और 2-500, GOST 1770-74।

वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क 2-10-2, 2-100-2, GOST 1770-74।

स्नातक पिपेट 1, 2, 5, 10 सेमी 3 , GOST 29227-91।

अभिकर्मक और सामग्री

तरल क्रोमैटोग्राफी के लिए एसीटोनिट्राइल, ओपी -3 उच्च शुद्धता, टीयू 6-09-14-2167-84, सुधारा।

द्वि-आसुत जल, टीयू 6-09-2502-77।

हेक्सेन, रासायनिक रूप से शुद्ध, टीयू 6-09-3375-78, Na . के ऊपर सूख गया 2 एस 04 , सुधारा गया।

बेंजीन, रासायनिक रूप से शुद्ध, GOST 5955-75, Na . के ऊपर सूख गया 2 एस 04 , सुधारा गया।

निर्जल सोडियम सल्फेट, रासायनिक रूप से शुद्ध, GOST 4166-76।

ध्यान केंद्रित कारतूस "डायपैक": ए -3, पी -3, सी; टीयू 4215-002-05451931-94, ज़ाओ बायोखिमक एसटी (मास्को)।

सहायक उपकरण

सीजेएससी "बायोखिममक एसटी" (मास्को) या अन्य एलुएंट्स के निस्पंदन और डिगैसिंग के लिए प्रणाली।

सुपेल्को से स्क्रू कैप और टेफ्लॉन गास्केट के साथ अंशांकन और विश्लेषण समाधान के लिए 1.8 और 5.0 सेमी 3 कांच की शीशियां, कैटलॉग संख्या 2-6951, 2-7037 और

2-7039, या समकक्ष।

माइक्रोमिक्सर पीपीई -3, "एक्रोस" (सेंट पीटर्सबर्ग)।

रोटरी बाष्पीकरण IR-1M2, TU 25-1173.102-84 या अन्य।

25, 10 और 5 सेमी 3, GOST 25336 की क्षमता वाले स्टॉपर्स के साथ शार्प-बॉटम फ्लास्क।

बायोमार्क संयुक्त उद्यम (लवव) या अन्य के थर्मोस्टेटिक रूप से नियंत्रित एल्यूमीनियम ब्लॉक (ड्राई-एयर बाथ) से लैस नाइट्रोजन की एक धारा में समाधान को उड़ाने के लिए एक उपकरण।

डीपी = 0.4-0.5 µm के साथ झिल्ली फिल्टर ।

लगभग 7 मिमी एचजी का वैक्यूम बनाने के लिए एक उपकरण। कला। (वाटर जेट पंप, गोस्ट 25336; बेगमोट वाटर रिंग वैक्यूम पंप, यूवीके-आरके2/1, सीजेएससी बायोखिममक एसटी, मॉस्को)।

वैक्यूम नमूना तैयार करने का उपकरण (वैक्यूम मैनिफोल्ड) या अन्य नमूना रिसीवर के साथ कम से कम 10 सेमी 3 की क्षमता के साथ।

ब्यूचनर फ्लास्क, बन्सन फ़नल, क्रमशः कम से कम 500 और 200 सेमी 3 की क्षमता, GOST 1770।

100 और 500 सेमी 3 की क्षमता वाले फ़नल को अलग करना, GOST 25336।

50, 100 और 250 सेमी 3, GOST 25336 की क्षमता वाले स्टॉपर्स के साथ फ्लैट-तल वाले शंक्वाकार फ्लास्क।

50 और 100 सेमी 3 की क्षमता वाले स्टॉपर्स के साथ नाशपाती के आकार के फ्लास्क, GOST 25336।

कम से कम 10 सेमी व्यास के साथ शंक्वाकार फ़नल, GOST 1770।

"ब्लू टेप" प्रकार का फिल्टर पेपर।

कपास ऊन चिकित्सा गैर-बाँझ, कपास।

माप पद्धति

तकनीक में निम्नलिखित मुख्य प्रक्रियाएं शामिल हैं:

• - स्मोक्ड उत्पाद के नमूने से हेक्सेन के साथ प्राथमिक निष्कर्षण और एसीटोनिट्राइल बीपी में पुन: निष्कर्षण;
• - अनाज या मिट्टी के नमूने से एसीटोनिट्राइल-पानी के मिश्रण के साथ बीपी का प्राथमिक निष्कर्षण;
• - ठोस चरण निष्कर्षण द्वारा प्राथमिक अर्क की एकाग्रता और शुद्धि;
• - एसीटोनिट्राइल-पानी के मिश्रण के साथ तैयार नमूना निकालने का कमजोर पड़ना;
• - बीपी के द्रव्यमान एकाग्रता के ज्ञात मूल्य के साथ समाधान के अनुसार क्रोमैटोग्राफ का अंशांकन;
• - फ्लोरेसेंस सिग्नल के पंजीकरण के साथ उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) द्वारा तैयार नमूना निकालने के समाधान का विश्लेषण;
• - अवधारण मापदंडों द्वारा निर्धारित बीपी की पहचान;
• - पंजीकृत विश्लेषणात्मक संकेत और अंशांकन विशेषताओं के आधार पर बीपी की द्रव्यमान एकाग्रता की गणना;
• - बीपी के द्रव्यमान अंश की गणना, बीपी की द्रव्यमान सांद्रता, भोजन के नमूने के द्रव्यमान और तैयार अर्क के घोल की मात्रा के आधार पर।

सुरक्षा आवश्यकताओं

उपयोग किए गए रासायनिक यौगिकों के साथ काम करते समय, विषाक्त, कास्टिक और ज्वलनशील पदार्थों के साथ काम करने के लिए स्थापित सुरक्षा आवश्यकताओं का पालन करना आवश्यक है, GOST 12.1.018-86 और GOST 12.1.004-76, अग्नि सुरक्षा आवश्यकताओं, GOST 12.1.004 -76.

यदि बीपी के घोल त्वचा या वस्तुओं की सतहों पर मिल जाते हैं, तो उन्हें पानी और डिटर्जेंट से और फिर एथिल अल्कोहल से उपचारित किया जाना चाहिए। समाधान को सीलबंद पैकेजिंग में रेफ्रिजरेटर में संग्रहित किया जाना चाहिए।

एचपीएलसी के लिए सिस्टम का संचालन करते समय और संबंधित मापन करते समय, विद्युत सुरक्षा के नियमों का पालन करना आवश्यक है, GOST

12.1.019-79 और डिवाइस के लिए ऑपरेटिंग निर्देश।

ऑपरेटर योग्यता आवश्यकताएँ

व्यक्तियों को काम करने की अनुमति:

• - एक रासायनिक इंजीनियर या रासायनिक तकनीशियन के रूप में योग्य;
• - एक रासायनिक प्रयोगशाला में अनुभव होना;
• - जिन्होंने एचपीएलसी का उपयोग करके विश्लेषण करने के लिए मान्यता प्राप्त प्रयोगशालाओं में प्रासंगिक प्रशिक्षण पाठ्यक्रम और इंटर्नशिप पूरा कर लिया है;
• - नियंत्रण कार्यों के प्रदर्शन के दौरान सकारात्मक परिणाम प्राप्त हुए।

मापन शर्तें

नमूना तैयार करना, समाधान तैयार करना, माप की तैयारी और प्रदर्शन 18-25 डिग्री सेल्सियस के परिवेश के तापमान पर किया जाता है, वायुमंडलीय दबाव 84.0-100.7 केपीए (630-800 मिमी एचजी), हवा की आर्द्रता 80% से अधिक नहीं होती है ( तापमान 25 डिग्री सेल्सियस पर)।

प्रयोगशाला में मापते समय, निम्नलिखित शर्तों को पूरा किया जाना चाहिए: मुख्य वोल्टेज 220 ± 10 वी, मुख्य आवृत्ति 50zh 1 हर्ट्ज। माप उपकरण के विवरण और संचालन निर्देशों द्वारा अनुशंसित शर्तों के तहत किए जाते हैं।

माप लेने की तैयारी

कांच के बने पदार्थ

आगे उपयोग करने से पहले, उपयोग किए गए कांच के बने पदार्थ को अंतिम उपयोग किए गए सॉल्वैंट्स से धोया जाता है और किसी भी वाशिंग पाउडर के साथ गर्म पानी से अच्छी तरह से धोया जाता है, आसुत और बिडिस्टिल्ड पानी के साथ क्रमिक रूप से धोया जाता है और सूख जाता है। साफ बर्तन को कॉर्क या कॉटन स्वैब से बंद करके स्टोर किया जाता है।

नमूनाकरण, भंडारण और हैंडलिंग

प्रत्येक प्रकार के उत्पाद (GOST 13586.3-83, GOST 27668-88, GOST 9792-73, GOST 7631-85) के लिए नियामक दस्तावेजों के अनुसार नमूनाकरण और औसत किया जाता है। निर्धारित बीपी को सूखे हेक्सेन के साथ निष्कर्षण द्वारा स्मोक्ड उत्पादों के नमूनों से निकाला जाता है, जिसके वाष्पीकरण के बाद इसे एसीटोनिट्राइल में फिर से निकाला जाता है। अनाज या मिट्टी के नमूनों से बीपी निकालते समय पानी-एसीटोनिट्राइल (16:84) के मिश्रण का उपयोग किया जाता है। प्रारंभिक उत्पाद की प्रकृति की परवाह किए बिना बीपी युक्त प्राथमिक नमूना अर्क की बाद की एकाग्रता और शुद्धि, तीन सांद्रण कारतूस डायपैक ए -3, पी -3, एस का उपयोग करके ठोस-चरण निष्कर्षण की जटिल योजना के अनुसार की जाती है। .

तैयार नमूने (नमूनों के अर्क) एसीटोनिट्राइल-पानी (70:30) के मिश्रण में घुल जाते हैं।

बीपी के द्रव्यमान अंश के प्रत्येक माप में कम से कम दो नमूनों की तैयारी और क्रोमैटोग्राफिक विश्लेषण शामिल है।

विलायक मिश्रण तैयार करना

सॉल्वेंट मिश्रण स्नातक किए गए सिलेंडरों में वॉल्यूमेट्रिक विधि द्वारा तैयार किए जाते हैं। एसीटोनिट्राइल और पानी की आवश्यक मात्रा को अलग-अलग स्नातक किए गए सिलेंडरों से मापा जाता है और फिर मिश्रित किया जाता है। एक्सट्रैक्टेंट ए: एसीटोनिट्राइल-वाटर (84:16)।

निकालने की तैयारी

पारस्परिक रूप से संतृप्त एसीटोनिट्राइल और हेक्सेन तैयार करने के लिए, 500 सेमी 3 की क्षमता के साथ एक अलग कीप में एसीटोनिट्राइल के लगभग 300 सेमी 3 और हेक्सेन के 100 सेमी 3 को हिलाएं। सॉल्वैंट्स को अलग करने के बाद, परतों को अलग से लिया जाता है: निचली परत (एसीटोनिट्राइल हेक्सेन - एक्सट्रैक्टेंट बी के साथ संतृप्त) और ऊपरी परत (एसीटोनिट्राइल - एक्सट्रैक्टेंट सी के साथ संतृप्त हेक्सेन), इंटरपेज़ को त्याग दिया जाता है।

एलुएंट्स की तैयारी

एचपीएलसी माप के लिए, एसीटोनिट्राइल-पानी के मिश्रण निम्नलिखित अनुपात में तैयार किए जाते हैं: (90:10) - एलुएंट 90, (84:16) - एलुएंट 84, (80:20) - एलुएंट 80, (70:30) - एलुएंट 70 तैयार एलुएंट्स को एक झिल्ली फिल्टर के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है और वैक्यूम या थर्मल डीगैसिंग किया जाता है।

अंशांकन समाधान की तैयारी

एसीटोनिट्राइल (ऊपर देखें) में बीपी समाधान की संरचना का जीएसओ उपयोग करने से पहले एसीटोनिट्राइल-पानी (7:3) के मिश्रण से पतला होता है। पिपेट लिया

स्टॉक घोल के 1.0 सेमी 3 को 100 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा जाता है और विलायक को निशान में जोड़ा जाता है। इसके बाद, परिणामी घोल के कुछ आयतनों को एक पिपेट के साथ लिया जाता है, जिसे 10 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा जाता है और विलायक को निशान में जोड़ा जाता है। अंशांकन समाधान 2-5 (विकल्प 1) और 3-7 (विकल्प 2, 3) के कमजोर पड़ने और सांद्रता के लिए उपयोग किए जाने वाले समाधानों के संगत खंड तालिका में दिखाए गए हैं। 2. हेक्सेन (नीचे देखें) में बीपी समाधान की संरचना के जीएसओ का उपयोग करते समय, नीचे की शर्तों के तहत विलायक को वाष्पित करने के बाद, सूखे अवशेषों को एसीटोनिट्राइल में फिर से भंग कर दिया जाता है और ऊपर वर्णित अनुसार पतला होता है, प्रमाणित के मूल्य को ध्यान में रखते हुए जीएसओ की एकाग्रता

तालिका 2।बेंजोपायरीन (बीपी) के विश्लेषण में अंशांकन के लिए समाधान

बीपी की मास सांद्रता (जीएसओ का प्रमाणित मूल्य), एमसीजी/सेमी 3	प्रारंभिक कमजोर पड़ने का समाधान		अंशांकन
				बीपी की मास एकाग्रता, माइक्रोग्राम / सेमी 3

* क्रोमैटोग्राफिक सिस्टम के प्रत्यक्ष अंशांकन के लिए उपयोग नहीं किया जाता है।

क्रोमैटोग्राफिक प्रणाली की तैयारी

क्रोमैटोग्राफ चालू है और इसके विवरण और ऑपरेटिंग मैनुअल के अनुसार संचालन के लिए तैयार किया गया है। क्रोमैटोग्राफ विकल्प (ऊपर देखें) के अनुसार मानक आकारों के साथ "डायस्फर-110-सी 16" कॉलम स्थापित करें। एसिटोनिट्राइल की उच्चतम सांद्रता वाले एलुएंट को क्रोमैटोग्राफिक सिस्टम के माध्यम से तब तक पंप किया जाता है जब तक कि डिटेक्टर की आधार रेखा स्थिर नहीं हो जाती है, और फिर इसे "विश्लेषण स्थितियों" के प्रासंगिक वर्गों के अनुसार ढाल की प्रारंभिक स्थितियों के तहत वातानुकूलित किया जाता है।

सांद्रण कारतूसों की तैयारी

ध्यान केंद्रित कारतूस Diapak A-3 और P-3 निम्नानुसार काम के लिए तैयार किए जाते हैं:

• 1. सूखे डायपैक ए या पी सॉर्बेंट के 3 सेमी3 को 10 सेमी 3 पॉलीप्रोपाइलीन आवास में निचले हिस्से में एक बदली फिल्टर के साथ डाला जाता है। आवास के ऊपरी खाली हिस्से का उपयोग नमूना या एलुएंट लगाने के लिए फ़नल के रूप में किया जाता है।
• 2. कारतूस को एक उपयुक्त वैक्यूम डिवाइस में लंबवत रूप से जकड़ें और सॉर्बेंट की एक सपाट, क्षैतिज शीर्ष परत बनाने के लिए टैप करें। Diapak A-3 कारतूस की अंतिम तैयारी के लिए, एक छोटे कपास झाड़ू के साथ शर्बत की परत को ठीक करने के लिए पर्याप्त है।
• 3. डायपैक पी-3 कार्ट्रिज तैयार करने के लिए, सॉर्बेंट को 10 सेमी 3 बेंजीन, एसीटोन और के साथ क्रमिक रूप से धोया जाता है। निकालने वाला एकम वैक्यूम पर (ड्रिप दर 1-2 बूंद प्रति सेकंड से अधिक नहीं), हवा को शर्बत में प्रवेश करने से रोकता है। कारतूस को एसीटोन से भरने के बाद, सॉर्बेंट को व्यवस्थित करने की अनुमति दी जाती है, ऊपरी बहुलक फ़िल्टर पेश किया जाता है, इसे सॉर्बेंट की ऊपरी परत पर जमा किया जाता है, और धुलाई जारी रहती है। पहुँचने पर निकालने वाला एफिल्टर के ऊपर 2-3 सेमी का स्तर, धुलाई बंद कर दी जाती है और कारतूस को नीचे के प्लग और एक शीर्ष कवर (भंडारण के लिए) से सील कर दिया जाता है। आकस्मिक सुखाने के मामले में, कारतूस धोया जाता है निकालने वाला ए.नमूना लगाने से पहले, प्लग हटा दिए जाते हैं और, एक कमजोर वैक्यूम के साथ, पानी-एसीटोनिट्राइल मिश्रण के अवशेषों को ऊपरी फिल्टर के स्तर तक पारित किया जाता है, फिर परीक्षण समाधान तुरंत डाला जाता है। पुन: प्रयोज्य कारतूस डायपैक पी -3 का पुनर्जनन एक समान योजना के अनुसार किया जाता है, ऊपरी फिल्टर को हटाने को छोड़कर।

ध्यान केंद्रित करने वाला कारतूस Diapak C निम्नानुसार काम के लिए तैयार किया जाता है:

• 1. तैयार किए गए पॉलीप्रोपाइलीन कैप्सूल को डायपैक एस सॉर्बेंट के 1 सेमी 3 के साथ प्लग के साथ सील कर दिया जाता है। प्लग को हटाने के बाद, 1-2 बूंद प्रति सेकंड की दर से सिरिंज के साथ 5 सेमी 3 हेक्सेन पास करके कारतूस को काम के लिए तैयार किया जाता है।
• 2. नमूना गुरुत्वाकर्षण द्वारा लागू किया जाता है, एक फ़नल के रूप में 10 सेमी 3 की मात्रा के साथ एक खाली पॉलीप्रोपाइलीन शरीर का उपयोग करके, डायपैक सी कैप्सूल की ऊपरी फिटिंग में कसकर तय किया जाता है।

माप के लिए नमूना तैयार करना

एक स्मोक्ड उत्पाद के नमूने से बेंजो (ए) पाइरीन का हेक्सेन निष्कर्षणस्मोक्ड उत्पाद के नमूने के 10.0 ग्राम का एक नमूना 30 ग्राम निर्जल सोडियम सल्फेट के साथ मोर्टार में डाला जाता है। मिश्रण को मात्रात्मक रूप से 100 सेमी 3 फ्लैट-तल वाले फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है और 40 सेमी 3 हेक्सेन के साथ कम से कम 30 मिनट के लिए सरगर्मी के साथ निकाला जाता है। नमूने के कुल वसा का प्राथमिक हेक्सेन अर्क निकाला जाता है और 10 ग्राम निर्जल सोडियम सल्फेट के माध्यम से एक स्ट्रिपिंग फ्लास्क में पारित किया जाता है। निष्कर्षण प्रक्रिया को हेक्सेन के 20 सेमी 3 के दो खंडों के साथ दो बार दोहराएं और उसी डिस्टिलिंग फ्लास्क में एक desiccant के माध्यम से निकालने के कुछ हिस्सों को पास करें। एक रोटरी बाष्पीकरण पर हेक्सेन को 35 डिग्री सेल्सियस से अधिक के तापमान पर तब तक वाष्पित करें जब तक कि गंध गायब न हो जाए।

कुल वसा का अर्क 20 सेमी 3 . में घुल जाता है निकालने वाला बी, 50 सेमी 3 की क्षमता वाले एक स्नातक सिलेंडर में मात्रात्मक रूप से स्थानांतरित करें और उसी विलायक के साथ समाधान की मात्रा 40.0 सेमी 3 पर लाएं।

परिणामी घोल के 20.0 सेमी 3 को 100 सेमी 3 की क्षमता वाले एक अलग करने वाले फ़नल में स्थानांतरित किया जाता है और बीपी को 20 सेमी 3 के तीन खंडों के साथ एसीटोनिट्राइल में फिर से निकाला जाता है। निकालने वाला बी.हर बार, चरणों के सबसे पूर्ण पृथक्करण को प्राप्त करने के लिए, निचली परत को लिया जाता है (बीपी का एसीटोनिट्राइल अर्क) और एक रोटरी बाष्पीकरण पर 50 से अधिक नहीं के तापमान पर वाष्पित हो जाता है। डिग्री सेल्सियस 10-15 सेमी 3 की मात्रा तक। मात्रात्मक रूप से (एसीटोनिट्राइल का उपयोग करके) 25 सेमी 3 की क्षमता के साथ एक मापने वाले सिलेंडर में घोल को स्थानांतरित करें, एसीटोनिट्राइल के साथ मात्रा को 21.0 सेमी 3 तक लाएं, 4.0 सेमी 3 बिडिस्टिल पानी डालें और परिणामस्वरूप अच्छी तरह मिलाएं बीपी का पानी-एसीटोनिट्राइल अर्क।

एसीटोनिट्राइल-पानी के मिश्रण के साथ अनाज या मिट्टी के नमूने से बेंजो (ए) पाइरीन का निष्कर्षण

नमूने के 10-25 ग्राम के एक हिस्से को एक फ्लैट-तल वाले फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है, 50-125 सेमी 3 जोड़ा जाता है निकालने वाला ए,उत्पाद के 1:5 नमूने के अनुपात को एक्सट्रैक्टेंट की मात्रा से सख्ती से देखते हुए, और 1 घंटे के लिए हिलाया जाता है। छाना हुआ बीपी का पानी-एसीटोनिट्राइल अर्कवैक्यूम के तहत एक बुकनर फ़नल पर एक पेपर फ़िल्टर के माध्यम से और फ़िल्टर पर अवक्षेप को निचोड़ें।

अनाज या स्मोक्ड उत्पाद के प्राथमिक अर्क की पूर्व-शुद्धि और एकाग्रता

Diapak A-3 25.0 cm 3 . कारतूस के माध्यम से गुजरें और फिर 3 सेमी 3 निकालने वाला एएक प्राप्त फ्लास्क में प्रति सेकंड 2-3 बूंदों की ड्रिप दर पर।

एकत्र किए गए एलुएट को तैयार कारतूस डायपैक पी -3 के माध्यम से पारित किया जाता है, और फिर एसीटोनिट्राइल के 5 सेमी 3 को 1-2 बूंदों प्रति सेकंड की दर से, वाशआउट को छोड़कर। बीपी युक्त लक्ष्य अंश कारतूस से बेंजीन-एसीटोनिट्राइल (1:1) के मिश्रण के साथ 7 सेमी 3 की मात्रा में 1-2 बूंद प्रति सेकंड की दर से डिस्टिलिंग फ्लास्क में निकाला जाता है। 50 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं के तापमान पर रोटरी बाष्पीकरण पर एलुएट को वाष्पित किया जाता है, 0.5 सेमी 3 हेक्सेन को फ्लास्क में जोड़ा जाता है और एक माइक्रोमिक्सर पर अच्छी तरह से हिलाया जाता है जब तक कि सूखा अवशेष पूरी तरह से भंग न हो जाए।

प्राथमिक मिट्टी के अर्क की प्रारंभिक शुद्धि और एकाग्रता

Diapak A-3 5.0 सेमी 3 . कारतूस के माध्यम से गुजरें बीपी का पानी-एसीटोनिट्राइल अर्क,फिर 3 सेमी 3 निकालने वाला एएक प्राप्त फ्लास्क में प्रति सेकंड 2-3 बूंदों की ड्रिप दर पर। एलुएट को 25 सेमी 3 की क्षमता वाले एक स्नातक किए गए सिलेंडर में स्थानांतरित करें, फ्लास्क को 5 सेमी 3 के दो खंडों से कुल्ला करें। निकालने वाला एऔर बेलन में विलयन का आयतन 20 cm 3 तक ले आएँ।

पतला एलुएट के 5.0 सेमी 3 को तैयार कारतूस डायपैक पी -3 के माध्यम से पारित किया जाता है, और फिर एसीटोनिट्राइल के 5 सेमी 3 को 1-2 बूंदों प्रति सेकंड की दर से, वाशआउट को छोड़कर। बीपी युक्त लक्ष्य अंश कारतूस से बेंजीन-एसीटोनिट्राइल (1:1) के मिश्रण के साथ 7 सेमी 3 की मात्रा में 1-2 बूंद प्रति सेकंड की दर से डिस्टिलिंग फ्लास्क में निकाला जाता है। 50 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं के तापमान पर रोटरी बाष्पीकरण पर एलुएट को वाष्पित किया जाता है, 0.5 सेमी 3 हेक्सेन को फ्लास्क में जोड़ा जाता है और एक माइक्रोमिक्सर पर अच्छी तरह से हिलाया जाता है जब तक कि सूखा अवशेष पूरी तरह से भंग न हो जाए।

निकालने की ठीक शुद्धि

हेक्सेन में नमूना समाधान के 0.5 सेमी 3 को गुरुत्वाकर्षण द्वारा तैयार डायपैक सी कारतूस पर लागू किया जाता है, फिर फ्लास्क को हेक्सेन के 0.5 सेमी 3 के दो भागों से धोया जाता है और क्रमिक रूप से सभी वॉश को छोड़कर कारतूस पर लगाया जाता है। बीपी को बेंजीन के साथ 2.0 सेमी 3 की मात्रा में 1-2 बूंद प्रति सेकंड की दर से स्ट्रिपिंग फ्लास्क में डाला जाता है और 50 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं के तापमान पर रोटरी बाष्पीकरण पर वाष्पित किया जाता है। एसीटोनिट्राइल-पानी (7:3) के मिश्रण में बीपी नमूने के अर्क के सूखे अवशेषों को भंग करें, जिनमें से वॉल्यूम क्रोमैटोग्राफिक सिस्टम के प्रत्येक प्रकार के लिए "माप की स्थिति" अनुभागों में इंगित किए गए हैं (नीचे देखें)।

स्नातक और माप

क्रोमैटोग्राफ अंशांकन

क्रोमैटोग्राफ को उनके द्रव्यमान सांद्रता के आरोही क्रम में अंशांकन समाधान (तालिका 2) के नाममात्र मात्रा के क्रमिक इनपुट (बीपी माप की शर्तों के तहत) द्वारा कैलिब्रेट किया जाता है। प्रत्येक घोल को क्रोमैटोग्राफ में कम से कम दो बार इंजेक्ट किया जाता है। क्रोमैटोग्राफिक सिस्टम की सही सेटिंग के साथ, सबसे कम सांद्रता वाले अंशांकन समाधान के क्रोमैटोग्राम पर शिखर की ऊंचाई बेसलाइन शोर स्तर से कम से कम 10 गुना अधिक होनी चाहिए।

क्रोमैटोग्राम के गणितीय प्रसंस्करण के बाद, अवधारण मापदंडों और शिखर क्षेत्रों को तय किया जाता है और अंशांकन विशेषताओं (जीसी) का निर्माण किया जाता है, जो अंशांकन समाधान में बीपी के द्रव्यमान एकाग्रता पर शिखर क्षेत्र के औसत मूल्य की निर्भरता को दर्शाता है।

अंशांकन विशेषताओं के निर्माण की शुद्धता को नियंत्रित करें।

जीसी की स्थिरता की निगरानी के नकारात्मक परिणामों के साथ, रखरखाव और निवारक रखरखाव करने के बाद, कॉलम बदलते समय अंशांकन विशेषता का पुनर्निर्माण किया जाता है (नीचे देखें)।

बेंजो का निर्धारण (ए) पाइरीन

मापन शर्तें (विकल्प 1)

विश्लेषण के लिए, बीपी नमूने का तैयार अर्क एक एसीटोनिट्राइल-पानी के मिश्रण के 0.1 सेमी 3 में भंग कर दिया जाता है।

FMD और UVPA के ऑपरेटिंग मोड उपयोगकर्ता मैनुअल (HSS "मल्टीक्रोम-स्पेक्ट्रम") के अनुसार कंप्यूटर कीबोर्ड से सेट किए जाते हैं और मॉनिटर पर निम्न रूप में नियंत्रित होते हैं:

फ्लोरोमेट्रिक डिटेक्टर

• उत्तेजना तरंग दैर्ध्य 296 एनएम;
• उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य - प्रकाश फिल्टर नंबर 2 (380 एनएम से अधिक);
• माप समय 0.2 एस।

स्वचालित डिस्पेंसर

• पुनर्जनन मात्रा 0.4 सेमी 3;
• नमूना मात्रा 0.04 सेमी 3;
• प्रवाह दर 0.15 सेमी 3 / मिनट;
• भर्ती की गति 0.3 सेमी 3 / मिनट;
• बीपी प्रतिधारण समय 11 मिनट।
• जहाजों में एलुएंट्स की संरचना और एसीटोनिट्राइल ग्रेडिएंट को संकलित करने की योजना तालिका में प्रस्तुत की गई है। 3.

टेबल तीनएलुएंट्स

मापन शर्तें (विकल्प 2)

विश्लेषण के लिए, तैयार (ऊपर देखें) बीपी नमूना अर्क एक एसीटोनिट्राइल-पानी के मिश्रण के 0.5 सेमी 3 में भंग कर दिया जाता है।

• उत्तेजना रेखा पर फ़िल्टर करें - "X4";
• उत्सर्जन लाइन पर फ़िल्टर - "खज़";
• नमूना मात्रा 0.02 सेमी 3;
• संवेदनशीलता औसत है;
• चौरसाई - 4;
• अंशांकन समाधान संख्या 3 के परीक्षण क्रोमैटोग्राम के पंजीकरण के परिणामों के आधार पर "पृष्ठभूमि" स्तर का चयन किया जाता है।

• प्रवाह दर 0.2 सेमी 3 / मिनट;
• एलुएंट 84;
• बीपी रिटेंशन का समय लगभग 12 मिनट है।

ग्रेडिएंट स्प्लिट मोड:

• प्रवाह दर 0.25 सेमी 3 / मिनट;
• एलुएंट 100 में एलुएंट 70 20 मिनट में;

मापन शर्तें (विकल्प 3)

विश्लेषण के लिए, बीपी नमूने का तैयार अर्क एक एसीटोनिट्राइल-पानी के मिश्रण के 0.5 सेमी 3 में भंग कर दिया जाता है।

• उत्तेजना तरंग दैर्ध्य 375 एनएम;
• उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य 405 एनएम;
• प्रवाह दर 0.8 सेमी 3 / मिनट;
• नमूना मात्रा 0.02 सेमी 3;
• समय स्थिर 1.0 एस।

ईश्वरीय पृथक्करण मोड:

• एलुएंट 84;
• बीपी प्रतिधारण समय लगभग 12 मिनट है;

ग्रेडिएंट स्प्लिट मोड:

• 30 से 70% तक रैखिक ढाल एलुएंट 100 में एलुएंट 70 20 मिनट में;
• बीपी रिटेंशन का समय लगभग 14 मिनट है।

क्रोमैटोग्राम का अधिग्रहण और प्रसंस्करण

नमूना निकालने के समाधान को क्रोमैटोग्राफ में दो बार पेश किया जाता है। बीपी की पहचान नमूना निकालने और अंशांकन समाधान के क्रोमैटोग्राम में शिखर प्रतिधारण मापदंडों की तुलना के आधार पर की जाती है। अनुमानित अवधारण पैरामीटर "माप शर्तों" अनुभागों में इंगित किए गए हैं। निर्धारित यौगिक की विश्वसनीय पहचान अंशांकन समाधान और नमूने के लिए अवधारण मापदंडों के मूल्यों के बीच अंतर से मेल खाती है, जो 0.2 मिनट से अधिक नहीं है।

अर्क समाधान का कमजोर पड़ना

इस घटना में किया जाता है कि निर्धारित बीपी की द्रव्यमान एकाग्रता अंशांकन समाधानों में इसकी उच्चतम द्रव्यमान एकाग्रता से अधिक हो जाती है। इस घोल की समान मात्रा और एसीटोनिट्राइल-पानी (70:30) के मिश्रण को मिलाकर बाद वाले को मिलाकर अर्क घोल को दो बार (कमजोर पड़ने का अनुपात, पतला = 2) पतला किया जाता है। इस घटना में कि एक एकल कमजोर पड़ने से "ऑफ स्केल" समाप्त नहीं होता है, प्रक्रिया दोहराई जाती है (कमजोर पड़ने की डिग्री, पतला = 4)।

माप परिणामों का प्रसंस्करण

क्रोमैटोग्राफ में नमूना निकालने के समाधान के दो इंजेक्शन के लिए शिखर क्षेत्र (क्रोमैटोग्राफ आउटपुट सिग्नल) के औसत मूल्य की गणना करें। आउटपुट संकेतों के अभिसरण को नियंत्रित करें (नीचे देखें)।

अंशांकन निर्भरता के अनुसार, समाधान में बीपी की द्रव्यमान एकाग्रता का मान शिखर क्षेत्र के औसत मूल्य के अनुरूप पाया जाता है।

i-वें नमूने (निर्धारण का परिणाम) में BP (I^), mg/kg के द्रव्यमान अंश की गणना सूत्र द्वारा की जाती है

जहां सीबीपी बीपी के आई-वें नमूने के अर्क के समाधान में विश्लेषक की द्रव्यमान एकाग्रता है, μg/cm 3 (अंशांकन निर्भरता के अनुसार गणना, शिखर क्षेत्र के औसत मूल्य के आधार पर); वीपी- बीपी के /-वें नमूने के अर्क के घोल की मात्रा, सेमी 3; आर- तालिका के अनुसार नमूना तैयार करने के चरण में बीपी के निष्कर्षण की डिग्री। 2; एम ईक्यू- शुद्धिकरण और बाद में क्रोमैटोग्राफिक निर्धारण के लिए उपयोग किए जाने वाले बीपी के पानी-एसीटोनिट्राइल अर्क के अनुपात के अनुरूप नमूने के हिस्से का द्रव्यमान - नमूने का समतुल्य द्रव्यमान, जो 5.0 ग्राम (अनाज, स्मोक्ड उत्पाद) या 0.25 ग्राम (मिट्टी) है।

अर्क के कमजोर पड़ने की स्थिति में (ऊपर देखें), बीपी का द्रव्यमान अंश ( डब्ल्यू,-, mg/kg) /-th आयाम में सूत्र द्वारा परिकलित किया जाता है

कहाँ पे डब्ल्यूजे- सूत्र द्वारा प्राप्त मूल्य (II। 1), पतला - कमजोर पड़ने की डिग्री (ऊपर देखें)।

दो नमूनों (विश्लेषण परिणाम) के लिए बीपी के द्रव्यमान अंश के औसत मूल्य की गणना करें:

बीपी के द्रव्यमान अंश को निर्धारित करने के परिणामों के अभिसरण को नियंत्रित करें (नीचे देखें)।

माप परिणामों का पंजीकरण

निर्धारित की जा रही वस्तु में बीपी के द्रव्यमान अंश के विश्लेषण (माप) का परिणाम रूप में प्रस्तुत किया जाता है

कहाँ पे डब्ल्यूबीपी का द्रव्यमान अंश, सूत्र (II.3) द्वारा परिकलित।

यदि बीपी का पता नहीं चलता है, तो माप परिणाम फॉर्म में प्रस्तुत किया जाता है

जहां P "ds तालिका 1 के अनुसार BP की अनुमेय सामग्री है।

एमवीआई त्रुटि नियंत्रण

क्रोमैटोग्राफ आउटपुट सिग्नल का अभिसरण नियंत्रण

क्रोमैटोग्राफ में समाधान के दो इंजेक्शन के साथ प्राप्त आउटपुट सिग्नल (क्रोमैटोग्राम पर बीपी चोटियों के क्षेत्रों के मूल्यों) के संबंध में प्रत्येक नमूने के अंशांकन और विश्लेषण के दौरान नियंत्रण किया जाता है। नियंत्रण परिणाम को संतोषजनक माना जाता है यदि अंकगणित माध्य को संदर्भित आउटपुट संकेतों की सीमा 8% से अधिक न हो।

अंशांकन विशेषता के निर्माण की शुद्धता का नियंत्रण

प्रत्येक अंशांकन पर नियंत्रण किया जाता है। नियंत्रण परिणाम को संतोषजनक माना जाता है यदि प्रत्येक "वें अंशांकन समाधान" के लिए शर्तें पूरी होती हैं

कहाँ पे एसजे- वाई "वें अंशांकन समाधान, सीयू के लिए बीपी पीक क्षेत्र का औसत मूल्य; एस)- y "वें कैलिब्रेशन सॉल्यूशन, c.u में BP के मास कंसंट्रेशन की कैलिब्रेशन विशेषता के अनुरूप पीक एरिया का मान।

अंशांकन विशेषता की स्थिरता को नियंत्रित करना

नियंत्रण समाधान का उपयोग करके विश्लेषण किए गए नमूनों के साथ काम शुरू करने से पहले दैनिक नियंत्रण किया जाता है, जिसका उपयोग विश्लेषण की गई वस्तु में इसकी अनुमेय सामग्री के अनुरूप बीपी के द्रव्यमान एकाग्रता के साथ अंशांकन समाधान के रूप में किया जाता है।

यदि शर्त पूरी हो जाती है तो नियंत्रण परिणाम को संतोषजनक माना जाता है

जहां सी की - नियंत्रण समाधान में बीपी के द्रव्यमान एकाग्रता का मूल्य, शिखर क्षेत्र के औसत मूल्य के लिए अंशांकन विशेषता द्वारा पाया जाता है, माइक्रोग्राम / सेमी 3; के साथ - तालिका के अनुसार नियंत्रण समाधान में बीपी के द्रव्यमान एकाग्रता का मूल्य। 2.

निर्धारण परिणामों के अभिसरण का नियंत्रण

नियंत्रण प्रत्येक विश्लेषण (माप) पर किया जाता है। नियंत्रण के परिणाम को संतोषजनक माना जाता है यदि अंकगणितीय माध्य (विश्लेषण का परिणाम) के लिए निर्दिष्ट निर्धारण के परिणामों की सीमा 10% से अधिक नहीं है।

योगात्मक विधि द्वारा त्रुटि नियंत्रण

नियंत्रण किया जाता है:

• ए) इस एमवीआई के आवेदन की शुरुआत से पहले - बिना असफलता के;
• बी) जब बीपी के द्रव्यमान अंश को निर्धारित करने के संदिग्ध परिणाम दिखाई देते हैं;
• ग) अंतःप्रयोगशाला नियंत्रण की योजना के अनुसार;
• घ) प्रयोगशाला की गतिविधियों को नियंत्रित करने वाले संगठनों के अनुरोध पर।

एडिटिव कैलिब्रेशन सॉल्यूशन के आधार पर बनता है। योजक मूल्य (डी, mg/kg) को चुना जाता है ताकि नमूने में BP का द्रव्यमान अंश 1.5-2.5 गुना बढ़ जाए। गणना सूत्र के अनुसार की जाती है

कहाँ पे सी डी- अंशांकन समाधान में बीपी का द्रव्यमान एकाग्रता, माइक्रोग्राम / सेमी 3; वो- नमूना में पेश किए गए बीपी अंशांकन समाधान की मात्रा, सेमी 3; एम एफडब्ल्यू- विश्लेषण के लिए लिए गए नमूने के बराबर वजन, जी।

तालिका के अनुसार तैयार किए गए अंशांकन समाधान के रूप में योजक को अनाज या मिट्टी के नमूने के प्राथमिक अर्क में पेश किया जाता है। 2. योजक को स्मोक्ड उत्पाद के प्राथमिक अर्क में हेक्सेन में समान सांद्रता के घोल के रूप में पेश किया जाता है। ऐसा करने के लिए, हेक्सेन में बीपी संरचना का जीआरएम (ऊपर देखें) पतला है (प्रमाणित एकाग्रता मूल्य के लिए सुधार को ध्यान में रखते हुए) अंशांकन समाधान तैयार करने की प्रक्रिया के अनुसार (ऊपर देखें), हेक्सेन का उपयोग विलायक के रूप में और आवश्यक एकाग्रता का समाधान प्राप्त करना। विलायक के वाष्पीकरण के बाद एसीटोनिट्राइल में बीपी की जीएसओ संरचना का उपयोग करते समय, सूखे अवशेषों को हेक्सेन में फिर से घोल दिया जाता है और हेक्सेन के साथ पतला किया जाता है, जैसा कि ऊपर वर्णित है।

बीपी की प्राकृतिक सामग्री के साथ दो नमूनों का विश्लेषण और बीपी के अतिरिक्त दो नमूनों का विश्लेषण समान परिस्थितियों (एक उपकरण, एक अंशांकन विशेषता, एक ऑपरेटर) के तहत किया जाता है। यदि शर्त पूरी हो जाती है तो नियंत्रण परिणाम को संतोषजनक माना जाता है

कहाँ पे डब्ल्यू डी- योगात्मक, मिलीग्राम/किलोग्राम वाले नमूनों में बीपी का द्रव्यमान अंश; वू- बिना एडिटिव के नमूनों में बीपी का द्रव्यमान अंश, मिलीग्राम / किग्रा ( डब्ल्यू डीतथा डब्ल्यूअभिसरण नियंत्रण के सकारात्मक परिणामों के साथ दो नमूनों के द्रव्यमान अंश का औसत मान)।

व्यावहारिक इकोएनालिटिक्स में इस तकनीक के अनुप्रयोग का एक उदाहरण क्रोमैटोग्राम और खाद्य उत्पादों में बेंजो (ए) पाइरीन के निर्धारण के लिए एक अंशांकन ग्राफ के रूप में काम कर सकता है (आंकड़े 11.15 और 11.16)।

फ्लोरीमेट्रिक डिटेक्शन 375 Ex/405 Et (वेरिएंट 3) के साथ परिवर्धन की विधि द्वारा वस्तुओं में बेंजो (ए) पाइरीन के निर्धारण में त्रुटि के नियंत्रण के परिणाम।

योजक का स्तर बेंज़पायरीन (0.0005 मिलीग्राम / किग्रा - अनाज और स्मोक्ड उत्पादों, 0.01 मिलीग्राम / किग्रा - मिट्टी) की स्वीकार्य सामग्री के 0.5 से मेल खाता है।

चावल। 11.15

घटक के लिए स्नातक: बीएपी सहसंबंध गुणांक: 0.999667 प्रतिक्रिया: क्षेत्र

संदर्भ चैनल 365 Ex/405 Em

फॉर्मूला वाई = की एक्स

मान 100 ( डब्ल्यू डी - डब्ल्यू-डी)/डीनमूने 1 और 2 के लिए क्रमशः 10 और 16% हैं। गेहूं के आटे के प्रारंभिक नमूने में निर्धारित यौगिक 0.00009 किग्रा/किग्रा की मात्रा में मौजूद है।

नमूना 1 - 0.00064 मिलीग्राम/किग्रा नमूना 2 - 0.00067 मिलीग्राम/किग्रा

• सामान्य स्थिति में, अंशांकन विशेषता का रूप S = AC + B होता है, जहां S शिखर क्षेत्र है, c.u.; सी प्रदूषक की द्रव्यमान सांद्रता है, माइक्रोग्राम/सेमी3; ए और बी गुणांक हैं।

पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन: भौतिक रासायनिक गुण और जैविक प्रभाव। बेंजापायरीन के निर्धारण के तरीकों की समीक्षा। फ्लोरोसेंट डिटेक्शन के साथ उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा पानी में बेंजापाइरीन का निर्धारण।

नॉलेज बेस में अपना अच्छा काम भेजें सरल है। नीचे दिए गए फॉर्म का प्रयोग करें

छात्र, स्नातक छात्र, युवा वैज्ञानिक जो अपने अध्ययन और कार्य में ज्ञान के आधार का उपयोग करते हैं, वे आपके बहुत आभारी रहेंगे।

प्रकाशित किया गया http://www.allbest.ru/

इस पाठ्यक्रम कार्य में 30 पृष्ठ, 1 खंड, 4 उपखंड, 14 पैराग्राफ, 6 टेबल और 9 आंकड़े शामिल हैं। पाठ्यक्रम के अंत में संदर्भों की एक सूची है, जिसमें 14 आइटम शामिल हैं।

मेरे शोध का उद्देश्य बेंजो (ए) पाइरीन, इसके गुण, कैंसरकारी प्रभाव, साथ ही इसके निर्धारण के तरीके हैं। कोर्स वर्क मास स्पेक्ट्रोस्कोपिक डिटेक्शन के साथ गैस क्रोमैटोग्राफी और फ्लोरेसेंस डिटेक्शन के साथ हाई परफॉर्मेंस लिक्विड क्रोमैटोग्राफी जैसे तरीके प्रस्तुत करता है। इसके अलावा, डिटेक्टरों पर विचार किया गया था जो बेंजो (ए) पाइरीन के विश्लेषणात्मक संकेत को रिकॉर्ड करने के लिए उपयुक्त हैं और एक या दूसरे डिटेक्टर का उपयोग करने की तर्कसंगतता की पुष्टि की गई थी।

इसके अलावा पाठ्यक्रम के काम में पानी में बेंजो (ए) पाइरीन के निर्धारण के लिए तरीके प्रस्तुत किए जाते हैं, जिसमें नमूना तैयार करना, क्रोमैटोग्राफ का अंशांकन, विश्लेषण और डेटा रिकॉर्डिंग शामिल है। पेपर इन विधियों द्वारा प्राप्त क्रोमैटोग्राम प्रस्तुत करता है।

कीवर्ड: पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन, बेंजो (ए) पाइरेन, उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी, गैस क्रोमैटोग्राफी, फ्लोरोसेंट डिटेक्शन।

ताज़ी कोर्स वर्क जिसमें 30 पेज, 1 सेक्शन, 4 सब सेक्शन, 14 पॉइंट, 6 मासी और 9 नंबर शामिल हैं। घसीट काम के किनारे पर, साहित्य की एक सूची दी गई है, जो बिंदु 14 से शुरू होती है।

सेल्टा ने बेंजो (ए) पाइरीन, नकारात्मक गुणों, कार्सिनोजेनिक प्रभावों के मेरे अध्ययन पर, और इसके लिए किसी भी तरह की विधि निर्धारित नहीं की है। मास-स्पेक्ट्रल वक्र के साथ गैस क्रोमैटोग्राफी और फ्लोरोसेंस वक्र के साथ उच्च दक्षता क्रोमैटोग्राफी जैसी विधियों सहित पाठ्यक्रम कार्य। यह वही है जो डिटेक्टरों को माना जाता है, जो बेंज़ो (ए) पाइरीन से सिग्नल के विश्लेषणात्मक रिसेप्शन और डिटेक्टर पर उचित उपयोग के लिए उपयुक्त हैं।

इसलिए, बेसिन पर काम के दौरान, हम पानी में बेंजो (ए) पाइरीन के निर्धारण के तरीकों को प्रस्तुत करते हैं, जिसमें नमूने पर तैयारी, क्रोमैटोग्राफ पर कैलिब्रेट करना, डेटा पर विश्लेषण और पंजीकरण शामिल है। चार्टर प्रस्तुत डेटा, कार्यप्रणाली के अनुसार प्राप्त करना।

मुख्य विचार: पॉलीसाइक्लिक सुगंधित पानी, बेंज (ए) पाइरेन, अत्यधिक कुशल तकनीक क्रोमैटोग्राफी, गैस क्रोमैटोग्राफी, फ्लोरिसेंट ओपनिंग।

30 पक्षों, 1 विभाजन, 4 सबफ़ोल्डर्स, 14 पॉइंट्स, 6 टेबल और 9 ड्रॉइंग को कवर करने के लिए कोर्स वर्क दिया गया था। पाठ्यक्रम के अंत में साहित्य की सूची, जिसमें 14 अंक होते हैं।

"बेंज़ (ए) पाइरीन, इसकी शक्ति, कैंसरजन्यता, साथ ही इसकी पहचान के तरीकों पर मेरे शोध के बारे में। पाठ्यक्रम के काम में, मास स्पेक्ट्रोस्कोपी पहचान के साथ गैस क्रोमैटोग्राफी जैसी विधियां अत्यधिक प्रभावी हैं, लेकिन क्रोमैटोग्राफी अत्यधिक प्रभावी और फ्लोरोसेंट है बेंजो (ए) पाइरीन के लिए एक विश्लेषणात्मक संकेत दर्ज करने के लिए उपयुक्त डिटेक्टर और अन्य डिटेक्टर की तर्कसंगतता की पुष्टि की जाती है।

इसके अलावा, पाठ्यक्रम के काम में, पानी में बेंजो (ए) पाइरीन के पदनाम के लिए कार्यप्रणाली प्रस्तुत की जाती है, जिसमें नमूना तैयार करना, क्रोमैटोग्राफ अंशांकन, विश्लेषण और डेटा का पंजीकरण शामिल है। इन विधियों से लिए गए क्रोमैटोग्राम द्वारा रोबोट का प्रतिनिधित्व किया जाता है।

मुख्य शब्द: पॉलीसाइक्लिक सुगंधित कार्बोहाइड्रेट, बेंज (ए) पाइरेन, अत्यधिक कुशल रिडिन्ना क्रोमैटोग्राफी, गैस क्रोमैटोग्राफी, फ्लोरोसेंट डिटेक्शन।

प्रतीक

परिचय

1. साहित्य समीक्षा

1.1.1 सामान्य जानकारी

1.1.2 पीएएच की उत्पत्ति

1.1.4 जैविक क्रिया

1.1.5 बेंज (ए) पाइरीन। सामान्य जानकारी

1.2 बेंजापायरीन के निर्धारण के लिए तरीके

1.2.1 गैस क्रोमैटोग्राफी

1.3 एचपीएलसी द्वारा पानी में बेंजापायरीन का निर्धारण

1.3.2 नमूना तैयार करना

1.3.3 स्नातक

1.3.4 एचपीएलसी विश्लेषण करना

1.3.5 डेटा की रिकॉर्डिंग और प्रसंस्करण

1.4.2 बीपी की मात्रा

ग्रंथ सूची

प्रतीक

पीएएच - पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन

बीपी - बेंजो (ए) पाइरीन

एमपीसी - अधिकतम अनुमेय एकाग्रता

एमपीसी एसएस - औसत दैनिक अधिकतम स्वीकार्य एकाग्रता

एचपीएलसी - उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी

जीसी - गैस क्रोमैटोग्राफी

एलसी - तरल क्रोमैटोग्राफी

एनपीसी - सामान्य चरण क्रोमैटोग्राफी

RPCH - रिवर्स चरण क्रोमैटोग्राफी

एलएलई - तरल-तरल निष्कर्षण

ओएफएस - उलट-चरण शर्बत

टीएलसी - पतली परत क्रोमैटोग्राफी

परिचय

पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन (PAHs) लगातार कार्बनिक प्रदूषकों के समूह से संबंधित हैं। उन्होंने कार्सिनोजेनिक गुणों का उच्चारण किया है। पीएएच के सबसे खतरनाक प्रतिनिधियों में से एक बेंजो (ए) पाइरीन (बीपी) है।

बेंज़ (ए) पाइरीन की खोज 1933 में हुई थी, बाद में 1935 में इसकी कैंसरजन्यता की पुष्टि के लिए अध्ययन किए गए। आज, बेंज़ो (ए) पाइरीन को प्रथम खतरा वर्ग के कार्सिनोजेन के रूप में वर्गीकृत किया गया है। इसमें उत्परिवर्तजन गुण होते हैं। बीपी की एक छोटी सी सांद्रता भी मानव शरीर को नकारात्मक रूप से प्रभावित करती है। लंबे समय तक एक्सपोजर के साथ हवा में बीपी की अधिकतम स्वीकार्य एकाग्रता (एमएसी) से अधिक होने से फेफड़ों का कैंसर हो सकता है। इसलिए, इसकी पहचान और परिभाषा की समस्या तीव्र है। इसके भौतिक-रासायनिक गुणों के आधार पर, इसके निर्धारण के लिए कई समान तरीके विकसित किए गए, जो केवल नमूने और नमूना तैयार करने के चरणों में भिन्न थे। मेरे काम का उद्देश्य पीएएच और बीपी के गुणों से परिचित होना था, पीएएच को अलग करने के तरीकों और बीपी को निर्धारित करने के तरीकों का अध्ययन करना था।

1. साहित्य समीक्षा

1.1 पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन (पीएएच)

1.1.1 सामान्य जानकारी

पीएएच बेंजीन श्रृंखला के उच्च-आणविक कार्बनिक यौगिक हैं, जिनकी संख्या 200 से अधिक प्रतिनिधि हैं। इनमें 2 से 7 बेंजीन के छल्ले होते हैं। पीएएच प्रकृति में व्यापक रूप से वितरित हैं और समय के साथ स्थिर हैं। उनके पास कार्सिनोजेनिक और म्यूटाजेनिक गतिविधि है। उनकी विषाक्तता और कार्सिनोजेनिक गुणों के कारण, उन्हें प्राथमिकता वाले प्रदूषकों के रूप में वर्गीकृत किया जाता है। पीएएच के निर्धारण का उपयोग पारिस्थितिक और भू-रासायनिक अध्ययनों में किया जाता है। उनमें से सबसे जहरीले 3, 4-बेंज (ए) पाइरीन और 1, 12-बेंज़पेरीलीन हैं, जो विशेष रूप से अक्सर पर्यावरणीय वस्तुओं में निर्धारित होते हैं।

1.1.2 पीएएच की उत्पत्ति

पीएएच जीवाश्म ईंधन को जलाने का एक अवांछनीय उपोत्पाद है। वे प्रकृति में एबोजेनिक प्रक्रियाओं के कारण बनते हैं। मिट्टी के ह्यूमिक घटकों से निकलने वाले हजारों टन पीएएच हर साल जीवमंडल में प्रवेश करते हैं। लेकिन इनमें से अधिकांश कार्सिनोजेन्स मानव निर्मित प्रक्रियाओं से आते हैं।

कोयले को न्यूनतम हाइड्रोजन सामग्री के साथ भारी मात्रा में पॉलीकंडेंस सुगंधित बेंजीन नाभिक का मिश्रण माना जाता है। जब इन पदार्थों को भट्टियों, बिजली संयंत्रों, आंतरिक दहन इंजनों में जलाया जाता है, तो ये यौगिक विघटित हो जाते हैं। कम दहन तापमान और वायुमंडलीय ऑक्सीजन की अपर्याप्त आपूर्ति पर, प्रतिक्रियाशील एसिटिलीन और स्निग्ध हाइड्रोकार्बन बनते हैं। एसिटिलीन ब्यूटाडीन में पॉलीमराइज़ करता है, जो तब एक सुगंधित हाइड्रोकार्बन के नाभिक का निर्माण करता है। जब मौजूदा सुगंधित नाभिक में जोड़ा जाता है, तो पीएएच का उत्पादन होता है।

अधूरे दहन से कार्बन-कालिख के कण पैदा होते हैं। पीएएच इसकी सतह पर सोख लिए जाते हैं और पर्यावरण में प्रवेश करते हैं।

1.1.3 पीएएच के भौतिक और रासायनिक गुण

अधिकांश पीएएच एक उच्च गलनांक के साथ क्रिस्टलीय यौगिक (कुछ नेफ़थलीन डेरिवेटिव के अपवाद के साथ) होते हैं। पीएएच पानी में खराब घुलनशील हैं। कार्बनिक सॉल्वैंट्स में जाने पर, उनकी घुलनशीलता बढ़ जाती है और उनके आणविक भार पर निर्भर करती है। एक नियम के रूप में, सुगंधित छल्ले और एल्काइल रेडिकल की संख्या में वृद्धि के साथ, पीएएच की घुलनशीलता कम हो जाती है।

अधिकांश पीएएच यूवी विकिरण (300-420 एनएम) को तीव्रता से अवशोषित करते हैं और क्विनोन और कार्बोनिल यौगिक बनाने के लिए वातावरण में तेजी से फोटोऑक्सीडाइज करते हैं।

1.1.4 जैविक क्रिया

पीएएच श्वसन पथ, त्वचा या पाचन तंत्र के माध्यम से शरीर में प्रवेश करते हैं।

शरीर के साथ पीएएच की बातचीत का प्रकार मुख्य रूप से हाइड्रोकार्बन पर ही निर्भर करता है। मूल रूप से, जब पीएएच शरीर में प्रवेश करते हैं, एंजाइम एक एपॉक्सी यौगिक बनाते हैं जो ग्वानिन के साथ प्रतिक्रिया करता है, जो डीएनए संश्लेषण में हस्तक्षेप करता है, विकारों का कारण बनता है, या उत्परिवर्तन की ओर जाता है जो कैंसर के विकास में योगदान देता है।

सबसे जहरीले पीएएच में से एक, जैसा कि पहले उल्लेख किया गया है, बीपी है। इसके अलावा, बीपी के प्रभाव के कारण पीएएच की कार्सिनोजेनिक गतिविधि 70-80% है। इसलिए, अन्य पीएएच की उपस्थिति का न्याय करने के लिए खाद्य उत्पादों में बीपी की उपस्थिति का उपयोग किया जा सकता है।

1.1.5 बेंज (ए) पाइरीन। सामान्य विशेषताएँ

बेंज (ए) पाइरीन (सी 20 एच 12) एक रासायनिक यौगिक है, जो पॉलीसाइक्लिक हाइड्रोकार्बन (चित्र। 1.1) के परिवार का एक प्रतिनिधि है, जो पहले खतरनाक वर्ग का पदार्थ है। यह हाइड्रोकार्बन तरल, ठोस और गैसीय ईंधन (गैसीय ईंधन के दहन के दौरान कुछ हद तक) के दहन के दौरान बनता है।

चित्र 1.1 बेंजो (ए) पाइरीन का संरचनात्मक सूत्र।

बीपी पीली प्लेट या सुई है। यह गैर-ध्रुवीय सॉल्वैंट्स में अत्यधिक घुलनशील है, उदाहरण के लिए, टोल्यूनि, बेंजीन, xylene में। यह ध्रुवीय सॉल्वैंट्स में थोड़ा कम घुलनशील है, लेकिन व्यावहारिक रूप से पानी में अघुलनशील है।

बीपी मुख्य रूप से मिट्टी में जमा होता है, कम पानी में। मिट्टी से, यह पौधों में प्रवेश करता है, ट्रॉफिक श्रृंखला के साथ अपना आंदोलन जारी रखता है। प्रत्येक अगले स्तर पर, बेंजो (ए) पाइरीन की सामग्री परिमाण के क्रम से बढ़ जाती है।

बीपी एक विशिष्ट रासायनिक कार्सिनोजेन है और न्यूनतम सांद्रता में भी मनुष्यों के लिए खतरनाक है, क्योंकि इसमें मानव शरीर में जमा होने का गुण होता है। विभिन्न वस्तुओं में बेंजो (ए) पाइरीन का एमपीसी तालिका 1.1 में प्रस्तुत किया गया है। इसके अलावा, बीपी में उत्परिवर्तजन गुण होते हैं, अर्थात। यह उत्परिवर्तन पैदा कर सकता है।

तालिका 1.1 विभिन्न वातावरणों में बेंजो (ए) पाइरीन का एमपीसी

वस्तु का नाम	मैक, एमसीजी / किग्रा
स्मोक्ड उत्पाद
अनाज
पेय जल
जल भंडार

हवा में, औसत दैनिक अधिकतम स्वीकार्य एकाग्रता (एमपीसी सीसी) 0.1 माइक्रोग्राम/100 मीटर 3 है।

1.2 बेंजो (ए) पाइरीन के निर्धारण के लिए तरीके

पीएएच का निर्धारण करने के लिए मुख्य तरीके फ्लोरीमेट्रिक या स्पेक्ट्रोस्कोपिक डिटेक्शन और गैस क्रोमैटोग्राफी (जीसी) के साथ चरण उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) को बड़े पैमाने पर चयनात्मक, लौ आयनीकरण, इलेक्ट्रॉन कैप्चर या फोटोयोनिज़ेशन डिटेक्शन के साथ उलट दिया जाता है।

बीपी का निर्धारण करने के लिए, शापोलस्की प्रभाव पर आधारित ल्यूमिनसेंट स्पेक्ट्रोस्कोपी की विधि का भी उपयोग किया जाता है। प्रभाव का सार इस तथ्य में निहित है कि कम तापमान पर कुछ पॉलीएटोमिक अणु उच्च-रिज़ॉल्यूशन अर्ध-रैखिक ल्यूमिनेसिसेंस स्पेक्ट्रा देते हैं। इस पद्धति का लाभ शुद्धिकरण और संवेदनशीलता की डिग्री पर कम मांग है। लेकिन हार्डवेयर की जटिलता बीपी की परिभाषा के लिए एक महत्वपूर्ण सीमा है।

क्रोमैटोग्राफी पदार्थों के पृथक्करण, विश्लेषण और भौतिक-रासायनिक अध्ययन की एक विधि है जो एक मोबाइल चरण प्रवाह में एक सॉर्बेंट परत के साथ एक पदार्थ के एक क्षेत्र के आंदोलन के आधार पर सोरशन और विलुप्त होने के कार्यों के कई दोहराव के साथ होती है। पृथक्करण दो चरणों के बीच अलग-अलग पदार्थों के वितरण स्थिरांक में अंतर के कारण होता है। क्रोमैटोग्राफी की सबसे महत्वपूर्ण विशेषता प्रक्रिया की गतिशील प्रकृति है, जिसमें अणुओं या कणों के एकाग्रता वितरण में ग्रेडिएंट होते हैं।

मिश्रण के घटकों को अलग करने की सामान्य योजना चित्र 1.2 में दिखाई गई है।

चित्र 1.2 क्रोमैटोग्राफिक प्रक्रिया के कार्यान्वयन की योजना

क्रोमैटोग्राफिक विधियों के लाभों में एक मिश्रण में घटकों के पृथक्करण, पहचान और परिमाणीकरण की विशेषता वाले बड़ी संख्या में मापदंडों के एक साथ कार्यान्वयन की संभावना शामिल है। इस प्रकार, क्रोमैटोग्राफी सूचना का एक मल्टीचैनल स्रोत है।

मोबाइल चरण के एकत्रीकरण की स्थिति के आधार पर, क्रोमैटोग्राफिक विधियों को गैस और तरल क्रोमैटोग्राफी में विभाजित किया जाता है।

गैस क्रोमैटोग्राफी, बदले में, स्थिर (स्थिर) के एकत्रीकरण की स्थिति के आधार पर, गैस-तरल और गैस-ठोस-चरण क्रोमैटोग्राफी शामिल है।

तरल क्रोमैटोग्राफी को तरल-तरल, तरल-ठोस चरण और तरल-जेल में विभाजित किया गया है।

1.2.1 गैस क्रोमैटोग्राफी

जीसी एक प्रकार की क्रोमैटोग्राफी है जिसमें मोबाइल चरण गैस या वाष्प की स्थिति में होता है - एक अक्रिय गैस। यह एक वाहक गैस है। स्थिर चरण एक उच्च आणविक भार तरल है, जो एक झरझरा वाहक या एक लंबी केशिका ट्यूब की दीवारों पर तय होता है।

जीसी उन पदार्थों के मिश्रण को अलग करने की एक सार्वभौमिक विधि है जो बिना अपघटन के वाष्पित हो जाते हैं। मिश्रण के घटक एक वाहक गैस के साथ क्रोमैटोग्राफिक कॉलम के माध्यम से चलते हैं। इस मामले में, मिश्रण को बार-बार वाहक गैस और स्थिर चरण के बीच वितरित किया जाता है। पृथक्करण ठोस चरण में मिश्रण घटकों की अलग-अलग घुलनशीलता के कारण होता है। स्तंभ से पदार्थों के बाहर निकलने पर, उन्हें एक डिटेक्टर का उपयोग करके रिकॉर्ड किया जाता है।

डिटेक्टर एक सतत उपकरण है जो एक विश्लेषणात्मक संकेत दर्ज करता है। जीसी के लिए लगभग 60 प्रकार के डिटेक्शन सिस्टम प्रस्तावित किए गए हैं। तालिका 1.2 जीसी में सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले डिटेक्टरों के प्रकारों को सूचीबद्ध करती है।

तालिका 1.2 गैस क्रोमैटोग्राफी डिटेक्टर

डिटेक्टर का नाम	संचालन का सिद्धांत
तापीय चालकता द्वारा	विश्लेषक और वाहक गैस के बीच तापीय चालकता में अंतर दर्ज किया गया है
डिटेक्टर का नाम	संचालन का सिद्धांत
इलेक्ट्रॉनिक ग्रिपिंग	वाहक गैस के β-कणों या उच्च-ऊर्जा इलेक्ट्रॉनों के साथ विकिरण द्वारा उत्पन्न थर्मल इलेक्ट्रॉनों के विश्लेषण द्वारा कब्जा
यूवी	एक विशिष्ट विश्लेषण क्रोमोफोर द्वारा यूवी प्रकाश का अवशोषण
माइक्रोवेव प्लाज्मा	माइक्रोवेव प्लाज्मा में एक विश्लेषक की उत्तेजना और पदार्थ में मौजूद तत्व की विशेषता तरंग दैर्ध्य पर प्रकाश का उत्सर्जन
लौ फोटोमेट्रिक	एक ज्वाला में विश्लेषक की उत्तेजना और पदार्थ में मौजूद तत्व के प्रकार के आधार पर प्रकाश का उत्सर्जन
परमाणु अवशोषण स्पेक्ट्रोमीटर	एक विशिष्ट तरंग दैर्ध्य पर प्रकाश के अवशोषण के बाद थर्मल परमाणुकरण
विद्युत	तरल प्रवाह द्वारा विश्लेषण किए गए पदार्थों का अवशोषण और प्रवाह में उनका विद्युत रासायनिक पता लगाना
आईआर स्पेक्ट्रोमीटर	विश्लेषण द्वारा आईआर क्षेत्र में प्रकाश का अवशोषण
लौ आयनीकरण	विश्लेषण किए गए पदार्थों के दहन के दौरान एक लौ में आयनों का निर्माण और पंजीकरण
मास स्पेक्ट्रोमीटर	इलेक्ट्रॉन प्रभाव या रासायनिक आयनीकरण द्वारा आणविक और खंड आयनों का निर्माण
फोटोआयनीकरण	विश्लेषण पर कठोर यूवी विकिरण की कार्रवाई के तहत आयनों का फोटोकैमिकल गठन और पंजीकरण

लौ आयनीकरण डिटेक्टर संवेदनशील है लेकिन बीपी के लिए गैर-चयनात्मक है। इसलिए, इसका उपयोग केवल साधारण मिश्रणों के विश्लेषण के लिए किया जाता है।

इलेक्ट्रॉन-कैप्चर डिटेक्टर बीपी के प्रति संवेदनशील और चयनात्मक दोनों है, लेकिन इलेक्ट्रोफिलिक यौगिकों की उच्च प्रतिक्रिया के कारण इसका अनुप्रयोग मुश्किल है।

बीपी का निर्धारण करने के लिए फोटोकरण का उपयोग आशाजनक है, लेकिन संचालन की अस्थिरता और उपकरणों की उच्च लागत के कारण इसे व्यापक वितरण नहीं मिला है।

मास स्पेक्ट्रोमेट्रिक डिटेक्शन के साथ जीसी जटिल मिश्रणों में बेंजापायरीन के निर्धारण के लिए सबसे अच्छा समाधान है

मास स्पेक्ट्रोमीटर के संचालन का सिद्धांत द्रव्यमान द्वारा टुकड़ों या आयनों को वितरित करना है। आयनीकरण की प्रक्रिया का उपयोग तटस्थ अणुओं को आयनों में बदलने के लिए किया जाता है। कार्बनिक यौगिकों को आयनित करने के लिए अक्सर इलेक्ट्रॉन प्रभाव का उपयोग किया जाता है। इसके अलावा, रासायनिक आयनीकरण का उपयोग किया जाता है, जो आयन-आणविक प्रतिक्रियाओं की घटना पर आधारित होता है। जैविक अणुओं, पॉलिमर और अन्य पदार्थों का अध्ययन करने के लिए जिन्हें बिना अपघटन के गैस चरण में स्थानांतरित नहीं किया जा सकता है, विशेष प्रकार के आयनीकरण का उपयोग किया जाता है।

मास स्पेक्ट्रोस्कोपिक डिटेक्शन के साथ जीसी एकमात्र तरीका है जो मात्रात्मक निर्धारण के लिए आंतरिक मानकों के उपयोग की अनुमति देता है। पीएएच के लेबल किए गए 2 एच और 13 सी आइसोमेरिक मिश्रण मानक पदार्थों के रूप में उपयोग किए जाते हैं। वजन में बदलाव और तथ्य यह है कि संदर्भ पदार्थों में लगभग समान विशेषताएं हैं जैसे कि बिना लेबल वाले पीएएच पहचान की सुविधा प्रदान करते हैं।

मास स्पेक्ट्रोमीटर के मामूली नुकसान में से एक डिटेक्टर प्रतिक्रिया की रैखिकता की छोटी सीमा है। इसलिए, एक पारंपरिक मास स्पेक्ट्रोमीटर को उड़ान के समय से बदल दिया जाता है। इसकी विशेषता यह है कि कम समय में यौगिकों का एक पूर्ण द्रव्यमान स्पेक्ट्रम प्राप्त करना और द्रव्यमान का सटीक माप 0.0001 a.m.u तक प्राप्त करना संभव है।

गैस क्रोमैटोग्राफी के साथ टाइम-ऑफ-फ़्लाइट मास स्पेक्ट्रोमीटर का संयोजन जटिल मिश्रणों और कम पता लगाने की सीमा का अच्छा घटक पृथक्करण प्रदान करता है।

1.2.2 तरल क्रोमैटोग्राफी

तरल क्रोमैटोग्राफी (एलसी) जटिल पदार्थों के पृथक्करण और विश्लेषण के लिए एक विधि है, जिसमें एक तरल एक मोबाइल चरण के रूप में कार्य करता है। एक ओर, मोबाइल चरण एक परिवहन कार्य करता है, अर्थात। गैर-शोषक पदार्थ को स्थानांतरित करता है, और दूसरी ओर संतुलन स्थिरांक को नियंत्रित करता है, और, परिणामस्वरूप, स्थिर चरण के साथ बातचीत के परिणामस्वरूप और पदार्थों के अणुओं के अलग होने के परिणामस्वरूप प्रतिधारण।

एलसी में, अलगाव अक्सर कमरे के तापमान पर होता है। विश्लेषण किए गए नमूने को कॉलम में इंजेक्ट किया जाता है और एलुएंट को पास किया जाता है। एलसी में, मोबाइल चरण की प्रकृति आवश्यक है। इसके कारण, स्थिर चरण की एक छोटी संख्या और बड़ी संख्या में मोबाइल चरण के विभिन्न संयोजन विभिन्न विश्लेषणात्मक समस्याओं को हल करना संभव बनाते हैं।

शास्त्रीय तरल क्रोमैटोग्राफी में विश्लेषण लंबे समय तक किया जाता है, क्योंकि नमूना फ़ीड दर कम है। यह विधि मिश्रण के घटकों के प्रारंभिक पृथक्करण के लिए उपयुक्त है। ज्यादातर मामलों में एचपीएलसी का उपयोग किया जाता है। उच्च पृथक्करण दक्षता के साथ तेजी से बड़े पैमाने पर स्थानांतरण एचपीएलसी को अणुओं, मैक्रोमोलेक्यूल्स और आयनों को निर्धारित करने की अनुमति देता है। शास्त्रीय एलसी और एचपीएलसी के बीच अंतर तालिका 1.3 में दिखाया गया है।

तालिका 1.3 शास्त्रीय और उच्च प्रदर्शन एलसी के बीच प्रायोगिक अंतर

विशेषता	शास्त्रीय एलसी	एचपीएलसी
दबाव, एटीएम	एटीएम के अंशों से। 2 बजे तक
प्रवाह दर, मिमी / मिनट
पृथक्करण अवधि	कई घंटों से लेकर कई दिनों तक	कई मिनट से लेकर कई घंटे
उपकरण	स्पीकर और एक्सेसरीज	क्रोमैटोग्राफ
पृथक्करण प्रकार	प्रारंभिक अलगाव	विश्लेषणात्मक अलगाव
खोज	व्यक्ति का पता लगाना विश्लेषणात्मक तरीकों से अंश	डिटेक्टर के साथ
परीक्षण पदार्थ की मात्रा	कुछ माइक्रोग्राम से लेकर कई किलो . तक	कई एनजी से कई माइक्रोग्राम

एचपीएलसी एक कॉलम क्रोमैटोग्राफी विधि है जिसमें मोबाइल चरण एक स्थिर चरण (सॉर्बेंट) से भरे क्रोमैटोग्राफिक कॉलम के माध्यम से चलने वाला तरल है। एचपीएलसी के लिए कॉलम इनलेट पर उच्च हाइड्रोलिक प्रतिरोध की विशेषता है।

पदार्थों के पृथक्करण के तंत्र के आधार पर, निम्नलिखित एचपीएलसी विकल्प प्रतिष्ठित हैं:

ए) वितरण;

बी) आयन एक्सचेंज;

ग) अनन्य;

घ) चिरल;

ई) सोखना।

विभाजन क्रोमैटोग्राफी दो अमिश्रणीय तरल पदार्थों के बीच एक पदार्थ के वितरण पर आधारित है, जो बार-बार निष्कर्षण के समान है। तरल मोबाइल चरण से गुजरते समय, तरल स्थिर चरण में मिश्रण के घटकों की अलग-अलग घुलनशीलता के कारण अलगाव होता है।

आयन-विनिमय क्रोमैटोग्राफी में, पदार्थों के मिश्रण के अणु, आयनों और आयनों में समाधान में अलग हो जाते हैं, आयनों के निर्धारित होने और सॉर्बेंट के आयनिक समूहों के बीच बातचीत के विभिन्न बलों के कारण सॉर्बेंट के माध्यम से चलते समय अलग हो जाते हैं।

आकार अपवर्जन क्रोमैटोग्राफी में, पदार्थों के अणुओं को स्थिर चरण के छिद्रों में घुसने की उनकी अलग क्षमता के कारण आकार से अलग किया जाता है। इस मामले में, सबसे बड़े अणु जो स्थिर चरण के न्यूनतम छिद्रों में प्रवेश कर सकते हैं, स्तंभ छोड़ने वाले पहले होते हैं, और छोटे आणविक आकार वाले पदार्थ छोड़ने के लिए अंतिम होते हैं।

चिरल क्रोमैटोग्राफी में, वैकल्पिक रूप से सक्रिय यौगिकों को अलग-अलग एनैन्टीओमर (दर्पण आइसोमर्स) में अलग किया जाता है।

सोखना क्रोमैटोग्राफी में, एक विकसित सतह के साथ एक सॉर्बेंट की सतह से सोखने और उतारने की उनकी अलग क्षमता के कारण पदार्थों को अलग किया जाता है।

मोबाइल और स्थिर चरणों की ध्रुवीयता के आधार पर, सोखना क्रोमैटोग्राफी को सामान्य चरण (एनपीसी) और उलट चरण (आरपीसी) क्रोमैटोग्राफी में विभाजित किया जाता है।

एनपीसी एक ध्रुवीय सोखना और एक गैर-ध्रुवीय मोबाइल चरण का उपयोग करता है, जबकि आरपीसी एक गैर-ध्रुवीय सोखना और एक ध्रुवीय मोबाइल चरण का उपयोग करता है।

हालांकि तरल क्रोमैटोग्राफी एक नमूने को घटकों में अलग करने की एक विधि है, एक आधुनिक तरल क्रोमैटोग्राफ में न केवल एक पृथक्करण प्रणाली शामिल है, बल्कि प्रत्येक घटक की सामग्री को मात्रात्मक रूप से मापने के लिए एक प्रणाली भी शामिल है, अर्थात। पता लगाने की प्रणाली। क्रोमैटोग्राफ की योजना चित्र 1.3 में दिखाई गई है।

बेंजापायरीन तरल क्रोमैटोग्राफी हाइड्रोकार्बन

चित्र 1.3 एक तरल क्रोमैटोग्राफ की योजनाबद्ध

1 - कॉलम के माध्यम से मोबाइल चरण की आपूर्ति के लिए पंप

2 - कॉलम में नमूना पेश करने के लिए डिस्पेंसर

3 - विभाजक स्तंभ

4 - डिटेक्टर - एक विश्लेषणात्मक संकेत प्राप्त करने के लिए एक उपकरण

5 - प्रसंस्करण प्रणाली - मानव धारणा के लिए सुविधाजनक रूप में विश्लेषणात्मक सिग्नल कनवर्टर

एक विश्लेषणात्मक संकेत दर्ज करने के लिए, जैसा कि पहले उल्लेख किया गया है, डिटेक्टरों का उपयोग किया जाता है। एलसी में विभिन्न पहचान विधियों का उपयोग किया जाता है। उनमें से कुछ की चर्चा तालिका 1.4 में की गई है।

तालिका 1.4 तरल क्रोमैटोग्राफी में डिटेक्टर

डिटेक्टर का नाम	संचालन का सिद्धांत
स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक	रेफरेंस प्रक्रिया के दौरान, एलुएट के ऑप्टिकल घनत्व को एक निश्चित तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है
फ्लोरीमेट्रिक	अवशोषित का फ्लोरोसेंट विकिरण
डिटेक्टर का नाम	संचालन का सिद्धांत
रेफ्रेक्टोमेट्रिक	मोबाइल चरण के अपवर्तनांक से भिन्न अपवर्तनांक के आधार पर किसी पदार्थ की सांद्रता का निर्धारण
बाष्पीकरणीय लेजर प्रकाश डिटेक्टर	संचालन का सिद्धांत क्रोमैटोग्राफिक सॉल्वैंट्स के वाष्प दबाव में अंतर पर आधारित है जो मोबाइल चरण और विश्लेषण किए गए पदार्थों को बनाते हैं।

एचपीएलसी में, बीपी को निर्धारित करने के लिए एक फ्लोरीमेट्रिक डिटेक्टर का उपयोग किया जाता है, जो बेंजापायरीन के संबंध में चयनात्मक होता है और इसमें उच्च संवेदनशीलता होती है। ऐसे डिटेक्टर के संचालन का सिद्धांत अवशोषित प्रकाश के फ्लोरोसेंट उत्सर्जन को मापने पर आधारित है। पदार्थों के दिए गए समूह के लिए अधिकतम अवशोषण की तरंग दैर्ध्य पर माप मुख्य रूप से यूवी क्षेत्र में किए जाते हैं। फ्लोरोसेंट विकिरण की तरंग दैर्ध्य हमेशा अवशोषित प्रकाश की तरंग दैर्ध्य से अधिक होती है। इस तथ्य के कारण कि शून्य तीव्रता से पता लगाया जाता है, फ्लोरीमेट्रिक डिटेक्टर अवशोषण डिटेक्टरों की तुलना में अधिक संवेदनशील होते हैं।

एक मास स्पेक्ट्रोस्कोपिक डिटेक्टर के साथ एचपीएलसी के संयोजन का उपयोग बेंजापायरीन के निर्धारण में नहीं किया गया है। यह इस तथ्य के कारण है कि अर्क की शुद्धता पर उच्च आवश्यकताएं लगाई जाती हैं, अर्थात। नमूने की श्रमसाध्य तैयारी के कारण विश्लेषण की अवधि बढ़ जाती है। इसके अलावा, उपकरण काफी महंगा है और पर्याप्त रूप से चयनात्मक और संवेदनशील नहीं है।

1.3 एचपीएलसी द्वारा पानी में बेंज़ (ए) पाइरीन का निर्धारण

1.3.1 मापने के उपकरण, सहायक उपकरण, अभिकर्मक

माप के लिए, फ्लोरीमेट्रिक डिटेक्टर के साथ एक एगिलेंट 1200 एचपीएलसी क्रोमैटोग्राफ (चित्र। 1.4) का उपयोग किया जाता है, जो 270-365 एनएम की सीमा में एक उत्तेजना तरंग दैर्ध्य रेंज और 390-460 एनएम की सीमा में प्रतिदीप्ति पंजीकरण प्रदान करता है।

चित्र 1.4 एगिलेंट 1200 एचपीएलसी

क्रोमैटोग्राफिक कॉलम ओएफसी के लिए एक सॉर्बेंट से भरा होता है। प्रयोग की शर्तों के तहत, कॉलम की दक्षता कम से कम 5000 सैद्धांतिक प्लेट होनी चाहिए।

नमूना तैयार करने के लिए, 2000 सेमी 3 की क्षमता वाला एक पृथक फ़नल, एक रोटरी बाष्पीकरण, एक पानी का स्नान, एक पानी जेट पंप, एन-हेक्सेन, सोडियम क्लोराइड और सल्फेट, और एसीटोनिट्राइल का उपयोग किया जाता है।

अंशांकन समाधान तैयार करने के लिए, 25 और 50 सेमी 3 की क्षमता वाले फ्लास्क और 1, 2, 5 सेमी 3 की क्षमता वाले स्नातक किए गए पिपेट, सी = 1.0 माइक्रोग्राम / सेमी 3 की एकाग्रता के साथ बेंज़ (ए) पाइरीन का एक समाधान और एसीटोनिट्राइल का उपयोग किया जाता है।

1.3.2 नमूना तैयार करना

तरल-तरल निष्कर्षण (एलएलई) का उपयोग पानी से बेंजो (ए) पाइरीन निकालने के लिए किया जाता है। एन-हेक्सेन के साथ बेंज़ो (ए) पाइरीन निकालें। इस प्रयोजन के लिए, 1000 सेमी 3 की मात्रा के साथ चयनित पानी को 2000 सेमी 3 की क्षमता और एन-हेक्सेन के 25-30 सेमी 3 और सोडियम क्लोराइड (NaCl) के 20 सेमी 3 की एकाग्रता के साथ एक अलग फ़नल में पेश किया जाता है। सी = 0, 25 ग्राम / सेमी 3 जोड़ा जाता है और मिश्रण को 10-15 मिनट के लिए मिलाते हुए निष्कर्षण किया जाता है। उसके बाद, जलीय परत को अलग किया जाता है और NaCl को जोड़े बिना दो बार और निष्कर्षण किया जाता है। अर्क को मिलाने और सूखने के बाद, एक desiccant के माध्यम से गुजरता है, जो कम से कम 2 सेमी ऊंची सोडियम सल्फेट की एक परत के साथ एक फ़नल है। एन-हेक्सेन के समान मात्रा के डाइक्लोरोमेथेन को निकालने वाले के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।

निष्कर्षण के बाद, रोटरी बाष्पीकरण पर 3-5 सेमी 3 की मात्रा में अर्क को वाष्पित किया जाता है - कम दबाव में आसवन द्वारा तरल पदार्थ को तेजी से हटाने के लिए एक उपकरण। अवशेष को 10 - 15 सेमी 3 की क्षमता के साथ एक परखनली में स्थानांतरित किया जाता है और n-हेक्सेन मिलाया जाता है, जिसके बाद घोल को पानी के जेट पंप के निर्वात में सुखाया जाता है, परखनली को पानी के स्नान में रखा जाता है 40 - 50 डिग्री सेल्सियस का तापमान। अवशेष 0.2 - 0.5 सेमी 3 एसीटोनिट्राइल में भंग हो जाता है। परिणामी ध्यान कम से कम 15 मिनट के लिए रखा जाता है।

1.3.3 स्नातक

0.002 की एकाग्रता के साथ 5 मानक समाधानों के अनुसार स्नातक किया जाता है; 0.01; 0.02; 0.05 और 0.1 µ g/cm3. अंशांकन समाधान की तैयारी तालिका 1.5में वर्णित है ।

तालिका 1.5 अंशांकन समाधान की तैयारी

	एस, माइक्रोग्राम/सेमी3	c0, µg/cm3

समाधान एसीटोनिट्राइल के साथ निशान तक बनाए गए थे।

प्रत्येक समाधान के लिए कम से कम दो क्रोमैटोग्राम दर्ज किए जाते हैं। चित्र 1.5 0.002 माइक्रोग्राम/सेमी 3 की सांद्रता के साथ बेंजो (ए) पाइरीन का एक क्रोमैटोग्राम दिखाता है।

चित्र 1.5 बेंज़ (ए) पाइरीन का क्रोमैटोग्राम 0.002 माइक्रोग्राम / सेमी 3 . की एकाग्रता के साथ

प्राप्त क्षेत्रों के बीच विसंगति उनके अंकगणितीय माध्य के 7% से अधिक नहीं होनी चाहिए।

प्राप्त आंकड़ों के आधार पर, द्रव्यमान एकाग्रता पर शिखर क्षेत्र की निर्भरता के रूप में एक अंशांकन ग्राफ बनाया गया है (चित्र 1.6)। अंशांकन वक्र रैखिक होना चाहिए। प्रत्येक समाधान के लिए, निर्दिष्ट मान से अंशांकन विशेषता के अनुसार मापा गया द्रव्यमान एकाग्रता का विचलन 12% से अधिक नहीं होना चाहिए। यदि विचलन निर्दिष्ट मान से अधिक है, तो अंशांकन दोहराया जाता है। अंशांकन न केवल माप से पहले किया जाता है, बल्कि स्तंभ को बदलने के बाद या क्रोमैटोग्राफ के रखरखाव और मरम्मत के दौरान भी किया जाता है।

चित्र 1.6 बेंजो (ए) पाइरीन (आर 2 = 0.998) की एकाग्रता पर शिखर क्षेत्र की अंशांकन निर्भरता

1.3.4 एचपीएलसी विश्लेषण करना

बेंजापायरीन का क्रोमैटोग्राफिक निर्धारण एक एगिलेंट 1200 एचपीएलसी कॉलम में किया जाता है, कॉलम की दक्षता बेंजापाइरीन चोटी पर आधारित कम से कम 5000 सैद्धांतिक प्लेट होनी चाहिए। स्तंभ का भीतरी व्यास 2 मिमी है। स्तंभ एक उलट-चरण सॉर्बेंट (आरपीएस) से भरा होता है। इस परिभाषा में, एक पूर्व-स्तंभ का उपयोग किया गया था जो एक सुरक्षात्मक कार्य करता है। प्री-कॉलम का भीतरी व्यास 2 मिमी है, यह उसी ओएफएस से भरा है।

ओएफएस के रूप में, सिलिका जेल के आधार पर प्राप्त बंधुआ चरणों वाले शर्बत का उपयोग किया जाता है। इस परिभाषा में, 5 माइक्रोन के कण आकार के साथ ऑक्टाडेसिल सिलिका जेल (सी 18) और 3.2 माइक्रोन के कण व्यास के साथ हाइड्रोफोबिक माइक्रोपोरस हाइपरक्रॉसलिंक्ड पॉलीस्टाइनिन और 20-40 ई के औसत छिद्र व्यास को सॉर्बेंट्स के रूप में इस्तेमाल किया गया था। यह सॉर्बेंट रासायनिक रूप से स्थिर है पीएच = 2–7 पर। पृथक्करण दक्षता सॉर्बेंट कणों के उच्च सतह क्षेत्र के साथ-साथ सॉर्बेंट संरचना की एकरूपता और घने वर्दी पैकिंग द्वारा सुनिश्चित की जाती है। ऐसे शर्बत का क्षमता कारक (k) 9.86 है।

मोबाइल चरण एसीटोनिट्राइल - पानी का मिश्रण है। एलुएंट को 8:2 के आयतन अनुपात में तैयार करें । 1000 सेमी 3 की क्षमता वाले कांच के बने पदार्थ में 200 सेमी 3 पानी डालें और एसीटोनिट्राइल के साथ निशान पर लाएं। उपयोग करने से तुरंत पहले, एलुएंट को कम से कम 4 घंटे के लिए डिगैसिंग के लिए रखा जाता है। तेजी से degassing के लिए, एलुएंट के साथ कंटेनर को पानी के जेट पंप से जोड़कर और एक अल्ट्रासोनिक स्नान में रखकर खाली कर दिया जाता है। एलुएंट को लूप डोजिंग वाल्व (इंजेक्टर) द्वारा 10 मिमी 3 के लूप वॉल्यूम के साथ आपूर्ति की जाती है, मोबाइल चरण की प्रवाह दर 200 मिमी 3 / मिनट है।

इन परिस्थितियों में, क्रोमैटोग्राफी में 20-30 मिनट लगते हैं।

1.3.5 परिणामों का पंजीकरण और प्रसंस्करण

फ्लोरोसेंट डिटेक्टर का उपयोग करके बेंजोपायरीन का पता लगाया जाता है। क्रोमैटोग्राम को उत्तेजना तरंग दैर्ध्य l पूर्व = 365 एनएम और पंजीकरण तरंग दैर्ध्य l रजिस्टर पर पंजीकृत करने की अनुशंसा की जाती है। = 400 - 460 एनएम।

इस तकनीक में संवेदनशीलता बढ़ाने के लिए प्रतिदीप्ति द्वारा उत्तेजना और उत्सर्जन की तरंग दैर्ध्य को क्रमादेशित किया गया था। प्रोग्रामिंग मोड तालिका 1 में दिखाया गया है। 6।

तालिका 1.6 फ्लोरोसेंट डिटेक्टर का उपयोग करते समय प्रोग्रामिंग मोड

जल विश्लेषण से प्राप्त क्रोमैटोग्राम चित्र 1.7 में दिखाया गया है।

चित्र 1.7 पानी में बीपी सामग्री का क्रोमैटोग्राम

बेंजापायरीन का शिखर अवधारण समय से निर्धारित होता है, क्योंकि यह बेंजो (ए) पाइरीन की गुणात्मक विशेषता है। बेंज़ो (ए) पाइरीन की सामग्री की मात्रा निर्धारित करने के लिए, शिखर क्षेत्र की गणना की जाती है। फिर, अंशांकन ग्राफ के अनुसार, इसकी सांद्रता पाई जाती है।

यदि बेंजो (ए) पाइरीन की सांद्रता मानक घोल की अधिकतम सांद्रता से अधिक है, तो विश्लेषण किया गया घोल पतला हो जाता है और नमूने का फिर से विश्लेषण किया जाता है।

इस विधि द्वारा बेंजापायरीन के निर्धारण की संवेदनशीलता 0.01 माइक्रोग्राम/डीएम 3 है।

1.4 जीसी . द्वारा पानी में बेंज़ (ए) पाइरीन का निर्धारण

1.4.1 नमूनाकरण और तैयारी

विश्लेषण का एक महत्वपूर्ण हिस्सा नमूने का चयन और तैयारी है। कई दिनों के अंतराल के साथ कई बार पानी लिया जाता है। उसके बाद पानी को छानकर 0.5 लीटर का सैंपल लिया जाता है। सोडियम क्लोराइड को नमूने में जोड़ा जाता है और रेफ्रिजरेटर में एक दिन से अधिक समय तक संग्रहीत नहीं किया जाता है।

विश्वसनीय डेटा प्राप्त करने के लिए, एलएलई विधि द्वारा नमूने से बीपी निकाला जाता है। एक्सट्रैक्टेंट डायथाइल ईथर है। निष्कर्षण तीन बार किया जाता है। पदार्थ को पहले दो बार निकालने वाले के 50 मिलीलीटर की मात्रा में निकाला जाता है। तीसरी बार, निकालने वाले की मात्रा 30 मिलीलीटर है। सभी अर्क एक रोटरी बाष्पीकरण में संयुक्त और वाष्पित हो जाते हैं जब तक कि ईथर पूरी तरह से हटा नहीं दिया जाता है। परिणामी नमूना बेंजीन के 2 मिलीलीटर में भंग कर दिया जाता है।

बीपी के मात्रात्मक निर्धारण से पहले, मिश्रण के घटकों को पतली परत क्रोमैटोग्राफी (टीएलसी) द्वारा अलग किया जाता है।

टीएलसी एक क्रोमैटोग्राफिक विधि है जो एक स्थिर चरण के रूप में सोखना की एक पतली परत के उपयोग पर आधारित है।

अलग होने से पहले, प्लेट को क्लोरोफॉर्म में कैफीन के 4% घोल में डुबोया जाता है और 100 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर ओवन में सक्रिय किया जाता है। प्लेट से अशुद्धियों को दूर करने के लिए, इसे ठंडा करने के बाद, इसे क्लोरोफॉर्म से धोया जाता है और फिर से सक्रिय किया जाता है 100 के तापमान पर 30 मिनट के लिए ओवन एस के बारे में।

बेंजीन में घुले नमूनों को एक प्लेट पर रखा जाता है और क्रोमैटोग्राफ किया जाता है। एल्यूटिंग एजेंट 16:1 के आयतन अनुपात में साइक्लोहेक्सेन - एन-हेक्सेन का मिश्रण है।

1.4.2 परिमाणीकरण

इस विधि के अनुसार मात्रात्मक विश्लेषण गैस-तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा एक लौ आयनीकरण डिटेक्टर के साथ किया जाता है। विश्लेषण के लिए, एक लौ आयनीकरण डिटेक्टर के साथ एक क्रोमैटोग्राफ "Tsvet - 500" (चित्र। 1.8) का उपयोग किया गया था।

चित्र 1.8 गैस क्रोमैटोग्राफ "रंग - 500"

इस निर्धारण के लिए वाहक गैस नाइट्रोजन थी। नाइट्रोजन की आपूर्ति 3 मिली/मिनट की प्रवाह दर से की गई। विश्लेषण के लिए 25 मीटर × 0.32 मिमी आकार के एक केशिका क्वार्ट्ज कॉलम का उपयोग किया गया था। 0.4 µm की फिल्म मोटाई के साथ मिथाइल सिलिकॉन तेल OV-101 का उपयोग स्थिर चरण के रूप में किया गया था। विश्लेषण तापमान प्रोग्रामिंग मोड में 210 से 300 डिग्री सेल्सियस तक 4 डिग्री सेल्सियस / मिनट की दर से किया गया था। एक माइक्रोसिरिंज का उपयोग करके 1 μL नमूना इंजेक्ट किया गया था।

चित्र 1.9 इस विधि द्वारा प्राप्त बीपी क्रोमैटोग्राम को दर्शाता है।

चित्र 1.9 जीसी द्वारा प्राप्त बीपी का क्रोमैटोग्राम (3-बीपी)

गुणात्मक रूप से, बीपी को मानक नमूने के अवधारण समय की तुलना में अवधारण समय द्वारा निर्धारित किया गया था, जो कि 28 मिनट था।

मात्रात्मक रूप से, बीपी बाहरी मानक विधि द्वारा निर्धारित किया जाता है। ऐसा करने के लिए, 1-20 एनजी/एमएल की एकाग्रता सीमा के साथ कई मानक नमूनों के लिए एक अंशांकन ग्राफ बनाएं। चोटी की ऊंचाई का उपयोग विश्लेषणात्मक संकेत के रूप में किया गया था।

बेंज (ए) पाइरीन पीएएच से संबंधित प्रथम खतरा वर्ग का एक कार्सिनोजेन है। यह मिट्टी, पानी, हवा, भोजन में पाया जा सकता है और जब यह शरीर में प्रवेश करता है तो जमा हो जाता है। इसलिए विभिन्न वस्तुओं में इसका निर्धारण प्राथमिकता है।

बीपी के लिए एमपीसी काफी कम है, इसलिए इसे निर्धारित करने के लिए संवेदनशील तरीकों का इस्तेमाल किया जाता है। इसके निर्धारण की कठिनाई इस तथ्य में भी निहित है कि, बीपी के अलावा, नमूने में इसके आइसोमर्स हो सकते हैं, जैसे कि बेंज (ई) पाइरीन और पेरिलीन, जिनका प्रतिधारण समय लगभग बीपी के समान ही होता है। यानी आइसोमर्स की मौजूदगी से पदार्थ की पहचान करना मुश्किल हो जाता है। इस समस्या को पहले टीएलसी द्वारा मिश्रण को अलग करने के साथ-साथ मानक बीपी नमूनों का उपयोग करके हल किया जाता है।

इस पाठ्यक्रम कार्य में, कई क्रोमैटोग्राफिक विधियों पर विचार किया गया जो बेंजो (ए) पाइरीन के निर्धारण के लिए उपयुक्त हैं। साहित्य के साथ प्रारंभिक कार्य के बाद, इसके मात्रात्मक निर्धारण के तरीकों का चुनाव उचित था। विधि के आधार पर विधियों का चयन किया गया और इन विधियों द्वारा प्राप्त वर्णलेखों को दिखाया गया है।

ग्रंथ सूची

1. ट्रैवेन वीएफ ऑर्गेनिक केमिस्ट्री। विश्वविद्यालयों के लिए पाठ्यपुस्तक: 3 खंडों में / वीएफ ट्रैवेन - एम।: बिनोम। नॉलेज लैब, 2013. --. - टी। 2. - 2013. - 517 पी।

2. Grechishcheva N. यू। पॉलीन्यूक्लियर एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन के साथ ह्यूमिक एसिड का इंटरेक्शन: रासायनिक और विषैले पहलू: थीसिस ... डॉक्टर ऑफ केमिस्ट्री की डिग्री के लिए। विज्ञान: 02.00.13 / एन. यू. ग्रीचिश्चेवा। - एम।, 2000. - 157 पी।

3. पैट। 2466406 रूसी संघ। तरल क्रोमैटोग्राफी / ज़ैतसेवा एन.वी., उलानोवा टी.एस., कोर्नाज़ित्सकाया टी.डी., किस्लिट्सिना ए.वी., पशेनिचनिकोवा ई.ओ., पर्म्याकोवा टी.एस. - - संख्या 2011142553/15; दिसम्बर 20.10.11; प्रकाशन 10.11.12, बैल। संख्या 31.

4. रसायनों की अधिकतम स्वीकार्य सांद्रता (एमपीसी): जीएन 2.1.7.2041-06। -- [2006-02-07 को पेश किया गया]। - एम .: स्टैंडआर्टिनफॉर्म, 2006. - 7 पी।

5. Tsimbalyuk K. K. पर्यावरणीय वस्तुओं (समीक्षा) में पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन (PAHs) का निर्धारण / K. K. Tsimbalyuk, Yu. M. Denga, V. P. Antonovich // रासायनिक विश्लेषण के तरीके और वस्तुएं। - 2013. - टी। 8, नंबर 2। - एस। 50 - 62।

6. यू। ए। ज़ोलोटोव, फंडामेंटल्स ऑफ एनालिटिकल केमिस्ट्री। सामान्य मुद्दे। पृथक्करण विधियाँ: 2 पुस्तकों में। / यू। ए। ज़ोलोटोव, ई। एन। डोरोखोवा, वी। आई। फादेवा और अन्य। एड। यू ए ज़ोलोटोवा। - एम .: उच्चतर। शक।, 2002। -। -- राजकुमार। 1. - 2002. - 351 पी।

7. तारेव एन। आई। प्रैक्टिकल गैस क्रोमैटोग्राफी। विशेष पाठ्यक्रम "गैस क्रोमैटोग्राफिक विश्लेषण विधियों" / एन.आई. त्सारेव, वी.आई. - बरनौल।: अल्ताई स्टेट यूनिवर्सिटी, 2000 का प्रकाशन गृह। - 156 पी।

8. ड्रगोव यू। एस। प्रदूषित हवा का गैस क्रोमैटोग्राफिक विश्लेषण / यू। एस। ड्रगोव, ए। ए। रोडिन। - एम .: बिनोम। ज्ञान प्रयोगशाला, 2015. -- 531 पी.

9. Styskin E. L. प्रैक्टिकल उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी / E. L. Styskin, L. B. इटिकसन, E. V. Braude। - एम .: रसायन विज्ञान, 1986. - 210 पी।

10. दिमित्रिकोव वी.पी., लारियोनोव ओ.जी., नबीवाच वी.एम. उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी // उसपेखी खिमी द्वारा पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन का विश्लेषण। - 1986. - टी। 2, नंबर 4। - एस। 679 -700।

11. पीने का पानी। बेंज़ो (ए) पाइरेन की सामग्री का निर्धारण करने की विधि: GOST 31860 - 2012। - [2014-01-01 को प्रस्तुत किया गया]। - एम .: स्टैंडआर्टिनफॉर्म, 2014. - 11 पी। - (अंतरराज्यीय मानक)।

12. बोर्श एन.ए. उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी / एन.ए. बोर्श, एस.वी. सिदोरेंको // विज्ञान और प्रौद्योगिकी के विकास में आधुनिक रुझान द्वारा बेंजापाइरीन का निर्धारण। - 2016. - वी। 1, नंबर 2. - एस.37 - 41।

13. Proskurina N. A. ठोस-चरण निष्कर्षण / N. A. Proskurina, V. A. Davankov, M. M. Ilyin // Sorption और chromatographic प्रक्रियाओं का उपयोग करके वसा युक्त खाद्य उत्पादों में पॉलीन्यूक्लियर एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन का निर्धारण। - 2009. - टी। 9, नंबर 2. - एस। 167 - 176।

14. नज़रकिना एस.जी. नज़रकिना एस.जी., पुरीगिन पी.पी., बुलानोवा ए.वी., लारियोनोव ओ.जी. केशिका गैस क्रोमैटोग्राफी पिघले पानी के पारिस्थितिक नियंत्रण में // वेस्टनिक सैमगु। - 2000. - टी। 2,। - एस. 152 -156.

Allbest.ru . पर होस्ट किया गया

...

इसी तरह के दस्तावेज़

सुगंधित हाइड्रोकार्बन: सामान्य विशेषताएं। नामकरण और समरूपता, सुगंधित हाइड्रोकार्बन के भौतिक और रासायनिक गुण। सुगंधित श्रृंखला में इलेक्ट्रोफिलिक और न्यूक्लियोफिलिक प्रतिस्थापन की प्रतिक्रियाओं का तंत्र। एरेनेस का उपयोग, उनकी विषाक्तता।

सार, जोड़ा गया 12/11/2011


विनाइल क्लोराइड के बारे में सामान्य जानकारी - एक रंगहीन गैस, एक मजबूत जहर जिसमें एक उत्परिवर्तजन, कार्सिनोजेनिक और टेराटोजेनिक प्रभाव होता है। विनाइल क्लोराइड की खोज का इतिहास, इसके रासायनिक गुण और उत्पादन के तरीके। एसिटिलीन का उत्प्रेरक गैस-चरण हाइड्रोक्लोरिनेशन।

प्रस्तुति, जोड़ा गया 08/10/2015


एल्डिहाइड का वर्गीकरण, संरचना, प्रकृति में घटना, जैविक क्रिया, अनुप्रयोग। कीटोन्स का नामकरण, खोज का इतिहास, भौतिक और रासायनिक गुण। न्यूक्लियोफिलिक जोड़ की प्रतिक्रियाएं। एल्डिहाइड की पहचान के लिए रासायनिक तरीके।

प्रस्तुति, जोड़ा गया 05/13/2014


पानी के गुण और इसे नरम करने के तरीके। गर्मी और बिजली उत्पादन में खपत पानी की कठोरता के लिए आवश्यकताएँ। कॉम्प्लेक्समेट्रिक विधि द्वारा पानी की कठोरता को निर्धारित करने के लिए सैद्धांतिक नींव और तरीके। नमूनाकरण, अभिकर्मकों, निर्धारण।

टर्म पेपर, 10/07/2009 जोड़ा गया


फिनोल की अवधारणा और नामकरण, उनके मूल भौतिक और रासायनिक गुण, विशेषता प्रतिक्रियाएं। फिनोल प्राप्त करने के तरीके और उनके व्यावहारिक अनुप्रयोग का दायरा। फिनोल के विषाक्त गुण और मानव शरीर पर इसके नकारात्मक प्रभाव की प्रकृति।

टर्म पेपर, जोड़ा गया 03/16/2011


एस्पार्टेम की खोज का इतिहास, इसके गुण। एस्पार्टेम, उपकरण, उपकरण और अभिकर्मकों के निर्धारण के लिए विधि। मानव शरीर में एस्पार्टेम। एस्पार्टेम के विष विज्ञान और नैदानिक ​​अध्ययन। अमीनो एसिड फेनिलएलनिन युक्त खाद्य पदार्थों का सेवन।

सार, जोड़ा गया 04.10.2011


जीवित जीवों पर फिनोल और फॉर्मलाडेहाइड का विषाक्त प्रभाव, उनके गुणात्मक निर्धारण के तरीके। प्राकृतिक जल के नमूनों में फिनोल का मात्रात्मक निर्धारण। पानी में कार्बनिक विषाक्त पदार्थों की न्यूनतम पहचान सांद्रता निर्धारित करने की विधि।

टर्म पेपर, जोड़ा गया 05/20/2013


विटामिन सी की रासायनिक संरचना, गुण और जैविक महत्व। इसकी दैनिक आवश्यकता होती है। खाद्य उत्पादों और विटामिन की तैयारी में विटामिन सामग्री के विश्लेषण के लिए प्रायोगिक आयोडोमेट्रिक निर्धारण, मात्रात्मक और रासायनिक तरीके।

टर्म पेपर, जोड़ा गया 03/18/2013


सुगंधित एसिटामिनो डेरिवेटिव की सामान्य विशेषताएं और मुख्य रासायनिक गुण। सुगंधित एसिटामिनो डेरिवेटिव की प्रामाणिकता का निर्धारण करने के तरीके। फार्माकोलॉजी में एसिटामिनो डेरिवेटिव का उपयोग और मानव शरीर पर उनका प्रभाव।

टर्म पेपर, 11/11/2009 जोड़ा गया


मोनोहाइड्रिक और पॉलीहाइड्रिक अल्कोहल के अणुओं की संरचना में सामान्य विशेषताएं। एथिल अल्कोहल के गुण मानव शरीर पर शराब का प्रभाव। प्रारंभिक सामग्री और प्रतिक्रिया उत्पादों के बीच एक पत्राचार स्थापित करना। पॉलीहाइड्रिक अल्कोहल के रासायनिक गुण।

पृष्ठ 1

पृष्ठ 2

पेज 3

पेज 4

पेज 5

पेज 6

पेज 7

पेज 8

पेज 9

पेज 10

पेज 11

पृष्ठ 12

पृष्ठ 13

पेज 14

पेज 15

पृष्ठ 16

पेज 17

पृष्ठ 18

पेज 19

गोस्ट 24104.

रोटरी बाष्पीकरण IR-1M।

गोस्ट 25336.

नहाने का पानी।

इलेक्ट्रिक हीटिंग के साथ मैग्नेटिक स्टिरर टाइप MM-ZM।

क्रोमैटोस्कोप पराबैंगनी प्रदीपक 250 - 700 एनएम की वर्णक्रमीय सीमा और यूवी विकिरण के स्रोत के रूप में एक बीयूवी -15 लैंप के साथ।

क्रोमैटोग्राफिक ग्लास चैम्बर 40 x 40 x 40 सेमी ।

पतली परत क्रोमैटोग्राफी 5 x 20 और 20 x 20 सेमी के लिए ग्लास प्लेट।

एक ग्लास क्रोमैटोग्राफिक कॉलम 500 मिमी लंबा और 20 मिमी व्यास के साथ नीचे की ओर खींचा गया और 50 - 60 सेमी 3 ПШ 14/23 की क्षमता वाला एक जलाशय।

रेफ्रिजरेटर ХПТ-2-400-29/32 या ХШ-1-400-29/32 के अनुसार गोस्ट 25336.

एलॉन्ग टाइप AIO-14/23-50 TS या AIO-14/23-14/23-65 TS के अनुसार गोस्ट 25336.

0.1 सेमी . के पैमाने के विभाजन के साथ मापने वाला शासक गोस्ट 427.

Dephlegmator 250-19/26-29/32 TC या 300-19/26-29/32 के अनुसार गोस्ट 25336.

नोजल П-1-19/26-14/23-14/23 या Н-2-19/26-14/23 के अनुसार गोस्ट 25336.

गोस्ट 25336.

गोस्ट 25336. स्नातक किए गए सिलेंडर 1-100, 1-250 या 3-100, 3-250 गोस्ट 25336.

रासायनिक कांच बी-1-100 या बी-1-150 के अनुसार गोस्ट 25336.

फ्लास्क K-1-100-29/32 THS, K-1-25R-29/32 THS, K-1-500-29/32 THS या P-1-500-29/32 THS के अनुसार गोस्ट 25336.

बुचनर फ़नल 1 या 2 या 3 गोस्ट 9147.

वजन के लिए कप (बक्से) SV-14/8 या SV-19/9, या SV-24/10, या SV-34/12 के अनुसार गोस्ट 25336.

MSH-10 प्रकार के माइक्रोसिरिंज, कांच की केशिकाएं।

पेपर इंडिकेटर यूनिवर्सल।

प्रयोगशाला के लिए फिल्टर पेपर गोस्ट 12026.

स्केलपेल या पतला स्पैटुला।

एथिल अल्कोहल के अनुसार सुधारा गया गोस्ट आर 51652या संशोधित एथिल अल्कोहल, तकनीकी ग्रेड गोस्ट 18300.

मानक दस्तावेज के अनुसार एसीटोनिट्राइल।

नियामक दस्तावेज के अनुसार सेल्यूलोज माइक्रोक्रिस्टलाइन पाउडर।

गोस्ट आर 51650-2000

बेंज (v) क्रिसीन, मुख्य पदार्थ की सामग्री 98% से कम नहीं है।

सेफैडेक्स एलएच -20।

मानक दस्तावेज़ के अनुसार ASKG ब्रांड का सिलिका जेल।

इसे मेट्रोलॉजिकल विशेषताओं और तकनीकी विशेषताओं वाले उपकरणों के साथ-साथ अभिकर्मकों और गुणवत्ता की सामग्री के साथ अन्य माप उपकरणों का उपयोग करने की अनुमति है जो उपरोक्त से कम नहीं हैं।

5.2 परीक्षण की तैयारी

5.2.1 विलायकों की तैयारी

सॉल्वैंट्स (एन.हेक्सेन, एथिल अल्कोहल, एसीटोन, बेंजीन) रिफ्लक्स कंडेनसर के साथ सामान्य तरीके से आसुत होते हैं।

डिमेथिलफॉर्मामाइड को आसवन फ्लास्क में 120 सेमी 3 बेंजीन और 36 सेमी 3 पानी प्रति 1 डीएम 3 विलायक जोड़कर आसवित किया जाता है।

5.2.2 सेल्यूलोज एसीटेट की तैयारी

(50.0 ± 2.0) ग्राम माइक्रोक्रिस्टलाइन सेलुलोज को 500 सेमी 3 की क्षमता वाले फ्लैट-तल वाले फ्लास्क में रखा जाता है, बेंजीन या टोल्यूनि के 150 सेमी 3, एसिटिक एनहाइड्राइड के 70 सेमी 3 और सल्फ्यूरिक एसिड के 0.3 सेमी 3 का मिश्रण तैयार किया जाता है। एक अलग फ्लास्क में जोड़ा जाता है। प्रतिक्रिया मिश्रण को 6 - 8 घंटे के लिए एक चुंबकीय उत्तेजक के साथ उभारा जाता है, एक और 18 घंटे के लिए बिना हिलाए छोड़ दिया जाता है, जिसके बाद तरल चरण को हटा दिया जाता है, और अवशेषों को एथिल अल्कोहल के 300 सेमी 3 में डाला जाता है, हिलाया जाता है, शराब में छोड़ दिया जाता है 24 घंटे, फिर सेल्यूलोज को बुचनर फ़नल पर फ़िल्टर किया जाता है, एथिल अल्कोहल और आसुत जल के 100 सेमी 3 से धोया जाता है जब तक कि धुलाई तटस्थ न हो जाए (संकेतक कागज के अनुसार)।

फिर एसिटिलेटेड सेल्युलोज की क्रोमैटोग्राफिक गतिविधि की जांच करें। ऐसा करने के लिए, विश्लेषण से 3-4 घंटे पहले, एथिल अल्कोहल, एसीटोन और पानी का मिश्रण तैयार करें, जिसे 60:25:15 के अनुपात में लिया जाता है, और इसे फिल्टर पेपर स्ट्रिप्स के साथ एक क्रोमैटोग्राफिक कक्ष में डालें। विलायक परत की ऊंचाई 1.5-2 सेमी होनी चाहिए। 1 माइक्रोग्राम / सेमी 3 के द्रव्यमान एकाग्रता के साथ बेंज (ए) पाइरीन के समाधान के 5 μl के बिंदु तक केशिका। प्लेट को क्रोमैटोग्राफिक कक्ष में रखा जाता है और कक्ष में छोड़ दिया जाता है जब तक कि विलायक का स्तर प्रारंभ रेखा से कम से कम 100 मिमी तक नहीं बढ़ जाता। क्रोमैटोग्राफी के अंत में, प्लेट को हटा दिया जाता है, हवा में सुखाया जाता है, और एक पराबैंगनी विकिरणक के दीपक के नीचे, बेंजो (ए) पाइरीन का एक फ्लोरोसेंट नीला धब्बा नोट किया जाता है। प्रारंभिक रेखा से विलायक के मोर्चे तक और बेंज़ो (ए) पाइरीन स्पॉट के मध्य तक की दूरी को मापें; आरजे के मूल्य की गणना करें, जो सूत्र के अनुसार प्लेट पर बेंज़ो (ए) पाइरीन की गति का अनुमान लगाता है:

जहां XBP बेंजो (ए) पाइरीन स्पॉट, मिमी के बीच की प्रारंभिक रेखा से दूरी है;

एल प्रारंभिक रेखा से विलायक के सामने की दूरी है, मिमी।

बेंजो (ए) पाइरीन का आरजे मान 0.1 होना चाहिए।

एक कार्यशील प्लेट तैयार करने के लिए, 5 ग्राम एसिटिलेटेड सेल्युलोज को एथिल अल्कोहल के 20 सेमी 3 में निलंबित कर दिया जाता है और एक समान परत में 20x20 सेमी प्लेट पर डाला जाता है।

5.2.3 बेंजो (ए) पाइरीन और बेंजो (बी) क्रिसीन के मानक समाधान तैयार करना

(10.0+0.2) मिलीग्राम बेंजो (ए) पाइरीन और बेंजो (बी) क्रिसीन वजन कप (बोतल बैग) में तौला जाता है। नमूनों को मात्रात्मक रूप से 100 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है: बेंज़ (ए) पाइरीन-बेंजीन, बेंजो (सी) क्रिसीन-एसीटोनिट्राइल, फिर बेंज़ (ए) पाइरीन समाधान की मात्रा को बेंजीन के साथ निशान में समायोजित किया जाता है, समाधान की मात्रा बेंज़ (सी) क्रिसीन-एसीटोनिट्राइल है। परिणामी समाधानों में 100 μg/cm 3 की द्रव्यमान सांद्रता होती है। समाधान ठंडे अंधेरे स्थान में तीन महीने से अधिक समय तक संग्रहीत नहीं होते हैं।

5.2.4 बेंजो (ए) पाइरीन और बेंजो (बी) क्रिसीन के कार्यशील समाधान तैयार करना

1, 5 और 10 सेमी 3 की क्षमता वाले पिपेट और 100 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क का उपयोग करके मानक समाधानों को पतला करके काम करने वाले समाधान तैयार किए जाते हैं, समाधान की मात्रा को उपयुक्त विलायक, मिश्रित और संग्रहीत के साथ निशान में समायोजित किया जाता है। ठंडे अंधेरे स्थान में एक महीने से अधिक नहीं।

1.0 माइक्रोग्राम/सेमी 3 (स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री द्वारा निर्धारित) के द्रव्यमान एकाग्रता के साथ बेंजो (ए) पाइरीन के समाधान की तैयारी: 1.0 सेमी 3 को मानक समाधान से लिया जाता है और 100 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है। ; समाधान की मात्रा बेंजीन के साथ निशान के लिए समायोजित की गई थी।

0.25: 1.0 और 5.0 μg/cm 3 (उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा निर्धारित करने के लिए) के द्रव्यमान एकाग्रता के साथ बेंज़ (ए) पाइरीन के समाधान की तैयारी: 0.25 मानक समाधान से लिया जाता है; 1.0; 5.0 सेमी 3 , क्रमशः, और 100 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित; समाधान की मात्रा को एसीटोनिट्राइल के साथ निशान में समायोजित किया गया था।

0.5 और 10 μg/cm 3: 0.5 और 10 सेमी 3 की द्रव्यमान सांद्रता के साथ बेंजो (बी) क्रिसीन के घोल की तैयारी क्रमशः मानक समाधान से ली जाती है, और 100 सेमी 3 की क्षमता के साथ वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित की जाती है; प्रत्येक घोल का आयतन एसीटोनिट्राइल के साथ निशान तक बनाया गया था।

5.2.5 अंशांकन समाधान तैयार करना

बेंजो (ए) पाइरीन और बेंजो (बी) क्रिसीन के मिश्रण के अंशांकन समाधान तैयार करने के लिए, बेंजो (ए) पाइरीन के मानक समाधान की मात्रा 100 माइक्रोग्राम / सेमी 3 की द्रव्यमान एकाग्रता और बेंजो (बी) के कामकाजी समाधान के साथ ) 10 माइक्रोग्राम/सेमी 3 की क्रिसीन द्रव्यमान सांद्रता, एसीटोनिट्राइल के साथ मात्रा को निशान पर लाएं। परिणामी समाधान मिश्रित होते हैं और एक अंधेरे, ठंडे स्थान पर एक महीने से अधिक समय तक संग्रहीत नहीं होते हैं।

तालिका 2

समाधान प्रारंभिक समाधान की मात्रा, सेमी 3 अंशांकन समाधान में बड़े पैमाने पर एकाग्रता, माइक्रोग्राम / सेमी 3 बेंज (ए) पाइरीन द्रव्यमान एकाग्रता 100 माइक्रोग्राम / सेमी 3 बेंज (v) क्राइसीन द्रव्यमान सांद्रता 10 माइक्रोग्राम / सेमी 3 बेंज (ए) पाइरीन बेंज (वी) क्रिसीन

5.3 परीक्षा आयोजित करना

5.3.1 उत्पाद से बेंजो (ए) पाइरीन का पृथक्करण

100 सेमी 3 की क्षमता वाले एक गोल तल वाले फ्लास्क या फ्लैट-तल वाले फ्लास्क में, 10 ग्राम वजन वाले उत्पाद का एक नमूना रखा जाता है, 92% एथिल अल्कोहल के 50 सेमी 3 में 4 ग्राम पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड युक्त घोल होता है जोड़ा गया। फ्लास्क की सामग्री को मिलाते हुए मिलाया जाता है। फ्लास्क को रिफ्लक्स कंडेनसर से जोड़ा जाता है और पानी के स्नान या चुंबकीय स्टिरर पर गर्म किया जाता है, जिसमें प्रतिक्रिया मिश्रण 3 घंटे तक उबलता है। फिर एक रेफ्रिजरेटर के माध्यम से फ्लास्क में 100 सेमी 3 आसुत जल मिलाया जाता है। प्रतिक्रिया द्रव्यमान को कमरे के तापमान पर ठंडा किया जाता है। ठंडा करने के बाद, प्रतिक्रिया द्रव्यमान को 500 सेमी 3 की क्षमता वाले एक अलग करने वाले फ़नल में स्थानांतरित कर दिया जाता है। यदि हाइड्रोलिसिस के बाद प्रतिक्रिया द्रव्यमान में एक ठोस अवशेष रहता है, तो इसे बुचनर फ़नल पर अलग किया जाता है, फिल्टर पर अवशेषों को 30 सेमी 3 गर्म एथिल अल्कोहल से धोता है। प्रतिक्रिया द्रव्यमान के तरल चरण का उपयोग निष्कर्षण के लिए किया जाता है। एक पृथक्कारी कीप में 30 cm 3 n.hexane मिलाएं। फ़नल की सामग्री को हिलाया जाता है और तरल पदार्थ को अलग करने के लिए छोड़ दिया जाता है। इमल्शन बनने की स्थिति में, एक पृथक्कारी फ़नल में मिश्रण में 20 सेमी 3 एथिल अल्कोहल मिलाया जाता है। अलग होने के बाद, निचले जलीय-अल्कोहल चरण को फ्लास्क में डाला जाता है, और हेक्सेन निकालने को दूसरे अलग करने वाले फ़नल में डाला जाता है। प्रतिक्रिया द्रव्यमान का यह उपचार दो बार और किया जाता है, निष्कर्षण के लिए एन-हेक्सेन के 30 सेमी 3 का उपयोग करके और 20 सेमी 3 के हिस्से में इमल्शन को अलग करने के लिए एथिल अल्कोहल का उपयोग किया जाता है।

निष्कर्षण के पूरा होने पर, संयुक्त हेक्सेन अर्क को अलग करने वाले फ़नल में आसुत जल से तीन बार 30 सेमी 3 से धोया जाता है, अर्क को 100 सेमी 3 की क्षमता के साथ एक गोल-नीचे फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है, निर्जल की एक परत के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है। एक झरझरा फिल्टर के साथ एक फ़नल पर सोडियम सल्फेट। घोल को रोटरी बाष्पीकरण पर 50 सेमी 3 की मात्रा में पानी के स्नान के तापमान पर 60 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं वाष्पित किया जाता है।

एक अलग किए गए अर्क को 500 सेमी 3 की क्षमता के साथ एक अलग फ़नल में स्थानांतरित किया जाता है और इसमें डाइमिथाइलफॉर्मैमाइड और पानी के मिश्रण का 50 सेमी 3 मिलाया जाता है, जिसे 9: 1 के आयतन अनुपात में लिया जाता है। मिश्रण को 1 मिनट के लिए सख्ती से हिलाया जाता है, चरण पृथक्करण के बाद, निचले वाले को 200 सेमी 3 की क्षमता वाले फ्लैट-तल वाले फ्लास्क में डाला जाता है, और डाइमिथाइलफॉर्माइड के मिश्रण के 50 सेमी 3 और ऊपरी हेक्सेन से पानी फिर से निकाला जाता है। परत। हेक्सेन परत को त्याग दिया जाता है, एक फ्लैट-तल वाले फ्लास्क में संयुक्त डाइमिथाइलफॉर्माइड निकालने को एक अलग फ़नल में स्थानांतरित कर दिया जाता है, आसुत जल के 100 सेमी 3 जोड़े जाते हैं, और जलीय चरण से निष्कर्षण हेक्सेन के साथ 50 सेमी 3 में तीन बार किया जाता है। जलीय चरण को त्याग दिया जाता है, और हेक्सेन निकालने को तीन बार 30 सेमी 3 पानी से धोया जाता है, एक फ्लैट-तल वाले फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है, 10 ग्राम निर्जल सोडियम सल्फेट जोड़ा जाता है और एक घंटे के लिए ऊष्मायन किया जाता है, n.hexane एक रोटरी पर वाष्पित हो जाता है 1.5 - 2.0 सेमी 3 की मात्रा में बाष्पीकरण करनेवाला, शेष विलायक हटा दिया जाता है

गोस्ट आर 51650-2000

पानी जेट पंप से जुड़े वैक्यूम एलॉन्ग के माध्यम से वायु प्रवाह, फ्लास्क में अवशेष एथिल अल्कोहल के 0.5 सेमी 3 में भंग हो जाता है।

100 सेमी 3 की क्षमता वाले गिलास में सेफैडेक्स एलएच -20 के वजन (2.5 ± 0.2) ग्राम, एथिल अल्कोहल के 20 सेमी 3 जोड़ें और 3-4 घंटे के लिए सूजने के लिए छोड़ दें। फिर जेल को स्थानांतरित किया जाता है, एक छोटे से धोकर अल्कोहल की मात्रा, एक ग्लास क्रोमैटोग्राफिक कॉलम में, विलायक को इस तरह से निकालने की अनुमति देता है कि सॉर्बेंट परत के ऊपर अल्कोहल की परत कम से कम 2 मिमी बनी रहे। फ्लास्क से निकालने के शेष को पिपेट के साथ तैयार कॉलम पर लागू किया जाता है, इसे फ्लास्क से 0.5 सेमी 3 के हिस्से में एथिल अल्कोहल के साथ तीन बार धोता है। बेंजो (ए) पाइरीन सहित पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन के एक स्तंभ से क्षालन, इथेनॉल के 40 सेमी 3 के साथ किया जाता है, 12 सेमी 3 के पहले अंश को त्याग दिया जाता है, 25 सेमी 3 का दूसरा अंश एकत्र किया जाता है। ब्लोअर या गैस की बोतल से जुड़े नोजल के माध्यम से हवा या नाइट्रोजन की एक धारा के साथ थोड़ा अधिक दबाव लागू करके 0.5 cc/मिनट की एक विलायक क्षालन दर प्राप्त की जाती है। सिलिका जेल से भरी कांच की नली से गैस की आपूर्ति की जानी चाहिए।

Sephadex LH-20 वाले कॉलम को बार-बार इस्तेमाल किया जा सकता है। ऐसा करने के लिए, शर्बत को विभाजन के बाद सूखने से रोकने के लिए, स्तंभ को एथिल अल्कोहल के 25 सेमी 3 से धोया जाता है और अगला नमूना लगाया जाता है।

दूसरे अंश के घोल को 50 सेमी 3 की क्षमता वाले नाशपाती के आकार के फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है, विलायक को 0.5 - 1.0 सेमी 3 की मात्रा में वाष्पित किया जाता है, इसके अवशेषों को हवा या नाइट्रोजन की एक धारा में हटा दिया जाता है।

बेंजो (ए) पाइरीन युक्त प्राप्त अंश का उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी या स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्रिक विधि द्वारा विश्लेषण किया जाता है।

उसी समय, एक नियंत्रण प्रयोग किया जाता है, विश्लेषण के सभी चरणों को प्रक्रिया के अनुसार अभिकर्मकों का उपयोग करके किया जाता है, लेकिन उत्पाद को तौलने के बिना।

5.3.2 उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा बेंज़ (ए) पाइरीन का निर्धारण

5.3.2.1 क्रोमैटोग्राफी की स्थिति

क्रोमैटोग्राफी स्थितियों का चयन तरल क्रोमैटोग्राफ और क्रोमैटोग्राफिक कॉलम के प्रकार के आधार पर किया जाता है।

एक उदाहरण के रूप में, बेंज़ो (ए) पाइरीन के क्रोमैटोग्राफिक निर्धारण के लिए निम्नलिखित शर्तें दी जा सकती हैं।

तरल क्रोमैटोग्राफ AIex-334 फ्लोरोसेंट डिटेक्टर Kratos FS-970 के साथ।

सुपेलकोसिल एलसी-पीएएम कॉलम, दानेदार 5 माइक्रोन, लंबाई 150 मिमी, व्यास - 4.6 मिमी।

फ्लोरोमेट्रिक डिटेक्टर: उत्तेजना तरंग दैर्ध्य 300 एनएम, उत्सर्जन फिल्टर - 418 एनएम।

मोबाइल चरण: एसीटोनिट्राइल और पानी 8:2 के आयतन अनुपात में।

रेफरेंस रेट - 2.0 सेमी 3 /मिनट।

इंजेक्शन नमूने की मात्रा 20 μl है।

एम्पलीफायर की संवेदनशीलता का चयन किया जाता है ताकि बेंजो (ए) पाइरीन और आंतरिक मानक - बेंजो (बी) क्रिसीन के संकेतों की तीव्रता पैमाने के 95% से अधिक न हो।

विश्लेषण समय - 15 मिनट; बेंजो (ए) पाइरीन का प्रतिधारण समय - 5 मिनट, बेंजो (बी) क्रिसीन -13 मिनट।

विश्लेषण किए गए समाधान समान परिस्थितियों में दो बार क्रोमैटोग्राफ किए जाते हैं। पीक क्षेत्रों को एक इंटीग्रेटर का उपयोग करके या मैन्युअल रूप से चोटी की ऊंचाई और आधी ऊंचाई पर इसकी चौड़ाई के उत्पाद के रूप में मापा जाता है।

बेंज़ो (ए) पाइरीन की सामग्री का निर्धारण आंतरिक मानक की विधि या परिवर्धन की विधि द्वारा किया जाता है।

5.3.2.2 आंतरिक मानक विधि द्वारा 5.3.1 के अनुसार प्राप्त विलयन (अर्क) में बेंजो (ए) पाइरीन की सामग्री का निर्धारण

मात्रात्मक मूल्यांकन की इस पद्धति का उपयोग करते समय, क्रोमैटोग्राफ को 5.2.5 के अनुसार तैयार किए गए अंशांकन समाधानों का उपयोग करके प्रारंभिक रूप से अंशांकित किया जाता है।

5.3.2.1 में निर्दिष्ट शर्तों के तहत, प्रत्येक तैयार समाधान के लिए तीन क्रोमैटोग्राम रिकॉर्ड करें और बेंजो (ए) पाइरीन और बेंजो (बी) क्रिसीन के शिखर क्षेत्रों को मापें। तीन क्रोमैटोग्राम से गणना की गई बेंजो (ए) पाइरीन और बेंजो (बी) क्रिसीन की चोटियों के क्षेत्र का अंकगणितीय माध्य निर्धारित करें।

अंशांकन गुणांक K की गणना सूत्र द्वारा की जाती है

जहां और 2 बेंज़ (ए) पाइरीन (/ एल]) और बेंजो (बी) क्रिसीन (टी 2), माइक्रोग्राम क्रोमैटोग्राफ में पेश किए गए द्रव्यमान हैं; 5) और ^2 - बेंज़ (ए) पाइरीन (.9]) और बेंजो (बी) क्रिसीन (ए^), सेमी 3 के शिखर क्षेत्र।

अंशांकन गुणांक K की गणना प्रत्येक समाधान के लिए की जाती है।

इसका मान अंशांकन कारक के अंकगणितीय माध्य से 10% से अधिक सभी परिणामों से भिन्न नहीं होना चाहिए।

300 एनएम की उत्तेजना तरंग दैर्ध्य और 418 एनएम के उत्सर्जन फिल्टर के साथ, अंशांकन कारक का मूल्य 9.5 है।

क्षारीय हाइड्रोलिसिस के लिए नमूने तैयार करने के चरण में विश्लेषण शुरू करने से पहले, उत्पाद के नमूने और नियंत्रण प्रयोग के नमूने में 0.5 माइक्रोग्राम / सेमी 3 की द्रव्यमान एकाग्रता के साथ बेंजो (बी) क्रिसीन के समाधान के 50 μl को जोड़ा जाता है। . दोनों नमूने 5.3.1 में निर्दिष्ट सभी परीक्षण चरणों से गुजरते हैं। सूखा अवशेष एसीटोनिट्राइल के 200 μl में भंग कर दिया जाता है।

5.3.2.1 में निर्दिष्ट शर्तों के तहत, बेंज़ (ए) पाइरीन के घोल के क्रोमैटोग्राम्स को 100 माइक्रोग्राम / सेमी 3 की द्रव्यमान सांद्रता के साथ रिकॉर्ड करें और 100 माइक्रोग्राम / सेमी 3 के द्रव्यमान एकाग्रता के साथ बेंजो (बी) क्रिसीन के घोल को रिकॉर्ड करें। बेंज़ (ए) पाइरीन और बेंज़ (सी) क्राइसेना के रिलीज समय पर ध्यान दें। फिर, बेंजो (बी) क्रिसीन के साथ नियंत्रण नमूने के क्रोमैटोग्राम और बेंजो (बी) क्रिसीन के समान जोड़ के साथ उत्पाद के नमूने को दर्ज किया जाता है। उत्पाद के नमूने और नियंत्रण नमूने के क्रोमैटोग्राम पर बेंजो (ए) पाइरीन और बेंजो (बी) क्रिसीन की चोटियों के क्षेत्रों को मापें।

प्रत्येक नमूने के लिए दो क्रोमैटोग्राम दर्ज किए जाते हैं। दो क्रोमैटोग्राम से, बेंज़ो (ए) पाइरीन और बेंजो (बी) क्रिसीन की चोटियों के क्षेत्र के अंकगणितीय माध्य की गणना की जाती है।

प्राप्त आंकड़ों के आधार पर, बेंजो (ए) पाइरीन, एमसीजी का द्रव्यमान उत्पाद एम के नमूने और नियंत्रण प्रयोग एम 2 के नमूने में निर्धारित किया जाता है।

"72 नियंत्रण प्रयोग, एमसीजी के नमूने में बेंजो (ए) पाइरीन का द्रव्यमान है; टी सेंट उत्पाद के नमूने और नियंत्रण नमूने, एमसीजी में पेश किए गए बेंजो (वी) क्रिसीन का द्रव्यमान है;

S"] और S 2 - उत्पाद के नमूने (.S"]) और नियंत्रण नमूने (.S/), सेमी 2 के क्रोमैटोग्राम पर बेंजो (ए) पाइरीन के शिखर क्षेत्र;

एल/, एल/- उत्पाद के नमूने (.एसएस) और नियंत्रण नमूने (एल/), सेमी 2 के क्रोमैटोग्राम पर बेंज (बी) क्रिसीन के शिखर क्षेत्र;

K 5.3.2.2 के अनुसार स्थापित अंशांकन कारक है।

5.3.2.3 योग विधि द्वारा 5.3.1 के अनुसार प्राप्त विलयन (अर्क) में बेंजो (ए) पाइरीन की सामग्री का निर्धारण

अतिरिक्त विधि का उपयोग करते समय परिमाणीकरण के लिए, उत्पाद के नमूने के साथ नियंत्रण प्रयोग के एक नमूने का विश्लेषण किया जाता है। उत्पाद के नमूनों से अलग किए गए अंश और 5.3.1 के अनुसार चलने वाले नियंत्रण को एसीटोनिट्राइल के 400 μl में भंग कर दिया जाता है। परिणामी समाधान दो भागों में विभाजित होते हैं, एक छोटे हिस्से (40 μl) को एक टेस्ट ट्यूब या नाशपाती के आकार के फ्लास्क में ले जाते हैं।

उत्पाद के नमूनों के क्रोमैटोग्राम, नियंत्रण के नमूने और बेंजो (ए) पाइरीन के घोल के क्रोमैटोग्राम को 0.25 माइक्रोग्राम/सेमी 3 के द्रव्यमान एकाग्रता के साथ रिकॉर्ड करें। बेंजो (ए) पाइरीन के रिलीज समय पर ध्यान दें।

उत्पाद और नियंत्रण अनुभव के नमूने के शेष हिस्सों में (360 μl) बेंजो (ए) पाइरीन द्रव्यमान एकाग्रता के समाधान के 10 - 20 μl के अतिरिक्त 5 माइक्रोग्राम / सेमी 3 के अतिरिक्त बनाएं। परिणामी समाधान क्रोमैटोग्राफ में फिर से पेश किए जाते हैं।

सभी क्रोमैटोग्राम डुप्लिकेट में दर्ज किए जाते हैं। बेंजो (ए) पाइरीन के शिखर क्षेत्रों को मापा जाता है। दो क्रोमैटोग्राम से, बेंज़ो (ए) पाइरीन शिखर क्षेत्र के अंकगणितीय माध्य की गणना की जाती है।

प्राप्त आंकड़ों के आधार पर, बेंजो (ए) पाइरीन, μg, का द्रव्यमान उत्पाद के नमूने /77] और नियंत्रण प्रयोग टी 2 के नमूने में निर्धारित किया जाता है:

टी सेशन एस 1 . _ टी से एस 3 (9)

एस 2 - 0.95) ' 2 5 4 - 0.95 3 '

जहां /77 op और /77 k बेंजो (ए) पाइरीन का द्रव्यमान है जो उत्पाद के नमूने (t op) और नियंत्रण नमूने (/%), μg से अर्क के हिस्से में जोड़ा जाता है;

S"] और S 2 - उत्पाद के नमूने (.S"]) के क्रोमैटोग्राम पर बेंजो (ए) पाइरीन के शिखर क्षेत्र और बेंज़ो (ए) पाइरीन (एल /), सेमी 2 के अतिरिक्त के साथ उत्पाद का नमूना;

एल/और.एस) - नियंत्रण प्रयोग (एल/) के नमूने के क्रोमैटोग्राम पर बेंजो (ए) पाइरीन के शिखर क्षेत्र और बेंजो (ए) पाइरीन (एल /) के अतिरिक्त के साथ नियंत्रण प्रयोग का नमूना, सेमी 2;

0.9 उस नमूने का अनुपात है जिसमें बेंज़ (ए) पाइरीन मिलाया जाता है।

5.3.3 कमरे के तापमान पर स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री द्वारा बेंज़ (ए) पाइरीन सामग्री का निर्धारण

स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री द्वारा बेंजो (ए) पाइरीन की सामग्री का निर्धारण करते समय, उत्पाद के एक नमूने के साथ, नियंत्रण प्रयोग के एक नमूने का विश्लेषण किया जाता है, जिसमें बेंजो (ए) पाइरीन के घोल का 50 μl 1 μg की द्रव्यमान एकाग्रता के साथ होता है। / सेमी 3 जोड़ा जाता है।

उत्पाद के नमूने से 5.3.1 के अनुसार प्राप्त बेंजो (ए) पाइरीन युक्त अंश और एडिटिव के साथ नियंत्रण नमूने को बेंजीन के 0.5 सेमी 3 में भंग कर दिया जाता है और फिर एसिटिलेटेड सेलूलोज़ की एक पतली परत में अतिरिक्त शुद्धिकरण के अधीन किया जाता है।

ऐसा करने के लिए, एक 20 x 20 सेमी प्लेट, जैसा कि 5.2.2 में दर्शाया गया है, को दो क्षेत्रों में विभाजित किया गया है: एक साइड फील्ड 1.5-2 सेमी चौड़ा और एक मुख्य क्षेत्र, एक स्केलपेल के साथ सॉर्बेंट परत पर एक विभाजित पट्टी खींचना या एक पतला स्पैटुला। 5.3.1 के अनुसार अलग किए गए अंश का एक समाधान मुख्य क्षेत्र पर एक सतत पट्टी के साथ लगाया जाता है, जो प्लेट के निचले किनारे से 2 सेमी और किनारे के किनारों से 1 सेमी की दूरी पर होता है। समाधान को पतली खींची गई केशिका या माइक्रोसिरिंज का उपयोग करके लागू किया जाता है, धब्बों का आकार 5 मिमी से अधिक नहीं होना चाहिए। किसी पदार्थ के मात्रात्मक हस्तांतरण के लिए, इसे फ्लास्क की दीवारों से दो बार बेंजीन (0.4 - 0.6 सेमी 3) की थोड़ी मात्रा के साथ धोया जाता है। साइड फील्ड की शुरुआती लाइन पर, बेंजो (ए) पाइरीन के घोल के 5 μl को 1 μg / cm 3 की द्रव्यमान सांद्रता के साथ बिंदु पर लगाया जाता है। विलायक के पूर्ण वाष्पीकरण के बाद, प्लेट को 70° - 85° के कोण पर एक पूर्व-संतृप्त क्रोमैटोग्राफिक कक्ष में रखा जाता है और एथिल अल्कोहल, एसीटोन और पानी के मिश्रण में क्षालन किया जाता है, जिसे 60 के अनुपात में लिया जाता है: 25:15। जब विलायक का मोर्चा प्लेट के ऊपरी किनारे से 2 सेमी तक पहुंच जाता है, तो इसे कक्ष से हटा दिया जाता है, हवा में सुखाया जाता है, और बेंज़ो (ए) पाइरीन क्रोमैटोग्राफिक क्षेत्र एक पराबैंगनी विकिरण लैंप के तहत विकसित किया जाता है। मुख्य क्षेत्र से बेंजो (ए) पाइरीन ज़ोन से सॉर्बेंट को एक स्केलपेल या एक पतले स्पैटुला का उपयोग करके प्लेट से निकाल दिया जाता है और एक ग्लास फिल्टर में स्थानांतरित कर दिया जाता है, जिसमें से पदार्थ को 50 सेमी बेंजीन के साथ फ्लास्क में कई चरणों में निकाला जाता है। 100 सेमी 3 की क्षमता के साथ, विलायक को थोड़ी मात्रा में वाष्पित किया जाता है, शेष विलायक को हवा की एक धारा के साथ हटा दिया जाता है और 1 सेमी 3 बेंजीन को फ्लास्क में जोड़ा जाता है।

60 एनएम/मिनट की स्कैनिंग गति से 400-440 एनएम की रेंज में 386 एनएम के रोमांचक प्रकाश की तरंग दैर्ध्य पर एक स्पेक्ट्रोफ्लोरिमीटर पर, उत्पाद के नमूने के प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रा और बेंजो (ए) पाइरीन के अतिरिक्त के साथ नियंत्रण नमूना अभिलेखित हैं।

समाधान के स्पेक्ट्रा को एक प्रवर्धन मोड में रिकॉर्ड किया जाता है, नियंत्रण नमूना समाधान के अनुसार अंतराल और प्रवर्धन कारक को समायोजित किया जाता है ताकि 406 एनएम पर बेंजो (ए) पाइरीन का संकेत उपकरण पैमाने का 0.4 - 0.6 हो। प्रत्येक समाधान के लिए, स्पेक्ट्रम को दो बार रिकॉर्ड किया जाता है, जिससे अच्छी प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता प्राप्त होती है। अधिकतम 406 एनएम पर प्राप्त स्पेक्ट्रोग्राम पर, उत्पाद के नमूने के लिए बेंज़ो (ए) पाइरीन की वर्णक्रमीय रेखा की ऊंचाई और नियंत्रण नमूने को मिलीमीटर में मापा जाता है। दो स्पेक्ट्रोग्राम के अनुसार बेंजो (ए) पाइरीन की ऊंचाई के औसत मूल्य की गणना करें। उत्पाद में बेंजो (ए) पाइरीन के उच्च स्तर पर, नमूनों को बेंजीन से पतला किया जाता है और स्पेक्ट्रम को फिर से उसी प्रवर्धन मोड में दर्ज किया जाता है जैसे कि नियंत्रण नमूने के लिए।

दो समानांतर निर्धारणों का संचालन करें।

5.4 परिणामों को संभालना

5.4.1 उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी विधि का उपयोग करते समय उत्पाद एक्स \,%, या एक्स 2, मिलीग्राम / किग्रा में बेंज़ (ए) पाइरीन के द्रव्यमान अंश की गणना सूत्रों द्वारा की जाती है:

(टी 1 - टी 2) 100 (टी जी - टी 2) टी 1000 1000 "टी 10

जहां mi उत्पाद के नमूने में बेंजो (ए) पाइरीन का द्रव्यमान है, μg;

m2 नियंत्रण नमूने में बेंजो (ए) पाइरीन का द्रव्यमान है, μg; टी विश्लेषण के लिए लिए गए उत्पाद का द्रव्यमान है, जी।

5.4.2 स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री विधि का उपयोग करते समय बेंज़ (ए) पाइरीन उत्पाद ए),%, या एक्स 2, मिलीग्राम / किग्रा के द्रव्यमान अंश की गणना सूत्रों द्वारा की जाती है:

एस सेंट एनयू- 100 एस एसटी // वी टी 1000 ■ 1000

जहां cst 5.2.4 के अनुसार तैयार किए गए कार्यशील घोल में बेंजो (ए) पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता है और नियंत्रण नमूने में जोड़ा जाता है, माइक्रोग्राम / सेमी 3;

उत्पाद के नमूने के स्पेक्ट्रोग्राम पर बेंजो (ए) पाइरीन की वर्णक्रमीय रेखा की ऊंचाई, मिमी; नियंत्रण प्रयोग के नमूने के स्पेक्ट्रोग्राम पर बेंजो (ए) पाइरीन की वर्णक्रमीय रेखा की ऊंचाई, मिमी;

V बेंज़ (ए) पाइरीन के कार्यशील घोल का आयतन है जिसे नियंत्रण प्रयोग के नमूने में जोड़ा गया है, सेमी 3; t परीक्षण के लिए लिए गए उत्पाद के नमूने का भार है, g.

महत्वपूर्ण अंकों की समान संख्या वाले दो समानांतर निर्धारणों के अंकगणितीय माध्य को अंतिम परीक्षा परिणाम के रूप में लिया जाता है।

यदि समानांतर निर्धारण के परिणामों के बीच विसंगति \X-y - YY 2 | . से अधिक नहीं है<

< 0,01 dX, где, Х 2 и X- результаты параллельных определений и их среднее арифметическое, а d - норматив контроля сходимости, то среднее арифметическое X принимают за результат анализа. В противном случае анализ повторяют. Значение норматива d приведено в таблице 3.

विश्लेषण X के परिणाम और तालिका 3 में दी गई सापेक्ष त्रुटि d के मान के आधार पर, पूर्ण त्रुटि A = 0, (SHK)

विश्लेषण का परिणाम पी = 0.95 पर (एक्स ± ए), मिलीग्राम / किग्रा या% के रूप में प्रस्तुत किया जाता है।

5.5 विश्लेषण परिणामों की सटीकता को नियंत्रित करना

5.5.1 5.3 के अनुसार विश्लेषण किए गए प्रत्येक नमूने के लिए प्रतिकृति निर्धारणों की पुनरावृत्ति की जाँच की जाती है।

5.5.2 कार्यशील नमूनों का उपयोग प्रजनन क्षमता को नियंत्रित करने के लिए किया जाता है। नमूने को दो समान भागों में विभाजित किया जाता है और विभिन्न प्रयोगशालाओं में या एक ही प्रयोगशाला में कार्यप्रणाली के अनुसार विश्लेषण किया जाता है, विश्लेषण की स्थिति को जितना संभव हो सके अलग-अलग किया जाता है, यानी वॉल्यूमेट्रिक बर्तनों के विभिन्न सेटों का उपयोग करके, विश्लेषण अलग-अलग दिनों में या दो बार किया जाता है। विभिन्न विश्लेषकों।

नियंत्रण विश्लेषण की पुनरुत्पादकता को संतोषजनक माना जाता है यदि \ X-y - X 2 \<

< 0,01 DX, где Л), Х 2 и X- результаты анализа одной и той же пробы, полученные в разных лабораториях или при варьирующих условиях в одной лаборатории и их среднее арифметическое значение, D - значение норматива внутреннего оперативного контроля воспроизводимости. Значение норматива D приведено в таблице 3.

प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता नियंत्रण की आवृत्ति - हर दो सप्ताह में कम से कम एक बार

तालिका 3 - मापन सीमा, सापेक्ष त्रुटि की विशेषता का मान और सापेक्ष त्रुटि (अभिसरण और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता) के यादृच्छिक घटक के परिचालन नियंत्रण के लिए एक विश्वास स्तर P = 0.95 पर मानक

5.5.3 सटीकता को नियंत्रित करने के लिए, बेंजो (ए) पाइरीन के ज्ञात जोड़ के साथ काम करने वाले नमूनों का उपयोग करें। नमूने को दो बराबर भागों में बांटा गया है, जिनमें से पहले का विश्लेषण प्रक्रिया के अनुसार किया जाता है, और बेंजो (ए) पाइरीन के ज्ञात जोड़ को दूसरे में पेश किया जाता है और फिर प्रक्रिया के अनुसार विश्लेषण भी किया जाता है। विश्लेषण किए गए नमूने में योजक का मूल्य बेंजापायरीन की सामग्री का 50 - 150% होना चाहिए।

नियंत्रण विश्लेषण की सटीकता को संतोषजनक माना जाता है यदि |L) - X- s \< К, где Л), X и с - результаты контрольных анализов пробы с добавкой бенз(а)пирена, реальной пробы и величина добавки бенз(а)пирена соответственно; К - норматив оперативного контроля точности.

पीसी पर FSUE "STANDARTINFORM" टाइप किया।

FSUE "STANDARTINFORM" की शाखा में मुद्रित - प्रकार। "मॉस्को प्रिंटर", 105062 मॉस्को, लाइलिन प्रति।, 6

गोस्ट आर 51650-2000

1 उपयोग का क्षेत्र ......................................... ............... एक

3 नमूना ...................................... ............... ................... 2

4 निम्न-तापमान स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री की विधि ......................... 2

4.1 उपकरण, सामग्री और अभिकर्मक …………………………… ... 2

4.2 परीक्षण की तैयारी …………………………… ................... ... 3

4.3 परीक्षण करना ……………………………… .................. 3

4.4 परिणामों को संसाधित करना ……………………………… ......................... 6

4.5 विश्लेषण परिणामों की शुद्धता की जाँच करना ..... 6

5 उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी और स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री विधियों के लिए

कमरे का तापमान ................................................ ...................... 7

5.1 उपकरण, सामग्री और अभिकर्मक ... 8

5.2 परीक्षण की तैयारी …………………………… ................... ... 9

5.3 परीक्षण करना ……………………………… ............... दस

5.4 प्रसंस्करण परिणाम ……………………………… .........................13

5.5 विश्लेषण परिणामों की शुद्धता की जाँच करना ......................14

6 सुरक्षा आवश्यकताएँ ……………………………………… ................. पंद्रह

7 ऑपरेटर योग्यता आवश्यकताएँ ……………………………………… .15

परिशिष्ट ए ग्रंथ सूची

रूसी संघ का राज्य मानक

खाद्य उत्पाद बेंजो (ए) पाइरीन के द्रव्यमान अंश को निर्धारित करने के तरीके

कुल द्रव्यमान के बेंज़ (ए) पाइरेन अंश के निर्धारण के लिए तरीके

परिचय दिनांक 2001-07-01

1 उपयोग का क्षेत्र

यह अंतर्राष्ट्रीय मानक खाद्य कच्चे माल, खाद्य पदार्थों, खाद्य और स्वाद योजकों पर लागू होता है और कम और कमरे के तापमान और उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी पर स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री का उपयोग करके बेंजो (ए) पाइरीन के द्रव्यमान अंश को निर्धारित करने के तरीकों को स्थापित करता है।

के अनुसार 500 ग्राम की उच्चतम वजन सीमा के साथ द्वितीय सटीकता वर्ग के सामान्य प्रयोजन प्रयोगशाला पैमाने गोस्ट 24104.

रोटरी बाष्पीकरण IR-1M।

नहाने का पानी।

एक बंद सर्पिल और एक हीटिंग नियामक के साथ घरेलू बिजली का स्टोव गोस्ट 14919.

किसी भी क्षमता के तरल नाइट्रोजन के लिए देवर पोत

क्रोमैटोग्राफी के लिए स्नान (तामचीनी फोटोक्यूवेट्स)।

15 x 30 और 20 x 40 सेमी मापने वाली कांच की प्लेटें।

फ्लास्क K-1-250-29/32 THS, K-1-100-29/32 THS, K-1-500-29/32 THS या P-1-500-29/32 THS के अनुसार गोस्ट 25336.

रेफ्रिजरेटर KhIT-1-300-14/23 KhS या KhIT-1-400-14/23 KhS अनुसार गोस्ट 25336.

रेफ्रिजरेटर KhPT-2-400-29/32 KhS और KhPT-1-300-29/32 या KhPT-400-29/32 KhS के अनुसार गोस्ट 25336.

डिफ्लेगमेटर 250-19/26-29/32 टीसी या डिफ्लेगमेटर 300-19/26-29/32 टीसी के अनुसार गोस्ट 25336.

ग्लास टेस्ट ट्यूब P2-10-180 XC के अनुसार गोस्ट 25336.

नोजल -1-19/26-14/23 या Н2-19/23 गोस्ट 25336.

जल जेट प्रयोगशाला पंप गोस्ट 25336.

1, 2, 5, 10 सेमी 3 . की क्षमता वाले पिपेट गोस्ट 29228तथा गोस्ट 29229.

फ़नल VFO-32-POR 100-14/23 XC या VFO-32-POR 160-14/23 XC के अनुसार गोस्ट 25336.

मापा ट्यूब P-2-15-14/23 KhS अनुसार गोस्ट 1770.

फ़नल को विभाजित करना VD-1-500 या VD-3-500 गोस्ट 25336.

स्नातक किए गए सिलेंडर 1-100, 1-250 या 3-100, 3-250 गोस्ट 25336.

वजन के लिए कप (बक्से) SV-14/8, या SV-19/9, या SV-24/10, या SV-34/12 के अनुसार गोस्ट 25336.

0-250 डिग्री सेल्सियस की तापमान माप सीमा के साथ थर्मामीटर 1 डिग्री सेल्सियस के विभाजन मूल्य के साथ गोस्ट 29224.

कांच की केशिकाएं, कांच की छड़ें।

n.octane, h., मानक दस्तावेज़ के अनुसार।

n.hexane, h., मानक दस्तावेज़ के अनुसार।

संशोधित एथिल अल्कोहल तकनीकी ग्रेड गोस्ट 18300या एथिल अल्कोहल के अनुसार सुधारा गया गोस्ट आर 51652.

मानक दस्तावेज के अनुसार पेट्रोलियम ईथर अंश 40 - 70 डिग्री सेल्सियस।

मानक दस्तावेज के अनुसार गतिविधि की दूसरी डिग्री की क्रोमैटोग्राफी के लिए एल्यूमीनियम ऑक्साइड।

बेंज (ए) पाइरीन, मुख्य पदार्थ की सामग्री 98% से कम नहीं है।

1,12-बेंजपेरीलीन, मुख्य पदार्थ की सामग्री 98% से कम नहीं है।

इसे मेट्रोलॉजिकल विशेषताओं और तकनीकी विशेषताओं वाले उपकरणों के साथ-साथ अभिकर्मकों और गुणवत्ता की सामग्री के साथ अन्य माप उपकरणों का उपयोग करने की अनुमति है जो संकेतित से कम नहीं हैं।

4.2 परीक्षण की तैयारी

4.2.1 विलायकों का शुद्धिकरण

सॉल्वैंट्स (एन। ऑक्टेन, एथिल अल्कोहल, पेट्रोलियम ईथर, क्लोरोफॉर्म और एन। हेक्सेन) रिफ्लक्स कंडेनसर के साथ सामान्य तरीके से आसुत होते हैं।

4.2.2 एल्यूमिना की तैयारी

एल्यूमिना को 4 घंटे के लिए (250 + 4) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर ओवन में सुखाया जाता है और एक बर्तन में ग्राउंड स्टॉपर के साथ संग्रहीत किया जाता है।

4.2.3 पतली परत क्रोमैटोग्राफी (गवाह समाधान) के लिए बेंज़ (ए) पाइरीन समाधान तैयार करना।

लगभग 10 मिलीग्राम बेंजो (ए) पाइरीन को तोलने वाली बोतल में तौला जाता है, कुछ मिलीलीटर पेट्रोलियम ईथर को तब तक मिलाया जाता है जब तक कि नमूना पूरी तरह से भंग न हो जाए।

परिणामी समाधान मात्रात्मक रूप से 100 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है और समाधान की मात्रा को पेट्रोलियम ईथर के साथ निशान में समायोजित किया जाता है। रेफ्रिजरेटर में समाधान का शेल्फ जीवन तीन महीने से अधिक नहीं है।

4.2.4 बेंज़ (ए) पाइरीन मानक समाधान तैयार करना

एक तोलने वाली बोतल में (10.0 ± 0.2) मिलीग्राम बेंजो (ए) पाइरीन तौलें, नमूना पूरी तरह से भंग होने तक कुछ मिलीलीटर n.octane जोड़ें। परिणामी घोल को मात्रात्मक रूप से 100 सेमी 3 की क्षमता वाले ग्राउंड स्टॉपर के साथ वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया गया था और n.octane के साथ निशान पर लाया गया था। परिणामी घोल में बेंजो (ए) पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता 100 माइक्रोग्राम / सेमी 3 है। समाधान रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया जाता है। समाधान का शेल्फ जीवन तीन महीने से अधिक नहीं है।

4.2.5 बेंजो(ए)पाइरीन . के कार्यशील विलयनों की तैयारी

बेंजो (ए) पाइरीन द्रव्यमान एकाग्रता 0.1 के कार्य समाधान; 0.04 और 0.02 माइक्रोग्राम/सेमी 3 एन.ऑक्टेन में 100 सेमी 3 की क्षमता वाले ग्राउंड स्टॉपर के साथ वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में 4.2.4 के अनुसार तैयार बेंजो (ए) पाइरीन के प्रारंभिक मानक समाधान के अनुक्रमिक कमजोर पड़ने से तैयार किए जाते हैं। समाधान एक रेफ्रिजरेटर में जमा हो जाते हैं। समाधान का शेल्फ जीवन एक महीने से अधिक नहीं है।

4.2.6 1,12-बेंजपेरीलीन मानक समाधान (आंतरिक मानक) तैयार करना

प्रारंभिक समाधान तैयार करने के लिए, एक बोतल में वजन (10.0 + 0.2) मिलीग्राम 1,12-बेंज़पेरीलीन, नमूना पूरी तरह से भंग होने तक कुछ मिलीलीटर n.octane जोड़ें। परिणामी घोल को मात्रात्मक रूप से 100 सेमी 3 की क्षमता वाले ग्राउंड स्टॉपर के साथ वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया गया था और n.octane के साथ निशान पर लाया गया था। परिणामी घोल में 1,12-बेंज़पेरीलीन का द्रव्यमान सांद्रण 100 माइक्रोग्राम/सेमी 3 है। समाधान रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया जाता है। समाधान का शेल्फ जीवन तीन महीने से अधिक नहीं है।

4.2.7 1,12-बेंजपेरीलीन (आंतरिक मानक समाधान) के कार्यशील समाधान तैयार करना

1,12-बेंजपेरिलीन द्रव्यमान एकाग्रता 0.01 के कार्य समाधान; 0.005; 0.002 और 0.001 माइक्रोग्राम / सेमी 3

100 सेमी 3 की क्षमता वाले ग्राउंड स्टॉपर के साथ वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में 4.2.6 के अनुसार तैयार किए गए प्रारंभिक मानक समाधान के क्रमिक कमजोर पड़ने से एन.ऑक्टेन में तैयार किया गया। समाधान एक रेफ्रिजरेटर में जमा हो जाते हैं। समाधान का शेल्फ जीवन एक महीने से अधिक नहीं है।

4.3 परीक्षण आयोजित करना

4.3.1 उत्पाद से बेंजो (ए) पाइरीन का पृथक्करण

500 सेमी 3 की क्षमता वाले एक गोल-नीचे फ्लास्क में 25 ग्राम वजन वाले उत्पाद का एक नमूना डालें, फ्लास्क में 20 सेमी 3 आसुत जल, 200 सेमी 3 एथिल अल्कोहल और 20 ग्राम पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड मिलाएं।

फ्लास्क की सामग्री को मिलाते हुए मिलाया जाता है। फ्लास्क को रिफ्लक्स कंडेनसर से जोड़ा जाता है और 3 घंटे तक उबलते हुए प्रतिक्रिया मिश्रण के साथ पानी के स्नान में गरम किया जाता है। फिर एक कंडेनसर के माध्यम से फ्लास्क में 150 सेमी 3 पानी डाला जाता है; फ्लास्क को स्नान से हटा दिया जाता है और कमरे के तापमान पर ठंडा कर दिया जाता है।

ठंडा करने के बाद, प्रतिक्रिया मिश्रण के तरल चरण को अलग करने के लिए एक अलग फ़नल में स्थानांतरित कर दिया जाता है, शेष उत्पाद को फ्लास्क में छोड़ दिया जाता है। n-हेक्सेन के 150 cm3 को अवशेषों के साथ फ्लास्क में मिलाया जाता है, फ्लास्क की सामग्री को जोर से हिलाया जाता है और n-हेक्सेन को अलग करने वाले फ़नल में बदल दिया जाता है।

फ़नल को रोक दिया जाता है और जोर से हिलाया जाता है, फिर एक रैक में सुरक्षित किया जाता है और तरल पदार्थ को अलग करने के लिए छोड़ दिया जाता है। परिणामी इमल्शन को अलग करने के लिए, एथिल अल्कोहल के 20 सेमी 3 को एक अलग करने वाले कीप में मिश्रण में मिलाया जाता है। अलग होने के बाद, निचले जलीय-अल्कोहल चरण को अवक्षेप के साथ फ्लास्क में वापस डाला जाता है, और हेक्सेन निकालने को 500 सेमी 3 फ्लास्क में डाला जाता है।

प्रतिक्रिया मिश्रण का यह उपचार दो बार और किया जाता है, निष्कर्षण के लिए 100 सेमी 3 एन-हेक्सेन और इमल्शन को अलग करने के लिए एथिल अल्कोहल का उपयोग करके, 20 सेमी 3 के हिस्से में।

निष्कर्षण के अंत में, फ्लास्क और हाइड्रोलाइज़ेट में अवशेषों को त्याग दिया जाता है, और अर्क को एक अलग कीप में आसुत जल से तीन बार 50 सेमी 3 से धोया जाता है और एक गोल-तल वाले फ्लास्क में भागों में वाष्पित किया जाता है। 250 सेमी 3 पानी के स्नान के तापमान पर एक रोटरी बाष्पीकरण पर दूसरे दशमलव स्थान पर 60 ° С से अधिक नहीं तौला जाता है। विलायक के निशान को हटाने के लिए धूआं हुड में अर्क के साथ फ्लास्क को छोड़ दें, जिसके बाद इसे फिर से तौला जाता है। निकाले गए अर्क का वजन वजन के बीच के अंतर से निर्धारित होता है।

फ्लास्क के अर्क से 1/5 भाग बिना तोल के बोतल में लिया जाता है। शेष अर्क के साथ फ्लास्क को तौला जाता है। बेंज़ (ए) पाइरीन "गवाह" घोल का 0.1-0.2 सेमी 3, अर्क के हिस्से के साथ बोतल में 4.2.3 के अनुसार तैयार करें। बोतल की सामग्री और फ्लास्क में अवशेष पेट्रोलियम ईथर की एक छोटी मात्रा में घुल जाते हैं।

अर्क के क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण के लिए, एल्यूमीनियम ऑक्साइड को समान रूप से 20x40 सेमी मापने वाली कांच की प्लेट पर डाला जाता है। फिर, 1 मिमी मोटी और 3 मिमी चौड़ी रबर के छल्ले के साथ तीन भागों (14, 1 और 3 सेमी) में विभाजित कांच की छड़ का उपयोग करके, एल्यूमीनियम ऑक्साइड को सावधानी से समतल किया जाता है।

परिणामी समाधान कांच की केशिकाओं के साथ तैयार प्लेट पर मात्रात्मक रूप से लागू होते हैं: संकीर्ण भाग पर - बोतल से एक समाधान ("गवाह"), व्यापक भाग पर - फ्लास्क से उत्पाद का अर्क। समाधान एक सतत पट्टी में समान रूप से लागू होते हैं, प्लेट के निचले किनारे से 7-8 सेमी पीछे हटते हैं।

प्लेट को क्रोमैटोग्राफी बाथ में थोड़ा सा 20° - 25° कोण पर रखा जाता है, पेट्रोलियम ईथर डाला जाता है ताकि यह नमूना अनुप्रयोग लाइन तक न पहुंचे। स्नान को कांच से ढक दिया जाता है और क्रोमैटोग्राफी की जाती है, जिससे विलायक को प्लेट के ऊपरी किनारे पर लाया जाता है।

प्लेट को सुखाए बिना, इसे पराबैंगनी प्रकाश से विकिरणित किया जाता है और परीक्षण नमूने में बेंजो (ए) पाइरीन का स्थान चमकदार "गवाह" बैंड द्वारा निर्धारित किया जाता है। परीक्षण नमूने के क्रोमैटोग्राम पर बेंजो (ए) पाइरीन बैंड की सीमाओं को चिह्नित करें। प्लेट को धूआं हुड में हवा में सुखाया जाता है।

परीक्षण नमूने के क्रोमैटोग्राम पर चिह्नित एल्यूमीनियम ऑक्साइड की पट्टी को कांच की स्लाइड का उपयोग करके प्लेट से हटा दिया जाता है और मात्रात्मक रूप से फिल्टर फ़नल की झरझरा प्लेट में स्थानांतरित कर दिया जाता है। कीप को 100 सेमी 3 की क्षमता वाले एक गोल तल वाले फ्लास्क से जोड़ा जाता है और बेंजो (ए) पाइरीन को 50 सेमी 3 बेंजीन के साथ एल्यूमिना से अलग किया जाता है, छोटे भागों में बेंजीन मिलाते हुए और एक छड़ी के साथ कीप पर एल्यूमिना को हिलाते हैं। बेंजीन को एक रोटरी बाष्पीकरण पर 60 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं पानी के स्नान के तापमान पर सुखाया जाता है। फ्लास्क में अवशेषों को मात्रात्मक रूप से ऑक्टेन के साथ एक परखनली में स्थानांतरित किया गया था। परखनली में घोल की मात्रा 5 सेमी 3 से अधिक नहीं होनी चाहिए।

कुछ उत्पादों के विश्लेषण में, उत्पाद से पृथक अर्क की प्राथमिक क्रोमैटोग्राफी के दौरान नमूने के फ्लोरोसेंट घटकों का पूर्ण और स्पष्ट पृथक्करण नहीं होता है। इस मामले में, "गवाह" स्तर पर प्लेट पर एल्यूमीनियम ऑक्साइड की एक विस्तृत पट्टी अलग की जाती है; बेंज़ (ए) पाइरीन को एल्यूमिना से बेंजीन के साथ ऊपर वर्णित किया गया है, और वाष्पीकरण अवशेषों को इथेनॉल में भंग कर दिया जाता है और परिणामस्वरूप अल्कोहल निकालने को पुन: क्रोमैटोग्राफ किया जाता है।

अल्कोहल के अर्क के क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण के लिए, 0.3 मिमी मोटी एल्यूमीनियम ऑक्साइड की परत के साथ 15 x 30 सेमी मापने वाली प्लेट का उपयोग किया जाता है। प्लेट पर 10 और 3 सेमी चौड़ी दो स्ट्रिप्स अलग हो जाती हैं। विश्लेषण किए गए उत्पाद का एक अल्कोहल निकालने को कांच के केशिका का उपयोग करके प्लेट के चौड़े हिस्से पर लागू किया जाता है, और पेट्रोलियम ईथर में बेंजो (ए) पाइरीन का समाधान ("गवाह" घोल) प्लेट के संकरे हिस्से पर लगाया जाता है। प्लेट को स्नान में 20 - 25 ° के कोण पर रखा जाता है और क्लोरोफॉर्म में क्रोमैटोग्राफी करता है, जिससे विलायक को प्लेट के ऊपरी किनारे पर लाया जाता है। पराबैंगनी प्रकाश में, अध्ययन के तहत उत्पाद के बेंजो (ए) पाइरीन के साथ एल्यूमीनियम ऑक्साइड का एक बैंड "गवाह" द्वारा नोट किया जाता है। फिर बेंजो (ए) पाइरीन को बेंजीन के साथ एल्यूमिना से निकाला जाता है और आगे के सभी ऑपरेशन ऊपर वर्णित अनुसार किए जाते हैं।

गोस्ट आर 51650-2000

n.octane में बेंजो (ए) पाइरीन का एक घोल एक परखनली में स्थानांतरित किया जाता है। 25 ग्राम के उत्पाद के प्रारंभिक नमूने के साथ समाधान की मात्रा 5 सेमी 3 से अधिक नहीं होनी चाहिए।

परिणामी समाधान (निकालें) में, बेंजो (ए) पाइरीन की सामग्री को मात्रात्मक मूल्यांकन के लिए अतिरिक्त विधि या आंतरिक मानक विधि का उपयोग करके निम्न-तापमान स्पेक्ट्रोफ्लोरोमेट्री की विधि द्वारा निर्धारित किया जाता है।

4.3.2 योग विधि द्वारा 4.3.1 के अनुसार प्राप्त विलयन (अर्क) में बेंजो (ए) पाइरीन की सामग्री का निर्धारण।

तीन परखनलियों में, बेंजो (ए) पाइरीन के परिणामी घोल का 1 सेमी 3 एक पिपेट के साथ एन.ऑक्टेन में डालें। फिर 2 cm 3 n.octane को पहली परखनली में डाला जाता है। एन.ऑक्टेन के 1.5 सेमी 3 और बेंज़ (ए) पाइरीन के एक कार्यशील घोल के 0.5 सेमी 3, 4.2.5 के अनुसार तैयार 0.1 माइक्रोग्राम / सेमी 3 की द्रव्यमान सांद्रता को दूसरी परखनली में डाला जाता है। तीसरी परखनली में बेंजो (ए) पाइरीन के समान कार्यशील घोल का 1 सेमी 3 एन.ऑक्टेन और 1 सेमी 3 दूसरी परखनली में मिलाएं।

स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्रिक विश्लेषण तीसरी टेस्ट ट्यूब से शुरू होता है। ऐसा करने के लिए, तीसरी परखनली को देवर के बर्तन में तरल नाइट्रोजन के साथ स्पेक्ट्रोफोटोमीटर के प्रवेश द्वार के सामने रखा जाता है; रोमांचक प्रकाश 367 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर बेंजो (ए) पाइरीन 403 एनएम की विश्लेषणात्मक प्रतिदीप्ति रेखा सेट करें। लाभ को समायोजित करके और भट्ठा खोलकर, साथ ही साथ देवर पोत में टेस्ट ट्यूब को समायोजित करके, अधिकतम संकेत स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (50 - 80% तक) के रिकॉर्डिंग डिवाइस द्वारा प्राप्त किया जाता है, जिसके बाद बेंज का स्पेक्ट्रोग्राम ( क) पाइरीन को 401 - 404 एनएम के क्षेत्र में दर्ज किया जाता है, जिससे रिकॉर्डिंग डिवाइस स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का मान 401 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर तय होता है। स्पेक्ट्रम की रिकॉर्डिंग दो बार दोहराई जाती है।

फिर दूसरी और पहली टेस्ट ट्यूब तरल नाइट्रोजन में क्रमिक रूप से जमे हुए हैं और प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रा तरंग दैर्ध्य रेंज 401 - 404 एनएम में दर्ज की जाती है, रिकॉर्डर पेन को 401 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर उसी स्थिति में सेट करना सुनिश्चित करें जैसे कि नमूना स्कैन करते समय तीसरी परखनली में।

विश्लेषण किए गए अर्क में बेंजो (ए) पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता ग्राफ के अनुसार निर्धारित की जाती है, जिस पर बेंज़ो (ए) पाइरीन (μg) के जोड़ का मूल्य एब्सिस्सा अक्ष के साथ प्लॉट किया जाता है, और शिखर की ऊंचाई 403 एनएम पर बेंजो (ए) पाइरीन की अधिकतम विशेषता रेखा को मिलीमीटर में प्राप्त स्पेक्ट्रोग्राम से मापा जाता है, कोऑर्डिनेट अक्ष के साथ प्लॉट किया जाता है।

यदि परीक्षण विलयन में बेंजो (ए) पाइरीन का द्रव्यमान मापन के लिए उपयुक्त क्षेत्र के भीतर आता है, तो प्राप्त प्रायोगिक बिंदु उसी सीधी रेखा पर स्थित होते हैं। एब्सिस्सा अक्ष के साथ चौराहे पर इस सीधी रेखा का एक्सट्रपलेशन उस पर एक खंड देता है जो बिना एडिटिव के घोल में बेंज़ो (ए) पाइरीन की सामग्री के अनुरूप होता है, यानी परीक्षण समाधान के 1 सेमी 3 में। यदि विश्लेषण किए गए घोल में बेंजो (ए) पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता डिवाइस द्वारा मापी गई सांद्रता की सीमा की ऊपरी सीमा से अधिक है, तो विश्लेषण किया गया समाधान n.octane से पतला होता है।

4.3.3 आंतरिक मानक विधि द्वारा 4.3.1 के अनुसार प्राप्त घोल (अर्क) में बेंजो (ए) पाइरीन की सामग्री का निर्धारण

1,12-बेंज़पेरीलीन का उपयोग आंतरिक मानक के रूप में किया जाता है। एक परखनली में 4.3.1 के अनुसार प्राप्त एन.ऑक्टेन में बेंज़ (ए) पाइरीन के घोल का 3 सेमी 3 डालें और इसे स्पेक्ट्रोफोटोमीटर के प्रवेश द्वार के सामने तरल नाइट्रोजन के साथ देवर के बर्तन में रखें, विश्लेषणात्मक सेट करें 367 एनएम के रोमांचक प्रकाश की तरंग दैर्ध्य पर 403 एनएम पर लाइन और तरंग दैर्ध्य रेंज 401-409 एनएम में समाधान के स्पेक्ट्रम की रिकॉर्डिंग करना। रेखा की तीव्रता से (403 एनएम पर बेंज़ो (ए) पाइरीन की अधिकतम विशेषता रेखा के शिखर की ऊंचाई के अनुसार), नमूने में बेंजो (ए) पाइरीन की अनुमानित सामग्री का अनुमान है। इस आकलन के अनुसार, फिर एक परखनली में n.octane में बेंज़ (ए) पाइरीन के घोल के 3 सेमी 3 के साथ एक परखनली में 1,12-बेंज़पेरीलीन का घोल इतनी मात्रा में मिलाया जाता है कि 1,12- नमूने के स्पेक्ट्रम में बेंज़पेरीलीन at

406.3 एनएम 403 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर बेंज (ए) पाइरीन लाइन की तीव्रता से 3-5 गुना अधिक था।

स्पेक्ट्रम तरंग दैर्ध्य रेंज 401 - 409 एनएम में दो बार दर्ज किया गया है।

बेंज़ (ए) पाइरीन की विशेषता रेखाओं की तीव्रता 403 एनएम और 1,12-बेंज़पेरीलीन पर

406.3 एनएम (क्रमशः एच | और एच 2) मिलीमीटर में इन यौगिकों की विशेषता रेखाओं के मैक्सिमा पर चोटियों की ऊंचाई को मापकर स्पेक्ट्रोग्राम से निर्धारित किया जाता है। गणना में औसत मूल्य लेते हैं। बेंज़ (ए) पाइरीन (ईजीडी) लाइन की तीव्रता का अनुपात गुणांक (के) 1,12-बेंज़पेरीलीन (ईजी 2) लाइन की तीव्रता की गणना की जाती है, के = //]/// 2।

इसके बाद, यह गुणांक बेंजो (ए) पाइरीन (एक्स सेंट) के मानक समाधान के लिए निर्धारित किया जाता है। ऐसा करने के लिए, 0.02 और 0.04 μg/cm 3 के द्रव्यमान एकाग्रता के साथ बेंज (ए) पाइरीन के मानक समाधान के 3 सेमी 3 को दो टेस्ट ट्यूबों में डाला जाता है। प्रत्येक परखनली में 1,12-बेंजपेरीलीन की उतनी ही मात्रा डाली जाती है जितनी नमूने के साथ परखनली में डाली जाती है। प्रत्येक समाधान का स्पेक्ट्रा दो बार तरंग दैर्ध्य रेंज 401-409 एनएम में दर्ज किया गया है ।

इस मामले में, यह सुनिश्चित करना अनिवार्य है कि सभी मामलों में 401 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर रिकॉर्डर पेन की स्थिति समान स्तर पर तय हो।

इसके बाद, बेंज़ (ए) पाइरीन की 403 एनएम और 1,12-बेंज़पेरीलीन की विशेषता लाइनों की तीव्रता 406.3 एनएम (क्रमशः डब्ल्यू और एच 2,) पर स्पेक्ट्रोग्राम से निर्धारित की जाती है। गणना में औसत मूल्य लेते हैं। बेंजो (ए) पाइरीन की प्रत्येक सांद्रता के लिए के सेंट \u003d एच ^ एच 2 की गणना करें।

विश्लेषण किए गए घोल c, µg/cm 3 में बेंजो (ए) पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता की गणना सूत्र द्वारा की जाती है:

एस सेंट * के / के सेंट, (1)

जहां सी सेंट मानक समाधान में बेंजो (ए) पाइरीन की एकाग्रता है, माइक्रोग्राम / सेमी 3;

K, विश्लेषण किए गए विलयन के स्पेक्ट्रोग्राम से प्राप्त गुणांक है जिसमें 1,12-बेंजपेरीलीन मिला दिया गया है;

K C1 - बेंज़ (ए) पाइरीन के एक मानक समाधान के स्पेक्ट्रोग्राम से पाया गया गुणांक, 1,12-बेंज़पेरीलीन के अतिरिक्त के साथ, जिसका मान 1 के संगत जोड़ के साथ विश्लेषण किए गए समाधान के गुणांक के मूल्य के करीब है। 12-बेंज़पेरीलीन।

दो समानांतर निर्धारण किए जाते हैं और साथ ही एक नियंत्रण प्रयोग किया जाता है, जो प्रक्रिया के अनुसार सभी अभिकर्मकों का उपयोग करके विश्लेषण के सभी चरणों के माध्यम से किया जाता है, लेकिन उत्पाद के नमूने के बिना।

4.4 परिणामों को संभालना

बेंज़ (ए) पाइरेन एल),%, एक्स और एक्स 2, मिलीग्राम / किग्रा के द्रव्यमान अंश की गणना सूत्रों द्वारा की जाती है:

= (एस - एर) एम एल वी ■ 100 = (एस - एर) ■ टी 1 ■ वी (2)

3 टी 2 टी ■ 1000 1000 टी 2 ■ टी '

_ (एस - एस 0) ■ वी ■ टी 1 (3)

जहां c बेंजो (ए) पाइरीन की सांद्रता है, जिसे 4.3.2 या 4.3.3 के अनुसार विश्लेषण किए गए उत्पाद के घोल (अर्क) में स्थापित किया गया है, जिसे 4.3.1, µg/cm 3 के अनुसार प्राप्त किया गया है; c 0 4.3.1, µg/cm 3 के अनुसार प्राप्त नियंत्रण प्रयोग के घोल में बेंजो (ए) पाइरीन की सांद्रता है; वी उत्पाद के विश्लेषण किए गए नमूने से अलग बेंजो (ए) पाइरीन समाधान की मात्रा है, सेमी 3;

/«मैं - विश्लेषण किए गए उत्पाद से अलग किए गए अर्क का वजन, जी; एम 2 - प्लेट की एक विस्तृत पट्टी पर लागू अर्क का द्रव्यमान, जी; टी उत्पाद के नमूने का द्रव्यमान है, जी।

परिणाम दूसरे महत्वपूर्ण आंकड़े के लिए गोल है।

निर्धारण के अंतिम परिणाम के लिए, महत्वपूर्ण अंकों की समान संख्या वाले दो समानांतर निर्धारणों का अंकगणितीय माध्य लिया जाता है।

यदि समानांतर निर्धारण के परिणामों के बीच विसंगति अधिक नहीं है |ए) - एक्स 2 \<

< 0,01яЖ, где Xi, Х 2 и X- результаты первого и второго параллельных определений и их среднеарифметическое, a d- норматив контроля сходимости, то среднеарифметическое X принимают за результат анализа. В противном случае анализ повторяют. Значение норматива контроля сходимости d приведено в таблице 1.

विश्लेषण X के परिणाम और तालिका 1 में दी गई सापेक्ष त्रुटि d के मान के आधार पर, पूर्ण त्रुटि A = 0, (SD mg/kg या %) की गणना की जाती है।

विश्लेषण का परिणाम पी = 0.95 पर (एक्स ± ए), मिलीग्राम / किग्रा या% के रूप में प्रस्तुत किया जाता है।

4.5 विश्लेषण परिणामों की सटीकता को नियंत्रित करना

विश्लेषण के परिणामों की गुणवत्ता के आंतरिक परिचालन नियंत्रण (IQA) में विश्लेषण के परिणामों के अभिसरण, प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता और सटीकता का नियंत्रण शामिल है।

4.5.1 4.4 के अनुसार विश्लेषण किए गए प्रत्येक नमूने के लिए प्रतिकृति निर्धारणों की पुनरावृत्ति की जाँच की जाती है।

4.5.2 पुनरुत्पादन के आंतरिक नियंत्रण के लिए, कार्यशील नमूनों का उपयोग किया जाता है। नमूने को दो समान भागों में विभाजित किया जाता है और विभिन्न प्रयोगशालाओं में या एक ही प्रयोगशाला में कार्यप्रणाली के अनुसार विश्लेषण किया जाता है, जितना संभव हो सके विश्लेषण की शर्तों को अलग-अलग किया जाता है, यानी वॉल्यूमेट्रिक बर्तनों के विभिन्न सेटों का उपयोग करके विश्लेषण अलग-अलग दिनों में किया जाता है या दो अलग-अलग विश्लेषकों द्वारा।

नियंत्रण विश्लेषण की पुनरुत्पादकता को संतोषजनक माना जाता है यदि \X^ - X 2 \<

< 0,01 DX, где X/, Х 2 и X- результаты анализа одной и той же пробы, полученные в разных лабораториях или при варьирующих условиях в одной лаборатории и их среднеарифметическое значение, D - значение норматива внутреннего оперативного контроля воспроизводимости. Значение норматива D приведено в таблице 1.

गोस्ट आर 51650-2000

प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता नियंत्रण की आवृत्ति हर दो सप्ताह में कम से कम एक बार होती है।

तालिका 1 - माप सीमा, सापेक्ष त्रुटि की विशेषता का मान और सापेक्ष त्रुटि (अभिसरण और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता) के यादृच्छिक घटक के परिचालन नियंत्रण के लिए मानकों का आत्मविश्वास स्तर पी = 0.95 के साथ

4.5.3 सटीकता को नियंत्रित करने के लिए, बेंजो (ए) पाइरीन के ज्ञात जोड़ के साथ काम करने वाले नमूनों का उपयोग करें। नमूने को दो बराबर भागों में बांटा गया है, जिनमें से एक का विश्लेषण प्रक्रिया के अनुसार किया जाता है; दूसरे में, बेंज़ो (ए) पाइरीन का एक ज्ञात जोड़ पेश किया जाता है और फिर प्रक्रिया के अनुसार विश्लेषण भी किया जाता है। विश्लेषण किए गए नमूने में योजक का मूल्य बेंजापायरीन की सामग्री का 50 - 150% होना चाहिए।

नियंत्रण विश्लेषण की सटीकता को संतोषजनक माना जाता है यदि \Xy-X-c\< 0,01 К, где Ху, Xи с - результаты контрольных анализов пробы с добавкой бенз(а)пирена, реальной пробы и величина добавки бенз(а)пирена, соответственно; К- норматив оперативного контроля точности. Норматив оперативного контроля точности рассчитывают по формулам: при проведении внутрилабораторного контроля (Р = 0,90)

के \u003d 0.84 वी (ए एक्स]) 2 + (ए एक्स) 2; (चार)

बाहरी नियंत्रण के दौरान (पी = 0.95)

के \u003d वी (ए ^) 2 + (ए जेड) 2, (5)

जहाँ A^ + A x द्रव्यमान सांद्रता के अनुरूप त्रुटि विशेषता के मान हैं

बेंजो (ए) योजक के साथ नमूने में और वास्तविक नमूने में पाइरीन;

अय, \u003d 0.01 Xy और A x \u003d 0.01d x X, जहां Xy और X नमूने में बेंजो (ए) पाइरीन का द्रव्यमान अंश हैं

और वास्तविक नमूने में, % या mg/kg।

सापेक्ष त्रुटि d x (8y) का मान तालिका 1 में दिया गया है।

विश्लेषण की सटीकता को महीने में कम से कम एक बार नियंत्रित किया जाता है, साथ ही अभिकर्मकों को बदलते समय या काम में लंबे ब्रेक के बाद भी।

यदि सटीकता के परिचालन नियंत्रण के मानकों को पार कर लिया जाता है, तो बार-बार विश्लेषण किया जाता है। यदि निर्दिष्ट मानकों को बार-बार पार किया जाता है, तो विश्लेषण निलंबित कर दिए जाते हैं, असंतोषजनक परिणामों के कारणों को स्पष्ट किया जाता है, और उन्हें समाप्त कर दिया जाता है।

WQA के परिणाम एक विशेष पत्रिका में दर्ज किए जाते हैं।

5 कमरे के तापमान पर उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी और स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री तकनीक

विधि का सार बेंजो (ए) पाइरीन सहित हाइड्रोकार्बन के निष्कर्षण में निहित है, पहले पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड के अल्कोहल समाधान के साथ इलाज किए गए उत्पाद से हेक्सेन के साथ, बेंजो (ए) पाइरेन युक्त पॉलीसाइक्लिक सुगंधित हाइड्रोकार्बन के एक अंश का अलगाव, और एक सेफैडेक्स कॉलम पर और एसिटिलेटेड सेल्युलोज की एक पतली परत में हस्तक्षेप करने वाली अशुद्धियों से परिणामी अंश की शुद्धि, इसके बाद कमरे के तापमान पर उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी या स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री द्वारा पृथक बेंजो (ए) पाइरीन का मात्रात्मक निर्धारण किया जाता है।

उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी की विधि और कमरे के तापमान पर स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री की विधि का उपयोग करके विश्लेषण किए गए उत्पादों में बेंजो (ए) पाइरीन के द्रव्यमान अंश के निर्धारित मूल्यों की सीमा 0.0001-0.002 मिलीग्राम / किग्रा या 0.1 x 10 -7 है। - 2.0 x 10-7%। उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी विधि का उपयोग करते समय समाधान में बेंजो (ए) पाइरीन की निर्धारित द्रव्यमान सांद्रता की इष्टतम सीमा 0.01-0.02 माइक्रोग्राम / सेमी 3 है, जब स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री विधि का उपयोग करते समय - 0.02-0.2 माइक्रोग्राम / सेमी 3।

फेसबुक

ट्विटर

संपर्क में

सहपाठियों

गूगल +