การตรวจสอบไส้กรอกชีสสำหรับเบนซาไพรีน วิธีผลิตภัณฑ์อาหารสำหรับกำหนดสัดส่วนมวลของเบนโซ (ก) ไพรีน การลงทะเบียนผลการวัด

เบนโซไพรีนอยู่ในกลุ่มโพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน - PAHs นี่คือกลุ่มของสารประกอบอินทรีย์ในโครงสร้างทางเคมีซึ่งมีวงแหวนเบนซีน - กลุ่มที่มีวงแหวนสามวงขึ้นไป คำจำกัดความทางเคมีของเบนซาไพรีน: สารอินทรีย์ที่มีคาร์บอนซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของกลุ่มโพลีไซคลิกไฮโดรคาร์บอนที่มีมวลต่อโมลาร์ 252.31 กรัมต่อโมล

เบนซาไพรีนคืออะไร

Benzopyrene เช่นเดียวกับ PAHs ส่วนใหญ่เป็นผลมาจากความก้าวหน้าทางเทคโนโลยีซึ่งเป็นผลมาจากกิจกรรมของมนุษย์ แหล่งที่มาหลักของมลพิษทางเทคโนโลยีของ PAHs คือการเผาไหม้สารอินทรีย์ที่เป็นของแข็งและของเหลว รวมถึงผลิตภัณฑ์น้ำมันและน้ำมัน ไม้ และของเสียจากมนุษย์ จากแหล่งเบนซาไพรีนตามธรรมชาตินั้นควรค่าแก่การสังเกตไฟป่าภูเขาไฟระเบิด

อย่างไรก็ตาม การก่อตัวของเบนซาไพรีนยังสามารถเกิดขึ้นได้โดยไม่ต้องใช้กระบวนการเผาไหม้ - ระหว่างไพโรไลซิส, การระอุ, การเกิดพอลิเมอไรเซชัน

Benzapyrene ถูกปล่อยออกมาในระหว่างการสูบบุหรี่: เนื้อหาของ benzapyrene ในควันบุหรี่หนึ่งมวนมีค่าเฉลี่ย 0.025 mcg ซึ่งสูงกว่า MPC หลายเท่า (เฉลี่ย 10,000-15,000 เท่า) มีการคำนวณว่าการสูบบุหรี่หนึ่งมวนนั้นเทียบเท่ากับการสูดก๊าซไอเสียเป็นเวลาสิบหกชั่วโมงในแง่ของปริมาณเบนซาไพรีน

สูตรเบนโซไพรีน

benzapyrene มีสองไอโซเมอร์ อย่างแรกคือ 1,2-benzapyrene (3,4-benzpyrene) - ที่มีอยู่ในผลิตภัณฑ์การเผาไหม้ทั้งหมด - น้ำมัน, น้ำมันดิน, ถ่านหิน, ควันจากแหล่งกำเนิดต่าง ๆ รวมถึง ในรูปแบบที่บริสุทธิ์ สิ่งเหล่านี้คือผลึกรูปเข็มหรือแผ่นสีเหลืองอ่อน โดยมีจุดหลอมเหลวประมาณ 177 ° C

4,5-Benzopyrene - ผลึกในรูปของเข็มและจานสีเหลืองอ่อนมีจุดหลอมเหลว 179 ° C มีอยู่ในน้ำมันถ่านหินที่พบในดิน (โดยเฉพาะบริเวณใกล้สถานประกอบการและทางหลวง) ไม่มีคุณสมบัติในการกลายพันธุ์หรือเป็นสารก่อมะเร็ง

สูตรทางเคมีของเบนโซไพรีนคือ C20H12

เบนโซไพรีนในดินและอากาศ

เบนโซไพรีนแทบไม่เกิดขึ้นในสภาวะอิสระ แต่จะตกตะกอนในอนุภาคที่อยู่ในอากาศเสมอ เมื่อรวมกับมวลอากาศเคลื่อนที่ เบนซาไพรีนจะกระจายไปทั่วพื้นที่ขนาดใหญ่ และตกลงมาจากอากาศพร้อมกับอนุภาคที่เป็นของแข็ง (เช่น ในระหว่างการตกตะกอน) เข้าสู่ชั้นดิน อ่างเก็บน้ำ และบนพื้นผิวของอาคาร

ในการอพยพและการสะสมของเบนซาไพรีน แหล่งที่มาของการขนส่งทางถนนก็มีบทบาทเช่นกัน ด้านหนึ่ง การเคลื่อนตัวในระยะทางไกล รถยนต์มีส่วนทำให้เบนซาไพรีนกระจายอย่างสม่ำเสมอ ในทางกลับกัน benzapyrene ที่ตกตะกอนจะสะสมในปริมาณมากตามทางหลวงและบนวัตถุที่อยู่ติดกัน (ที่เรียกว่า "แหล่งทุติยภูมิ")

เบนโซไพรีน "รวม" ได้ง่ายในวัฏจักรของสารในธรรมชาติ: ด้วยการตกตะกอนซึ่งมักจะมีอนุภาคที่เป็นของแข็ง มันถูกพาไปยังดินแดนที่ห่างไกลจากแหล่งหลักของ PAHs เข้าสู่แหล่งน้ำจากที่ซึ่งในระหว่างกระบวนการระเหยมันจะเพิ่มขึ้น อีกครั้งในอากาศ ความสามารถในการอพยพนี้ทำให้ benzapyrene นำไปสู่ความจริงที่ว่าเนื้อหาสามารถสูงได้ในสถานที่ที่ไม่มีแหล่งที่มีประสิทธิภาพของสารนี้

เมื่อเข้าไปในสิ่งแวดล้อมและสะสมอยู่ในนั้น benzapyrene แทรกซึมเข้าไปในพืชซึ่งต่อมาทำหน้าที่เป็นอาหารปศุสัตว์หรือใช้ในโภชนาการของมนุษย์ ความเข้มข้นของเบนซาไพรีนในพืชสูงกว่าปริมาณในดิน และในอาหาร (หรืออาหารสัตว์) จะสูงกว่าในวัตถุดิบสำหรับการผลิต ผลของการเพิ่มความเข้มข้นของสารเคมี รวมทั้งเบนซาไพรีน เรียกว่าการสะสมทางชีวภาพ

ดังนั้น benzapyrene จึงเป็นอันตรายไม่เพียงแต่เป็นมลภาวะต่อสิ่งแวดล้อมเท่านั้น แต่ยังเป็นสารที่แทรกซึมเข้าสู่ร่างกายผ่านห่วงโซ่อาหารด้วย

MAC ของเบนซาไพรีน

วิธีการหลักในการกำหนดและควบคุมเบนซาไพรีนคือโครมาโตกราฟีของเหลว

ตามมาตรฐานสุขอนามัย 2.1.6.695-98 และ 2.1.6.1338-03 ปริมาณเบนซาไพรีนในอากาศเฉลี่ยต่อวันสูงสุดที่อนุญาต (MPCds) คือ 0.1 ไมโครกรัม/100 ม.3 หรือ 10-9 ก./ลบ.ม. และ MPC ในดิน ตามมาตรฐานสุขอนามัย 2.1.7.2041-06 - 0.02 มก. / กก. โดยรวมโดยคำนึงถึงระดับพื้นหลัง ในอากาศในที่ทำงาน MPC กะเฉลี่ยไม่เกิน 0.00015 มก./ลบ.ม. (จากข้อ 1. และข้อ 2. GN 2.2.5. 1313-03)

MPC ของเบนซาไพรีนในน้ำไม่เกิน 0.000001 มก./ลิตร ในน้ำดื่มที่มีระบบจ่ายน้ำแบบรวมศูนย์ - ไม่เกิน 0.00005 มก./ลิตร ในน้ำดื่มบรรจุขวด - ตั้งแต่ไม่เกิน 0.001 ไมโครกรัม/ลิตร (น้ำคุณภาพสูงสุด) ถึงไม่เกิน 0.005 ไมโครกรัม/ลิตรในน้ำดื่มบรรจุขวดประเภทคุณภาพที่หนึ่ง

ในผลิตภัณฑ์อาหารที่มี benzapyrene ได้รับอนุญาตเนื่องจากคุณสมบัติทางเทคโนโลยี ระดับ benzapyrene ที่อนุญาตจะไม่เกิน 0.001 มก. / กก. เหล่านี้รวมถึง: ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์ที่ใช้ผลพลอยได้รวมทั้งรมควัน น้ำมันหมูรมควัน ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์รมควันจากเนื้อสัตว์ปีกและเครื่องใน อาหารกระป๋องรมควันและแยมปลา, ปลารมควัน; อาหารเม็ด

เมื่อใช้สารแต่งกลิ่นรสที่มีควัน เบนซาไพรีนมีปริมาณไม่เกิน 2 ไมโครกรัม/กิโลกรัม (ลิตร) และหลังจากใช้แล้ว ปริมาณเบนซาไพรีนในผลิตภัณฑ์สำเร็จรูปไม่ควรเกิน 0.03 ไมโครกรัม/กิโลกรัม (ลิตร)

ในผลิตภัณฑ์อาหารอื่นๆ ไม่อนุญาตให้มีเบนซาไพรีน

อย่างไรก็ตาม จากผลการตรวจติดตาม พบว่ามีปริมาณเบนซาไพรีนเกินมาตรฐานหลายครั้ง โดยเฉลี่ยแล้ว ระดับมลพิษทางอากาศในเมืองต่างๆ จะสูงกว่า MPC 5-12 เท่า ในดิน - 3-7 เท่า ในอาหาร - จาก 1.5 ถึง 11 เท่า

ผลของเบนซาไพรีนต่อร่างกายมนุษย์

เบนโซไพรีนจัดเป็นสารประเภทความเป็นอันตรายที่หนึ่ง ระดับความเป็นอันตรายที่หนึ่งคือสารที่มีผลกระทบต่อสิ่งแวดล้อมสูงมาก ในขณะที่การเปลี่ยนแปลงที่เกิดจากสิ่งเหล่านี้จะย้อนกลับไม่ได้และไม่สามารถกู้คืนได้

เบนโซไพรีนเป็นหนึ่งในสารก่อมะเร็งที่ทรงพลังที่สุดแต่ยังแพร่หลายอยู่ มีความเสถียรทางเคมีและทางความร้อน ซึ่งมีคุณสมบัติในการสะสมทางชีวภาพ เมื่อเข้าสู่ร่างกายและสะสมในร่างกายแล้ว มันจะทำหน้าที่อย่างต่อเนื่องและทรงพลัง นอกจากจะเป็นสารก่อมะเร็งแล้ว benzapyrene ยังมีผลต่อการกลายพันธุ์ พิษต่อตัวอ่อน และโลหิตเป็นพิษ

เส้นทางการแทรกซึมของเบนซาไพรีนเข้าสู่ร่างกายมีหลากหลาย: ด้วยอาหารและน้ำ ทางผิวหนัง และโดยการสูดดม ระดับของอันตรายไม่ว่าเบนซาไพรีนจะเข้าสู่ร่างกายอย่างไร ในการทดลอง เช่นเดียวกับการติดตามตรวจสอบพื้นที่ที่ไม่เอื้ออำนวยต่อระบบนิเวศน์ เบนซาไพรีนถูกนำเข้าสู่ดีเอ็นเอเชิงซ้อน ทำให้เกิดการกลายพันธุ์ที่ไม่สามารถย้อนกลับได้ซึ่งส่งต่อไปยังรุ่นต่อๆ ไป สิ่งที่น่ากังวลเป็นพิเศษคือข้อเท็จจริงของการสะสมทางชีวภาพของเบนซาไพรีน: โอกาสในการพัฒนาการกลายพันธุ์ในลูกหลานรุ่นต่อไปจะเพิ่มขึ้นหลายเท่าเนื่องจากการสะสมทางชีวภาพ

ต้องการเลิกสูบบุหรี่หรือไม่?

แล้วมาร่วมวิ่งมาราธอนเลิกบุหรี่กับเรา
จะทำให้การเลิกบุหรี่ง่ายขึ้นมาก

4.1.2. วิธีการวัดสัดส่วนมวลของเบนโซ(เอ)ไพรีนในวัตถุดิบอาหาร ผลิตภัณฑ์อาหารและดินโดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง

วัตถุประสงค์และขอบเขต

วิธีการนี้มีจุดมุ่งหมายเพื่อกำหนดปริมาณเบนโซ (เอ)ไพรีน (BP) ในวัตถุดิบอาหาร ผลิตภัณฑ์อาหารและดินตามสัดส่วนมวลสารที่ระบุไว้ในตาราง 1. ขีดจำกัดล่างของช่วงการวัดสอดคล้องกับ 1/2 ของระดับที่อนุญาต (เนื้อหา) ของสารพิษในผลิตภัณฑ์และวัตถุดิบ ขีดจำกัดบน - ถึงห้าเท่าของระดับที่อนุญาต

Benz (a) pyrene เป็นสารประกอบก่อมะเร็งที่เป็นพิษสูง และเนื้อหาที่อนุญาตในผลิตภัณฑ์อาหารและวัตถุดิบอาหารได้รับการกำหนดโดยกฎสุขาภิบาลและ SanPiN 2.3.2.560-96

เทคนิคนี้สามารถนำไปใช้โดยสถาบันการกำกับดูแลด้านสุขอนามัยและระบาดวิทยาของสหพันธรัฐรัสเซีย ห้องปฏิบัติการขององค์กรและองค์กรอื่น ๆ ที่เกี่ยวข้องกับการวิจัย การวิเคราะห์ทางเคมี และการรับรองผลิตภัณฑ์อาหาร วิธีการนี้ไม่ใช่การเก็งกำไร

ข้าว. 11.14.

• 1. แนฟทาลีน 9. ไครเซน (0.17*)
• 2. อะซีแนฟทีน (1.40*) 10. เบนซ์(ก)ไพรีน
• 3. ฟลูออรีน (2.60*) 11. เบนซ์(b)ฟลูออรีน (0.26*)
• 4. ฟีแนนทรีน *2.40*) 12. เบนซ์(ค)ฟลูออเรนทีน (0.10*)
• 5. แอนทราซีน (0.13*) 13. เบนซ์(เอ)ไพรีน (0.2*)
• 6. ฟลูออแรนทีน (0.74*) 14. ไดเบนซ์(a,b)แอนทราซีน
• 7. Pyrene (0.67*) 15. BeH3(g, h, i)nepHaen (0.21*)
• 8. เบนซ์(เอ)แอนทราซีน (0.07*) 16. อินดีโน(1,2,3-cc1)ไพรีน (0.26*)

เงื่อนไขการวิเคราะห์:

คอลัมน์: Supelcosil® LC RAS ​​​​(250 มม. x 2.1 มม.; 5 µm);

ไล่โทนสี: อะซิโตไนไตรล์ (A) 50-100% น้ำ (B) 50-0%; 200 µl/นาที อุณหภูมิ: 25°C ปริมาตรของตัวอย่าง: 10 µl การตรวจจับ: Sflu ตามโปรแกรม

ลักษณะของข้อผิดพลาดในการวัด

ขีดจำกัดของข้อผิดพลาดสัมพัทธ์ (±5) ของผลการวัดของเศษส่วนมวลของ BP (ด้วยระดับความเชื่อมั่นที่ 0.95) แสดงไว้ในตาราง หนึ่ง.

ตารางที่ 1.วิเคราะห์วัตถุ ช่วง และลักษณะของการวัด

กลุ่มผลิตภัณฑ์ (อ็อบเจ็กต์ที่วิเคราะห์)	เนื้อหาที่อนุญาต ( IV X),มก./กก.	ช่วงการวัดเศษส่วนมวล BP mg/kg	ค่าสัมประสิทธิ์ การสกัด	ขีดจำกัดข้อผิดพลาดสัมพัทธ์ (±8) %
เนื้อรมควัน ปลา และผลิตภัณฑ์ไขมัน

เครื่องมือวัด อุปกรณ์เสริม วัสดุและรีเอเจนต์

เครื่องมือวัด

โครมาโตกราฟีของเหลว:

• - ไมโครคอลัมน์ "Milichrome-5", TU 25-7405.0009-89, เวอร์ชัน 3 พร้อมเครื่องตรวจจับฟลูออไรเมตริก (FlD) (ตัวเลือกที่ 1)
• - โครมาโตกราฟีของเหลวแบบไอโซเครติกหรือแบบไล่ระดับ เช่น "Kpayeg" (เยอรมนี) ทะเบียนเครื่องมือวัดของสหพันธรัฐรัสเซีย 16848-97 หรือเอกสารแนบโครมาโตกราฟี "VEZHKh-3", LLP "Lumex" (เซนต์ปีเตอร์สเบิร์ก) พร้อมกับ FLD "Fluorat-02 -2M", LLP "Lumex", ทะเบียนเครื่องมือวัดของสหพันธรัฐรัสเซีย 14093-99 (ตัวเลือก 2)
• - โครมาโตกราฟีของเหลวแบบไอโซเครติกหรือแบบไล่ระดับพร้อม PLD ทุกประเภท เช่น "Kpaerg" (เยอรมนี) ทะเบียนเครื่องมือวัดแห่งสหพันธรัฐรัสเซีย 16848-97 (ตัวเลือกที่ 3)

คอลัมน์โครมาโตกราฟี "Diasfer-110-S 16", TU 4215-001-05451931-94, CJSC "BioKhimMak ST" (มอสโก) ด้วยขนาดมาตรฐานที่สอดคล้องกับตัวแปรของระบบโครมาโตกราฟี:

• - 2 x 80 มม. dp = 5 - 7 µm (ตัวเลือกที่ 1)
• - 2 x 150 มม. dp = 5 - 7 µm (ตัวเลือกที่ 2)
• - 4 x 150 มม. dp = 5 - 7 µm (ตัวเลือกที่ 3)

ฮาร์ดแวร์และซอฟต์แวร์ที่ซับซ้อน "MultiChrom-Spectrum", TU AZHRC

3.036.001, CJSC Ampersend (มอสโก) หรือซอฟต์แวร์อื่นใดที่อนุญาตให้สอบเทียบและกำหนดเชิงปริมาณโดยวิธีมาตรฐานภายนอก

GSO 7515-98 ขององค์ประกอบของสารละลาย benzo(a)pyrene ใน acetonitrile ที่มีความเข้มข้นของมวลของ benzo(a)pyrene 100 μg/cm 3, AOZT "Ekros" (เซนต์ปีเตอร์สเบิร์ก)

GSO 7064-93 องค์ประกอบของสารละลายเบนโซ(a)ไพรีนในเฮกเซนที่มีความเข้มข้นมวลของเบนโซ(a)ไพรีน 100 ไมโครกรัม/ซม. 3 , AOZT "Ekros" (เซนต์ปีเตอร์สเบิร์ก)

เครื่องชั่งห้องปฏิบัติการอิเล็กทรอนิกส์ 4 เซลล์ ความแม่นยำรุ่น VLE 134, GOST 24104-88 หรืออื่นๆ

ไมโครไซริงก์ขนาด 100 ไมโครลิตรจากแฮมิลตัน รุ่นไมโครลิตร #1710 หรือเทียบเท่า

ไมโครปิเปต 0.5; 0.2; 0.1 ไมโครลิตร; GOST 20292-74

กระบอกสูบมิติ 2-25.2-50, 2-100 และ 2-500, GOST 1770-74

ขวดปริมาตร 2-10-2, 2-100-2, GOST 1770-74

ปิเปตไล่ระดับ 1, 2, 5, 10 ซม. 3 , GOST 29227-91

รีเอเจนต์และวัสดุ

อะซีโตไนไตรล์สำหรับโครมาโตกราฟีของเหลว OP-3 ความบริสุทธิ์สูง TU 6-09-14-2167-84 แก้ไขแล้ว

น้ำกลั่น TU 6-09-2502-77

เฮกเซน, บริสุทธิ์ทางเคมี, TU 6-09-3375-78, ทำให้แห้งเหนือNa 2 ส 04 , แก้ไขแล้ว.

เบนซิน, เคมีบริสุทธิ์, GOST 5955-75, ทำให้แห้งเหนือNa 2 ส 04 , แก้ไขแล้ว.

แอนไฮดรัสโซเดียมซัลเฟต บริสุทธิ์ทางเคมี GOST 4166-76

ตลับเข้มข้น "Diapak": A-3, P-3, C; TU 4215-002-05451931-94, ZAO BioKhimMak ST (มอสโก).

อุปกรณ์เสริม

ระบบกรองและขจัดแก๊สของสารชะ CJSC "BioKhimMak ST" (มอสโก) หรืออื่นๆ

ขวดแก้วขนาด 1.8 และ 5.0 ซม. 3 หลอดสำหรับโซลูชันการสอบเทียบและการวิเคราะห์พร้อมฝาเกลียวและปะเก็นเทฟลอนจาก Supelco หมายเลขแค็ตตาล็อก 2-6951, 2-7037 และ

2-7039 หรือเทียบเท่า

ไมโครมิกเซอร์ PPE-3, "Ekros" (เซนต์ปีเตอร์สเบิร์ก)

เครื่องระเหยแบบหมุน IR-1M2, TU 25-1173.102-84 หรืออื่นๆ

ขวดก้นแหลมพร้อมจุกที่มีความจุ 25, 10 และ 5 ซม. 3, GOST 25336

อุปกรณ์สำหรับเป่าสารละลายในกระแสไนโตรเจน ซึ่งติดตั้งบล็อกอะลูมิเนียมควบคุมด้วยอุณหภูมิ (อ่างอากาศแห้ง) ของกิจการร่วมค้า BioMark (Lvov) หรืออื่นๆ

ตัวกรองเมมเบรนที่มี dp = 0.4-0.5 µm

อุปกรณ์สำหรับสร้างสุญญากาศประมาณ 7 มม. ปรอท ศิลปะ. (ปั๊มฉีดน้ำ GOST 25336; ปั๊มสุญญากาศวงแหวนน้ำ Begemot, UVK-RK2/1, CJSC BioKhimMak ST, มอสโก)

อุปกรณ์เตรียมตัวอย่างสุญญากาศ (ท่อร่วมสูญญากาศ) หรืออื่นๆ ที่มีตัวรับตัวอย่างที่มีความจุอย่างน้อย 10 ซม. 3

กระติกน้ำ Buechner กรวย Bunsen ที่มีความจุอย่างน้อย 500 และ 200 ซม. 3 ตามลำดับ GOST 1770

กรวยแยกที่มีความจุ 100 และ 500 ซม. 3, GOST 25336

ขวดรูปกรวยก้นแบนพร้อมจุกที่มีความจุ 50, 100 และ 250 ซม. 3, GOST 25336

ขวดรูปลูกแพร์พร้อมจุกที่มีความจุ 50 และ 100 ซม. 3, GOST 25336

กรวยกรวยที่มีเส้นผ่านศูนย์กลางอย่างน้อย 10 ซม. GOST 1770

กระดาษกรองประเภท "เทปสีน้ำเงิน"

สำลีทางการแพทย์ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อ, สำลี.

วิธีการวัด

เทคนิคประกอบด้วยขั้นตอนหลักดังต่อไปนี้:

• - การสกัดเบื้องต้นด้วยเฮกเซนและการสกัดซ้ำเป็นอะซิโตไนไทรล์ BP จากตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่รมควัน
• - การสกัด BP เบื้องต้นที่มีส่วนผสมของน้ำอะซิโตไนไทรล์จากตัวอย่างเมล็ดพืชหรือดิน
• - ความเข้มข้นและการทำให้บริสุทธิ์ของสารสกัดหลักโดยการสกัดแบบโซลิดเฟส
• - การเจือจางของสารสกัดตัวอย่างที่เตรียมไว้ด้วยส่วนผสมของน้ำอะซิโตไนไทรล์
• - การสอบเทียบโครมาโตกราฟีตามสารละลายด้วยค่าที่ทราบของความเข้มข้นมวลของ BP
• - การวิเคราะห์สารละลายของสารสกัดตัวอย่างที่เตรียมไว้โดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC) พร้อมการลงทะเบียนสัญญาณเรืองแสง
• - การระบุ BP ที่กำหนดโดยพารามิเตอร์การเก็บรักษา
• - การคำนวณความเข้มข้นของมวล BP ตามสัญญาณการวิเคราะห์ที่ลงทะเบียนและลักษณะการสอบเทียบ
• - การคำนวณเศษส่วนมวลของ BP ตามความเข้มข้นของมวล BP มวลของตัวอย่างอาหารและปริมาตรของสารละลายของสารสกัดที่เตรียมไว้

ข้อกำหนดด้านความปลอดภัย

เมื่อทำงานกับสารเคมีที่ใช้จำเป็นต้องปฏิบัติตามข้อกำหนดด้านความปลอดภัยที่กำหนดไว้สำหรับการทำงานกับสารพิษ สารกัดกร่อนและสารไวไฟ GOST 12.1.018-86 และ GOST 12.1.004-76 ข้อกำหนดด้านความปลอดภัยจากอัคคีภัย GOST 12.1.004 -76.

หากสารละลาย BP โดนผิวหนัง" หรือพื้นผิวของวัตถุ จะต้องบำบัดด้วยน้ำและผงซักฟอก ตามด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ สารละลายควรเก็บไว้ในตู้เย็นในบรรจุภัณฑ์ที่ปิดสนิท

เมื่อใช้งานระบบสำหรับ HPLC และดำเนินการวัดที่เกี่ยวข้อง จำเป็นต้องปฏิบัติตามกฎความปลอดภัยทางไฟฟ้า GOST

12.1.019-79 และคู่มือการใช้งานสำหรับอุปกรณ์

ข้อกำหนดคุณสมบัติผู้ปฏิบัติงาน

บุคคลที่ได้รับอนุญาตให้ทำงาน:

• - มีคุณสมบัติเป็นวิศวกรเคมีหรือช่างเทคนิคเคมี
• - มีประสบการณ์ในห้องปฏิบัติการเคมี
• - ผู้ที่สำเร็จหลักสูตรการฝึกอบรมที่เกี่ยวข้องและการฝึกงานในห้องปฏิบัติการที่ได้รับการรับรองให้ทำการวิเคราะห์โดยใช้ HPLC
• - ได้รับผลบวกระหว่างการปฏิบัติงานของการควบคุม

เงื่อนไขการวัด

การเตรียมตัวอย่าง การเตรียมสารละลาย การเตรียมและประสิทธิภาพของการวัดจะดำเนินการที่อุณหภูมิแวดล้อม 18-25 ° C ความดันบรรยากาศ 84.0-100.7 kPa (630-800 mm Hg) ความชื้นในอากาศไม่เกิน 80% ( ที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส)

เมื่อทำการวัดในห้องปฏิบัติการ ต้องเป็นไปตามเงื่อนไขต่อไปนี้: แรงดันไฟหลัก 220 ± 10 V, ความถี่หลัก 50zh 1 Hz การวัดจะดำเนินการภายใต้สภาวะที่แนะนำโดยคำอธิบายและคู่มือการใช้งานของอุปกรณ์

เตรียมเข้าวัด

เครื่องแก้ว

ก่อนใช้งานต่อไป ให้ล้างเครื่องแก้วที่ใช้แล้วด้วยตัวทำละลายสุดท้ายที่ใช้ และล้างด้วยน้ำร้อนอย่างทั่วถึงด้วยผงซักผ้าใดๆ ก็ตาม ล้างตามลำดับด้วยน้ำกลั่นและน้ำกลั่นแล้วเช็ดให้แห้ง เก็บจานสะอาดโดยการปิดด้วยไม้ก๊อกหรือสำลีก้าน

การสุ่มตัวอย่าง การจัดเก็บ และการจัดการ

การสุ่มตัวอย่างและการหาค่าเฉลี่ยจะดำเนินการตามเอกสารข้อบังคับสำหรับผลิตภัณฑ์แต่ละประเภท (GOST 13586.3-83, GOST 27668-88, GOST 9792-73, GOST 7631-85) ค่า BP ที่กำหนดจะถูกสกัดจากตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่รมควันโดยการสกัดด้วยเฮกเซนแบบแห้ง เมื่อสกัด BP จากตัวอย่างเมล็ดพืชหรือดิน จะใช้ส่วนผสมของน้ำ-อะซิโตไนไตรล์ (16:84) ความเข้มข้นที่ตามมาและการทำให้บริสุทธิ์ของสารสกัดตัวอย่างหลักที่มี BP โดยไม่คำนึงถึงลักษณะของผลิตภัณฑ์เริ่มต้น จะดำเนินการตามรูปแบบที่ซับซ้อนของการสกัดแบบโซลิดเฟสโดยใช้ตลับความเข้มข้นสามตลับ Diapak A-3, P-3, S .

ตัวอย่างที่เตรียมไว้ (สารสกัดจากตัวอย่าง) จะละลายในส่วนผสมของน้ำอะซิโตไนไทรล์ (70:30)

การวัดเศษส่วนมวลของ BP แต่ละครั้งรวมถึงการเตรียมการและการวิเคราะห์ด้วยโครมาโตกราฟีของตัวอย่างอย่างน้อยสองตัวอย่าง

การเตรียมของผสมตัวทำละลาย

สารผสมของตัวทำละลายเตรียมโดยวิธีปริมาตรในกระบอกสูบที่สำเร็จการศึกษา ปริมาตรที่ต้องการของอะซิโตไนไทรล์และน้ำจะถูกวัดด้วยกระบอกสูบแยกระดับแล้วผสม Extractant A: acetonitrile-water (84:16).

การเตรียมสารสกัด

ในการเตรียม acetonitrile และ hexane ที่อิ่มตัวร่วมกัน ให้เขย่า acetonitrile ประมาณ 300 ซม. 3 และเฮกเซน 100 ซม. 3 ในกรวยแยกความจุ 500 ซม. 3 หลังจากแยกตัวทำละลายแล้ว ชั้นจะถูกแยกออกจากกัน: ชั้นล่าง (อะซิโตไนไตรล์อิ่มตัวด้วยเฮกเซน - สารสกัด B) และชั้นบน (เฮกเซนอิ่มตัวด้วยอะซิโตไนไตรล์ - สารสกัด C) เฟสจะถูกทิ้ง

การเตรียมสารชะ

สำหรับการวัด HPLC ของผสมอะซิโตไนไตรล์กับน้ำถูกเตรียมในอัตราส่วนต่อไปนี้: (90:10) - ตัวชะ 90, (84:16) - ตัวชะ 84, (80:20) - ตัวชะ 80, (70:30) - ตัวชะ 70 . สารชะสำเร็จรูปจะถูกกรองผ่านตัวกรองเมมเบรนและดำเนินการสุญญากาศหรือระบายความร้อน

การเตรียมสารละลายสอบเทียบ

GSO ขององค์ประกอบของสารละลาย BP ใน acetonitrile (ดูด้านบน) ถูกเจือจางด้วยส่วนผสมของ acetonitrile-water (7:3) ก่อนใช้งาน ปิเปตถ่ายแล้ว

สารละลายสต็อก 1.0 ซม. 3 วางในขวดปริมาตรที่มีความจุ 100 ซม. 3 และเติมตัวทำละลายลงในเครื่องหมาย ถัดไป ปริมาตรของสารละลายที่เป็นผลลัพธ์จำนวนหนึ่งจะถูกถ่ายด้วยปิเปต วางในขวดปริมาตรที่มีความจุ 10 ซม. 3 และเติมตัวทำละลายลงในเครื่องหมาย ปริมาตรของสารละลายที่ใช้สำหรับการเจือจางและความเข้มข้นของสารละลายสอบเทียบ 2-5 (ตัวเลือกที่ 1) และ 3-7 (ตัวเลือกที่ 2, 3) จะแสดงในตาราง 2. เมื่อใช้ GSO ขององค์ประกอบของสารละลาย BP ในเฮกเซน (ดูด้านล่าง) หลังจากการระเหยตัวทำละลายภายใต้สภาวะด้านล่าง สารตกค้างที่แห้งจะถูกละลายซ้ำในอะซิโตไนไทรล์และเจือจางตามที่อธิบายไว้ข้างต้น โดยคำนึงถึงมูลค่าของใบรับรอง ความเข้มข้นของ GSO

ตารางที่ 2โซลูชันสำหรับการสอบเทียบในการวิเคราะห์เบนโซไพรีน (BP)

ความเข้มข้นมวลของ BP (ค่ารับรองของ GSO), mcg/cm3	สารละลายเจือจางเบื้องต้น		การสอบเทียบ
				ความเข้มข้นมวลของ BP, µg/cm3

*ไม่ใช้สำหรับการสอบเทียบโดยตรงของระบบโครมาโตกราฟี

การเตรียมระบบโครมาโตกราฟี

โครมาโตกราฟีเปิดใช้งานและเตรียมพร้อมสำหรับการทำงานตามคำอธิบายและคู่มือการใช้งาน ติดตั้งคอลัมน์ "Diasfer-110-C 16" ด้วยขนาดมาตรฐานตามตัวเลือกโครมาโตกราฟี (ดูด้านบน) สารชะที่มีความเข้มข้นสูงสุดของอะซีโตไนไตรล์ถูกสูบผ่านระบบโครมาโตกราฟีจนกว่าเส้นฐานของเครื่องตรวจจับจะเสถียร จากนั้นจึงปรับสภาพภายใต้สภาวะเริ่มต้นของการไล่ระดับสีตามส่วนที่เกี่ยวข้องของ "เงื่อนไขการวิเคราะห์"

การเตรียมตลับเข้มข้น

ตลับเข้มข้น Diapak A-3 และ P-3 เตรียมไว้สำหรับการทำงานดังนี้:

• 1. เทตัวดูดซับแห้ง Diapak A หรือ P ขนาด 3 ซม. ลงในตัวเรือนโพลีโพรพีลีน 3 ขนาด 10 ซม. พร้อมตัวกรองแบบเปลี่ยนได้ที่ส่วนล่าง ส่วนที่ว่างด้านบนของตัวเรือนใช้เป็นกรวยสำหรับใส่ตัวอย่างหรือสารชะ
• 2. หนีบตลับในแนวตั้งในอุปกรณ์สูญญากาศที่เหมาะสมแล้วแตะเพื่อสร้างชั้นดูดซับในแนวนอนที่เรียบ สำหรับการเตรียมตลับ Diapak A-3 ขั้นสุดท้าย ก็เพียงพอที่จะแก้ไขชั้นตัวดูดซับด้วยสำลีก้อนเล็กๆ
• 3. ในการเตรียมคาร์ทริดจ์ Diapak P-3 ตัวดูดซับจะถูกล้างอย่างต่อเนื่องด้วยน้ำมันเบนซิน อะซิโตน 10 ซม. 3 และ สารสกัดAที่สุญญากาศต่ำ (อัตราการหยดไม่เกิน 1-2 หยดต่อวินาที) ป้องกันไม่ให้อากาศเข้าสู่ตัวดูดซับ หลังจากเติมอะซิโตนลงในคาร์ทริดจ์แล้ว ตัวดูดซับจะได้รับอนุญาตให้จับตัวได้ แนะนำตัวกรองพอลิเมอร์ด้านบน มันถูกบีบอัดเหนือชั้นบนของตัวดูดซับ และการล้างจะดำเนินต่อไป พอไปถึง สารสกัดAระดับเหนือตัวกรอง 2-3 ซม. หยุดการซักและตลับหมึกปิดผนึกด้วยปลั๊กด้านล่างและฝาปิดด้านบน (สำหรับจัดเก็บ) ในกรณีที่แห้งโดยไม่ได้ตั้งใจ ตลับจะถูกล้าง สารสกัด A.ก่อนที่จะใช้ตัวอย่าง ปลั๊กจะถูกลบออกและด้วยสุญญากาศที่อ่อนแอ ส่วนที่เหลือของส่วนผสมระหว่างน้ำกับอะซิโตไนไตรล์จะถูกส่งไปยังระดับของตัวกรองด้านบน จากนั้นจึงเทสารละลายทดสอบลงในทันที การสร้างคาร์ทริดจ์แบบใช้ซ้ำได้ Diapak P-3 ดำเนินการตามรูปแบบที่คล้ายกัน ไม่รวมการถอดตัวกรองด้านบน

ตลับเข้มข้น Diapak C เตรียมไว้สำหรับการทำงานดังนี้:

• 1. แคปซูลโพลีโพรพิลีนสำเร็จรูปพร้อมตัวดูดซับ Diapak S ขนาด 1 ซม. 3 ปิดผนึกด้วยปลั๊ก หลังจากถอดปลั๊กแล้ว คาร์ทริดจ์พร้อมสำหรับการทำงานโดยส่งเฮกเซน 5 ซม. 3 ผ่านเข้าไปในนั้นด้วยหลอดฉีดยาในอัตราหยด 1-2 หยดต่อวินาที
• 2. ตัวอย่างถูกนำไปใช้โดยแรงโน้มถ่วง โดยใช้ตัวโพลีโพรพิลีนเปล่าที่มีปริมาตร 10 ซม. 3 เป็นกรวย โดยยึดแน่นกับส่วนบนของแคปซูล Diapak C

การเตรียมตัวอย่างสำหรับการวัด

การสกัดสารเฮกเซนของเบนโซ(เอ)ไพรีนจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์รมควันตัวอย่างผลิตภัณฑ์รมควัน 10.0 กรัมบดในครกที่มีโซเดียมซัลเฟต 30 กรัม ส่วนผสมจะถูกถ่ายโอนในเชิงปริมาณไปยังขวดก้นแบนขนาด 100 ซม. 3 และสกัดด้วยเฮกเซน 40 ซม. 3 เป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาทีด้วยการกวน สารสกัดเฮกเซนหลักของไขมันทั้งหมดของตัวอย่างจะถูกแยกออกและผ่านโซเดียมซัลเฟต 10 กรัมลงในขวดปอก ทำซ้ำขั้นตอนการสกัดสองครั้งด้วยเฮกเซน 20 ซม. 3 สองปริมาตร และส่งส่วนของสารสกัดผ่านสารดูดความชื้นลงในขวดกลั่นเดียวกัน ระเหยเฮกเซนบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิไม่เกิน 35 ° C จนกว่ากลิ่นจะหายไป

สารสกัดไขมันทั้งหมดละลายใน 20 ซม. 3 สารสกัด B,ถ่ายโอนในเชิงปริมาณลงในกระบอกสูบที่มีความจุ 50 ซม. 3 และนำปริมาตรของสารละลายไปที่ 40.0 ซม. 3 ด้วยตัวทำละลายเดียวกัน

20.0 ซม. 3 ของสารละลายที่ได้จะถูกถ่ายโอนไปยังกรวยแยกที่มีความจุ 100 ซม. 3 และ BP จะถูกแยกออกมาอีกครั้งเป็นอะซิโตไนไทรล์ด้วยปริมาตร 20 ซม. 3 ปริมาตร สารสกัด B.แต่ละครั้งที่แยกเฟสได้อย่างสมบูรณ์ที่สุด ชั้นล่างจะถูกถ่าย (สารสกัดอะซิโตไนไตรล์ของ BP) และระเหยบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิไม่เกิน 50 °Cได้ถึงปริมาตร 10-15 ซม. 3 ในเชิงปริมาณ (โดยใช้อะซิโตไนไทรล์) ถ่ายสารละลายลงในกระบอกวัดที่มีความจุ 25 ซม. 3 นำปริมาตรเป็น 21.0 ซม. 3 ด้วยอะซิโตไนไทรล์ เติมน้ำกลั่น 4.0 ซม. 3 แล้วผสมให้ละเอียดผลลัพธ์ที่ได้ สารสกัดจากน้ำ-acetonitrile ของ BP

การสกัดเบนโซ(เอ)ไพรีนจากตัวอย่างเมล็ดพืชหรือดินที่มีส่วนผสมของน้ำอะซิโตไนไทรล์

ตัวอย่าง 10-25 กรัมจะถูกถ่ายโอนไปยังขวดก้นแบนโดยเติม 50-125 ซม. 3 สารสกัด A,สังเกตอัตราส่วน 1:5 ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ต่อปริมาตรของสารสกัดอย่างเคร่งครัดและกวนเป็นเวลา 1 ชั่วโมง กรองแล้ว สารสกัดจากน้ำ-acetonitrile ของ BPผ่านกระดาษกรองบนกรวย Buchner ภายใต้สุญญากาศและบีบตะกอนบนตัวกรองออก

การทำให้บริสุทธิ์และความเข้มข้นของสารสกัดหลักจากเมล็ดพืชหรือผลิตภัณฑ์ที่รมควัน

ผ่านตลับ Diapak A-3 25.0 cm 3 แล้ว 3 ซม. 3 สารสกัดAในอัตราหยด 2-3 หยดต่อวินาทีลงในขวดรับ

สารชะที่เก็บรวบรวมจะถูกส่งผ่านคาร์ทริดจ์ Diapak P-3 ที่เตรียมไว้ แล้วตามด้วยอะซิโตไนไทรล์ 5 ซม. 3 ที่อัตราการหยด 1-2 หยดต่อวินาที โดยทิ้งการชะล้าง เศษส่วนของเป้าหมายที่มี BP ถูกชะออกจากคาร์ทริดจ์ที่มีส่วนผสมของเบนซีน-อะซีโตไนไตรล์ (1:1) ในปริมาตร 7 ซม. 3 ที่อัตราการหยด 1-2 หยดต่อวินาทีลงในขวดกลั่น สารชะจะถูกระเหยบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิไม่เกิน 50 °C เติมเฮกเซน 0.5 ซม. 3 ลงในขวดและเขย่าให้ทั่วด้วยไมโครมิกเซอร์จนสารตกค้างที่แห้งละลายหมด

การทำให้บริสุทธิ์เบื้องต้นและความเข้มข้นของสารสกัดจากดินเบื้องต้น

ผ่านตลับ Diapak A-3 5.0 cm 3 น้ำ-acetonitrile สารสกัดจาก BP,แล้ว 3 ซม. 3 สารสกัดAในอัตราหยด 2-3 หยดต่อวินาทีลงในขวดรับ ย้ายสารชะไปยังกระบอกสูบแบบไล่ระดับความจุ 25 ซม. 3 ล้างขวดด้วยปริมาตร 5 ซม. 3 สองปริมาตร สารสกัดAและนำปริมาตรของสารละลายในกระบอกสูบมาที่ 20 ซม. 3 .

สารชะเจือจาง 5.0 ซม. 3 จะถูกส่งผ่านคาร์ทริดจ์ Diapak P-3 ที่เตรียมไว้ และจากนั้นอะซิโตไนไทรล์ 5 ซม. 3 ที่อัตราการหยด 1-2 หยดต่อวินาที โดยทิ้งการชะล้าง เศษส่วนของเป้าหมายที่มี BP ถูกชะออกจากคาร์ทริดจ์ที่มีส่วนผสมของเบนซีน-อะซีโตไนไตรล์ (1:1) ในปริมาตร 7 ซม. 3 ที่อัตราการหยด 1-2 หยดต่อวินาทีลงในขวดกลั่น สารชะจะถูกระเหยบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิไม่เกิน 50 °C เติมเฮกเซน 0.5 ซม. 3 ลงในขวดและเขย่าให้ทั่วด้วยไมโครมิกเซอร์จนสารตกค้างที่แห้งละลายหมด

การทำให้บริสุทธิ์ของสารสกัด

สารละลายตัวอย่าง 0.5 ซม. 3 ในเฮกเซนถูกนำไปใช้กับคาร์ทริดจ์ Diapak C ที่เตรียมไว้ด้วยแรงโน้มถ่วง จากนั้นล้างขวดด้วยเฮกเซน 0.5 ซม. 3 สองส่วน และนำไปใช้กับคาร์ทริดจ์ตามลำดับ โดยทิ้งการล้างทั้งหมด BP ถูกชะด้วยเบนซินในปริมาตร 2.0 ซม. 3 ในอัตรา 1-2 หยดต่อวินาทีลงในขวดปอกและระเหยบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิไม่เกิน 50 °C ละลายสารตกค้างแบบแห้งของสารสกัดของตัวอย่าง BP ในส่วนผสมของอะซีโตไนไตรล์-น้ำ (7:3) ซึ่งระบุปริมาตรในส่วน "สภาวะการวัด" สำหรับแต่ละตัวแปรของระบบโครมาโตกราฟี (ดูด้านล่าง)

การสำเร็จการศึกษาและการวัดผล

การสอบเทียบโครมาโตกราฟี

โครมาโตกราฟีได้รับการสอบเทียบโดยอินพุตที่ต่อเนื่องกัน (ภายใต้เงื่อนไขของการวัด BP) ของปริมาตรที่ระบุของโซลูชันการสอบเทียบ (ตารางที่ 2) โดยเรียงลำดับจากน้อยไปหามากของความเข้มข้นของมวล สารละลายแต่ละชนิดถูกฉีดเข้าไปในโครมาโตกราฟีอย่างน้อยสองครั้ง ด้วยการตั้งค่าที่ถูกต้องของระบบโครมาโตกราฟี ความสูงของพีคบนโครมาโตแกรมของสารละลายสอบเทียบที่มีความเข้มข้นต่ำสุดควรเกินระดับสัญญาณรบกวนพื้นฐานอย่างน้อย 10 เท่า

หลังจากประมวลผลทางคณิตศาสตร์ของโครมาโตแกรม พารามิเตอร์การคงอยู่และพื้นที่พีคจะคงที่และสร้างลักษณะการสอบเทียบ (GC) ขึ้น ซึ่งสะท้อนการพึ่งพาค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีคต่อความเข้มข้นมวลของ BP ในสารละลายสอบเทียบ

ควบคุมความถูกต้องของการสร้างลักษณะการสอบเทียบ

คุณลักษณะการสอบเทียบจะถูกสร้างขึ้นใหม่เมื่อเปลี่ยนคอลัมน์ หลังจากดำเนินการบำรุงรักษาและบำรุงรักษาเชิงป้องกัน โดยมีผลลบจากการตรวจสอบความเสถียรของ GC (ดูด้านล่าง)

การหาปริมาณเบนโซ(เอ)ไพรีน

เงื่อนไขการวัด (ตัวเลือกที่ 1)

สำหรับการวิเคราะห์ สารสกัดที่เตรียมไว้ของตัวอย่าง BP จะถูกละลายใน 0.1 ซม. 3 ของส่วนผสมอะซิโตไนไทรล์กับน้ำ

โหมดการทำงานของ FMD และ UVPA ตั้งค่าจากแป้นพิมพ์คอมพิวเตอร์ตามคู่มือผู้ใช้ (HSS "MultiChrome-Spectrum") และควบคุมบนจอภาพในรูปแบบต่อไปนี้:

เครื่องตรวจจับฟลูออโรเมตริก

• ความยาวคลื่นกระตุ้น 296 นาโนเมตร;
• ความยาวคลื่นปล่อย - ตัวกรองแสงหมายเลข 2 (มากกว่า 380 นาโนเมตร);
• เวลาในการวัด 0.2 วินาที

เครื่องจ่ายอัตโนมัติ

• ปริมาณการงอกใหม่ 0.4 ซม. 3 ;
• ปริมาณตัวอย่าง 0.04 ซม. 3 ;
• อัตราการไหล 0.15 ซม. 3 /นาที;
• ความเร็วในการรับสมัคร 0.3 ซม. 3 /นาที;
• เวลาเก็บ BP 11 นาที
• องค์ประกอบของสารชะในภาชนะและรูปแบบการรวบรวมความลาดชันของ acetonitrile แสดงไว้ในตาราง 3.

ตารางที่ 3สารชะ

เงื่อนไขการวัด (ตัวเลือก 2)

สำหรับการวิเคราะห์ สารสกัดตัวอย่าง BP ที่เตรียมไว้ (ดูด้านบน) ถูกละลายใน 0.5 ซม. 3 ของส่วนผสมอะซิโตไนไทรล์กับน้ำ

• กรองบนเส้นกระตุ้น - "X4";
• กรองบนสายการปล่อย - "KhZ";
• ปริมาณตัวอย่าง 0.02 ซม. 3 ;
• ความไวเป็นค่าเฉลี่ย
• การปรับให้เรียบ - 4;
• ระดับ "พื้นหลัง" จะถูกเลือกตามผลการลงทะเบียนของโครมาโตแกรมทดสอบของโซลูชันการสอบเทียบหมายเลข 3

• อัตราการไหล 0.2 ซม. 3 /นาที;
• สารชะ 84;
• เวลาเก็บ BP ประมาณ 12 นาที

โหมดแยกการไล่ระดับสี:

• อัตราการไหล 0.25 ซม. 3 /นาที;
• สารชะ 100 ในตัวชะ70ใน 20 นาที;

เงื่อนไขการวัด (ตัวเลือกที่ 3)

สำหรับการวิเคราะห์ สารสกัดที่เตรียมไว้ของตัวอย่าง BP จะถูกละลายใน 0.5 ซม. 3 ของส่วนผสมอะซิโตไนไทรล์กับน้ำ

• ความยาวคลื่นกระตุ้น 375 นาโนเมตร;
• ความยาวคลื่นการปล่อย 405 นาโนเมตร;
• อัตราการไหล 0.8 ซม. 3 /นาที;
• ปริมาณตัวอย่าง 0.02 ซม. 3 ;
• เวลาคงที่ 1.0 วินาที

โหมดการแยกไอโซเครต:

• สารชะ 84;
• เวลาเก็บรักษา BP ประมาณ 12 นาที;

โหมดแยกการไล่ระดับสี:

• การไล่ระดับสีเชิงเส้นจาก 30 เป็น 70% สารชะ 100 ในตัวชะ70ใน 20 นาที;
• เวลาเก็บรักษา BP ประมาณ 14 นาที

การได้มาและการประมวลผลโครมาโตแกรม

นำสารละลายตัวอย่างไปใส่ในโครมาโตกราฟีสองครั้ง การระบุ BP ดำเนินการบนพื้นฐานของการเปรียบเทียบพารามิเตอร์การคงอยู่สูงสุดในโครมาโตแกรมของสารสกัดตัวอย่างและสารละลายสอบเทียบ พารามิเตอร์การเก็บรักษาโดยประมาณระบุไว้ในส่วน "เงื่อนไขการวัด" การระบุสารประกอบที่วิเคราะห์ได้อย่างน่าเชื่อถือสอดคล้องกับความแตกต่างระหว่างค่าพารามิเตอร์การกักเก็บสำหรับสารละลายสอบเทียบและตัวอย่าง ซึ่งไม่เกิน 0.2 นาที

การเจือจางสารละลายสารสกัด

ดำเนินการในกรณีที่ความเข้มข้นของมวลของ BP ที่กำหนดเกินความเข้มข้นสูงสุดของมวลในสารละลายสำหรับการสอบเทียบ สารละลายสารสกัดถูกเจือจางสองครั้ง (อัตราส่วนการเจือจาง, dil = 2) โดยนำสารละลายนี้ในปริมาณที่เท่ากันและส่วนผสมของอะซิโตไนไทรล์-น้ำ (70:30) และผสมส่วนหลัง ในกรณีที่การเจือจางเพียงครั้งเดียวไม่ได้ขจัด "นอกสเกล" ให้ทำซ้ำขั้นตอน (ระดับของการเจือจาง dil = 4)

การประมวลผลผลการวัด

คำนวณค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีค (สัญญาณเอาท์พุตโครมาโตกราฟี) สำหรับการฉีดสารละลายตัวอย่างเข้าไปในโครมาโตกราฟีสองครั้ง ควบคุมการบรรจบกันของสัญญาณเอาท์พุต (ดูด้านล่าง)

จากการพึ่งพาการสอบเทียบ จะพบค่าความเข้มข้นมวลของ BP ในสารละลาย ซึ่งสอดคล้องกับค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีค

เศษส่วนมวลของ BP (I^), มก./กก. ในตัวอย่างที่ i (ผลลัพธ์ของการกำหนด) คำนวณโดยสูตร

โดยที่ Cbp คือความเข้มข้นของมวลของสารที่วิเคราะห์ในสารละลายของการแยกตัวอย่างที่ i ของ BP, μg/cm 3 (คำนวณจากการพึ่งพาการสอบเทียบ ตามค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีค) Vp- ปริมาตรของสารละลายสารสกัดของตัวอย่าง /-th ของ BP, cm 3; R- ระดับการสกัด BP ในขั้นตอนการเตรียมตัวอย่างตามตาราง 2; เอ็มเท่ากับ- มวลของส่วนของตัวอย่างที่สอดคล้องกับสัดส่วนของสารสกัดน้ำ-อะซิโตไนไตรล์ของ BP ที่ใช้สำหรับการทำให้บริสุทธิ์และการกำหนดด้วยโครมาโตกราฟีที่ตามมา - มวลที่เท่ากันของตัวอย่างคือ 5.0 กรัม (เมล็ดพืช ผลิตภัณฑ์รมควัน) หรือ 0.25 กรัม (ดิน)

ในกรณีของการเจือจางสารสกัด (ดูด้านบน) เศษส่วนมวลของ BP ( ว,-,มก./กก.) ในมิติ / - คำนวณโดยสูตร

ที่ไหน wj- ค่าที่ได้จากสูตร (II. 1), dil - ระดับการเจือจาง (ดูด้านบน)

คำนวณค่าเฉลี่ยของเศษส่วนมวลของ BP สำหรับสองตัวอย่าง (ผลการวิเคราะห์):

ควบคุมการบรรจบกันของผลลัพธ์การกำหนดสัดส่วนมวลของ BP (ดูด้านล่าง)

การลงทะเบียนผลการวัด

ผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ (การวัด) ของเศษส่วนมวลของ BP ในวัตถุที่ถูกกำหนดจะแสดงในรูปแบบ

ที่ไหน ว-เศษส่วนมวลของ BP คำนวณโดยสูตร (II.3)

หากตรวจไม่พบ BP ผลการวัดจะแสดงในรูปแบบ

โดยที่ P "ds คือเนื้อหาที่อนุญาตของ BP ตามตารางที่ 1

การควบคุมข้อผิดพลาด MVI

การควบคุมคอนเวอร์เจนซ์ของสัญญาณเอาท์พุตโครมาโตกราฟี

การควบคุมจะดำเนินการระหว่างการสอบเทียบและการวิเคราะห์ของแต่ละตัวอย่างที่สัมพันธ์กับสัญญาณเอาท์พุต (ค่าของพื้นที่พีค BP บนโครมาโตแกรม) ที่ได้จากการฉีดสารละลายสองครั้งลงในโครมาโตกราฟี ผลการควบคุมถือว่าน่าพอใจหากช่วงของสัญญาณเอาท์พุตซึ่งอ้างถึงค่าเฉลี่ยเลขคณิตไม่เกิน 8%

การควบคุมความถูกต้องของการสร้างลักษณะการสอบเทียบ

การควบคุมจะดำเนินการในการสอบเทียบแต่ละครั้ง ผลการควบคุมได้รับการยอมรับว่าน่าพอใจหากตรงตามเงื่อนไขสำหรับ "โซลูชันการสอบเทียบแต่ละครั้ง"

ที่ไหน sj- ค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีค BP สำหรับโซลูชันการสอบเทียบที่ y, c.u.; ส)- ค่าของพื้นที่พีคที่สอดคล้องกับลักษณะการสอบเทียบของความเข้มข้นของมวลของ BP ในสารละลายการสอบเทียบ y "c.u.

การควบคุมความเสถียรของลักษณะการสอบเทียบ

การควบคุมจะดำเนินการทุกวันก่อนเริ่มทำงานกับตัวอย่างที่วิเคราะห์ตามโซลูชันการควบคุม ซึ่งใช้เป็นสารละลายสอบเทียบที่มีความเข้มข้นของมวล BP ที่สอดคล้องกับเนื้อหาที่อนุญาตในวัตถุที่วิเคราะห์

ผลการควบคุมถือว่าน่าพอใจหากตรงตามเงื่อนไข

โดยที่ C ki - ค่าความเข้มข้นมวลของ BP ในสารละลายควบคุม พบโดยลักษณะการสอบเทียบสำหรับค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีค µg/cm 3 ; ด้วย ถึง - ค่าความเข้มข้นมวลของ BP ในสารละลายควบคุมตามตาราง 2.

การควบคุมการบรรจบกันของผลการกำหนด

การควบคุมจะดำเนินการในการวิเคราะห์แต่ละครั้ง (การวัด) ผลลัพธ์ของการควบคุมถือว่าน่าพอใจ ถ้าช่วงของผลลัพธ์ของการกำหนด อ้างอิงถึงค่าเฉลี่ยเลขคณิต (ผลการวิเคราะห์) ไม่เกิน 10%

การควบคุมข้อผิดพลาดด้วยวิธีการเสริม

ดำเนินการควบคุม:

• ก) ก่อนเริ่มแอปพลิเคชัน MVI นี้ - โดยไม่ล้มเหลว
• b) เมื่อผลลัพธ์ที่น่าสงสัยของการกำหนดสัดส่วนมวลของ BP ปรากฏขึ้น
• c) ตามแผนการควบคุมภายในห้องปฏิบัติการ
• d) ตามคำร้องขอขององค์กรที่ควบคุมกิจกรรมของห้องปฏิบัติการ

สารเติมแต่งถูกสร้างขึ้นบนพื้นฐานของสารละลายสอบเทียบ มูลค่าเพิ่ม (ด,มก./กก.) ถูกเลือกเพื่อให้สัดส่วนมวลของ BP ในตัวอย่างเพิ่มขึ้น 1.5-2.5 เท่า การคำนวณจะดำเนินการตามสูตร

ที่ไหน ซีดี- ความเข้มข้นมวลของ BP ในสารละลายสอบเทียบ µg/cm 3 ; โว- ปริมาตรของสารละลายสอบเทียบ BP ที่ใส่เข้าไปในตัวอย่าง cm3; เอ็ม fw- น้ำหนักเท่ากันของตัวอย่างที่นำมาวิเคราะห์ g.

สารเติมแต่งนี้ถูกนำมาใช้ในสารสกัดเบื้องต้นของเมล็ดพืชหรือตัวอย่างดินในรูปแบบของสารละลายสอบเทียบที่เตรียมตามตาราง 2. สารเติมแต่งถูกนำมาใช้ในสารสกัดหลักของผลิตภัณฑ์ที่รมควันในรูปแบบของสารละลายที่มีความเข้มข้นใกล้เคียงกันในเฮกเซน ในการทำเช่นนี้ GRM ขององค์ประกอบ BP ในเฮกเซน (ดูด้านบน) จะถูกเจือจาง (โดยคำนึงถึงการแก้ไขสำหรับค่าความเข้มข้นที่ผ่านการรับรอง) ตามขั้นตอนในการเตรียมสารละลายสำหรับการสอบเทียบ (ดูด้านบน) โดยใช้เฮกเซนเป็นตัวทำละลายและ ได้สารละลายที่มีความเข้มข้นที่ต้องการ เมื่อใช้องค์ประกอบ GSO ของ BP ในอะซิโตไนไทรล์หลังจากการระเหยของตัวทำละลาย สารตกค้างที่แห้งจะถูกละลายซ้ำในเฮกเซนและเจือจางด้วยเฮกเซน ดังที่อธิบายไว้ข้างต้น

การวิเคราะห์ตัวอย่างสองตัวอย่างที่มีเนื้อหาตามธรรมชาติของ BP และสองตัวอย่างด้วยการเพิ่ม BP จะดำเนินการภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน ผลการควบคุมถือว่าน่าพอใจหากตรงตามเงื่อนไข

ที่ไหน W D- เศษส่วนมวลของความดันโลหิตในตัวอย่างที่มีสารเติมแต่ง มก./กก. W- เศษส่วนมวลของความดันโลหิตในตัวอย่างที่ไม่มีสารเติมแต่ง mg/kg ( W Dและ ว-ค่าเฉลี่ยของเศษส่วนมวลสำหรับสองตัวอย่างที่มีผลบวกของการควบคุมการบรรจบกัน)

ภาพประกอบของการประยุกต์ใช้เทคนิคนี้ในเชิงนิเวศน์เชิงปฏิบัติสามารถใช้เป็นโครมาโตแกรมและกราฟสอบเทียบสำหรับการกำหนดเบนโซ (a)ไพรีนในผลิตภัณฑ์อาหาร (รูปที่ 11.15 และ 11.16)

ผลของการควบคุมข้อผิดพลาดในการกำหนดเบนโซ (เอ)ไพรีนในวัตถุโดยวิธีการเติมด้วยการตรวจจับฟลูออไรเมตริก 375 Ex/405 Et (ตัวแปร 3)

ระดับของสารเติมแต่งสอดคล้องกับ 0.5 ของเนื้อหาที่อนุญาตของเบนซาไพรีน (0.0005 มก./กก. - เมล็ดพืชและผลิตภัณฑ์รมควัน 0.01 มก./กก. - ดิน)

ข้าว. 11.15.

การสำเร็จการศึกษาสำหรับส่วนประกอบ: BaP ค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์: 0.999667 การตอบสนอง: พื้นที่

อ้างอิงช่อง 365 Ex/405 Em

สูตร Y = Ki X

ค่า 100 ( W D - W-D)/ดคือ 10 และ 16% สำหรับตัวอย่างที่ 1 และ 2 ตามลำดับ สารประกอบที่กำหนดในตัวอย่างเริ่มต้นของแป้งสาลีมีอยู่ในปริมาณ 0.000009 กก./กก.

ตัวอย่างที่ 1 - 0.00064 มก./กก. ตัวอย่างที่ 2 - 0.00067 มก./กก.

• ในกรณีทั่วไป ลักษณะเฉพาะของการสอบเทียบจะมีรูปแบบ S = AC + B โดยที่ S คือพื้นที่พีค, c.u.; C คือความเข้มข้นมวลของสารก่อมลพิษ µg/cm3; A และ B เป็นสัมประสิทธิ์

โพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน: คุณสมบัติทางเคมีกายภาพและผลกระทบทางชีวภาพ ทบทวนวิธีการกำหนดเบนซาไพรีน การหาค่าเบนซาไพรีนในน้ำโดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงพร้อมการตรวจจับด้วยฟลูออเรสเซนต์

ส่งงานที่ดีของคุณในฐานความรู้เป็นเรื่องง่าย ใช้แบบฟอร์มด้านล่าง

นักศึกษา นักศึกษาระดับบัณฑิตศึกษา นักวิทยาศาสตร์รุ่นเยาว์ที่ใช้ฐานความรู้ในการศึกษาและการทำงานจะขอบคุณอย่างยิ่ง

โพสต์เมื่อ http://www.allbest.ru/

หลักสูตรนี้ประกอบด้วย 30 หน้า 1 ส่วน 4 ส่วนย่อย 14 ย่อหน้า 6 ตารางและ 9 ตัวเลข ในตอนท้ายของหลักสูตรจะมีรายการอ้างอิงซึ่งประกอบด้วย 14 ข้อ

วัตถุประสงค์ของการวิจัยของฉันคือเบนโซ (เอ)ไพรีน คุณสมบัติของสาร ฤทธิ์ก่อมะเร็ง รวมถึงวิธีการในการพิจารณา หลักสูตรนี้นำเสนอวิธีการต่างๆ เช่น แก๊สโครมาโตกราฟีด้วยการตรวจจับแมสสเปกโตรสโกปีและโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงพร้อมการตรวจจับด้วยฟลูออเรสเซนต์ นอกจากนี้ เครื่องตรวจจับที่เหมาะสำหรับการบันทึกสัญญาณวิเคราะห์ของเบนโซ (เอ)ไพรีนได้รับการพิจารณาและพิสูจน์ความสมเหตุสมผลของการใช้เครื่องตรวจจับหนึ่งหรืออีกเครื่องหนึ่ง

นอกจากนี้ ในหลักสูตรยังมีการนำเสนอวิธีการตรวจวัดเบนโซ (เอ)ไพรีนในน้ำ ซึ่งประกอบด้วยการเตรียมตัวอย่าง การสอบเทียบโครมาโตกราฟี การวิเคราะห์และการบันทึกข้อมูล กระดาษนำเสนอโครมาโตแกรมที่ได้จากวิธีการเหล่านี้

คำสำคัญ: โพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน, เบนโซ(เอ)ไพรีน, โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง, โครมาโตกราฟีของแก๊ส, การตรวจจับฟลูออเรสเซนต์

หลักสูตร Tazi ประกอบด้วย 30 หน้า 1 ส่วน 4 ส่วนย่อย 14 คะแนน 6 masi และ 9 ตัวเลข ที่ขอบของงานเขียนเรียงความมีรายการวรรณกรรมเริ่มต้นจากจุดที่ 14

Celta ในการศึกษาของฉันเกี่ยวกับเบนโซ (a) pyrene คุณสมบัติเชิงลบ ผลการก่อมะเร็ง แต่อย่างใดและวิธีการสำหรับมันยังไม่พร้อมที่จะระบุ หลักสูตรการทำงานรวมถึงวิธีการต่างๆ เช่น แก๊สโครมาโตกราฟีที่มีเส้นโค้งมวลสารและโครมาโตกราฟีประสิทธิภาพสูงพร้อมเส้นโค้งเรืองแสง นี่คือสิ่งที่ถือว่าเป็นเครื่องตรวจจับซึ่งเหมาะสำหรับการรับสัญญาณเชิงวิเคราะห์จากเบนโซ (a) pyrene และการใช้งานที่เหมาะสมกับเครื่องตรวจจับ

โดยพื้นฐานแล้ว ในระหว่างการทำงานในแอ่ง เรานำเสนอวิธีการในการพิจารณาเบนซ์ (a) pyrene ในน้ำ ซึ่งประกอบด้วยการเตรียมตัวอย่าง การสอบเทียบบนโครมาโตกราฟี การวิเคราะห์และการบันทึกข้อมูล กฎบัตรนำเสนอข้อมูลโดยได้รับตามวิธีการ

แนวคิดหลัก: POLYCYCLIC AROMATIC WATER, Benz (A) PYRENE, TECHNA CHROMATOGRAPHY ที่มีประสิทธิภาพสูง, โครมาโตกราฟีของแก๊ส, การเปิดเรืองแสง

หลักสูตรนี้กำหนดให้ครอบคลุม 30 ด้าน 1 แยก 4 โฟลเดอร์ย่อย 14 คะแนน 6 ตารางและ 9 ภาพวาด เมื่อจบหลักสูตร รายชื่อวรรณกรรม ซึ่งประกอบด้วย 14 คะแนน

เกี่ยวกับ "งานวิจัยของฉันเกี่ยวกับ benz (a) pyrene พลังของมัน การก่อมะเร็งตลอดจนวิธีการระบุตัวตน ในหลักสูตรนี้ วิธีการต่างๆ เช่น แก๊สโครมาโตกราฟีพร้อมการตรวจจับแมสสเปกโตรสโคปีนั้นมีประสิทธิภาพสูง แต่โครมาโตกราฟีมีประสิทธิภาพสูงและเป็นฟลูออเรสเซนต์ . เครื่องตรวจจับที่เหมาะสมสำหรับการลงทะเบียนสัญญาณวิเคราะห์กับเบนโซ (ก) pyrene และความสมเหตุสมผลของเครื่องตรวจจับอื่น ๆ ได้รับการพิสูจน์

นอกจากนี้ ในรายวิชายังได้นำเสนอวิธีการกำหนด benz (a) pyrene ในน้ำ ซึ่งประกอบด้วย การเตรียมตัวอย่าง การสอบเทียบโครมาโตกราฟี การวิเคราะห์ และการลงทะเบียนข้อมูล หุ่นยนต์จะแสดงด้วยโครมาโตแกรมซึ่งนำมาจากวิธีการเหล่านี้

คำสำคัญ: POLICYCLIC AROMATIC CARBOHYDRATES, Benz(A)PYRENE, RIDINNA CHROMATOGRAPHY ประสิทธิภาพสูง, GAS CHROMATOGRAPHY, การตรวจจับฟลูออเรสเซนต์

สัญลักษณ์

การแนะนำ

1. การทบทวนวรรณกรรม

1.1.1 ข้อมูลทั่วไป

1.1.2 ที่มาของ PAHs

1.1.4 การกระทำทางชีวภาพ

1.1.5 เบนซ์(เอ)ไพรีน ข้อมูลทั่วไป

1.2 วิธีการกำหนดเบนซาไพรีน

1.2.1 แก๊สโครมาโตกราฟี

1.3 การหาค่าเบนซาไพรีนในน้ำโดย HPLC

1.3.2 การเตรียมตัวอย่าง

1.3.3 การสำเร็จการศึกษา

1.3.4 ดำเนินการวิเคราะห์ HPLC

1.3.5 การบันทึกและประมวลผลข้อมูล

1.4.2 การหาปริมาณของ BP

บรรณานุกรม

สัญลักษณ์

PAHs - โพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน

BP - เบนโซ (a) pyrene

MPC - ความเข้มข้นสูงสุดที่อนุญาต

MPC SS - ความเข้มข้นสูงสุดที่อนุญาตเฉลี่ยรายวัน

HPLC - โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง

GC - แก๊สโครมาโตกราฟี

LC - โครมาโตกราฟีของเหลว

NPC - โครมาโตกราฟีเฟสปกติ

RPCH - โครมาโตกราฟีแบบย้อนกลับ

LLE - การสกัดของเหลวและของเหลว

OFS - ตัวดูดซับแบบย้อนกลับ

TLC - โครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง

การแนะนำ

โพลีไซคลิก อะโรมาติก ไฮโดรคาร์บอน (PAHs) อยู่ในกลุ่มของสารมลพิษอินทรีย์ที่คงอยู่ พวกเขามีคุณสมบัติในการก่อมะเร็งที่เด่นชัด หนึ่งในตัวแทนที่อันตรายที่สุดของ PAHs คือ benzo(a)pyrene (BP)

Benz (a) pyrene ถูกค้นพบในปี 1933 ต่อมาในปี 1935 มีการศึกษาเพื่อยืนยันการก่อมะเร็ง วันนี้ benzo(a)pyrene จัดเป็นสารก่อมะเร็งในระดับอันตรายที่ 1 มีคุณสมบัติในการกลายพันธุ์ แม้แต่ความเข้มข้นเล็กน้อยของความดันโลหิตก็ส่งผลเสียต่อร่างกายมนุษย์ ความเข้มข้นของ BP ในอากาศเกินความเข้มข้นสูงสุดที่อนุญาต (MAC) เมื่อได้รับสารเป็นเวลานานอาจทำให้เกิดมะเร็งปอดได้ ดังนั้นปัญหาของการตรวจจับและคำจำกัดความจึงรุนแรง จากคุณสมบัติทางเคมีกายภาพของมัน ได้มีการพัฒนาวิธีการที่คล้ายกันจำนวนหนึ่งสำหรับการวิเคราะห์ โดยมีความแตกต่างกันเฉพาะในขั้นตอนของการสุ่มตัวอย่างและการเตรียมตัวอย่าง จุดประสงค์ของงานของฉันคือเพื่อทำความคุ้นเคยกับคุณสมบัติของ PAHs และ BP เพื่อศึกษาวิธีการแยก PAHs และวิธีการกำหนด BP

1. การทบทวนวรรณกรรม

1.1 โพลีไซคลิก อะโรมาติก ไฮโดรคาร์บอน (PAHs)

1.1.1 ข้อมูลทั่วไป

PAHs เป็นสารประกอบอินทรีย์โมเลกุลสูงในซีรีส์เบนซีน ซึ่งมีตัวแทนมากกว่า 200 ราย ประกอบด้วยวงแหวนเบนซิน 2 ถึง 7 วง PAHs มีการกระจายอย่างกว้างขวางในธรรมชาติและมีเสถียรภาพเมื่อเวลาผ่านไป พวกมันมีฤทธิ์ก่อมะเร็งและก่อกลายพันธุ์ เนื่องจากความเป็นพิษและคุณสมบัติในการก่อมะเร็ง จึงจัดเป็นสารก่อมลพิษที่มีลำดับความสำคัญสูง การกำหนด PAHs ใช้ในการศึกษาทางนิเวศวิทยาและธรณีเคมี สารพิษที่เป็นพิษมากที่สุดคือ 3, 4-benz(a)pyrene และ 1, 12-benzperylene ซึ่งมักถูกกำหนดโดยเฉพาะอย่างยิ่งในวัตถุสิ่งแวดล้อม

1.1.2 ที่มาของ PAHs

PAHs เป็นผลพลอยได้จากการเผาไหม้เชื้อเพลิงฟอสซิลที่ไม่พึงประสงค์ พวกมันก่อตัวขึ้นในธรรมชาติเนื่องจากกระบวนการทางชีวภาพ PAHs หลายพันตันที่ปล่อยออกมาจากส่วนประกอบฮิวมิกของดินเข้าสู่ชีวมณฑลทุกปี แต่สารก่อมะเร็งเหล่านี้ส่วนใหญ่มาจากกระบวนการที่มนุษย์สร้างขึ้น

ถ่านหินถือเป็นส่วนผสมของนิวเคลียสของเบนซีนอะโรมาติกที่ควบแน่นจำนวนมากซึ่งมีปริมาณไฮโดรเจนน้อยที่สุด เมื่อสารเหล่านี้ถูกเผาในเตาเผา โรงไฟฟ้า เครื่องยนต์สันดาปภายใน สารประกอบเหล่านี้จะสลายตัว ที่อุณหภูมิการเผาไหม้ต่ำและปริมาณออกซิเจนในบรรยากาศไม่เพียงพอจะเกิดปฏิกิริยาอะเซทิลีนและอะลิฟาติกไฮโดรคาร์บอน อะเซทิลีนจะรวมตัวเป็นบิวทาไดอีน ซึ่งจะสร้างนิวเคลียสของอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน เมื่อเติมเข้าไปในนิวเคลียสอะโรมาติกที่มีอยู่แล้ว PAHs จะถูกสร้างขึ้น

การเผาไหม้ที่ไม่สมบูรณ์ทำให้เกิดอนุภาคของเขม่าคาร์บอน PAHs ถูกดูดซับบนพื้นผิวและเข้าสู่สิ่งแวดล้อม

1.1.3 คุณสมบัติทางกายภาพและเคมีของ PAHs

PAHs ส่วนใหญ่เป็นสารประกอบผลึก (ยกเว้นอนุพันธ์แนฟทาลีนบางชนิด) ที่มีจุดหลอมเหลวสูง PAHs ละลายได้ไม่ดีในน้ำ เมื่อเปลี่ยนไปใช้ตัวทำละลายอินทรีย์ ความสามารถในการละลายจะเพิ่มขึ้นและขึ้นอยู่กับน้ำหนักโมเลกุลของตัวทำละลาย ตามกฎแล้วด้วยการเพิ่มจำนวนของวงแหวนอะโรมาติกและอนุมูลอัลคิลความสามารถในการละลายของ PAHs จะลดลง

PAHs ส่วนใหญ่ดูดซับรังสียูวีอย่างเข้มข้น (300–420 นาโนเมตร) และโฟโตออกซิไดซ์อย่างรวดเร็วในบรรยากาศเพื่อสร้างควิโนนและสารประกอบคาร์บอนิล

1.1.4 การกระทำทางชีวภาพ

PAHs เข้าสู่ร่างกายทางทางเดินหายใจ ผิวหนัง หรือทางเดินอาหาร

ประเภทของปฏิสัมพันธ์ของ PAHs กับร่างกายส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับตัวไฮโดรคาร์บอนเอง โดยพื้นฐานแล้ว เมื่อ PAHs เข้าสู่ร่างกาย เอ็นไซม์จะสร้างสารประกอบอีพ็อกซี่ที่ทำปฏิกิริยากับกวานีน ซึ่งขัดขวางการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ ทำให้เกิดความผิดปกติ หรือนำไปสู่การกลายพันธุ์ที่นำไปสู่การพัฒนาของมะเร็ง

หนึ่งใน PAHs ที่เป็นพิษมากที่สุดดังที่ได้กล่าวไว้ก่อนหน้านี้คือ BP นอกจากนี้ ฤทธิ์ก่อมะเร็งของ PAHs อยู่ที่ 70-80% เนื่องจากอิทธิพลของความดันโลหิต ดังนั้น การมี BP ในผลิตภัณฑ์อาหารจึงสามารถใช้เพื่อตัดสินการมีอยู่ของ PAHs อื่นๆ

1.1.5 เบนซ์(เอ)ไพรีน ลักษณะทั่วไป

Benz (a) pyrene (C 20 H 12) เป็นสารประกอบทางเคมีซึ่งเป็นตัวแทนของตระกูลโพลีไซคลิกไฮโดรคาร์บอน (รูปที่ 1.1) ซึ่งเป็นสารประเภทอันตรายที่หนึ่ง มันเกิดขึ้นระหว่างการเผาไหม้เชื้อเพลิงของเหลวไฮโดรคาร์บอนของแข็งและก๊าซ (ในระดับที่น้อยกว่าระหว่างการเผาไหม้เชื้อเพลิงก๊าซ)

รูปที่ 1.1 สูตรโครงสร้างของเบนโซ(เอ)ไพรีน

BP เป็นจานหรือเข็มสีเหลือง สามารถละลายได้สูงในตัวทำละลายที่ไม่มีขั้ว เช่น ในโทลูอีน เบนซีน ไซลีน ละลายได้น้อยกว่าเล็กน้อยในตัวทำละลายขั้ว แต่ไม่ละลายในน้ำ

ความดันโลหิตสะสมส่วนใหญ่ในดิน น้อยกว่าในน้ำ จากดินเข้าสู่พืชโดยเคลื่อนที่ไปตามห่วงโซ่อาหาร ในแต่ละระดับถัดไป เนื้อหาของ benzo(a)pyrene จะเพิ่มขึ้นตามลำดับความสำคัญ

ความดันโลหิตเป็นสารเคมีก่อมะเร็งทั่วไปและเป็นอันตรายต่อมนุษย์แม้ในระดับความเข้มข้นที่น้อยที่สุด เนื่องจากมีคุณสมบัติในการสะสมในร่างกายมนุษย์ MPC ของเบนโซ (a) pyrene ในวัตถุต่าง ๆ แสดงไว้ในตารางที่ 1.1 นอกจากนี้ BP ยังมีคุณสมบัติในการกลายพันธุ์ กล่าวคือ มันสามารถทำให้เกิดการกลายพันธุ์

ตารางที่ 1.1 MPC ของเบนโซ (a) pyrene ในสภาพแวดล้อมต่างๆ

ชื่อวัตถุ	MAC, ไมโครกรัม/กก.
ผลิตภัณฑ์รมควัน
ซีเรียล
น้ำดื่ม
อ่างเก็บน้ำ

ในอากาศ ความเข้มข้นสูงสุดที่อนุญาตต่อวันโดยเฉลี่ย (MPC CC) คือ 0.1 µg/100m 3

1.2 วิธีการหาเบนโซ(เอ)ไพรีน

วิธีการหลักในการกำหนด PAHs คือโครมาโตกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงแบบย้อนกลับเฟส (HPLC) ที่มีการตรวจจับฟลูออไรเมตริกหรือสเปกโตรสโกปีและแก๊สโครมาโตกราฟี (GC) ที่มีการเลือกมวล การแตกตัวเป็นไอออนด้วยเปลวไฟ การดักจับอิเล็กตรอน หรือการตรวจจับโฟโตอิออไนเซชัน

ในการตรวจสอบ BP จะใช้วิธีการสเปกโตรสโกปีเรืองแสงตามเอฟเฟกต์ Shpolsky สาระสำคัญของผลกระทบอยู่ในความจริงที่ว่าที่อุณหภูมิต่ำโมเลกุล polyatomic บางตัวให้สเปกตรัมการเรืองแสงกึ่งเชิงเส้นที่มีความละเอียดสูง ข้อดีของวิธีนี้คือความต้องการระดับการทำให้บริสุทธิ์และความไวต่ำ แต่ความซับซ้อนของฮาร์ดแวร์นั้นเป็นข้อจำกัดที่สำคัญต่อคำจำกัดความของ BP

โครมาโตกราฟีเป็นวิธีการแยก การวิเคราะห์ และการศึกษาทางเคมีกายภาพของสารโดยพิจารณาจากการเคลื่อนที่ของโซนของสารตามชั้นตัวดูดซับในกระแสเฟสเคลื่อนที่โดยมีการดูดซับและการคายการดูดซับซ้ำหลายครั้ง การแยกตัวเกิดขึ้นเนื่องจากความแตกต่างในค่าคงที่การกระจายของสารแต่ละตัวระหว่างสองเฟส คุณลักษณะที่สำคัญที่สุดของโครมาโตกราฟีคือลักษณะไดนามิกของกระบวนการ ซึ่งการไล่ระดับสีเกิดขึ้นในการกระจายความเข้มข้นของโมเลกุลหรืออนุภาค

รูปแบบทั่วไปสำหรับการแยกส่วนประกอบของของผสมจะแสดงในรูปที่ 1.2

รูปที่ 1.2 แผนการดำเนินงานของกระบวนการโครมาโตกราฟี

ข้อดีของวิธีโครมาโตกราฟี ได้แก่ ความเป็นไปได้ของการใช้พารามิเตอร์จำนวนมากพร้อมกันเพื่อระบุลักษณะการแยก การระบุ และการหาปริมาณของส่วนประกอบในส่วนผสม ดังนั้นโครมาโตกราฟีจึงเป็นแหล่งข้อมูลหลายช่องทาง

ขึ้นอยู่กับสถานะของการรวมตัวของเฟสเคลื่อนที่ วิธีโครมาโตกราฟีแบ่งออกเป็นโครมาโตกราฟีแบบแก๊สและของเหลว

ในทางกลับกันแก๊สโครมาโตกราฟีขึ้นอยู่กับสถานะของการรวมตัวของนิ่ง (นิ่ง) รวมถึงโครมาโตกราฟีแบบแก๊สของเหลวและแก๊ส - ของแข็ง - เฟส

โครมาโตกราฟีของเหลวแบ่งออกเป็นของเหลว-ของเหลว ของเหลว-ของแข็งและของเหลว-เจล

1.2.1 แก๊สโครมาโตกราฟี

GC เป็นโครมาโตกราฟีชนิดหนึ่งซึ่งเฟสเคลื่อนที่อยู่ในสถานะก๊าซหรือไอ ซึ่งเป็นก๊าซเฉื่อย เป็นก๊าซพาหะ เฟสที่อยู่กับที่คือของเหลวที่มีน้ำหนักโมเลกุลสูง ซึ่งจับจ้องอยู่ที่ตัวพาที่มีรูพรุนหรือบนผนังของหลอดเส้นเลือดฝอยยาว

GC เป็นวิธีการสากลในการแยกส่วนผสมของสารที่ระเหยโดยไม่สลายตัว ส่วนประกอบของของผสมเคลื่อนผ่านคอลัมน์โครมาโตกราฟีด้วยก๊าซพาหะ ในกรณีนี้ ส่วนผสมจะถูกกระจายซ้ำๆ ระหว่างก๊าซพาหะกับเฟสที่อยู่กับที่ การแยกตัวเกิดขึ้นเนื่องจากความสามารถในการละลายที่แตกต่างกันของส่วนประกอบผสมในเฟสของแข็ง ที่ทางออกของสารจากคอลัมน์ สารเหล่านี้จะถูกบันทึกโดยใช้เครื่องตรวจจับ

เครื่องตรวจจับเป็นอุปกรณ์ต่อเนื่องที่ลงทะเบียนสัญญาณวิเคราะห์ มีการเสนอระบบตรวจจับประมาณ 60 ประเภทสำหรับ GC ตารางที่ 1.2 แสดงประเภทของตัวตรวจจับที่ใช้บ่อยที่สุดใน GC

ตาราง 1.2 เครื่องตรวจจับแก๊สโครมาโตกราฟี

ชื่อของเครื่องตรวจจับ	หลักการทำงาน
โดยการนำความร้อน	บันทึกความแตกต่างของค่าการนำความร้อนระหว่างสารที่วิเคราะห์กับก๊าซพาหะ
ชื่อของเครื่องตรวจจับ	หลักการทำงาน
อุปกรณ์จับยึดแบบอิเล็กทรอนิกส์	ดักจับโดยตัววิเคราะห์ของอิเล็กตรอนความร้อนที่เกิดจากการฉายรังสีด้วยอนุภาค β หรืออิเล็กตรอนพลังงานสูงของก๊าซพาหะ
ยูวี	การดูดซับแสงยูวีโดยโครโมฟอร์ที่วิเคราะห์จำเพาะ
ไมโครเวฟพลาสม่า	การกระตุ้นของสารวิเคราะห์ในพลาสมาไมโครเวฟและการเปล่งแสงที่ความยาวคลื่นลักษณะเฉพาะของธาตุที่มีอยู่ในสาร
โฟโตเมตริกซ์เปลวไฟ	การกระตุ้นของสารที่วิเคราะห์ในเปลวไฟและการเปล่งแสงขึ้นอยู่กับชนิดขององค์ประกอบที่มีอยู่ในสาร
สเปกโตรมิเตอร์ดูดกลืนอะตอม	การทำให้เป็นละอองด้วยความร้อนตามด้วยการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่นจำเพาะ
เคมีไฟฟ้า	การดูดซับสารที่วิเคราะห์โดยการไหลของของเหลวและการตรวจจับไฟฟ้าเคมีในการไหล
อินฟราเรดสเปกโตรมิเตอร์	การดูดซับแสงในบริเวณ IR โดยตัววิเคราะห์
เปลวไฟไอออไนซ์	การก่อตัวและการลงทะเบียนของไอออนในเปลวไฟระหว่างการเผาไหม้ของสารที่วิเคราะห์
แมสสเปกโตรมิเตอร์	การก่อตัวของโมเลกุลและชิ้นส่วนไอออนโดยผลกระทบของอิเล็กตรอนหรือไอออไนซ์ทางเคมี
photoionization	การเกิดโฟโตเคมีและการลงทะเบียนของไอออนภายใต้การกระทำของรังสี UV อย่างหนักบนสารวิเคราะห์

เครื่องตรวจจับไอออไนซ์จากเปลวไฟมีความละเอียดอ่อนแต่ไม่สามารถเลือก BP ได้ ดังนั้นจึงใช้สำหรับการวิเคราะห์สารผสมอย่างง่ายเท่านั้น

เครื่องตรวจจับการจับอิเล็กตรอนมีทั้งความไวและการคัดเลือกสำหรับ BP แต่การใช้งานทำได้ยากเนื่องจากมีการตอบสนองสูงต่อสารประกอบอิเล็กโตรฟิลลิก

การใช้โฟโตอิออไนเซชันมีแนวโน้มในการกำหนด BP แต่ไม่พบการกระจายอย่างกว้างขวางเนื่องจากความไม่เสถียรของการทำงานและต้นทุนของอุปกรณ์สูง

GC ที่มีการตรวจจับแมสสเปกโตรเมตรีเป็นทางออกที่ดีที่สุดสำหรับการกำหนดเบนซาไพรีนในสารผสมที่ซับซ้อน

หลักการทำงานของแมสสเปกโตรมิเตอร์คือการกระจายชิ้นส่วนหรือไอออนตามมวล กระบวนการไอออไนซ์ใช้เพื่อเปลี่ยนโมเลกุลที่เป็นกลางให้เป็นไอออน ผลกระทบของอิเล็กตรอนมักถูกใช้เพื่อทำให้สารประกอบอินทรีย์แตกตัวเป็นไอออน นอกจากนี้ยังใช้ไอออไนซ์ทางเคมีซึ่งขึ้นอยู่กับการเกิดปฏิกิริยาโมเลกุลไอออน ในการศึกษาโมเลกุลชีวภาพ โพลีเมอร์ และสารอื่นๆ ที่ไม่สามารถถ่ายโอนไปยังเฟสของแก๊สได้โดยไม่มีการสลายตัว จะใช้ไอออไนซ์ชนิดพิเศษ

GC ที่มีการตรวจจับด้วยแมสสเปกโตรสโกปีเป็นวิธีเดียวที่ช่วยให้สามารถใช้มาตรฐานภายในสำหรับการวัดเชิงปริมาณได้ ใช้สารผสมไอโซเมอร์ 2 H และ 13 C ที่ติดฉลากของ PAHs เป็นสารมาตรฐาน การเปลี่ยนน้ำหนักและความจริงที่ว่าสารอ้างอิงมีลักษณะเกือบเหมือนกันกับ PAHs ที่ไม่มีป้ายกำกับช่วยให้ระบุตัวตนได้ง่ายขึ้น

ข้อเสียเล็กน้อยประการหนึ่งของแมสสเปกโตรมิเตอร์คือช่วงเชิงเส้นเล็ก ๆ ของการตอบสนองของเครื่องตรวจจับ ดังนั้นแมสสเปกโตรมิเตอร์แบบเดิมจึงถูกแทนที่ด้วยเวลาของเที่ยวบิน คุณลักษณะของมันคือในเวลาอันสั้น เป็นไปได้ที่จะได้สเปกตรัมมวลที่สมบูรณ์ของสารประกอบและการวัดมวลที่แม่นยำถึง 0.0001 น.

การผสมผสานระหว่างแมสสเปกโตรมิเตอร์ตามเวลาบินกับแก๊สโครมาโตกราฟีช่วยให้สามารถแยกส่วนประกอบที่ดีของสารผสมที่ซับซ้อนและขีดจำกัดการตรวจจับต่ำได้

1.2.2 โครมาโตกราฟีของเหลว

โครมาโตกราฟีเหลว (LC) เป็นวิธีการแยกและวิเคราะห์สารที่ซับซ้อน ซึ่งของเหลวทำหน้าที่เป็นเฟสเคลื่อนที่ ในอีกด้านหนึ่ง เฟสเคลื่อนที่จะทำหน้าที่ขนส่ง กล่าวคือ ถ่ายโอนสารที่ไม่สามารถดูดซับได้และในทางกลับกันควบคุมค่าคงที่สมดุลและเป็นผลให้การคงอยู่อันเป็นผลมาจากการมีปฏิสัมพันธ์กับเฟสที่อยู่กับที่และกับโมเลกุลของสารที่ถูกแยกออก

ใน LC การแยกส่วนใหญ่มักเกิดขึ้นที่อุณหภูมิห้อง ตัวอย่างที่วิเคราะห์แล้วจะถูกฉีดเข้าไปในคอลัมน์และผ่านสารชะ ใน LC ธรรมชาติของเฟสเคลื่อนที่เป็นสิ่งสำคัญ ด้วยเหตุนี้ การรวมกันของเฟสคงที่จำนวนน้อยและเฟสเคลื่อนที่จำนวนมากทำให้สามารถแก้ปัญหาการวิเคราะห์ต่างๆ ได้

การวิเคราะห์ในโครมาโตกราฟีของเหลวแบบคลาสสิกดำเนินการมาเป็นเวลานาน เนื่องจากอัตราการป้อนตัวอย่างต่ำ วิธีนี้เหมาะสำหรับการแยกส่วนประกอบเบื้องต้นของส่วนผสม ในกรณีส่วนใหญ่ใช้ HPLC การถ่ายโอนมวลอย่างรวดเร็วพร้อมประสิทธิภาพการแยกสูงช่วยให้ HPLC สามารถกำหนดโมเลกุล โมเลกุลขนาดใหญ่ และไอออน ความแตกต่างระหว่าง LC แบบคลาสสิกและ HPLC แสดงไว้ในตารางที่ 1.3

ตารางที่ 1.3 ความแตกต่างในการทดลองระหว่าง LC . แบบคลาสสิกและประสิทธิภาพสูง

ลักษณะ	LC .คลาสสิก	HPLC
ความดัน atm	จากเศษส่วนของตู้เอทีเอ็ม สูงถึง 2atm
อัตราการไหล mm/min
ระยะเวลาการแยก	จากหลายชั่วโมงเป็นหลายวัน	หลายนาทีถึงหลายชั่วโมง
อุปกรณ์	ลำโพงและอุปกรณ์เสริม	โครมาโตกราฟ
ประเภทแยก	การเตรียมการแยกตัว	ฝ่ายวิเคราะห์
การตรวจจับ	การตรวจจับบุคคล เศษส่วนโดยวิธีวิเคราะห์	ด้วยเครื่องตรวจจับ
ปริมาณสารทดสอบ	จากไม่กี่ไมโครกรัมเป็นหลายกิโลกรัม	หลายนาโนกรัมถึงหลายไมโครกรัม

HPLC คือวิธีการโครมาโตกราฟีแบบคอลัมน์ในที่ซึ่งเฟสเคลื่อนที่เป็นของเหลวที่เคลื่อนที่ผ่านคอลัมน์โครมาโตกราฟีที่เติมด้วยเฟสที่อยู่กับที่ (ตัวดูดซับ) คอลัมน์สำหรับ HPLC มีความต้านทานไฮดรอลิกสูงที่ทางเข้า

ขึ้นอยู่กับกลไกของการแยกสาร ตัวเลือก HPLC ต่อไปนี้มีความโดดเด่น:

ก) การกระจาย;

b) การแลกเปลี่ยนไอออน

ค) พิเศษ;

ง) ไครัล;

จ) การดูดซับ

โครมาโตกราฟีแบบแบ่งส่วนจะขึ้นอยู่กับการกระจายตัวของสารระหว่างของเหลวสองชนิดที่เข้ากันไม่ได้ คล้ายกับการสกัดซ้ำ เมื่อผ่านเฟสเคลื่อนที่ของของเหลว การแยกตัวเกิดขึ้นเนื่องจากความสามารถในการละลายที่แตกต่างกันของส่วนประกอบของของผสมในเฟสคงที่ของของเหลว

ในโครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยนไอออน โมเลกุลของส่วนผสมของสารที่แยกตัวออกจากสารละลายเป็นไอออนบวกและแอนไอออน จะถูกแยกออกเมื่อเคลื่อนที่ผ่านตัวดูดซับเนื่องจากแรงปฏิกิริยาที่แตกต่างกันระหว่างไอออนที่ถูกกำหนดและกลุ่มไอออนของตัวดูดซับ

ในโครมาโตกราฟีแบบแยกขนาด โมเลกุลของสารจะถูกแยกตามขนาดเนื่องจากความสามารถที่แตกต่างกันในการเจาะเข้าไปในรูพรุนของเฟสที่อยู่กับที่ ในกรณีนี้ โมเลกุลที่ใหญ่ที่สุดที่สามารถเจาะเข้าไปในจำนวนรูพรุนขั้นต่ำของเฟสที่อยู่นิ่งจะเป็นกลุ่มแรกที่ออกจากคอลัมน์ และสารที่มีขนาดโมเลกุลเล็กจะเหลือตัวสุดท้าย

ในโครมาโตกราฟีแบบไครัล สารประกอบออกฤทธิ์ทางแสงถูกแยกออกเป็นอิแนนชิโอเมอร์แต่ละชนิด (ไอโซเมอร์กระจก)

ในโครมาโตกราฟีแบบดูดซับ สารจะถูกแยกออกจากกันเนื่องจากความสามารถที่แตกต่างกันในการดูดซับและขจัดออกจากพื้นผิวของตัวดูดซับที่มีพื้นผิวที่พัฒนาแล้ว

โครมาโตกราฟีการดูดซับจะแบ่งออกเป็นเฟสปกติ (NPC) และโครมาโตกราฟีแบบย้อนกลับ (RPC) ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับขั้วของเฟสเคลื่อนที่และเฟสคงที่

NPC ใช้ตัวดูดซับแบบมีขั้วและเฟสเคลื่อนที่แบบไม่มีขั้ว ในขณะที่ RPC ใช้ตัวดูดซับแบบไม่มีขั้วและเฟสเคลื่อนที่แบบมีขั้ว

แม้ว่าโครมาโตกราฟีของเหลวเป็นวิธีการแยกตัวอย่างออกเป็นส่วนประกอบ แต่โครมาโตกราฟีของเหลวที่ทันสมัยไม่เพียงแต่ประกอบด้วยระบบการแยกสารเท่านั้น แต่ยังรวมถึงระบบสำหรับการวัดปริมาณเนื้อหาของแต่ละส่วนประกอบด้วย เช่น ระบบตรวจจับ โครงร่างของโครมาโตกราฟีแสดงในรูปที่ 1.3

เบนซาไพรีนเหลวโครมาโตกราฟีไฮโดรคาร์บอน

รูปที่ 1.3 แผนผังของโครมาโตกราฟีของเหลว

1 - ปั๊มสำหรับจ่ายเฟสเคลื่อนที่ผ่านคอลัมน์

2 - เครื่องจ่ายสำหรับใส่ตัวอย่างลงในคอลัมน์

3 - คอลัมน์คั่น

4 - เครื่องตรวจจับ - อุปกรณ์สำหรับรับสัญญาณวิเคราะห์

5 - ระบบประมวลผล - ตัวแปลงสัญญาณวิเคราะห์ให้อยู่ในรูปแบบที่สะดวกต่อการรับรู้ของมนุษย์

ในการลงทะเบียนสัญญาณวิเคราะห์ดังที่กล่าวไว้ก่อนหน้านี้จะใช้เครื่องตรวจจับ LC ใช้วิธีการตรวจจับแบบต่างๆ บางส่วนถูกกล่าวถึงในตารางที่ 1.4

ตารางที่ 1.4 เครื่องตรวจจับในโครมาโตกราฟีของเหลว

ชื่อของเครื่องตรวจจับ	หลักการทำงาน
สเปกโตรโฟโตเมตริก	ในระหว่างกระบวนการชะล้าง ความหนาแน่นเชิงแสงของตัวถูกวัดที่ความยาวคลื่นที่กำหนด
ฟลูออไรเมตริก	รังสีเรืองแสงของตัวดูดซับ
ชื่อของเครื่องตรวจจับ	หลักการทำงาน
การหักเหของแสง	การกำหนดความเข้มข้นของสารขึ้นอยู่กับดัชนีการหักเหของแสงที่แตกต่างจากดัชนีการหักเหของแสงของเฟสเคลื่อนที่
เครื่องตรวจจับแสงเลเซอร์แบบระเหย	หลักการทำงานขึ้นอยู่กับความแตกต่างของแรงดันไอของตัวทำละลายโครมาโตกราฟีที่ประกอบเป็นเฟสเคลื่อนที่และสารที่วิเคราะห์

ใน HPLC เครื่องตรวจจับฟลูออไรด์ใช้เพื่อกำหนด BP ซึ่งคัดเลือกโดยคำนึงถึงเบนซาไพรีนและมีความไวสูง หลักการทำงานของเครื่องตรวจจับดังกล่าวขึ้นอยู่กับการวัดการปล่อยแสงฟลูออเรสเซนต์ของแสงที่ดูดกลืน การวัดส่วนใหญ่ดำเนินการในพื้นที่ UV ที่ความยาวคลื่นของการดูดกลืนสูงสุดของสารกลุ่มหนึ่ง ความยาวคลื่นของรังสีฟลูออเรสเซนต์จะมากกว่าความยาวคลื่นของแสงที่ถูกดูดกลืนเสมอ เนื่องจากการตรวจจับดำเนินการจากความเข้มข้นเป็นศูนย์ เครื่องตรวจจับฟลูออไรด์จึงมีความไวมากกว่าเครื่องตรวจจับการดูดกลืน

ไม่ได้มีการใช้ HPLC ร่วมกับเครื่องตรวจจับมวลสารในการตรวจวัดเบนซาไพรีน นี่เป็นเพราะความจริงที่ว่ามีข้อกำหนดสูงเกี่ยวกับความบริสุทธิ์ของสารสกัดเช่น ระยะเวลาของการวิเคราะห์เพิ่มขึ้นเนื่องจากการเตรียมตัวอย่างอย่างลำบาก นอกจากนี้อุปกรณ์มีราคาค่อนข้างแพงและไม่คัดเลือกและมีความละเอียดอ่อนเพียงพอ

1.3 การหาปริมาณเบน (a) pyrene ในน้ำโดย HPLC

1.3.1 เครื่องมือวัด อุปกรณ์เสริม รีเอเจนต์

สำหรับการวัดจะใช้โครมาโตกราฟี Agilent 1200 HPLC (รูปที่ 1.4) พร้อมเครื่องตรวจจับฟลูออไรด์ ซึ่งให้ช่วงความยาวคลื่นที่กระตุ้นในช่วง 270-365 นาโนเมตรและการลงทะเบียนเรืองแสงในช่วง 390-460 นาโนเมตร

รูปที่ 1.4 Agilent 1200 HPLC

คอลัมน์โครมาโตกราฟีเต็มไปด้วยตัวดูดซับสำหรับ OFC ภายใต้เงื่อนไขของการทดลอง ประสิทธิภาพของคอลัมน์ควรมีอย่างน้อย 5,000 แผ่นตามทฤษฎี

สำหรับการเตรียมตัวอย่าง ใช้กรวยแยกที่มีความจุ 2,000 ซม. 3 เครื่องระเหยแบบหมุน อ่างน้ำ ปั๊มฉีดน้ำ เอ็น-เฮกเซน โซเดียมคลอไรด์และซัลเฟต และอะซิโตไนไทรล์

ในการเตรียมสารละลายสำหรับการสอบเทียบ ขวดที่มีความจุ 25 และ 50 ซม. 3 และปิเปตที่สำเร็จการศึกษาที่มีความจุ 1, 2, 5 ซม. 3, สารละลายของ benz(a)pyrene ที่มีความเข้มข้น c = 1.0 μg/cm 3 และ ใช้อะซิโตไนไทรล์

1.3.2 การเตรียมตัวอย่าง

การสกัดของเหลวและของเหลว (LLE) ใช้เพื่อสกัดเบนโซ (เอ)ไพรีนออกจากน้ำ แยกเบนโซ (a) pyrene ด้วย n-hexane เพื่อจุดประสงค์นี้ น้ำที่เลือกที่มีปริมาตร 1,000 ซม. 3 จะถูกนำเข้าสู่กรวยแยกที่มีความจุ 2,000 ซม. 3 และ 25-30 ซม. 3 ของเอ็น-เฮกเซนและโซเดียมคลอไรด์ 20 ซม. 3 (NaCl) ที่มีความเข้มข้นของ c=0, 25 g/cm 3 ถูกเติมและทำการสกัด, เขย่าส่วนผสมเป็นเวลา 10-15 นาที หลังจากนั้นชั้นน้ำจะถูกแยกออกและทำการสกัดอีกสองครั้งโดยไม่ต้องเติม NaCl หลังจากผสมสารสกัดและทำให้แห้งแล้ว ให้ผ่านสารดูดความชื้น ซึ่งเป็นกรวยที่มีชั้นของโซเดียมซัลเฟตสูงอย่างน้อย 2 ซม. ไดคลอโรมีเทนที่มีปริมาตรเท่ากับ n-hexane สามารถใช้เป็นสารสกัดได้

หลังจากการสกัด สารสกัดจะระเหยเป็นปริมาตร 3 - 5 ซม. 3 บนเครื่องระเหยแบบหมุน - อุปกรณ์สำหรับการกำจัดของเหลวอย่างรวดเร็วโดยการกลั่นภายใต้แรงดันที่ลดลง สารตกค้างจะถูกถ่ายโอนไปยังหลอดทดลองที่มีความจุ 10 - 15 ซม. 3 และเติม n-hexane หลังจากนั้นสารละลายจะระเหยจนแห้งในสุญญากาศของปั๊มแรงดันน้ำ วางหลอดทดลองในอ่างน้ำที่ อุณหภูมิ 40 - 50 ° C สารตกค้างจะละลายในอะซิโตไนไทรล์ 0.2 - 0.5 ซม. 3 ความเข้มข้นที่ได้จะถูกเก็บไว้เป็นเวลาอย่างน้อย 15 นาที

1.3.3 การสำเร็จการศึกษา

การสำเร็จการศึกษาจะดำเนินการตาม 5 โซลูชั่นมาตรฐานที่มีความเข้มข้น 0.002; 0.01; 0.02; 0.05 และ 0.1 ไมโครกรัม/ซม.3 การเตรียมสารละลายสอบเทียบได้อธิบายไว้ในตารางที่ 1.5

ตารางที่ 1.5 การเตรียมสารละลายสอบเทียบ

	s, µg/cm3	c0, µg/cm3

สารละลายถูกสร้างขึ้นด้วยอะซิโตไนไทรล์

อย่างน้อยสองโครมาโตแกรมจะถูกบันทึกสำหรับแต่ละโซลูชัน รูปที่ 1.5 แสดงโครมาโตแกรมของเบนโซ(a)ไพรีนที่มีความเข้มข้น 0.002 ไมโครกรัม/ซม. 3

รูปที่ 1.5 Chromatogram ของ benz (a) pyrene ที่มีความเข้มข้น 0.002 μg / cm 3

ความคลาดเคลื่อนระหว่างพื้นที่ที่ได้รับไม่ควรเกิน 7% ของค่าเฉลี่ยเลขคณิต

จากข้อมูลที่ได้รับ กราฟการปรับเทียบจะถูกสร้างขึ้น (รูปที่ 1.6) ในรูปแบบของการพึ่งพาพื้นที่พีคบนความเข้มข้นของมวล เส้นโค้งการสอบเทียบต้องเป็นเส้นตรง สำหรับแต่ละสารละลาย ความเบี่ยงเบนของความเข้มข้นของมวลที่วัดตามลักษณะการสอบเทียบจากค่าที่ระบุไม่ควรเกิน 12% หากค่าเบี่ยงเบนเกินค่าที่ระบุ ให้ทำการสอบเทียบซ้ำ การสอบเทียบไม่เพียงดำเนินการก่อนการวัดเท่านั้น แต่ยังรวมถึงหลังจากเปลี่ยนคอลัมน์หรือระหว่างงานบำรุงรักษาโครมาโตกราฟี

รูปที่ 1.6 การพึ่งพาการสอบเทียบของพื้นที่พีคต่อความเข้มข้นของเบนโซ (เอ)ไพรีน (r 2 = 0.998)

1.3.4 ดำเนินการวิเคราะห์ HPLC

การหาค่าโครมาโตกราฟีของเบนซาไพรีนดำเนินการในคอลัมน์ Agilent 1200 HPLC ประสิทธิภาพของคอลัมน์ควรเป็นอย่างน้อย 5,000 แผ่นตามทฤษฎีโดยอิงจากพีคของเบนซาไพรีน เส้นผ่านศูนย์กลางภายในของเสาคือ 2 มม. คอลัมน์เต็มไปด้วยตัวดูดซับแบบย้อนกลับ (RPS) ในคำจำกัดความนี้ มีการใช้พรีคอลัมน์ที่ทำหน้าที่ป้องกัน เส้นผ่านศูนย์กลางด้านในของพรีคอลัมน์คือ 2 มม. บรรจุด้วย OFS เดียวกัน

ในฐานะของ OFS จะใช้ตัวดูดซับที่มีเฟสพันธะที่ได้รับบนพื้นฐานของซิลิกาเจล ในคำจำกัดความนี้ octadecyl silica gel (C 18) ที่มีขนาดอนุภาค 5 µm และพอลิสไตรีนไฮเปอร์ครอสลิงก์ที่ไม่เข้ากับน้ำซึ่งมีเส้นผ่านศูนย์กลางอนุภาค 3.2 µm และเส้นผ่านศูนย์กลางรูพรุนเฉลี่ย 20–40 E ถูกใช้เป็นตัวดูดซับ ตัวดูดซับนี้มีความเสถียรทางเคมี ที่ pH = 2–7 ประสิทธิภาพการแยกสารมั่นใจได้โดยพื้นที่ผิวที่สูงของอนุภาคตัวดูดซับ เช่นเดียวกับความสม่ำเสมอขององค์ประกอบตัวดูดซับและการบรรจุที่หนาแน่นสม่ำเสมอ ค่าความจุ (k) ของตัวดูดซับดังกล่าวคือ 9.86

เฟสเคลื่อนที่เป็นส่วนผสมของอะซิโตไนไทรล์ - น้ำ เตรียมสารชะในอัตราส่วนปริมาตร 8:2 ในเครื่องแก้วที่มีความจุ 1,000 ซม. 3 เติมน้ำ 200 ซม. 3 แล้วนำไปทำเครื่องหมายด้วยอะซิโตไนไทรล์ ทันทีก่อนใช้งาน สารชะจะถูกเก็บไว้เพื่อกำจัดแก๊สเป็นเวลาอย่างน้อย 4 ชั่วโมง เพื่อการขจัดแก๊สที่เร็วขึ้น ภาชนะที่มีสารชะจะถูกอพยพโดยเชื่อมต่อกับปั๊มฉีดน้ำแล้ววางลงในอ่างอัลตราโซนิก สารชะถูกจ่ายโดยวาล์วจ่ายยาแบบวนซ้ำ (หัวฉีด) ที่มีปริมาตรลูป 10 มม. 3 อัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่คือ 200 มม. 3 / นาที

ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ โครมาโตกราฟีจะใช้เวลา 20-30 นาที

1.3.5 การลงทะเบียนและการประมวลผลผลลัพธ์

ตรวจพบเบนโซไพรีนโดยใช้เครื่องตรวจจับเรืองแสง ขอแนะนำให้ลงทะเบียนโครมาโตแกรมที่ความยาวคลื่นกระตุ้น l ex = 365 นาโนเมตร และรีจิสเตอร์ความยาวคลื่น l รีจิสเตอร์ = 400 - 460 นาโนเมตร

เพื่อเพิ่มความไวในเทคนิคนี้ ความยาวคลื่นของการกระตุ้นและการปล่อยแสงโดยการเรืองแสงถูกตั้งโปรแกรมไว้ โหมดการเขียนโปรแกรมแสดงในตารางที่ 1 6.

ตารางที่ 1.6 โหมดการเขียนโปรแกรมเมื่อใช้ตัวตรวจจับเรืองแสง

โครมาโตแกรมที่ได้จากการวิเคราะห์น้ำแสดงไว้ในรูปที่ 1.7

รูปที่ 1.7 โครมาโตแกรมของเนื้อหา BP ในน้ำ

จุดสูงสุดของเบนซาไพรีนถูกกำหนดโดยเวลาคงอยู่ เนื่องจากเป็นลักษณะเชิงคุณภาพของเบนโซ (เอ)ไพรีน ในการหาปริมาณสารเบนโซ (เอ)ไพรีน ให้คำนวณพื้นที่พีค จากนั้นตามกราฟการสอบเทียบจะพบความเข้มข้น

หากความเข้มข้นของเบนโซ (เอ)ไพรีนสูงกว่าความเข้มข้นสูงสุดของสารละลายมาตรฐาน สารละลายที่วิเคราะห์แล้วจะถูกเจือจางและวิเคราะห์ตัวอย่างอีกครั้ง

ความไวในการหาเบนซาไพรีนด้วยวิธีนี้คือ 0.01 ไมโครกรัม/DM 3

1.4 การหาปริมาณเบน (a) pyrene ในน้ำโดย GC

1.4.1 การสุ่มตัวอย่างและการเตรียมการ

ส่วนสำคัญของการวิเคราะห์คือการเลือกและการเตรียมตัวอย่าง น้ำถูกถ่ายหลายครั้งด้วยช่วงเวลาหลายวัน หลังจากนั้นน้ำจะถูกกรองและเก็บตัวอย่าง 0.5 ลิตร โซเดียมคลอไรด์ถูกเติมลงในตัวอย่างและเก็บไว้ในตู้เย็นไม่เกินหนึ่งวัน

เพื่อให้ได้ข้อมูลที่เชื่อถือได้ BP จะถูกดึงออกจากตัวอย่างโดยวิธี LLE สารสกัดคือไดเอทิลอีเทอร์ การสกัดจะดำเนินการสามครั้ง สารสกัดสองครั้งแรกในปริมาณ 50 มล. ของสารสกัด เป็นครั้งที่สาม ปริมาตรของสารสกัดคือ 30 มล. สารสกัดทั้งหมดจะถูกรวมและระเหยในเครื่องระเหยแบบหมุนจนกว่าอีเธอร์จะถูกกำจัดออกจนหมด ตัวอย่างที่ได้จะละลายในน้ำมันเบนซิน 2 มล.

ก่อนการกำหนดหาความดันโลหิตในเชิงปริมาณ ส่วนประกอบของของผสมจะถูกแยกออกโดยโครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง (TLC)

TLC เป็นวิธีโครมาโตกราฟีที่มีพื้นฐานมาจากการใช้ชั้นบางๆ ของตัวดูดซับในฐานะเฟสที่อยู่กับที่

ก่อนแยกจานจะถูกแช่ในสารละลายคาเฟอีน 4% ในคลอโรฟอร์มและเปิดใช้งานในเตาอบที่อุณหภูมิ 100 ° C เพื่อขจัดสิ่งสกปรกออกจากจานหลังจากเย็นลงแล้วจะถูกล้างด้วยคลอโรฟอร์มและเปิดใช้งานอีกครั้งใน เตาอบเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 100 ประมาณ S.

ตัวอย่างที่ละลายในน้ำมันเบนซินจะถูกวางบนจานและโครมาโตกราฟี สารชะล้างเป็นส่วนผสมของไซโคลเฮกเซน - เอ็น-เฮกเซน ในอัตราส่วนปริมาตร 16:1

1.4.2 การหาปริมาณ

การวิเคราะห์เชิงปริมาณตามวิธีนี้ดำเนินการโดยโครมาโตกราฟีแบบแก๊สและของเหลวด้วยเครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออไนซ์ สำหรับการวิเคราะห์นั้นใช้โครมาโตกราฟี "Tsvet - 500" (รูปที่ 1.8) พร้อมเครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออไนซ์

รูปที่ 1.8 แก๊สโครมาโตกราฟี "สี - 500"

ก๊าซพาหะสำหรับการกำหนดนี้คือไนโตรเจน ไนโตรเจนถูกจ่ายที่อัตราการไหล 3 มล./นาที คอลัมน์ควอตซ์ของเส้นเลือดฝอยขนาด 25 ม. × 0.32 มม. ใช้สำหรับการวิเคราะห์ น้ำมันเมทิลซิลิโคน OV-101 ที่มีความหนาของฟิล์ม 0.4 µm ถูกใช้เป็นเฟสอยู่กับที่ การวิเคราะห์ดำเนินการในโหมดการตั้งโปรแกรมอุณหภูมิตั้งแต่ 210 ถึง 300°C ที่อัตรา 4°C/นาที ตัวอย่าง 1 ไมโครลิตรถูกฉีดโดยใช้ไมโครไซริงก์

รูปที่ 1.9 แสดง BP chromatogram ที่ได้จากวิธีนี้

รูปที่ 1.9 โครมาโตแกรมของ BP ที่ได้รับจาก GC (3-BP)

ในเชิงคุณภาพ BP ถูกกำหนดโดยเวลาการคงอยู่ เปรียบเทียบกับเวลาการกักเก็บของตัวอย่างมาตรฐาน ซึ่งคือ 28 นาที

ในเชิงปริมาณ BP ถูกกำหนดโดยวิธีมาตรฐานภายนอก ในการทำเช่นนี้ ให้สร้างกราฟการสอบเทียบสำหรับตัวอย่างมาตรฐานหลายๆ ตัวอย่างที่มีช่วงความเข้มข้น 1-20 ng/ml ความสูงสูงสุดถูกใช้เป็นสัญญาณวิเคราะห์

Benz (a) pyrene เป็นสารก่อมะเร็งในระดับอันตรายที่ 1 ที่เกี่ยวข้องกับ PAHs สามารถพบได้ในดิน น้ำ อากาศ อาหาร และเมื่อเข้าสู่ร่างกายก็จะสะสม ดังนั้นความมุ่งมั่นในวัตถุต่าง ๆ จึงมีความสำคัญ

MPC สำหรับ BP ค่อนข้างต่ำ ดังนั้นจึงใช้วิธีการที่ละเอียดอ่อนในการพิจารณา ความยากในการพิจารณายังอยู่ในข้อเท็จจริงที่ว่า นอกจาก BP แล้ว ตัวอย่างอาจมีไอโซเมอร์ เช่น benz(e)pyrene และ perylene ซึ่งเวลาการกักเก็บเกือบเท่ากับของ BP กล่าวคือ การมีอยู่ของไอโซเมอร์ทำให้ยากต่อการระบุสาร ปัญหานี้แก้ไขได้ด้วยการแยกส่วนผสมก่อนโดย TLC และใช้ตัวอย่าง BP มาตรฐาน

ในรายวิชานี้ มีการพิจารณาวิธีโครมาโตกราฟีหลายวิธีที่เหมาะสมกับการกำหนดเบนโซ (a) ไพรีน หลังจากทำงานเบื้องต้นกับวรรณคดีแล้ว การเลือกวิธีการสำหรับการกำหนดเชิงปริมาณก็สมเหตุสมผลแล้ว บนพื้นฐานของวิธีการนั้น วิธีการต่างๆ ได้ถูกเลือกและแสดงโครมาโตแกรมที่ได้จากวิธีการเหล่านี้

บรรณานุกรม

1. Traven VF เคมีอินทรีย์ ตำราสำหรับมหาวิทยาลัย: ใน 3 เล่ม / VF Traven - M.: BINOM. แล็บความรู้, 2556. --. - ต. 2. - 2556. - 517 น.

2. Grechishcheva N. Yu. ปฏิกิริยาของกรดฮิวมิกกับไฮโดรคาร์บอนอะโรมาติกโพลีนิวเคลียร์: ด้านเคมีและทางพิษวิทยา: วิทยานิพนธ์ระดับปริญญาดุษฎีบัณฑิต วิทยาศาสตร์: 02.00.13 / N. Yu. Grechishcheva - ม., 2000. - 157 น.

3.แพท 2466406 สหพันธรัฐรัสเซีย วิธีการกำหนดปริมาณเบนโซ (a) pyrene ในปัสสาวะโดยโครมาโตกราฟีของเหลว / Zaitseva N. V. , Ulanova T. S. , Kornazhitskaya T. D. , Kislitsina A. V. , Pshenichnikova E. O. , Permyakova T. S. - - หมายเลข 2011142553/15; ธ.ค. 20.10.11; สาธารณะ 10.11.12, กระทิง. หมายเลข 31.

4. ความเข้มข้นสูงสุดที่อนุญาต (MPC) ของสารเคมี: GN 2.1.7.2041-06 -- [แนะนำ 2549-02-07] - ม.: Standartinform, 2549. - 19.00 น.

5. Tsimbalyuk K. K. การกำหนดโพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน (PAHs) ในวัตถุสิ่งแวดล้อม (ทบทวน) / K. K. Tsimbalyuk, Yu. M. Denga, V. P. Antonovich // วิธีการและวัตถุของการวิเคราะห์ทางเคมี - 2556. - ต. 8 ลำดับที่ 2 - ส. 50 - 62.

6. Yu. A. Zolotov พื้นฐานของเคมีวิเคราะห์ ปัญหาทั่วไป. วิธีการแยก: ใน 2 เล่ม / Yu. A. Zolotov, E. N. Dorokhova, V. I. Fadeeva และคนอื่น ๆ เอ็ด ยู เอ โซโลโตวา -- ม.: สูงกว่า. ศก., 2545. --. --เจ้าชาย. 1. - 2545. - 351 น.

7. Tsarev N. I. แก๊สโครมาโตกราฟีที่ใช้งานได้จริง สื่อการสอนสำหรับนักศึกษาคณะเคมีในหลักสูตรพิเศษ "วิธีการวิเคราะห์แก๊สโครมาโตกราฟี" / N. I. Tsarev, V. I. Tsarev, I. B. Katrakov - Barnaul.: สำนักพิมพ์ของ Altai State University, 2000. - 156 p.

8. Drugov Yu. S. การวิเคราะห์แก๊สโครมาโตกราฟีของอากาศเสีย / Yu. S. Drugov, A. A. Rodin -- ม.: บีโนม. ห้องปฏิบัติการความรู้ 2558. -- 531 น.

9. Styskin E. L. โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงที่ใช้งานได้จริง / E. L. Styskin, L. B. Itsikson, E. V. Braude -- อ.: เคมี, 2529. -- 210 น.

10. Dmitrikov V. P. , Larionov O. G. , Nabivach V. M. การวิเคราะห์โพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอนโดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง // Uspekhi khimii - พ.ศ. 2529 - ต. 2 ลำดับที่ 4 - ส. 679 -700.

11. น้ำดื่ม. วิธีการกำหนดเนื้อหาของ benzo(a)pyrene: GOST 31860 - 2012. -- [แนะนำ 2014-01-01] - ม.: Standartinform, 2557. - 23.00 น. -- (มาตรฐานระหว่างรัฐ).

12. Borsch N. A. การหาค่า benzapyrene โดยโครมาโตกราฟีของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูง / N. A. Borsch, S. V. Sidorenko // แนวโน้มสมัยใหม่ในการพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี - 2559. - V. 1, No. 2 - S.37 - 41.

13. Proskurina N. A. การหาปริมาณโพลีนิวเคลียร์อะโรมาติกไฮโดรคาร์บอนในผลิตภัณฑ์อาหารที่มีไขมันโดยใช้การสกัดด้วยสถานะของแข็ง / N. A. Proskurina, V. A. Davankov, M. M. Ilyin // กระบวนการดูดซับและโครมาโตกราฟี - 2552. - ต. 9 ลำดับที่ 2 - ส. 167 - 176.

14. Nazarkina S. G. Nazarkina S. G. , Purygin P. P. , Bulanova A. V. , Larionov O. G. แก๊สโครมาโตกราฟีในการควบคุมระบบนิเวศน์ของน้ำละลาย // Vestnik SamGU - 2000. - ต. 2, . -- ส. 152 -156.

โฮสต์บน Allbest.ru

...

เอกสารที่คล้ายกัน

อะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน: ลักษณะทั่วไป ศัพท์เฉพาะและไอโซเมอร์ สมบัติทางกายภาพและเคมีของอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน กลไกของปฏิกิริยาของการแทนที่อิเล็กโทรฟิลิกและนิวคลีโอฟิลิกในอนุกรมอะโรมาติก การใช้ arenes ความเป็นพิษของพวกเขา

บทคัดย่อ เพิ่มเมื่อ 12/11/2011


ข้อมูลทั่วไปเกี่ยวกับไวนิลคลอไรด์ - ก๊าซไม่มีสี พิษรุนแรงที่มีผลต่อการกลายพันธุ์ สารก่อมะเร็ง และก่อการก่อมะเร็ง ประวัติการค้นพบไวนิลคลอไรด์ คุณสมบัติทางเคมีและวิธีการผลิต ไฮโดรคลอริเนชันของแก๊สตัวเร่งปฏิกิริยาของอะเซทิลีน

การนำเสนอ, เพิ่ม 08/10/2015


การจำแนกอัลดีไฮด์ โครงสร้าง การเกิดขึ้นตามธรรมชาติ ฤทธิ์ทางชีวภาพ การประยุกต์ใช้ การตั้งชื่อคีโตน ประวัติการค้นพบ คุณสมบัติทางกายภาพและทางเคมี ปฏิกิริยาของการเติมนิวคลีโอฟิลิก วิธีทางเคมีในการระบุอัลดีไฮด์

การนำเสนอ, เพิ่ม 05/13/2014


คุณสมบัติของน้ำและวิธีการทำให้อ่อนตัว ข้อกำหนดสำหรับความกระด้างของน้ำที่ใช้ในการผลิตความร้อนและพลังงาน พื้นฐานทางทฤษฎีและวิธีการกำหนดความกระด้างของน้ำโดยวิธีเชิงซ้อน การสุ่มตัวอย่าง รีเอเจนต์ ความมุ่งมั่น

ภาคเรียนที่เพิ่ม 10/07/2552


แนวคิดและการตั้งชื่อฟีนอล คุณสมบัติพื้นฐานทางกายภาพและเคมีของพวกมัน ปฏิกิริยาลักษณะเฉพาะ วิธีการรับฟีนอลและขอบเขตของการใช้งานจริง คุณสมบัติเป็นพิษของฟีนอลและลักษณะของผลกระทบต่อร่างกายมนุษย์

ภาคเรียนที่เพิ่ม 03/16/2011


ประวัติการค้นพบสารให้ความหวานคุณสมบัติของมัน วิธีการกำหนดแอสปาร์แตม อุปกรณ์ เครื่องมือ และรีเอเจนต์ สารให้ความหวานในร่างกายมนุษย์ การศึกษาทางพิษวิทยาและทางคลินิกของแอสพาเทม การบริโภคอาหารที่มีกรดอะมิโนฟีนิลอะลานีน

บทคัดย่อ เพิ่ม 04.10.2011


พิษของฟีนอลและฟอร์มัลดีไฮด์ต่อสิ่งมีชีวิต วิธีการกำหนดเชิงคุณภาพ การหาปริมาณฟีนอลในตัวอย่างน้ำธรรมชาติ วิธีการกำหนดความเข้มข้นขั้นต่ำในการตรวจหาสารพิษอินทรีย์ในน้ำ

ภาคเรียนที่เพิ่ม 05/20/2013


โครงสร้างทางเคมี คุณสมบัติ และความสำคัญทางชีวภาพของวิตามินซี ความต้องการในชีวิตประจำวัน การทดลองหาไอโอโดเมตริก วิธีการเชิงปริมาณและทางเคมีสำหรับการวิเคราะห์ปริมาณวิตามินในผลิตภัณฑ์อาหารและการเตรียมวิตามิน

ภาคเรียนที่เพิ่ม 03/18/2013


ลักษณะทั่วไปและคุณสมบัติทางเคมีหลักของอนุพันธ์อะซิตามิโนอะโรมาติก วิธีการกำหนดความถูกต้องของอนุพันธ์อะโรมาติกอะซิตามิโน การใช้อนุพันธ์อะซิตามิโนในเภสัชวิทยาและผลกระทบต่อร่างกายมนุษย์

กระดาษภาคเรียนเพิ่ม 11/11/2009


ลักษณะทั่วไปในโครงสร้างของโมเลกุลของแอลกอฮอล์โมโนไฮดริกและโพลีไฮดริก คุณสมบัติของเอทิลแอลกอฮอล์ ผลของแอลกอฮอล์ต่อร่างกายมนุษย์ การสร้างความสัมพันธ์ระหว่างวัสดุตั้งต้นและผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยา คุณสมบัติทางเคมีของโพลีไฮดริกแอลกอฮอล์

หน้า 1

หน้า 2

หน้า 3

หน้า 4

หน้า 5

หน้า 6

หน้า 7

หน้า 8

หน้า 9

หน้า 10

หน้า 11

หน้า 12

หน้า 13

หน้า 14

หน้า 15

หน้า 16

หน้า 17

หน้า 18

หน้า 19

GOST 24104.

เครื่องระเหยแบบหมุน IR-1M.

GOST 25336.

น้ำอาบ.

เครื่องกวนแบบแม่เหล็ก MM-ZM พร้อมเครื่องทำความร้อนไฟฟ้า

Chromatoscope ultraviolet illuminator ที่มีช่วงสเปกตรัม 250 - 700 nm และหลอด BUV-15 เป็นแหล่งของรังสียูวี

ตู้กระจกโครมาโตกราฟี 40 x 40 x 40 ซม.

แผ่นกระจกสำหรับโครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง 5 x 20 และ 20 x 20 ซม.

คอลัมน์โครมาโตกราฟีแก้วยาว 500 มม. และเส้นผ่านศูนย์กลาง 20 มม. พร้อมปลายดึงที่ด้านล่างและอ่างเก็บน้ำที่มีความจุ 50 - 60 ซม. 3 ПШ 14/23

ตู้เย็น ХПТ-2-400-29/32 ХС หรือ ХШ-1-400-29/32 ХС ตาม GOST 25336.

ควบคู่ไปกับประเภท AIO-14/23-50 TS หรือ AIO-14/23-14/23-65 TS ตาม GOST 25336.

ไม้บรรทัดวัดส่วนมาตราส่วน 0.1 cm GOST 427.

Dephlegmator 250-19/26-29/32 TC หรือ 300-19/26-29/32 ตาม GOST 25336.

หัวฉีด П-1-19/26-14/23-14/23 ТС หรือ Н-2-19/26-14/23 ТС ตาม GOST 25336.

GOST 25336.

GOST 25336. กระบอกสูบไล่ระดับ 1-100, 1-250 หรือ 3-100, 3-250 GOST 25336.

แก้วเคมี B-1-100 หรือ B-1-150 ตามมาตรฐาน GOST 25336.

ขวด K-1-100-29/32 THS, K-1-25R-29/32 THS, K-1-500-29/32 THS หรือ P-1-500-29/32 THS ตาม GOST 25336.

ช่องทาง Buchner 1 หรือ 2 หรือ 3 GOST 9147.

ถ้วยสำหรับชั่งน้ำหนัก (กล่อง) SV-14/8 หรือ SV-19/9 หรือ SV-24/10 หรือ SV-34/12 ตาม GOST 25336.

เข็มฉีดยาไมโครชนิด MSH-10 เส้นเลือดฝอยแก้ว

ตัวบ่งชี้กระดาษสากล

กระดาษกรองสำหรับห้องปฏิบัติการ GOST 12026.

มีดผ่าตัดหรือไม้พายแบบบาง

เอทิลแอลกอฮอล์แก้ไขตาม GOST R 51652หรือเอทิลแอลกอฮอล์ที่แก้ไขแล้ว เกรดทางเทคนิค GOST 18300.

อะซิโตไนไตรล์ตามเอกสารเชิงบรรทัดฐาน

ผงเซลลูโลส microcrystalline ตามเอกสารเชิงบรรทัดฐาน

GOST R 51650-2000

เบนซ์ (v) ไครซีน เนื้อหาของสารหลักไม่น้อยกว่า 98%.

เซฟาเด็กซ์ LH-20.

ซิลิกาเจลของแบรนด์ ASKG ตามเอกสารเชิงบรรทัดฐาน

อนุญาตให้ใช้เครื่องมือวัดอื่นที่มีคุณสมบัติทางมาตรวิทยาและอุปกรณ์ที่มีลักษณะทางเทคนิคตลอดจนรีเอเจนต์และวัสดุที่มีคุณภาพไม่ต่ำกว่าข้างต้น

5.2 การเตรียมตัวสอบ

5.2.1 การเตรียมตัวทำละลาย

ตัวทำละลาย (n.hexane, เอทิลแอลกอฮอล์, อะซิโตน, เบนซิน) ถูกกลั่นด้วยวิธีปกติด้วยคอนเดนเซอร์รีฟลักซ์

ไดเมทิลฟอร์มาไมด์ถูกกลั่นโดยการเติมเบนซีน 120 ซม. 3 และน้ำ 36 ซม. 3 ต่อตัวทำละลาย 1 dm 3 ลงในขวดกลั่น

5.2.2 การเตรียมเซลลูโลสอะซิเตท

ไมโครคริสตัลลีนเซลลูโลส (50.0 ± 2.0) กรัมวางในขวดก้นแบนที่มีความจุ 500 ซม. 3 ส่วนผสมของเบนซีนหรือโทลูอีน 150 ซม. 3 อะซิติกแอนไฮไดรด์ 70 ซม. 3 และกรดซัลฟิวริก 0.3 ซม. 3 ในขวดแยกต่างหากจะถูกเพิ่ม ผสมส่วนผสมของปฏิกิริยาด้วยเครื่องกวนแม่เหล็กเป็นเวลา 6 - 8 ชั่วโมง ทิ้งไว้โดยไม่กวนอีก 18 ชั่วโมง หลังจากนั้นจึงเทเฟสของเหลวออก และเทสารตกค้างลงในเอทิลแอลกอฮอล์ 300 ซม. 3 คนให้เข้ากัน ทิ้งไว้ในแอลกอฮอล์เป็นเวลา 24 ชั่วโมง จากนั้นเซลลูโลสจะถูกกรองบนกรวย Buchner ล้างด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ 100 ซม. 3 และน้ำกลั่นจนกว่าการซักจะเป็นกลาง (ตามกระดาษแสดง)

จากนั้นตรวจสอบกิจกรรมโครมาโตกราฟีของเซลลูโลสอะซิติเลต ในการทำเช่นนี้ 3-4 ชั่วโมงก่อนการวิเคราะห์ ให้เตรียมส่วนผสมของเอทิลแอลกอฮอล์ อะซิโตน และน้ำ ในอัตราส่วนปริมาตร 60:25:15 น. แล้วเทลงในห้องโครมาโตกราฟีที่เรียงรายไปด้วยแถบกระดาษกรอง ความสูงของชั้นตัวทำละลายควรอยู่ที่ 1.5–2 ซม. เส้นเลือดฝอยจนถึงจุด 5 ไมโครลิตรของสารละลายเบนซ์ (ก) ไพรีนที่มีความเข้มข้นของมวล 1 ไมโครกรัมต่อซม. 3 เพลตถูกวางไว้ในห้องโครมาโตกราฟีและปล่อยทิ้งไว้ในห้องจนกว่าระดับตัวทำละลายจะเพิ่มขึ้นอย่างน้อย 100 มม. จากเส้นเริ่มต้น ในตอนท้ายของโครมาโตกราฟี เพลตจะถูกลบออก ตากในอากาศ และภายใต้หลอดไฟของเครื่องฉายรังสีอัลตราไวโอเลต จะสังเกตเห็นจุดสีน้ำเงินเรืองแสงของเบนโซ (เอ)ไพรีน วัดระยะทางจากเส้นเริ่มต้นไปยังด้านหน้าตัวทำละลายและตรงกลางของจุดเบนโซ (a)pyrene คำนวณค่าของ Rj ซึ่งประมาณความเร็วของการเคลื่อนที่ของเบนโซ (เอ)ไพรีนบนจานตามสูตร:

โดยที่ XBP คือระยะทางจากเส้นเริ่มต้นถึงกึ่งกลางของจุดเบนโซ (a)pyrene, mm;

L คือระยะทางจากเส้นเริ่มต้นถึงด้านหน้าตัวทำละลาย mm.

ค่า Rj ของเบนโซ (a) pyrene ควรเป็น 0.1

ในการเตรียมจานทำงาน อะซิติเลตเซลลูโลส 5 กรัมจะถูกแขวนไว้ในเอทิลแอลกอฮอล์ขนาด 20 ซม. 3 และเทลงบนจานขนาด 20x20 ซม. ให้เป็นชั้นเท่ากัน

5.2.3 การเตรียมสารละลายมาตรฐานของเบนโซ(a)ไพรีนและเบนโซ(b)ไครซีน

(10.0+0.2) มก. ของเบนโซ (a) ไพรีนและเบนโซ (ข) ไครซีนถูกชั่งน้ำหนักลงในถ้วยชั่งน้ำหนัก (ถุงขวด) ตัวอย่างจะถูกถ่ายโอนในเชิงปริมาณไปยังขวดปริมาตรที่มีความจุ 100 ซม. 3: benz(a)pyrene-benzene, benzo(c)chrysene-acetonitrile จากนั้นปริมาตรของสารละลาย benz(a)pyrene จะถูกปรับเป็นเครื่องหมายด้วยเบนซิน ปริมาตรของสารละลายคือ benz(c)chrysene-acetonitrile สารละลายที่ได้มีความเข้มข้นของมวล 100 ไมโครกรัม/ซม. 3 สารละลายถูกเก็บไว้ในที่มืดเย็นไม่เกินสามเดือน

5.2.4 การเตรียมสารละลายในการทำงานของเบนโซ(เอ)ไพรีนและเบนโซ(ข)ไครซีน

สารละลายทำงานเตรียมโดยการเจือจางสารละลายมาตรฐานโดยใช้ปิเปตที่มีความจุ 1, 5 และ 10 ซม. 3 และขวดปริมาตรที่มีความจุ 100 ซม. 3 ปริมาตรของสารละลายจะถูกปรับให้เข้ากับเครื่องหมายด้วยตัวทำละลายที่เหมาะสม ผสมและจัดเก็บ ในที่มืดเย็นไม่เกินหนึ่งเดือน

การเตรียมสารละลายเบนโซ(เอ)ไพรีนที่มีความเข้มข้นของมวล 1.0 ไมโครกรัม/ซม. 3 (กำหนดโดยสเปกโตรฟลูออริเมทรี): 1.0 ซม. 3 ถูกนำออกจากสารละลายมาตรฐานและถ่ายโอนไปยังขวดปริมาตรที่มีความจุ 100 ซม. 3 ; ปริมาตรของสารละลายถูกปรับให้เป็นเครื่องหมายด้วยน้ำมันเบนซิน

การเตรียมสารละลายเบนซ์ (เอ)ไพรีนที่มีความเข้มข้นมวล 0.25: 1.0 และ 5.0 ไมโครกรัม/ซม. 3 (กำหนดโดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง): 0.25 นำมาจากสารละลายมาตรฐาน 1.0; 5.0 ซม. 3 ตามลำดับ และถ่ายโอนไปยังขวดปริมาตรที่มีความจุ 100 ซม. 3 ; ปริมาตรของสารละลายถูกปรับให้เข้ากับเครื่องหมายด้วยอะซิโตไนไทรล์

การเตรียมสารละลายเบนโซ(b)ไครซีนที่มีความเข้มข้นมวล 0.5 และ 10 ไมโครกรัม/ซม. 3 : 0.5 และ 10 ซม. 3 นำมาจากสารละลายมาตรฐานตามลำดับ และถ่ายโอนลงในขวดปริมาตรที่มีความจุ 100 ซม. 3 ; ปริมาตรของสารละลายแต่ละชนิดถูกสร้างจนถึงเครื่องหมายด้วยอะซีโตไนไทรล์

5.2.5 การเตรียมสารละลายสอบเทียบ

เพื่อเตรียมสารละลายสอบเทียบของส่วนผสมของเบนโซ (a) pyrene และ benzo (b) ไครซีน ปริมาตรของสารละลายมาตรฐานของ benzo (a) pyrene ที่มีความเข้มข้นของมวล 100 μg / cm 3 และสารละลายในการทำงานของเบนโซ (b )ความเข้มข้นของมวลไครซีน 10 ไมโครกรัม/ซม. 3 ให้ปริมาตรอยู่ที่เครื่องหมายด้วยอะซิโตไนไทรล์ สารละลายที่ได้จะถูกผสมและเก็บไว้ในที่มืดและเย็นไม่เกินหนึ่งเดือน

ตารางที่ 2

วิธีการแก้ ปริมาตรของสารละลายเริ่มต้น cm3 ความเข้มข้นของมวลในสารละลายสอบเทียบ µg/cm 3 Benz (a) ความเข้มข้นของมวล pyrene 100 μg / cm3 เบนซ์ (v) ความเข้มข้นของมวลไครซีน 10 ไมโครกรัม / ซม. 3 เบนซ์(ก)ไพรีน เบนซ์(v)chrysene

5.3 การดำเนินการทดสอบ

5.3.1 การแยกเบนโซ(เอ)ไพรีนออกจากผลิตภัณฑ์

ในขวดก้นกลมหรือขวดก้นแบนที่มีความจุ 100 ซม. 3 วางตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีน้ำหนัก 10 กรัมวางสารละลายที่ประกอบด้วยโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ 4 กรัมใน 50 ซม. 3 ของเอทิลแอลกอฮอล์ 92% เพิ่ม เนื้อหาของขวดผสมโดยการเขย่า กระติกน้ำเชื่อมต่อกับคอนเดนเซอร์รีฟลักซ์และให้ความร้อนในอ่างน้ำหรือเครื่องกวนแม่เหล็กโดยผสมปฏิกิริยาเดือดเป็นเวลา 3 ชั่วโมง จากนั้นเติมน้ำกลั่น 100 ซม. 3 ลงในขวดผ่านตู้เย็น มวลปฏิกิริยาถูกทำให้เย็นลงจนถึงอุณหภูมิห้อง หลังจากเย็นตัวลง มวลของปฏิกิริยาจะถูกถ่ายโอนไปยังกรวยแยกที่มีความจุ 500 ซม. 3 . หากหลังจากการไฮโดรไลซิส สารตกค้างที่เป็นของแข็งยังคงอยู่ในมวลปฏิกิริยา จะถูกแยกบนกรวย Buchner ล้างสิ่งตกค้างบนตัวกรองด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ร้อน 30 ซม. 3 เฟสของเหลวของมวลปฏิกิริยาใช้สำหรับการสกัด ในกรวยแยก เพิ่ม 30 ซม. 3 n.เฮกเซน เนื้อหาของกรวยถูกเขย่าและทิ้งไว้เพื่อแยกของเหลว ในกรณีของการเกิดอิมัลชัน จะมีการเติมเอทิลแอลกอฮอล์ 20 ซม. 3 ลงในส่วนผสมในกรวยแยก หลังจากแยกจากกัน เฟสแอลกอฮอล์ที่มีน้ำต่ำจะถูกเทลงในขวด และสารสกัดเฮกเซนจะถูกเทลงในกรวยแยกอีกช่องทางหนึ่ง การบำบัดมวลปฏิกิริยานี้ดำเนินการอีกสองครั้ง โดยใช้เอ็น-เฮกเซน 30 ซม. 3 ในการสกัดและเอทิลแอลกอฮอล์เพื่อแยกอิมัลชันในส่วน 20 ซม. 3

เมื่อสกัดเสร็จแล้ว สารสกัดเฮกเซนที่รวมกันจะถูกล้างในกรวยแยกด้วยน้ำกลั่น 3 ครั้งโดย 30 ซม. 3 สารสกัดจะถูกถ่ายโอนไปยังขวดก้นกลมที่มีความจุ 100 ซม. 3 กรองผ่านชั้นของแอนไฮดรัส โซเดียมซัลเฟตบนกรวยกรองที่มีรูพรุน สารละลายถูกระเหยบนเครื่องระเหยแบบหมุนให้ได้ปริมาตร 50 ซม. 3 ที่อุณหภูมิอ่างน้ำไม่เกิน 60 °C

สารสกัดที่ลอกออกหนึ่งตัวจะถูกถ่ายโอนไปยังกรวยแยกที่มีความจุ 500 ซม. 3 และเติมส่วนผสมของไดเมทิลฟอร์มาไมด์และน้ำ 50 ซม. 3 ในอัตราส่วนปริมาตร 9:1 เขย่าส่วนผสมอย่างแรงเป็นเวลา 1 นาที หลังจากแยกเฟส ส่วนผสมด้านล่างจะถูกเทลงในขวดก้นแบนที่มีความจุ 200 ซม. 3 และ 50 ซม. 3 ของส่วนผสมของไดเมทิลฟอร์มาไมด์และน้ำจะถูกสกัดอีกครั้งจากเฮกเซนด้านบน ชั้น. ชั้นเฮกเซนถูกทิ้ง สารสกัดไดเมทิลฟอร์มาไมด์ที่รวมกันในขวดก้นแบนจะถูกถ่ายโอนไปยังกรวยแยก เติมน้ำกลั่น 100 ซม. 3 และสกัดจากเฟสที่เป็นน้ำด้วยเฮกเซนสามครั้งใน 50 ซม. 3 เฟสที่เป็นน้ำจะถูกทิ้งและสารสกัดเฮกเซนจะถูกล้างด้วยน้ำสามครั้ง 30 ซม. 3 ถ่ายโอนไปยังขวดก้นแบนเติมโซเดียมซัลเฟตปราศจากน้ำ 10 กรัมและบ่มเป็นเวลาหนึ่งชั่วโมง n.เฮกเซนจะระเหยในการหมุน เครื่องระเหยที่มีปริมาตร 1.5 - 2.0 ซม. 3 ตัวทำละลายที่เหลือจะถูกลบออก

GOST R 51650-2000

การไหลของอากาศผ่านสุญญากาศที่เชื่อมต่อกับปั๊มฉีดน้ำ สารตกค้างในขวดจะละลายในเอทิลแอลกอฮอล์ 0.5 ซม. 3

Sephadex LH-20 ชั่งน้ำหนัก (2.5 ± 0.2) กรัมลงในแก้วที่มีความจุ 100 ซม. 3 ใส่เอทิลแอลกอฮอล์ 20 ซม. 3 แล้วปล่อยให้บวม 3-4 ชั่วโมง จากนั้นเทเจลล้างด้วยขนาดเล็ก ปริมาณแอลกอฮอล์ในคอลัมน์โครมาโตกราฟีแบบแก้ว ปล่อยให้ตัวทำละลายระบายออกในลักษณะที่ชั้นแอลกอฮอล์เหนือชั้นดูดซับยังคงอยู่อย่างน้อย 2 มม. ส่วนที่เหลือของสารสกัดจากขวดจะถูกนำไปใช้กับคอลัมน์ที่เตรียมไว้ด้วยปิเปตล้างออกจากขวดสามครั้งด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ในส่วน 0.5 ซม. 3 . การชะจากคอลัมน์ของโพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอนรวมถึงเบนโซ (a) pyrene ดำเนินการด้วยเอธานอล 40 ซม. 3 เศษส่วนแรกของ 12 ซม. 3 จะถูกทิ้งและส่วนที่สองของ 25 ซม. 3 จะถูกรวบรวม อัตราการชะด้วยตัวทำละลาย 0.5 ซีซี/นาที มีให้โดยการใช้แรงดันเกินเล็กน้อยกับกระแสอากาศหรือไนโตรเจนผ่านหัวฉีดที่เชื่อมต่อกับโบลเวอร์หรือขวดแก๊ส ควรจ่ายแก๊สผ่านหลอดแก้วที่เติมซิลิกาเจล

คอลัมน์ที่มี Sephadex LH-20 สามารถใช้ซ้ำได้ เมื่อต้องการทำเช่นนี้ เพื่อป้องกันไม่ให้ตัวดูดซับแห้งหลังจากการแยกส่วน คอลัมน์จะถูกล้างด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ 25 ซม. 3 และตัวอย่างต่อไปจะถูกนำไปใช้

สารละลายของเศษส่วนที่สองจะถูกถ่ายโอนไปยังขวดรูปลูกแพร์ที่มีความจุ 50 ซม. 3 ตัวทำละลายจะระเหยเป็นปริมาตร 0.5 - 1.0 ซม. 3 สารตกค้างจะถูกลบออกในกระแสอากาศหรือไนโตรเจน

เศษส่วนที่ได้รับซึ่งมีเบนโซ(เอ)ไพรีนถูกวิเคราะห์เพิ่มเติมโดยโครมาโตกราฟีของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูงหรือวิธีสเปกโตรฟลูออไรเมตริก

ในเวลาเดียวกัน มีการทดลองควบคุม โดยดำเนินการวิเคราะห์ทุกขั้นตอนโดยใช้รีเอเจนต์ตามขั้นตอน แต่ไม่ต้องชั่งน้ำหนักผลิตภัณฑ์

5.3.2 การหาปริมาณเบน (a) pyrene โดยโครมาโตกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง

5.3.2.1 เงื่อนไขโครมาโตกราฟี

เงื่อนไขของโครมาโตกราฟีจะถูกเลือกขึ้นอยู่กับชนิดของโครมาโตกราฟีของเหลวและคอลัมน์โครมาโตกราฟีที่ใช้

ตัวอย่างเช่น สามารถให้เงื่อนไขต่อไปนี้สำหรับการกำหนดโครมาโตกราฟีของเบนโซ (เอ)ไพรีนได้

โครมาโตกราฟีของเหลว AIex-334 พร้อมเครื่องตรวจจับเรืองแสง Kratos FS-970

คอลัมน์ Supelcosil LC-PAM แกรนูล 5 ไมครอน ความยาว 150 มม. เส้นผ่านศูนย์กลาง - 4.6 มม.

เครื่องตรวจจับฟลูออโรเมตริก: ความยาวคลื่นกระตุ้น 300 นาโนเมตร, ตัวกรองการปล่อย - 418 นาโนเมตร

เฟสเคลื่อนที่: อะซิโตไนไทรล์และน้ำในอัตราส่วนปริมาตร 8:2

อัตราการชะ - 2.0 ซม. 3 /นาที

ปริมาตรของตัวอย่างที่ฉีดคือ 20 ไมโครลิตร

ความไวของเครื่องขยายเสียงถูกเลือกเพื่อให้ความเข้มของสัญญาณเบนโซ (a) pyrene และมาตรฐานภายใน - benzo (b) ไครซีนไม่เกิน 95% ของสเกล

เวลาวิเคราะห์ - 15 นาที; เวลาเก็บรักษาเบนโซ(a)ไพรีน - 5 นาที, เบนโซ(b)ไครซีน -13 นาที

สารละลายที่วิเคราะห์แล้วจะถูกโครมาโตกราฟีสองครั้งภายใต้สภาวะเดียวกัน พื้นที่พีคถูกวัดโดยใช้ผู้รวมระบบหรือด้วยตนเองเป็นผลคูณของความสูงพีคและความกว้างที่ความสูงครึ่งหนึ่ง

การกำหนดปริมาณเบนโซ (ก) ไพรีนดำเนินการโดยวิธีมาตรฐานภายในหรือโดยวิธีการเพิ่มเติม

5.3.2.2 การหาปริมาณเบนโซ (เอ) ไพรีนในสารละลาย (สารสกัด) ที่ได้รับตาม 5.3.1 โดยวิธีมาตรฐานภายใน

เมื่อใช้วิธีการประเมินเชิงปริมาณนี้ โครมาโตกราฟีจะได้รับการปรับเทียบเบื้องต้นโดยใช้สารละลายสำหรับการสอบเทียบที่จัดเตรียมตามข้อ 5.2.5

ภายใต้เงื่อนไขที่ระบุไว้ใน 5.3.2.1 ให้บันทึกโครมาโตแกรมสามแบบสำหรับแต่ละสารละลายที่เตรียมไว้ และวัดพื้นที่พีคของเบนโซ(a)ไพรีนและเบนโซ(b)ไครซีน หาค่าเฉลี่ยเลขคณิตของพื้นที่พีคของเบนโซ(a)ไพรีนและเบนโซ(b)ไครซีน คำนวณจากสามโครมาโตแกรม

ค่าสัมประสิทธิ์การสอบเทียบ K คำนวณโดยสูตร

โดยที่ และ และ 2 คือมวลของ benz (a) pyrene (/l]) และ benzo (b) chrysene (t 2), μg ที่ใส่เข้าไปในโครมาโตกราฟี 5) และ ^2 - พื้นที่พีคของ benz(a)pyrene (.9]) และ benzo(b)chrysene (A^), cm 3 .

ค่าสัมประสิทธิ์การสอบเทียบ K ถูกคำนวณสำหรับแต่ละสารละลาย

ค่าของมันไม่ควรแตกต่างจากค่าเฉลี่ยเลขคณิตของปัจจัยการสอบเทียบจากผลลัพธ์ทั้งหมดมากกว่า 10%

ด้วยความยาวคลื่นกระตุ้น 300 นาโนเมตรและตัวกรองการปล่อย 418 นาโนเมตร ค่าของปัจจัยการสอบเทียบคือ 9.5

ก่อนเริ่มการวิเคราะห์ที่ขั้นตอนของการเตรียมตัวอย่างสำหรับการไฮโดรไลซิสแบบอัลคาไลน์ จะมีการเติมสารละลายเบนโซ(b)ไครซีนที่มีความเข้มข้นของมวล 0.5 ไมโครกรัม/ซม. 3 ลงในตัวอย่างผลิตภัณฑ์และตัวอย่างกลุ่มควบคุม 50 ไมโครลิตร ตัวอย่างทั้งสองจะผ่านขั้นตอนการทดสอบทั้งหมดที่ระบุไว้ใน 5.3.1 กากแห้งถูกละลายในอะซีโตไนไทรล์ 200 ไมโครลิตร

ภายใต้เงื่อนไขที่ระบุใน 5.3.2.1 ให้บันทึกโครมาโตแกรมของสารละลายของ benz (a) pyrene ที่มีความเข้มข้นของมวล 100 μg / cm 3 และสารละลายของ benzo (b) chrysene ที่มีความเข้มข้นของมวล 100 μg / cm 3 ให้สังเกตเวลาปล่อยของ benz (a) pyrene และ benz ( c) chrysena จากนั้น บันทึกโครมาโตแกรมของตัวอย่างกลุ่มควบคุมด้วยการเติมเบนโซ(b)ไครซีนและตัวอย่างผลิตภัณฑ์ด้วยการเติมเบนโซ(b)ไครซีนแบบเดียวกัน วัดพื้นที่ของพีคของเบนโซ(a)ไพรีนและเบนโซ(b)ไครซีนบนโครมาโตแกรมของตัวอย่างผลิตภัณฑ์และตัวอย่างควบคุม

โครมาโตแกรมสองอันถูกบันทึกสำหรับแต่ละตัวอย่าง จากสองโครมาโตแกรมคำนวณค่าเฉลี่ยเลขคณิตของพื้นที่พีคของเบนโซ (a) pyrene และ benzo (b) ไครซีน

จากข้อมูลที่ได้รับ มวลของเบนโซ(a)ไพรีน, ไมโครกรัม, ถูกกำหนดในตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ m\ และตัวอย่างของการทดลองควบคุม ม. 2 .

“72 คือมวลของเบนโซ(เอ)ไพรีนในตัวอย่างของการทดลองกลุ่มควบคุม, ไมโครกรัม; t st คือมวลของเบนโซ(v)ไครซีนที่นำเข้าในตัวอย่างผลิตภัณฑ์และตัวอย่างควบคุม ไมโครกรัม;

S"] และ S 2 - พื้นที่พีคของเบนโซ(a)ไพรีนบนโครมาโตแกรมของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ (.S"]) และตัวอย่างควบคุม (.S/), ซม. 2 ;

L/, L/ - พื้นที่พีคของ benz(b)chrysene บนโครมาโตแกรมของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ (.SS) และตัวอย่างควบคุม (L/), cm 2 ;

K คือปัจจัยการสอบเทียบที่กำหนดขึ้นตาม 5.3.2.2

5.3.2.3 การหาปริมาณเบนโซ (เอ) ไพรีนในสารละลาย (สารสกัด) ที่ได้รับตาม 5.3.1 โดยวิธีการเติม

สำหรับการหาปริมาณเมื่อใช้วิธีการบวก ตัวอย่างของการทดลองควบคุมจะถูกวิเคราะห์พร้อมกันกับตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ เศษส่วนที่แยกได้จากตัวอย่างผลิตภัณฑ์และการควบคุมตาม 5.3.1 ถูกละลายในอะซิโตไนไทรล์ 400 ไมโครลิตร สารละลายที่ได้จะถูกแบ่งออกเป็นสองส่วน โดยนำส่วนที่เล็กกว่า (40 ไมโครลิตร) ไปใส่ในหลอดทดลองหรือขวดทรงลูกแพร์

บันทึกโครมาโตแกรมของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ ตัวอย่างควบคุม และโครมาโตแกรมของสารละลาย benz(a)pyrene ด้วยความเข้มข้นของมวล 0.25 ไมโครกรัม/ซม. 3 สังเกตเวลาที่ปล่อยเบนโซ (เอ)ไพรีน

ในส่วนที่เหลือของตัวอย่างผลิตภัณฑ์และประสบการณ์การควบคุม (360 ไมโครลิตร) ให้เติมสารละลายเบนโซ(a)ไพรีนเข้มข้น 10 - 20 ไมโครลิตรเพิ่ม 10 - 20 ไมโครลิตร ผลลัพธ์ที่ได้จะได้รับการแนะนำอีกครั้งในโครมาโตกราฟี

โครมาโตแกรมทั้งหมดถูกบันทึกซ้ำกัน วัดพื้นที่พีคของเบนโซ(เอ)ไพรีน จากสองโครมาโตแกรม ค่าเฉลี่ยเลขคณิตของพื้นที่พีคเบนโซ (a)ไพรีนจะถูกคำนวณ

ตามข้อมูลที่ได้รับ มวลของเบนโซ(a)ไพรีน, ไมโครกรัม, ถูกกำหนดหาในตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ /77] และตัวอย่างของการทดลองควบคุม t 2:

t op ■ S 1 . _ t ถึง ■ S 3 (9)

ส 2 - 0.95) ' 2 5 4 - 0.95 3 '

โดยที่ /77 op และ /77 k คือมวลของเบนโซ (a) pyrene ที่เติมในส่วนของสารสกัดจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์ (t op) และตัวอย่างควบคุม (/%), μg;

S"] และ S 2 - พื้นที่พีคของเบนโซ(a)ไพรีนบนโครมาโตแกรมของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ (.S"]) และตัวอย่างผลิตภัณฑ์ด้วยการเติมเบนโซ(a)ไพรีน (L/), ซม. 2;

L/ และ.S) - พื้นที่พีคของ benz(a)pyrene บนโครมาโตแกรมของตัวอย่างของการทดลองกลุ่มควบคุม (L/) และตัวอย่างของการทดลองกลุ่มควบคุมด้วยการเติมเบนโซ(a)pyrene (L/) ซม. 2;

0.9 คือสัดส่วนของตัวอย่างที่เติม benz(a)pyrene

5.3.3 การหาปริมาณเบนซ์ (a) ไพรีนโดยสเปกโตรฟลูออไรเมทรีที่อุณหภูมิห้อง

เมื่อกำหนดปริมาณเบนโซ(a)ไพรีนโดยสเปกโตรฟลูออไรรีเมทรี พร้อมกันกับตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ จะทำการวิเคราะห์ตัวอย่างของการทดลองควบคุม โดยที่ 50 ไมโครลิตรของสารละลายเบนโซ(เอ)ไพรีนที่มีความเข้มข้นของมวล 1 ไมโครกรัม /cm 3 ถูกเพิ่ม

เศษส่วนที่มีเบนโซ (a) ไพรีนที่ได้รับตาม 5.3.1 จากตัวอย่างผลิตภัณฑ์และตัวอย่างควบคุมที่มีสารเติมแต่งจะละลายในเบนซีน 0.5 ซม. 3 แล้วนำไปทำให้บริสุทธิ์เพิ่มเติมในชั้นบาง ๆ ของอะซิติเลตเซลลูโลส

ในการทำเช่นนี้ จานขนาด 20 x 20 ซม. ที่เตรียมตามข้อ 5.2.2 ถูกแบ่งออกเป็นสองฟิลด์: ฟิลด์ด้านข้างกว้าง 1.5–2 ซม. และฟิลด์หลัก วาดแถบแบ่งเหนือชั้นดูดซับด้วยมีดผ่าตัดหรือ ไม้พายบาง สารละลายของเศษส่วนที่แยกตามข้อ 5.3.1 ถูกนำไปใช้กับสนามหลักด้วยแถบต่อเนื่อง โดยห่างจากขอบล่างของจาน 2 ซม. และ 1 ซม. จากขอบด้านข้าง สารละลายนี้ใช้โดยใช้เส้นเลือดฝอยหรือไมโครไซริงก์ที่วาดบางๆ ขนาดของจุดไม่ควรเกิน 5 มม. สำหรับการถ่ายโอนสารในเชิงปริมาณ จะถูกชะล้างออกจากผนังขวดสองครั้งด้วยน้ำมันเบนซินจำนวนเล็กน้อย (0.4 - 0.6 ซม. 3) บนเส้นเริ่มต้นของสนามข้าง ใช้สารละลายเบนโซ(a)ไพรีน 5 ไมโครลิตรที่มีความเข้มข้นของมวล 1 ไมโครกรัม/ซม. 3 กับจุดนั้น หลังจากการระเหยอย่างสมบูรณ์ของตัวทำละลาย เพลตถูกวางในห้องโครมาโตกราฟีที่เตรียมไว้ล่วงหน้าที่มุม 70° - 85° และทำการชะในส่วนผสมของเอทิลแอลกอฮอล์ อะซีโตน และน้ำ ถ่ายในอัตราส่วน 60: 25:15. เมื่อด้านหน้าตัวทำละลายสูงจากขอบบนของเพลท 2 ซม. มันจะถูกลบออกจากห้อง ตากให้แห้งในอากาศ และโซนโครมาโตกราฟีเบนโซ (a)ไพรีนได้รับการพัฒนาภายใต้หลอดฉายรังสีอัลตราไวโอเลต ตัวดูดซับจากโซนเบนโซ (เอ)ไพรีนจากสนามหลักจะถูกขูดออกจากจานโดยใช้มีดผ่าตัดหรือไม้พายบาง ๆ และถ่ายโอนไปยังตัวกรองแก้ว จากนั้นสารจะถูกชะล้างด้วยน้ำมันเบนซินขนาด 50 ซม. 3 หลายขั้นตอนหลายขั้นตอนในขวด ด้วยความจุ 100 ซม. 3 จากนั้นตัวทำละลายจะระเหยเป็นปริมาตรเล็กน้อย ตัวทำละลายที่เหลือจะถูกลบออกด้วยกระแสอากาศและเติมน้ำมันเบนซิน 1 ซม. 3 ลงในขวด

บนสเปกโตรฟลูออริมิเตอร์ที่ความยาวคลื่นของแสงที่น่าตื่นเต้น 386 นาโนเมตร ในช่วง 400 - 440 นาโนเมตรที่ความเร็วการสแกน 60 นาโนเมตร/นาที สเปกตรัมการเรืองแสงของตัวอย่างผลิตภัณฑ์และตัวอย่างควบคุมด้วยการเพิ่มเบนโซ (เอ)ไพรีน จะถูกบันทึกไว้

สเปกตรัมของสารละลายจะถูกบันทึกในโหมดการขยายหนึ่งโหมด โดยปรับช่องว่างและปัจจัยการขยายตามโซลูชันตัวอย่างควบคุม เพื่อให้สัญญาณของเบนโซ (a) pyrene ที่ 406 นาโนเมตรเท่ากับ 0.4 - 0.6 ของมาตราส่วนเครื่องมือ สำหรับแต่ละโซลูชัน สเปกตรัมจะถูกบันทึกสองครั้ง เพื่อให้ได้ความสามารถในการทำซ้ำที่ดี บนสเปกโตรแกรมที่ได้รับสูงสุดที่ 406 นาโนเมตร ความสูงของเส้นสเปกตรัมของเบนโซ (เอ)ไพรีนสำหรับตัวอย่างผลิตภัณฑ์และตัวอย่างควบคุมจะถูกวัดเป็นมิลลิเมตร คำนวณค่าเฉลี่ยของความสูงของเบนโซ (เอ)ไพรีนตามสเปกโตรแกรมสองแบบ ที่ระดับเบนโซ (เอ)ไพรีนในผลิตภัณฑ์สูง ตัวอย่างจะถูกเจือจางด้วยเบนซีนและสเปกตรัมจะถูกบันทึกอีกครั้งในโหมดการขยายเสียงเดียวกันกับตัวอย่างควบคุม

ดำเนินการกำหนดสองแบบคู่ขนาน

5.4 การจัดการผลลัพธ์

5.4.1 เศษส่วนมวลของ benz (a) pyrene ในผลิตภัณฑ์ X \,% หรือ X 2, mg / kg เมื่อใช้วิธีโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงคำนวณโดยสูตร:

(t 1 - t 2) ■ 100 (t g - t 2) t ■ 1,000 1,000 “t 10

โดยที่ mi คือมวลของเบนโซ (a) pyrene ในตัวอย่างผลิตภัณฑ์ µg;

m2 คือมวลของเบนโซ (a) pyrene ในตัวอย่างควบคุม μg; t คือมวลของผลิตภัณฑ์ที่นำมาวิเคราะห์ g

5.4.2 เศษส่วนมวลของ benz(a)pyrene ในผลิตภัณฑ์ A), % หรือ X 2 , mg/kg เมื่อใช้วิธี spectrofluorimetry คำนวณโดยสูตร:

S st NU- 100 s ST // V t ■ 1,000 ■ 1,000 ■

โดยที่ cst คือความเข้มข้นมวลของเบนโซ(a)ไพรีนในสารละลายทำงานที่เตรียมตาม 5.2.4 และเติมลงในตัวอย่างกลุ่มควบคุม ไมโครกรัม/ซม. 3 ;

ความสูงของเส้นสเปกตรัมของเบนโซ (a) pyrene บนสเปกโตรแกรมของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ mm; ความสูงของเส้นสเปกตรัมของเบนโซ (a) pyrene บนสเปกโตรแกรมของตัวอย่างการทดลองควบคุม mm;

V คือปริมาตรของสารละลายในการทำงานของ benz (a) pyrene ที่เติมลงในตัวอย่างของการทดลองควบคุม cm 3; t คือน้ำหนักของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่นำไปทดสอบ g.

ผลการทดสอบขั้นสุดท้ายถือเป็นค่าเฉลี่ยเลขคณิตของการคำนวณหาคู่ขนานสองชุดที่มีเลขนัยสำคัญเท่ากัน

หากความคลาดเคลื่อนระหว่างผลลัพธ์ของการกำหนดแบบขนานไม่เกิน \X-y - YY 2 |<

< 0,01 dX, где, Х 2 и X- результаты параллельных определений и их среднее арифметическое, а d - норматив контроля сходимости, то среднее арифметическое X принимают за результат анализа. В противном случае анализ повторяют. Значение норматива d приведено в таблице 3.

จากผลการวิเคราะห์ X และค่าของข้อผิดพลาดสัมพัทธ์ d ที่ระบุในตารางที่ 3 ให้คำนวณข้อผิดพลาดสัมบูรณ์ A = 0 (SH

ผลการวิเคราะห์แสดงเป็น (X ± A), mg / kg หรือ % ที่ P = 0.95

5.5 การควบคุมความถูกต้องของผลการวิเคราะห์

5.5.1 มีการตรวจสอบความสามารถในการทำซ้ำของการวัดซ้ำสำหรับตัวอย่างแต่ละตัวอย่างที่วิเคราะห์ตามข้อ 5.3

5.5.2 ตัวอย่างการทำงานใช้เพื่อควบคุมการทำซ้ำ ตัวอย่างจะถูกแบ่งออกเป็นสองส่วนเท่าๆ กัน และวิเคราะห์ตามวิธีการในห้องปฏิบัติการต่างๆ หรือในห้องปฏิบัติการเดียวกัน โดยทำให้เงื่อนไขการวิเคราะห์แตกต่างกันมากที่สุดเท่าที่จะเป็นไปได้ กล่าวคือ การใช้ชุดอุปกรณ์ปริมาตรต่างกัน การวิเคราะห์จะดำเนินการในวันที่ต่างกันหรือทีละสอง นักวิเคราะห์ที่แตกต่างกัน

ความสามารถในการทำซ้ำของการวิเคราะห์การควบคุมถือว่าน่าพอใจถ้า \ X-y - X 2 \<

< 0,01 DX, где Л), Х 2 и X- результаты анализа одной и той же пробы, полученные в разных лабораториях или при варьирующих условиях в одной лаборатории и их среднее арифметическое значение, D - значение норматива внутреннего оперативного контроля воспроизводимости. Значение норматива D приведено в таблице 3.

ความถี่ของการควบคุมการทำซ้ำ - อย่างน้อยหนึ่งครั้งทุกสองสัปดาห์

ตารางที่ 3 - ช่วงการวัดค่าลักษณะของข้อผิดพลาดสัมพัทธ์และมาตรฐานสำหรับการควบคุมการปฏิบัติงานขององค์ประกอบสุ่มของข้อผิดพลาดสัมพัทธ์ (การบรรจบกันและการทำซ้ำ) ที่ระดับความเชื่อมั่น P = 0.95

5.5.3 เพื่อควบคุมความแม่นยำ ให้ใช้ตัวอย่างการทำงานที่มีการเติมเบนโซ (เอ)ไพรีนที่ทราบกันดี ตัวอย่างถูกแบ่งออกเป็นสองส่วนเท่า ๆ กัน โดยส่วนแรกจะได้รับการวิเคราะห์ตามขั้นตอน และการเพิ่มเบนโซ (a) pyrene ที่ทราบที่ทราบจะถูกนำมาใช้ในส่วนที่สองและวิเคราะห์ตามขั้นตอนด้วย ค่าของสารเติมแต่งควรเป็น 50 - 150% ของเนื้อหาของเบนซาไพรีนในตัวอย่างที่วิเคราะห์

ความถูกต้องของการวิเคราะห์การควบคุมถือว่าน่าพอใจหาก |L) - X- s \< К, где Л), X и с - результаты контрольных анализов пробы с добавкой бенз(а)пирена, реальной пробы и величина добавки бенз(а)пирена соответственно; К - норматив оперативного контроля точности.

พิมพ์ FSUE "STANDARTINFORM" บนพีซี

พิมพ์ในสาขา FSUE "STANDARTINFORM" - ประเภท "เครื่องพิมพ์มอสโก", 105062 มอสโก, Lyalin ต่อ, 6

GOST R 51650-2000

1 พื้นที่ใช้งาน................................................ ... ......... หนึ่ง

3 การสุ่มตัวอย่าง ................................................ ............... ................ 2

4 วิธีการสเปกโตรฟลูออไรเมทรีที่อุณหภูมิต่ำ .................................. 2

4.1 เครื่องมือ วัสดุ และรีเอเจนต์................................................ ... 2

4.2 การเตรียมตัวสอบ.................................................. ...................... ... 3

4.3 ดำเนินการทดสอบ ................................................. ............ .... 3

4.4 การประมวลผลผลลัพธ์.................................................. ................. .... 6

4.5 การตรวจสอบความถูกต้องของผลการวิเคราะห์.......................................... ..... 6

5 วิธีโครมาโตกราฟีของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูงและวิธีการสเปกโตรฟลูออไรเมทรีสำหรับ

อุณหภูมิห้อง ................................................ ................ ...... 7

5.1 เครื่องมือ วัสดุ และรีเอเจนต์................................................ ... 8

5.2 การเตรียมตัวสอบ................................................. ...................... ... 9

5.3 ดำเนินการทดสอบ ................................................. ............ ....สิบ

5.4 ผลการดำเนินการ............................................ ................ ....13

5.5 การตรวจสอบความถูกต้องของผลการวิเคราะห์.......................................... .......................14

6 ข้อกำหนดด้านความปลอดภัย ................................................. ................สิบห้า

7 ข้อกำหนดคุณสมบัติผู้ปฏิบัติงาน.............................................. .15

ภาคผนวก ก บรรณานุกรม

มาตรฐานแห่งสหพันธรัฐรัสเซีย

ผลิตภัณฑ์อาหาร วิธีการหาเศษส่วนมวลของเบนโซ (เอ)ไพรีน

วิธีการหาเศษส่วนเบนส์ (a)pyren ของมวลรวม

วันที่แนะนำ 2001-07-01

1 พื้นที่ใช้งาน

มาตรฐานสากลนี้ใช้กับวัตถุดิบอาหาร อาหาร สารปรุงแต่งอาหารและกลิ่นรส และกำหนดวิธีการกำหนดสัดส่วนมวลของเบนโซ (a)ไพรีนโดยใช้สเปกโตรฟลูออไรเมทรีที่อุณหภูมิต่ำและอุณหภูมิห้อง และโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง

เครื่องชั่งในห้องปฏิบัติการเอนกประสงค์ที่มีระดับความแม่นยำที่ 2 โดยมีขีดจำกัดการชั่งน้ำหนักสูงสุด 500 กรัมตาม GOST 24104.

เครื่องระเหยแบบหมุน IR-1M.

น้ำอาบ.

เตาไฟฟ้าในครัวเรือนที่มีเกลียวปิดและตัวปรับความร้อนตาม GOST 14919.

ภาชนะ Dewar สำหรับไนโตรเจนเหลวทุกความจุ

ห้องอาบน้ำสำหรับโครมาโตกราฟี (โฟโตคิวเวตต์เคลือบ)

จานแก้วขนาด 15 x 30 และ 20 x 40 ซม.

ขวด K-1-250-29/32 THS, K-1-100-29/32 THS, K-1-500-29/32 THS หรือ P-1-500-29/32 THS ตาม GOST 25336.

ตู้เย็น KhIT-1-300-14/23 KhS หรือ KhIT-1-400-14/23 KhS ตาม GOST 25336.

ตู้เย็น KhPT-2-400-29/32 KhS และ KhPT-1-300-29/32 หรือ KhPT-400-29/32 KhS ตาม GOST 25336.

Dephlegmator 250-19/26-29/32 TC หรือ dephlegmator 300-19/26-29/32 TC ตาม GOST 25336.

หลอดทดลองแก้ว P2-10-180 XC ตามมาตรฐาน GOST 25336.

หัวฉีด П-1-19/26-14/23 ТС หรือ Н2-19/23 GOST 25336.

ปั๊มน้ำในห้องปฏิบัติการ GOST 25336.

ปิเปตที่มีความจุ 1, 2, 5, 10 ซม. 3 GOST 29228และ GOST 29229.

กรวย VFO-32-POR 100-14/23 XC หรือ VFO-32-POR 160-14/23 XC ตาม GOST 25336.

หลอดวัด P-2-15-14/23 KhS ตาม GOST 1770.

กรวยแบ่ง VD-1-500 หรือ VD-3-500 GOST 25336.

กระบอกสูบไล่ระดับ 1-100, 1-250 หรือ 3-100, 3-250 GOST 25336.

ถ้วยสำหรับชั่งน้ำหนัก (กล่อง) SV-14/8 หรือ SV-19/9 หรือ SV-24/10 หรือ SV-34/12 ตาม GOST 25336.

เทอร์โมมิเตอร์ที่มีขีดจำกัดการวัดอุณหภูมิที่ 0-250 °C โดยมีค่าหาร 1 °C ตาม GOST 29224.

เส้นเลือดฝอยแก้วแท่งแก้ว

n.octane, h. ตามเอกสารกฎเกณฑ์

n.hexane, h. ตามเอกสารเชิงบรรทัดฐาน

แก้ไขเกรดทางเทคนิคของเอทิลแอลกอฮอล์ GOST 18300หรือเอทิลแอลกอฮอล์ที่แก้ไขตาม GOST R 51652.

เศษส่วนของปิโตรเลียมอีเทอร์ 40 - 70 ° C ตามเอกสารเชิงบรรทัดฐาน

อะลูมิเนียมออกไซด์สำหรับโครมาโตกราฟีระดับที่ 2 ของกิจกรรมตามเอกสารเชิงบรรทัดฐาน

เบนซ์ (ก) pyrene เนื้อหาของสารหลักไม่น้อยกว่า 98%

1,12-Benzperylene เนื้อหาของสารหลักไม่น้อยกว่า 98%

อนุญาตให้ใช้เครื่องมือวัดอื่นที่มีคุณสมบัติทางมาตรวิทยาและอุปกรณ์ที่มีลักษณะทางเทคนิคตลอดจนรีเอเจนต์และวัสดุที่มีคุณภาพไม่ต่ำกว่าที่ระบุ

4.2 การเตรียมตัวสอบ

4.2.1 การทำให้ตัวทำละลายบริสุทธิ์

ตัวทำละลาย (n. ออกเทน, เอทิลแอลกอฮอล์, ปิโตรเลียมอีเทอร์, คลอโรฟอร์ม และ n. เฮกเซน) ถูกกลั่นด้วยวิธีปกติด้วยคอนเดนเซอร์รีฟลักซ์

4.2.2 การเตรียมอลูมินา

อลูมินาถูกทำให้แห้งในเตาอบที่อุณหภูมิ (250 + 4) ° C เป็นเวลา 4 ชั่วโมงและเก็บไว้ในภาชนะที่มีจุกปิดพื้น

4.2.3 การเตรียมสารละลายเบนส์ (เอ)ไพรีนสำหรับโครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง (สารละลายพยาน)

ชั่งน้ำหนักเบนโซ (เอ)ไพรีนประมาณ 10 มก. ลงในขวดชั่งน้ำหนัก จากนั้นเติมปิโตรเลียมอีเทอร์สองสามมิลลิลิตรจนกว่าตัวอย่างจะละลายหมด

สารละลายที่ได้จะถูกถ่ายโอนในเชิงปริมาณไปยังขวดปริมาตรที่มีความจุ 100 ซม. 3 และปริมาตรของสารละลายจะถูกปรับให้เข้ากับเครื่องหมายด้วยปิโตรเลียมอีเทอร์ อายุการเก็บรักษาของสารละลายไม่เกินสามเดือนในตู้เย็น

4.2.4 การเตรียมสารละลายมาตรฐาน benz(a)pyrene

ชั่งน้ำหนัก (10.0 ± 0.2) มก. ของเบนโซ (เอ) ไพรีนลงในขวดชั่งน้ำหนัก เติม n.octane สองสามมิลลิลิตรจนกว่าตัวอย่างจะละลายหมด สารละลายที่เป็นผลลัพธ์ถูกถ่ายโอนในเชิงปริมาณไปในขวดปริมาตรที่มีจุกปิดพื้นที่มีความจุ 100 ซม. 3 และนำไปทำเครื่องหมายด้วย n.octane ความเข้มข้นของมวลเบนโซ(เอ)ไพรีนในสารละลายที่ได้คือ 100 ไมโครกรัม/ซม. 3 สารละลายถูกเก็บไว้ในตู้เย็น อายุการเก็บรักษาของสารละลายไม่เกินสามเดือน

4.2.5 การเตรียมสารละลายในการทำงานของเบนโซ(เอ)ไพรีน

สารละลายในการทำงานของเบนโซ (a) ความเข้มข้นของมวลไพรีน 0.1; 0.04 และ 0.02 ไมโครกรัม/ซม. 3 ใน n.octane ถูกเตรียมโดยการเจือจางตามลำดับของสารละลายมาตรฐานเริ่มต้นของ benzo(a)pyrene ที่เตรียมตาม 4.2.4 ในขวดปริมาตรที่มีจุกปิดพื้นที่มีความจุ 100 ซม. 3 สารละลายถูกเก็บไว้ในตู้เย็น อายุการเก็บรักษาของสารละลายไม่เกินหนึ่งเดือน

4.2.6 การเตรียมสารละลายมาตรฐาน 1,12-benzperylene (มาตรฐานภายใน)

ในการเตรียมสารละลายเริ่มต้น ให้ชั่งน้ำหนัก (10.0 + 0.2) มก. ของ 1,12-benzperylene ในขวด เติม n.octane สองสามมิลลิลิตรจนกว่าตัวอย่างจะละลายหมด สารละลายที่เป็นผลลัพธ์ถูกถ่ายโอนในเชิงปริมาณไปในขวดปริมาตรที่มีจุกปิดพื้นที่มีความจุ 100 ซม. 3 และนำไปทำเครื่องหมายด้วย n.octane ความเข้มข้นของมวลของ 1,12-benzperylene ในสารละลายที่ได้คือ 100 µg/cm 3 สารละลายถูกเก็บไว้ในตู้เย็น อายุการเก็บรักษาของสารละลายไม่เกินสามเดือน

4.2.7 การเตรียมสารละลายในการทำงานของ 1,12-benzperylene (สารละลายมาตรฐานภายใน)

สารละลายในการทำงานของความเข้มข้นของมวลสาร 1,12-benzperylene 0.01; 0.005; 0.002 และ 0.001 ไมโครกรัม / ซม. 3

เตรียมใน n.octane โดยการเจือจางอย่างต่อเนื่องของสารละลายมาตรฐานเริ่มต้น ซึ่งเตรียมตามข้อ 4.2.6 ในขวดปริมาตรที่มีจุกปิดพื้นที่มีความจุ 100 ซม. 3 สารละลายถูกเก็บไว้ในตู้เย็น อายุการเก็บรักษาของสารละลายไม่เกินหนึ่งเดือน

4.3 การดำเนินการทดสอบ

4.3.1 การแยกเบนโซ(เอ)ไพรีนออกจากผลิตภัณฑ์

ในขวดก้นกลมที่มีความจุ 500 ซม. 3 ให้ใส่ตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีน้ำหนัก 25 กรัม เติมน้ำกลั่น 20 ซม. 3, เอทิลแอลกอฮอล์ 200 ซม. 3 และโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ 20 กรัมลงในขวด

เนื้อหาของขวดผสมโดยการเขย่า กระติกน้ำเชื่อมต่อกับคอนเดนเซอร์รีฟลักซ์และให้ความร้อนในอ่างน้ำโดยให้ส่วนผสมของปฏิกิริยาเดือดเป็นเวลา 3 ชั่วโมง จากนั้นจึงเติมน้ำ 150 ซม. 3 ลงในขวดโดยใช้คอนเดนเซอร์ นำขวดออกจากอ่างและทำให้เย็นลงที่อุณหภูมิห้อง

หลังจากการทำความเย็น เฟสของเหลวของส่วนผสมของปฏิกิริยาจะถูกถ่ายโอนโดยการแยกส่วนไปยังกรวยแยก โดยปล่อยให้ผลิตภัณฑ์ที่เหลืออยู่ในขวด 150 cm3 ของ n-hexane ถูกเติมไปยังขวดที่มีสารตกค้าง เนื้อหาของขวดถูกกวนอย่างแรง และ n-hexane ถูกเทลงในกรวยแยก

กรวยปิดและเขย่าอย่างแรง จากนั้นยึดในชั้นวางและปล่อยทิ้งไว้เพื่อแยกของเหลว ในการแยกอิมัลชันที่ได้นั้น จะมีการเติมเอทิลแอลกอฮอล์ 20 ซม. 3 ลงในส่วนผสมในกรวยแยก หลังจากแยกจากกัน เฟสของน้ำที่มีแอลกอฮอล์ระดับล่างจะถูกเทกลับเข้าไปในขวดด้วยตะกอน และสารสกัดเฮกเซนจะถูกเทลงในขวดขนาด 500 ซม. 3

การบำบัดส่วนผสมของปฏิกิริยานี้ดำเนินการอีกสองครั้ง โดยใช้เอ็น-เฮกเซน 100 ซม. 3 ในการสกัดและเอทิลแอลกอฮอล์สำหรับการแยกอิมัลชัน ในส่วน 20 ซม. 3

ในตอนท้ายของการสกัดสารตกค้างในขวดและไฮโดรไลเสตจะถูกทิ้งและสารสกัดจะถูกล้างในกรวยแยกด้วยน้ำกลั่นสามครั้งโดย 50 ซม. 3 และระเหยเป็นส่วน ๆ ในขวดก้นกลมที่มีความจุ ชั่งน้ำหนักล่วงหน้า 250 ซม. 3 ถึงตำแหน่งทศนิยมที่สองบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิของอ่างน้ำไม่เกิน 60 ° C ทิ้งขวดที่มีสารสกัดไว้ในตู้ดูดควันเพื่อขจัดร่องรอยของตัวทำละลาย หลังจากนั้นจึงชั่งน้ำหนักอีกครั้ง น้ำหนักของสารสกัดที่สกัดออกมาจะพิจารณาจากความแตกต่างระหว่างการชั่งน้ำหนัก

จากสารสกัดในขวด 1/5 ส่วนจะถูกถ่ายในขวดโดยไม่ต้องชั่งน้ำหนัก ชั่งน้ำหนักขวดที่มีสารสกัดที่เหลือ เติมสารละลาย "พยาน" 0.1-0.2 ซม. 3 benz(a)pyrene" ที่เตรียมตามข้อ 4.2.3 ลงในขวดที่มีส่วนของสารสกัด เนื้อหาของขวดและสิ่งตกค้างในขวดจะละลายในปิโตรเลียมอีเทอร์ในปริมาณเล็กน้อย

สำหรับการแยกสารสกัดด้วยโครมาโตกราฟี อะลูมิเนียมออกไซด์จะถูกเทลงบนจานแก้วขนาด 20x40 ซม. อย่างสม่ำเสมอ จากนั้นใช้แท่งแก้วแบ่งออกเป็นสามส่วน (14, 1 และ 3 ซม.) กับวงแหวนยางหนา 1 มม. และกว้าง 3 มม. อะลูมิเนียมออกไซด์จะถูกปรับระดับอย่างระมัดระวัง

สารละลายที่ได้จะถูกนำไปใช้ในเชิงปริมาณกับจานที่เตรียมด้วยเส้นเลือดฝอยแก้ว: ในส่วนที่แคบ - สารละลายจากขวด ("พยาน") ในส่วนกว้าง - สารสกัดจากผลิตภัณฑ์จากขวด สารละลายถูกนำไปใช้อย่างสม่ำเสมอในแถบต่อเนื่อง โดยถอยห่างจากขอบล่างของจาน 7-8 ซม.

เพลตถูกวางในอ่างโครมาโตกราฟีที่มุมเล็กน้อย 20° - 25° ปิโตรเลียมอีเทอร์จะถูกเทลงไปเพื่อไม่ให้ไปถึงสายการใช้งานของตัวอย่าง อ่างถูกปกคลุมด้วยแก้วและโครมาโตกราฟีจะดำเนินการโดยนำตัวทำละลายไปที่ขอบด้านบนของแผ่น

โดยไม่ทำให้จานแห้ง โดยจะฉายรังสีอัลตราไวโอเลต และตำแหน่งของเบนโซ (เอ)ไพรีนในตัวอย่างทดสอบจะถูกกำหนดโดยแถบ "พยาน" ที่เรืองแสง ทำเครื่องหมายขอบเขตของแถบเบนโซ (a) pyrene บนโครมาโตแกรมของตัวอย่างทดสอบ จานถูกทำให้แห้งในอากาศในตู้ดูดควัน

แถบอะลูมิเนียมออกไซด์ที่ทำเครื่องหมายบนโครมาโตแกรมของตัวอย่างทดสอบจะถูกลบออกจากเพลตโดยใช้สไลด์แก้วและถ่ายโอนในเชิงปริมาณไปยังเพลตที่มีรูพรุนของกรวยกรอง กรวยเชื่อมต่อกับขวดก้นกลมที่มีความจุ 100 ซม. 3 และเบนโซ (a)ไพรีนถูกชะออกจากอลูมินาด้วยเบนซีน 50 ซม. 3 เติมเบนซินในส่วนเล็กๆ แล้วคนอลูมินาบนกรวยด้วยไม้ น้ำมันเบนซินระเหยจนแห้งบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิอ่างน้ำไม่เกิน 60 °C สารตกค้างในขวดถูกถ่ายโอนเชิงปริมาณด้วยออกเทนไปยังหลอดทดลอง ปริมาตรของสารละลายในหลอดทดลองไม่ควรเกิน 5 ซม. 3

ในการวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์บางอย่าง ไม่มีการแยกส่วนประกอบเรืองแสงของตัวอย่างอย่างสมบูรณ์และชัดเจนระหว่างการทำโครมาโตกราฟีเบื้องต้นของสารสกัดที่แยกได้จากผลิตภัณฑ์ ในกรณีนี้ แผ่นอะลูมิเนียมออกไซด์ที่กว้างกว่าจะถูกแยกออกที่ระดับ "พยาน" benz(a)pyrene ถูกชะออกจากอลูมินาด้วยเบนซีนตามที่อธิบายไว้ข้างต้น และสารตกค้างจากการระเหยจะละลายในเอทานอล และผลที่สกัดจากแอลกอฮอล์จะถูกปรับโครมาโตกราฟี

สำหรับการแยกสารด้วยโครมาโตกราฟีของสารสกัดแอลกอฮอล์ ใช้จานขนาด 15 x 30 ซม. พร้อมชั้นอะลูมิเนียมออกไซด์หนา 0.3 มม. บนจานแยกแถบกว้าง 10 และ 3 ซม. ออกเป็นสองแถบ สารสกัดแอลกอฮอล์ของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์ถูกนำไปใช้กับส่วนกว้างของเพลตโดยใช้เส้นเลือดฝอยแก้วและสารละลายของเบนซ์ (a) ไพรีนในปิโตรเลียมอีเทอร์ (“พยาน” สารละลาย) ถูกนำไปใช้กับส่วนที่แคบของแผ่นจานวางจานในอ่างที่มุม 20 - 25 °และดำเนินการโครมาโตกราฟีในคลอโรฟอร์มนำหน้าตัวทำละลายไปที่ขอบบนของแผ่น ในแสงอัลตราไวโอเลต "พยาน" สังเกตเห็นแถบอะลูมิเนียมออกไซด์ที่มีเบนโซ (a) ไพรีนของผลิตภัณฑ์ที่อยู่ระหว่างการศึกษา จากนั้น benzo(a)pyrene จะถูกชะออกจากอลูมินาด้วยเบนซินและดำเนินการต่อไปทั้งหมดตามที่อธิบายไว้ข้างต้น

GOST R 51650-2000

สารละลายของเบนโซ(เอ)ไพรีนใน n.octane ถูกถ่ายโอนไปยังหลอดทดลอง ปริมาตรของสารละลายไม่ควรเกิน 5 ซม. 3 โดยมีตัวอย่างเริ่มต้นของผลิตภัณฑ์ 25 กรัม

ในสารละลายที่เป็นผลลัพธ์ (สารสกัด) เนื้อหาของ benz(a)pyrene ถูกกำหนดโดยวิธีการของสเปกโตรฟลูออโรเมทรีที่อุณหภูมิต่ำ โดยใช้วิธีการเติมหรือวิธีมาตรฐานภายในสำหรับการประเมินเชิงปริมาณ

4.3.2 การหาปริมาณเบนโซ (a) pyrene ในสารละลาย (สารสกัด) ที่ได้รับตาม 4.3.1 โดยวิธีการเติม

ในหลอดทดลอง 3 หลอด ให้เทสารละลายเบนโซ (เอ)ไพรีนที่เป็นผลลัพธ์ 1 ซม. 3 ใน n.octane ด้วยปิเปต จากนั้นเทน้ำมันออกเทน 2 ซม. 3 ลงในหลอดทดลองแรก 1.5 ซม. 3 ของกรดออกเทนและ 0.5 ซม. 3 ของสารละลายทำงานของเบนซ์ (เอ)ไพรีน ความเข้มข้นของมวล 0.1 ไมโครกรัม/ซม. 3 ที่เตรียมตามข้อ 4.2.5 ถูกเทลงในหลอดทดลองที่สอง ในหลอดทดลองที่สาม ให้เติมกรดออกเทน 1 ซม. 3 และสารละลายเบนโซ (เอ)ไพรีนที่ใช้งานได้ 1 ซม. 3 เช่นเดียวกับในหลอดทดลองที่สอง

การวิเคราะห์ด้วยสเปกโตรฟลูออไรเมตริกเริ่มต้นด้วยหลอดทดลองที่สาม เมื่อต้องการทำเช่นนี้ หลอดทดลองที่สามจะถูกวางไว้ในภาชนะ Dewar ที่มีไนโตรเจนเหลวที่ด้านหน้าช่องสลิตทางเข้าของเครื่องวัดสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ กำหนดเส้นเรืองแสงเชิงวิเคราะห์ของเบนโซ(เอ)ไพรีน 403 นาโนเมตรที่ความยาวคลื่นของแสงที่น่าตื่นเต้น 367 นาโนเมตร โดยการปรับเกนและการเปิดร่องตลอดจนการปรับหลอดทดลองในภาชนะ Dewar พร้อมกัน อุปกรณ์บันทึกของสเปกโตรโฟโตมิเตอร์จะบรรลุสัญญาณสูงสุด (มากถึง 50 - 80%) หลังจากนั้นก็ทำการสเปกโตรแกรมของเบนซ์ ( ก) pyrene ถูกบันทึกในพื้นที่ 401 - 404 nm โดยกำหนดมูลค่าของอุปกรณ์บันทึก spectrophotometer ที่ความยาวคลื่น 401 nm การบันทึกสเปกตรัมซ้ำสองครั้ง

จากนั้นหลอดทดลองที่สองและหลอดแรกจะถูกแช่แข็งตามลำดับในไนโตรเจนเหลว และสเปกตรัมการเรืองแสงจะถูกบันทึกในช่วงความยาวคลื่น 401 - 404 นาโนเมตร อย่าลืมตั้งค่าปากกาบันทึกที่ความยาวคลื่น 401 นาโนเมตร ให้อยู่ในตำแหน่งเดียวกับเมื่อทำการสแกนตัวอย่าง ในหลอดทดลองที่สาม

ความเข้มข้นมวลของเบนโซ(a)ไพรีนในสารสกัดที่วิเคราะห์ถูกกำหนดตามกราฟ ซึ่งค่าของการเติมเบนโซ(a)ไพรีน (µg) จะถูกพล็อตตามแกนแอบซิสซา และความสูงของยอดของ เส้นลักษณะเฉพาะสูงสุดของเบนโซ (เอ) ไพรีนที่ 403 นาโนเมตร ถูกพล็อตตามแกนพิกัด วัดจากสเปกโตรแกรมที่ได้รับในหน่วยมิลลิเมตร

หากความเข้มข้นมวลของเบนโซ (เอ)ไพรีนในสารละลายทดสอบอยู่ภายในบริเวณที่เหมาะสมสำหรับการวัด จุดทดลองที่ได้รับจะอยู่บนเส้นตรงเดียวกัน การคาดคะเนเส้นตรงไปยังจุดตัดกับแกน abscissa ให้ส่วนที่สอดคล้องกับเนื้อหาของเบนโซ (a) pyrene ในสารละลายที่ไม่มีสารเติมแต่งเช่นใน 1 ซม. 3 ของสารละลายทดสอบ หากความเข้มข้นมวลของเบนโซ (เอ)ไพรีนในสารละลายที่วิเคราะห์แล้วสูงกว่าขีดจำกัดบนของช่วงความเข้มข้นที่วัดโดยอุปกรณ์ สารละลายที่วิเคราะห์แล้วจะถูกเจือจางด้วยเอ็น.ออกเทน

4.3.3 การหาปริมาณเบนโซ (a) pyrene ในสารละลาย (สารสกัด) ที่ได้รับตาม 4.3.1 โดยวิธีมาตรฐานภายใน

1,12-benzperylene ใช้เป็นมาตรฐานภายใน เทสารละลาย benz(a)pyrene 3 ซม. 3 ใน n.octane ที่ได้รับตามข้อ 4.3.1 ลงในหลอดทดลองแล้วใส่ลงในภาชนะ Dewar ที่มีไนโตรเจนเหลวที่ด้านหน้าช่องทางเข้าของเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ ตั้งค่าการวิเคราะห์ เส้นที่ 403 นาโนเมตรที่ความยาวคลื่นของแสงที่น่าตื่นเต้น 367 นาโนเมตร และดำเนินการบันทึกสเปกตรัมของสารละลายในช่วงความยาวคลื่น 401 - 409 นาโนเมตร จากความเข้มของเส้น (ตามความสูงของจุดสูงสุดของเส้นลักษณะเฉพาะของเบนโซ(เอ)ไพรีนที่ 403 นาโนเมตร) ปริมาณโดยประมาณของเบนโซ(เอ)ไพรีนในตัวอย่างจะถูกประมาณ ตามการประเมินนี้ สารละลายของ 1,12-benzperylene จะถูกเติมลงในหลอดทดลองด้วยสารละลาย benz(a)pyrene 3 ซม. 3 ใน n.octane ในปริมาณที่ความเข้มข้น 1,12- benzperylene ในสเปกตรัมของตัวอย่างที่

406.3 นาโนเมตร มากกว่าความเข้มของเส้น benz(a)pyrene 3-5 เท่า ที่ความยาวคลื่น 403 นาโนเมตร

สเปกตรัมถูกบันทึกในช่วงความยาวคลื่น 401 - 409 นาโนเมตรสองครั้ง

ความเข้มของเส้นลักษณะเฉพาะของ benz(a)pyrene ที่ 403 nm และ 1,12-benzperylene at

406.3 นาโนเมตร (H| และ H 2 ตามลำดับ) ถูกกำหนดจากสเปกโตรแกรมโดยการวัดความสูงของพีคที่จุดสูงสุดของเส้นแสดงลักษณะเฉพาะของสารประกอบเหล่านี้เป็นมิลลิเมตร ในการคำนวณใช้ค่าเฉลี่ย ค่าสัมประสิทธิ์อัตราส่วน (K) ของความเข้มของเส้น benz (a) pyrene (EGD) ต่อความเข้มของเส้น 1,12-benzperylene (EG 2) คำนวณได้ K = //]/// 2

ต่อไป ค่าสัมประสิทธิ์นี้ถูกกำหนดสำหรับสารละลายมาตรฐานของเบนโซ(a)ไพรีน (X st) ในการทำเช่นนี้ 3 ซม. 3 ของสารละลายมาตรฐานของ benz (a) pyrene ที่มีความเข้มข้นของมวล 0.02 และ 0.04 μg/cm 3 ถูกเทลงในหลอดทดลองสองหลอด 1,12-benzperylene จำนวนเท่ากันถูกเทลงในหลอดทดลองแต่ละหลอดเช่นเดียวกับในหลอดทดลองที่มีตัวอย่าง สเปกตรัมของสารละลายแต่ละชนิดจะถูกบันทึกสองครั้งในช่วงความยาวคลื่น 401 - 409 นาโนเมตร

ในเวลาเดียวกัน จำเป็นต้องตรวจสอบให้แน่ใจว่าตำแหน่งของปากกาบันทึกที่ความยาวคลื่น 401 นาโนเมตรนั้นคงที่ที่ระดับเดียวกันในทุกกรณี

ถัดไป ความเข้มของเส้นที่เป็นลักษณะเฉพาะของ benz (a) pyrene ที่ 403 nm และ 1,12-benzperylene ที่ 406.3 nm (W และ H 2 ตามลำดับ) ถูกกำหนดจากสเปกโตรแกรม ในการคำนวณใช้ค่าเฉลี่ย คำนวณ K st \u003d H ^ H 2 สำหรับแต่ละความเข้มข้นของเบนโซ (a) pyrene

ความเข้มข้นมวลของเบนโซ(a)ไพรีนในสารละลายที่วิเคราะห์ c, µg/cm 3 คำนวณโดยสูตร:

s st *K/K เซนต์, (1)

โดยที่ c st คือความเข้มข้นของเบนโซ(a)ไพรีนในสารละลายมาตรฐาน µg/cm 3 ;

K คือสัมประสิทธิ์ที่พบในสเปกโตรแกรมของสารละลายที่วิเคราะห์ด้วยการเติม 1,12-benzperylene

K C1 - สัมประสิทธิ์ที่พบในสเปกโตรแกรมของสารละลายมาตรฐานของ benz (a) pyrene ด้วยการเติม 1,12-benzperylene ซึ่งค่านั้นใกล้เคียงกับค่าสัมประสิทธิ์ของสารละลายที่วิเคราะห์ด้วยการเติม 1 ที่สอดคล้องกัน 12-เบนเพอรีลีน

มีการดำเนินการตรวจวัดแบบคู่ขนานสองครั้งและการทดลองควบคุมพร้อมกัน ซึ่งดำเนินการในทุกขั้นตอนของการวิเคราะห์โดยใช้รีเอเจนต์ทั้งหมดตามขั้นตอน แต่ไม่มีตัวอย่างผลิตภัณฑ์

4.4 การจัดการผลลัพธ์

เศษส่วนมวลของ benz (a) pyrene L),%, X และ X 2, mg / kg คำนวณโดยสูตร:

= (s - er) ■m l V ■ 100 = (s - er) ■ t 1 ■ V (2)

3 t 2 ■ t ■ 1000 ■ 1000 t 2 ■ t '

_ (s - s 0) ■ V ■ t 1 (3)

โดยที่ c คือความเข้มข้นของเบนโซ(a)ไพรีนที่สร้างขึ้นตาม 4.3.2 หรือ 4.3.3 ในสารละลาย (สารสกัด) ของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์ที่ได้รับตาม 4.3.1, ไมโครกรัม/ซม. 3 ; c 0 คือความเข้มข้นของเบนโซ(a)ไพรีนในสารละลายของการทดลองควบคุมที่ได้รับตาม 4.3.1, ไมโครกรัม/ซม. 3 ; V คือปริมาตรของสารละลายเบนโซ (a) pyrene ที่แยกได้จากตัวอย่างที่วิเคราะห์ของผลิตภัณฑ์ cm 3;

/«ฉัน - น้ำหนักของสารสกัดที่แยกได้จากผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์ g; ม. 2 - มวลของสารสกัดที่ใช้กับแถบกว้างของจาน g; t คือมวลของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ g

ผลลัพธ์จะถูกปัดเศษเป็นตัวเลขสำคัญที่สอง

สำหรับผลลัพธ์สุดท้ายของการกำหนด จะใช้ค่าเฉลี่ยเลขคณิตของการคำนวณแบบขนานสองค่าที่มีจำนวนหลักนัยสำคัญเท่ากัน

หากความคลาดเคลื่อนระหว่างผลลัพธ์ของการกำหนดแบบขนานไม่เกิน |A) - X 2 \<

< 0,01яЖ, где Xi, Х 2 и X- результаты первого и второго параллельных определений и их среднеарифметическое, a d- норматив контроля сходимости, то среднеарифметическое X принимают за результат анализа. В противном случае анализ повторяют. Значение норматива контроля сходимости d приведено в таблице 1.

จากผลการวิเคราะห์ X และค่าของข้อผิดพลาดสัมพัทธ์ d ที่ระบุในตารางที่ 1 ข้อผิดพลาดสัมบูรณ์ A = 0 (SD มก./กก. หรือ %) ถูกคำนวณ

ผลการวิเคราะห์แสดงเป็น (X ± A), mg / kg หรือ % ที่ P = 0.95

4.5 การควบคุมความถูกต้องของผลการวิเคราะห์

การควบคุมการปฏิบัติงานภายใน (IQA) ของคุณภาพของผลการวิเคราะห์รวมถึงการควบคุมการลู่เข้า การทำซ้ำ และความถูกต้องของผลการวิเคราะห์

4.5.1 มีการตรวจสอบความสามารถในการทำซ้ำของการวัดซ้ำสำหรับตัวอย่างแต่ละตัวอย่างที่วิเคราะห์ตาม 4.4

4.5.2 สำหรับการควบคุมภายในของการทำซ้ำ จะใช้ตัวอย่างการทำงาน ตัวอย่างจะถูกแบ่งออกเป็นสองส่วนเท่าๆ กัน และวิเคราะห์ตามวิธีการในห้องปฏิบัติการต่างๆ หรือในห้องปฏิบัติการเดียวกัน โดยทำให้เงื่อนไขของการวิเคราะห์แตกต่างกันมากที่สุดเท่าที่จะเป็นไปได้ กล่าวคือ การใช้ชุดอุปกรณ์ปริมาตรต่างกัน การวิเคราะห์จะดำเนินการในวันต่างๆ หรือ โดยนักวิเคราะห์ที่แตกต่างกันสองคน

ความสามารถในการทำซ้ำของการวิเคราะห์การควบคุมถือว่าน่าพอใจถ้า \X^ - X 2 \<

< 0,01 DX, где X/, Х 2 и X- результаты анализа одной и той же пробы, полученные в разных лабораториях или при варьирующих условиях в одной лаборатории и их среднеарифметическое значение, D - значение норматива внутреннего оперативного контроля воспроизводимости. Значение норматива D приведено в таблице 1.

GOST R 51650-2000

ความถี่ของการควบคุมการทำซ้ำได้อย่างน้อยหนึ่งครั้งทุกสองสัปดาห์

ตารางที่ 1 - ช่วงการวัดค่าลักษณะของข้อผิดพลาดสัมพัทธ์และมาตรฐานสำหรับการควบคุมการปฏิบัติงานขององค์ประกอบสุ่มของข้อผิดพลาดสัมพัทธ์ (การบรรจบกันและการทำซ้ำ) ด้วยระดับความเชื่อมั่น P = 0.95

4.5.3 เพื่อควบคุมความแม่นยำ ให้ใช้ตัวอย่างการทำงานที่มีการเติมเบนโซ (เอ)ไพรีนที่ทราบกันดี ตัวอย่างถูกแบ่งออกเป็นสองส่วนเท่า ๆ กัน โดยส่วนหนึ่งจะถูกวิเคราะห์ตามขั้นตอน ในส่วนที่สอง จะมีการแนะนำการเพิ่มเบนโซ (เอ)ไพรีนที่เป็นที่รู้จักและวิเคราะห์ตามขั้นตอนด้วย ค่าของสารเติมแต่งควรเป็น 50 - 150% ของเนื้อหาของเบนซาไพรีนในตัวอย่างที่วิเคราะห์

ความถูกต้องของการวิเคราะห์การควบคุมถือว่าน่าพอใจถ้า \Xy-X-c\< 0,01 К, где Ху, Xи с - результаты контрольных анализов пробы с добавкой бенз(а)пирена, реальной пробы и величина добавки бенз(а)пирена, соответственно; К- норматив оперативного контроля точности. Норматив оперативного контроля точности рассчитывают по формулам: при проведении внутрилабораторного контроля (Р = 0,90)

K \u003d 0.84 V (A X]) 2 + (A x) 2; (สี่)

ระหว่างการควบคุมภายนอก (P = 0.95)

K \u003d V (A ^) 2 + (A z) 2, (5)

โดยที่ A^ + A x คือค่าของลักษณะข้อผิดพลาดที่สอดคล้องกับความเข้มข้นของมวล

benzo(a)pyrene ในตัวอย่างที่มีสารเติมแต่งและในตัวอย่างจริง

Ay \u003d 0.01 Xy และ A x \u003d 0.01d x X โดยที่ Xy และ X เป็นเศษส่วนมวลของเบนโซ (a) pyrene ในตัวอย่างโดยเติม

และในตัวอย่างจริง % หรือ มก./กก.

ค่าของข้อผิดพลาดสัมพัทธ์ d x (8y) แสดงไว้ในตารางที่ 1

การควบคุมความแม่นยำในการวิเคราะห์จะดำเนินการอย่างน้อยเดือนละครั้ง เช่นเดียวกับเมื่อเปลี่ยนรีเอเจนต์หรือหลังจากหยุดงานไปนาน

หากเกินมาตรฐานสำหรับการควบคุมการปฏิบัติงานของความถูกต้อง การวิเคราะห์ซ้ำจะดำเนินการ หากเกินมาตรฐานที่ระบุซ้ำแล้วซ้ำอีก การวิเคราะห์จะถูกระงับ เหตุผลที่นำไปสู่ผลลัพธ์ที่ไม่น่าพอใจจะได้รับการชี้แจง และจะถูกกำจัด

ผลลัพธ์ของ WQA ถูกบันทึกไว้ในวารสารพิเศษ

5 เทคนิคโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงและเทคนิคสเปกโตรฟลูออไรเมทรีที่อุณหภูมิห้อง

สาระสำคัญของวิธีการนี้อยู่ที่การสกัดสารไฮโดรคาร์บอน รวมทั้งเบนโซ(a)ไพรีน กับเฮกเซนจากผลิตภัณฑ์ที่เคยบำบัดด้วยสารละลายแอลกอฮอล์ของโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ การแยกส่วนของพอลิไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอนที่มีเบนโซ(เอ)ไพรีน และการทำให้บริสุทธิ์ของเศษส่วนที่เป็นผลจากการรบกวนสิ่งเจือปนบนคอลัมน์ด้วย Sephadex และในชั้นบางๆ ของอะซิติเลตเซลลูโลส ตามด้วยการกำหนดปริมาณเบนโซ (a) pyrene ที่แยกได้โดยใช้โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงหรือสเปกโตรฟลูออไรเมทรีที่อุณหภูมิห้อง

ช่วงของค่าที่กำหนดของเศษส่วนมวลของเบนโซ (a) pyrene ในผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์โดยใช้วิธีโครมาโตกราฟีของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูงและวิธีการ spectrofluorimetry ที่อุณหภูมิห้องคือ 0.0001-0.002 มก. / กก. หรือ 0.1 x 10 -7 - 2.0 x 10 -7% . ช่วงที่เหมาะสมของความเข้มข้นมวลที่กำหนดของเบนโซ(a)ไพรีนในสารละลายเมื่อใช้วิธีโครมาโตกราฟีของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูงคือ 0.01-0.02 ไมโครกรัม/ซม. 3 เมื่อใช้วิธีสเปกโตรฟลูออริเมทรี - 0.02-0.2 ไมโครกรัม/ซม. 3

Facebook

ทวิตเตอร์

ติดต่อกับ

เพื่อนร่วมชั้นเรียน

Google+